Procedimiento 2, partida con muestra a

GOT (ASAT) IFCC mod.

Pipetear en las cubetas 25°C, 30°C 37°C
Prueba !"#$"%& Muestra 200 µl 100 µl
Aspartato aminotransferasa (EC 2.6.1.1) Mezcla de reactivo 1000 µl 1000 µl
Presentacion del equipo Mezclar, leer la absorbancia después de 1 minuto y al mismo tiempo
activar el cronómetro. Leer nuevamente la absorbancia exactamente
Cat.-No.: 12 011 10 x 10 ml Equipo completo
después de 1, 2 y 3 minutos.
12 021 8 x 50 ml Equipo completo a
12 031 4 x 250 ml Equipo completo Método semi micro; para métodos macro multiplicar volúmenes por 2.

Metodo 1 Calculos
Método cinético para la determinación de la actividad de ASAT de Para cambios de absorbancia por minuto ("A/min) entre 0.06-0.08
acuerdo a las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC (Hg 365 nm) ó de 0.12-0.16 (Hg 334 nm, 340 nm) (procedimiento
(Federación Internacional de Química Clínica). 1+2) sólo emplear la medición de los 2 primeros minutos que en el
cálculo.
Principio de la reaccion (1 minuto de incubación, 2 minutos de medición).
GOT Calcular la actividad de la GOT en la muestra usando los factores:
2-oxoglutarato + L-aspartato L-glutamato + oxalacetato
MDH
Procedimiento 1, partida con reactivo
+ +
Oxalocetato + NADH + H L- malato + NAD U/l Hg 334 nm 340 nm Hg 365 nm
(25°C,30°C) = "A/min x 1173 1151 2132
Contenidos, composicion de reactivos en la prueba
Cat.-Nos.: 12 011 12 021 12 031 (37°C) = "A/min x 2184 2143 3971
R1 10 x 8 ml 8 x 40 ml 4 x 200 ml
Procedimiento 2, partida con muestra
R2 2 x 10 ml 8 x 10 ml 4 x 50 ml
U/l Hg 334 nm 340 nm Hg 365 nm
R1 Reactivo 1, Reactivo enzimático (25°C, 30°C) = "A/min x 971 952 1765
Buffer TRIS (pH 7.8) 80 mmol/l
L-aspartato 240 mmol/l (37°C) = "A/min x 1780 1745 3235
LDH ! 600 U/l
Linearidad
MDH > 600 U/l
Si la diferencia de absorbancia por minuto ("Amin) excede 0.160 a Hg
R2 Reactivo 2, Reactivo de partida 334 nm/340 nm ó 0.08 a Hg 365 nm, diluir 0.1 ml de muestra con
NADH 0.18 mmol/l 0.9 ml de solución salina fisiológica (NaCl 0.9 %) y repetir el ensayo
2-oxoglutarato 12 mmol/l usando esta dilución. Multiplicar el resultado por 10.

Preparacion de reactivos y estabilidad Factor de conversión de unidades tradicionales U/l a unidades SI,
Procedimiento 1, partida con reactivo kat/l:
Los reactivos están listos para su uso. 1 U/l = 16.67 x 10-3 µkat/l
Los reactivos son estables, aún después de abiertos, hasta su fecha 1 µkat/l = 60 U/l
de caducidad cuando se almacenan protegidos de la luz 2...8°C.
Evitar la contaminación. Valores de referencia
25°C 30°C 37°C
Procedimiento 2, partida con muestra Hombres Hasta 18 U/l Hasta 25 U/l Hasta 37 U/l
Para 12 031 y 12 021: Poner el contenido entero de un frasco 2
(reactivo de partida, R2) en un frasco 1 (reactivo enzimático, R1) Mujeres Hasta 15 U/l Hasta 21 U/l Hasta 31 U/l
Para 12 011: Pipetear 2 ml del frasco 2 (reactivo de partida, R2) en un
Control de calidad
frasco 1 (reactivo enzimático, R1), mezclar bien.
La mezcla reactiva es estable 4 semanas de 2...8°C y 5 días de Todos los sueros controles con valores de GOT determinados por
15...25°C. este método pueden ser empleados.
Nosotros recomendamos el uso de nuestro suero de origen animal
Muestras HUMATROL ó nuestro suero de origen humano SERODOS como
Suero, plasma con heparina ó EDTA. control de calidad.
Evitar la hemólisis !
Automatizacion
Disminución de la actividad a los 3 días a +4°C ~ 8 %,
a 20...25°C ~ 10 %. Las adaptaciones especiales para analizadores automáticos están
disponibles según su solicitud.
Ensayo
Notas
Longitud de onda: Hg 365 nm, 340 nm ó Hg 334 nm
Paso de luz: 1 cm El reactivo enzimático (R1) y el reactivo de partida (R2) contienen
Temperatura: 25°C, 30°C ó 37°C azida de sodio (0.095 %). No ingerirlo. Evitar el contacto con la piel y
Medición: Frente al aire (disminución de la absorbancia) membranas mucosas.
Llevar los reactivos y las cubetas a la temperatura
deseada. La temperatura debe permanecer Literatura
constante (± 0.5°C) durante la prueba. 1. Clin. Chim. Acta 70 (1976), 19-42
2. Synopsis der Leberkrankheiten: H. Wallnöfer, E. Schmidt und
Procedimiento 1, partida con reactivo a F.W. Schmidt, Georg Thieme Verlag, Stuttgat 1974
3. Thefeld, W. et al.; Dtsch. med. Wschr. 99, 343 (1974)
Pipetear en cubetas 25°C, 30°C 37°C
Muestra 200 µl 100 µl
Reactivo 1, R1 1000 µl 1000 µl
Mezclar, incubar por 5 minutos a la temperatura deseada
Reactivo de partida, R2 250 µl 250 µl
Mezclar, leer la absorbancia después de 1 minuto y al mismo tiempo
EN-GOTLI.DOC
activar el cronómetro. Leer nuevamente la absorbancia exactamente 502 148 E
después de 1, 2 y 3 minutos. 01-1998-6

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