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Procedimiento 2, con muestra activada
Pipetear en la cubetas 25°C, 30°C, 37°C
Prueba colorimetrica Muestra 100 µl
Mezcla de reactivo 1000 µl
L-!-glutamyl transferasa (EC 2.3.2.2)
Mezclar, leer la absorbancia después de 1 minuto y al mismo tiempo
activar el cronómetro. Leer la absorbancia exactamente después de
Presentacion del equipo
1, 2 y 3 minutos.
Cat-No.: 12 013 10 x 10 ml Equipo completo
Método semi-micro; para métodos macro multiplicar volúmenes por 2.
Cat-No.: 12 023 8 x 50 ml Equipo completo
Cat-No.: 12 033 4 x 250 ml Equipo completo
Calculos
Metodo 1, 2 Calcular la actividad de la !-GT de la muestra usando los siguientes
factores:
Método cinético colorimétrico para la determinación de la actividad de
la !-GT de acuerdo a Persijn & van der Slik.
Procedimiento 1, con reactivo activador (Hg 405 nm)
Principio de la reaccion U/L (25°C, 30°C, 37°C) = "A/min x 1421
!-GT
L-!-glutamil-3-carboxi- L-!-glutamil-glicilglicina + Procedimiento 2, con muestra activada (Hg 405 nm).
4-nitroanilide + glycylglycine 5-amino-2-nitro-benzoate
U/L (25°C, 30°C, 37°C) = "A/min x 1158
Contenidos, composicion de reactivos en la prueba
Factor de conversión para unidades tradicionales (U/L) en SI-unidades
Cat.-Nos.: 12 013 12 023 12 033 (kat/l):
R1 10 x 8 ml 8 x 40 ml 4 x 400 ml 1 U/L = 16,67 x 10-3 µkat/l
R2 2 x 10 ml 8 x 10 ml 4 x 50 ml 1 mkat/L = 60 U/l

R1 Reactivo 1, Solución buffer Linearidad


Buffer tris (pH 8.25) 100 mmol/l
Sí el cambio de absorbancia por minuto ("A/min) excede 0.200 a Hg
Glicilglicina 100 mmol/l
405 nm diluir la muestra 0.1 ml con 0.5 ml de solución salina
fisiológica (0.9 %) y repetir el ensayo usando esta dilución. Multiplicar
R2 Reactivo 2, Reactivo activador
el resultado por 6.
L-!-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida 4 mmol/l
3,4
Valores de referencia
Preparacion y estabilidad de reactivos
Procedimiento 1, con reactivo activador Temperatura 25°C 30°C 37°C
Los reactivos están listos para su uso. Hombres 6-28 U/l 8-46 U/l 11-61 U/l
Los reactivos son estables, después de abiertos, hasta su fecha de Mujeres 4-18 U/l 7-29 U/l 9-39 U/l
caducidad cuando son almacenados de 2...8°C. Debe evitarse la
contaminación !
Control de calidad
Procedimiento 2, con muestra activada Todos los sueros controles con valores de !-GT determinados por
Para 12 033 y 12 023: Poner el contenido entero de un frasco 2 este método pueden ser empleados.
(reactivo activador, R2) en un frasco 1 (solución buffer, R1), mezclar Nosotros recomendamos el uso de nuestro suero de origen animal
cuidadosamente. HUMATROL ó nuestro suero de origen humano SERODOS como
Para 12 013: Pipetear 2 ml de la botella 2 (reactivo activador, R2) en control de calidad.
un frasco 1 (solución buffer, R1), mezclar cuidadosamente.
El reactivo de trabajo es estable 6 semanas a 2...8°C y 5 días a Automatizacion
15...25°C. Las adaptaciones especiales para analizadores están disponibles
según su solicitud.
Muestras
Suero, EDTA plasma. Notas
Evitar la hemólisis! La solución buffer (R1) y el reactivo activado (R2) contienen azida de
No hay baja de actividad después de 7 días a +4°C y 20...25°C. sodio (0.095 %). No ingerirlo. Evitar el contacto con la piel y
membranas mucosas.
Ensayo
Longitud de onda: Hg 405 nm (400-420 nm). Literatura
Paso de luz: 1 cm 1. J. Clin. Chem. Biochem. 14 (1976), 421
Temperatura: 25°C, 30°C ó 37°C. 2. Z. Klin. Chem. Klin. Biochem. 12 (1974), 228
Medicion: Frente al aire (incremento de absorbancia) 3. Persijn, J.P. & van der Slik, W.; J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 14
Llevar los reactivos y las cubetas a la (1976), 421 Bulletin SGKC, Suppl.
temperatura deseada. La temperatura debe 4. Bulletin SGKC, Suppl. Vol. 27/1 (1986)
permanecer constante (± 0.5°C) durante la
prueba.

Procedimiento 1, con reactivo activador


Pipetear en las cubetas 25°C, 30°C, 37°C
Muestra 100 µl
Reactivo 1, R1 1000 µl
Mezclar, incubar por 1 minuto a 25°C, 30°C ó 37 °C
Reactivo activado, R2 250 µl
Mezclar, leer la absorbancia después de 1 minuto y al mismo tiempo
activar el cronómetro. Leer la absorbancia exactamente después de
1, 2 y 3 minutos. EN-GT-LQ.DOC
502 150 E
01-1998-5

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