UNIVERSIDAD DE SANTANDER

FACULTAD DE MEDICINA- V SEMESTRE

Yiceth Katherine Acosta Triana

Docente

MORFOLOGÍA Y TINCIÓN BACTERIANA

Yiceth Katherine Acosta Triana

Docente
INTRODUCCIÓN
La forma de las bacterias al microscopio está determinada por la rigidez de su pared celular.
Básicamente, se diferencian según su forma en cocos (esféricas u ovaladas), bacilos (cilíndrica
o de bastones; rectos o curvos) y espirilos (espiral).

La Tinción de Gram consiste en una técnica de laboratorio diseñada por Christian Gram en el
año 1884. El objetivo de Gram era conseguir una prueba con la que fuera posible diferenciar
diferentes grupos de bacterias para así poder estudiarlas y clasificarlas.

La tinción de Gram es una prueba que detecta bacterias en el lugar donde se sospecha una
infección, como la garganta, los pulmones, los genitales o las lesiones en la piel. Las tinciones
de Gram también se pueden usar para detectar bacterias en ciertos fluidos corporales, como la
sangre o la orina. Hay dos categorías principales de infecciones bacterianas: Gram positivas y
Gram negativas, Según la distribución del peptidoglicano de la pared celular que las envuelve,
se tiñen de una forma u otra. Así, las bacterias que no se tiñen mediante esta técnica se
denominan Gram negativas. Están formadas por una pared más fina formada por menos capas
de peptidoglicano y una segunda membrana rica en lípidos (que repele la tinción Gram).

Las Gram positivas tienen una pared celular mucho más gruesa, formada por un gran número
de capas de peptidoglicano entre las que se inserta la tinción Gram, dando un color
violeta intenso al microscopio

La gran aportación práctica de la tinción de Gram es que permite determinar el tipo

de antibiótico así como su eficacia. El antibiótico de elección ha de ser capaz de atravesar la
pared bacteriana, en función de si la bacteriana es Gram positiva o negativa se seleccionará el
antibiótico más eficaz.

OBJETIVO
 Clasificar las bacterias según su morfología y coloración.
MATERIALES Y EQUIPOS
 Aceite de inmersión
 Asas de Siembra o material estéril para sembrar
 Escobillones
 Laminas porta objeto
 Microscopios
 Colorantes de Tinción de Gram
 Mechero de alcohol
 Solución Salina o agua destilada
 Cepas bacterianas
 Papel secante
METODOLOGIA
Procedimiento Tinción de Gram

1. para realizar una tinción, lo que tenemos que tener son microorganismos sembrados.
Dichos microorganismos los hemos el día anterior mediante la técnica de siembra de
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estría múltiple, los hemos dejado incubar durante 24 horas a 37ºC en la incubadora para
así obtener las colonias de los diferentes microorganismos
2. Siempre que “destapemos” una placa con colonias, deberá hacerse en condiciones de
esterilidad. Para conseguir estas condiciones podemos utilizar un mechero Bunsen o un
mechero de alcohol. Con el mechero, conseguiremos que se forme un ambiente de
esterilidad alrededor de la llama, por lo tanto, si trabajamos cerca del mechero,
tendremos un ambiente estéril.
3. A la hora de comenzar con la tinción, lo primero que hay que realizar es un frotis del
microorganismo, para ello hay que añadir una gota pequeña de agua destilada (cuanto
mayor sea la gota, tardará más tiempo en secarse). Debemos coger la muestra con el
asa bacteriológica previamente esterilizada y extendemos sobre la gota de agua
destilada
4. Luego realizamos la coloración de Gram según orden y tiempo (consultar
fundamento )
5. Secar la lámina y observar al microscopio.

RESULTADO
Tiempo de Cepa N. 1 Cepa N. 2 Cepa N. 3 Cepa N. 4
aplicación
Colorante :

Mordiente:

Decolorante:

Colorante de
contraste :

Dibujo de las
células _________
bacterianas en el
campo
observado
Descripción de lo
observado
(morfología y
coloración de la ---------------
bacteria)

En el cuadro establecer el colorante usado, su tiempo de aplicación y la diferente coloración

que adoptan las bacterias en cada paso de la coloración de Gram (violeta, incolora, rosada).
BIBLIOGRAFIA
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Esta debe ser citada y consultada por el grupo.