Universidad Autónoma de Ciudad Juárez

Instituto de Ciencias Biomédicas

M.V.Z
Laboratorio de bioquímica veterinaria 2
Detección de amilasa
Ivan Anselmo Arteaga Burciaga 218230
Grupo B
Rivera sida Jorge Daniel
6 de enero
 Introducción
La saliva es un fluido biológico bastante complejo e imprescindible para el
organismo debido a que el volumen y composición de la saliva tiene gran influencia
sobre la función bucal y las repercusiones biológicas y psicológicas que la cavidad
bucal puede llegar a tener sobre el resto del organismo. La saliva contiene e influye
en funciones como:

• Posee agua, siendo el vehículo para nutrientes y enzimas digestivas,

colaborando en la preparación del bolo alimenticio. También humecta y
disuelve las sustancias saborizantes.
• Contiene mucinas, que le proporcionan características de lubricación,
viscosidad y elasticidad a la mucosa.
• Dispone de enzimas digestivas como la amilasa y la lipasa que
colaboran en la formación y tránsito del bolo alimenticio, iniciando así el
proceso digestivo.
• Goza de enzimas y proteínas antibacterianas como lactoperoxidasas,
lisozimas, inhibidores de proteasas y lactoferrina. También la Ig As, Ig G,
que brindan protección a mucosas y dientes, y un cambio cualitativo o
cuantitativo puede influir en la aparición de estomatitis y facilita el
desarrollo de placa dentobacteriana de cepas específicas.
• Contiene iones y sales minerales que le dan la capacidad amortiguadora
para evitar cambios en el pH de la saliva y favorece el recambio mineral
con el esmalte o tejidos dentales expuestos.

La amilasa, denominada también ptialina o tialina, es un enzima hidrolasa que

tiene la función de digerir el glucógeno y el almidón para formar azúcares simples,
se produce principalmente en las glándulas salivares (sobre todo en las glándulas
parótidas) y en el páncreas. Tiene un pH de 7. Cuando uno de estas glándulas se
inflama aumenta la producción de amilasa y aparece elevado su nivel en sangre.
Fue la primera enzima en ser identificada y aislada por Anselme Payen en 1833,
quien la bautizó en un principio con el nombre de diastasa.

Objetivo
Que el alumno identifique a interpretar los niveles bajos y altos de amilasa en
presencia de saliva y conocer la actividad que realiza la amilasa en el organismo
animal.
 Materiales

• Tubos de ensayo
• Reactivos
• Gradilla
• Propipeta
• Pipetas
• Agua destilada

Metodología

Experimento 1

Reacción cualitativa. En 4 tubos de ensayo colocar los reactivos según la

tabla.

Reactivo muestra testigo control

saliva 0.1 ml ………….. …………..
sustrato 1ml 1ml ………….
Lugol 0.1ml 0.1ml 0.1ml
Agua destilada 5ml 5ml 5ml

1. Poner en una gradilla tubos enumerados del 1-4.

2. Tomar una muestra de saliva de algún integrante del equipo.
3. Al tubo numero 1 agregar 0,1 ml de saliva, 1ml de sustrato, 0.1ml de
yodo Lugol y 5 ml de agua destilada.
4. Preparar el tubo testigo preparar con 1ml de sustrato. 0.1 ml de yodo
Lugol y 5ml de agua destilada, sin contener saliva.
5. El tubo control se preparará solamente con 0,1de Lugol y 5 ml de agua
destilada.

Experimento 2

Hidrolisis del almidón y prueba de azucares reductores.

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4

Almidón 1% 5.0ml 5.0ml 5.0ml 5.0ml
saliva 0.1ml 0.1ml
Fehling A 1.0ml
Fehling B 1.0ml
Yodo lugol 3 gotas
 1. Agregar al tubo 1 5.0ml de almidón, 1.0 ml de reactivo de Fehling A y
1.0 ml de Fehling B.
2. Al tubo 2 agregar 5.0 ml de almidón y 3 gotas de yodo Lugol.
3. Al tubo 3 y 4 se preparará con 5.0 ml de almidón y 0.1ml de la muestra
de saliva.
4. Introducir los tubos 3 y 4 en baño maría y esperar por 15 minutos.
5. Recoger los tubos y agregar rápidamente al tubo 3, 1 ml de Fehling a
y 1.0 ml de Fehling b, al tubo 4 agregar 3 gotas de yodo lugol y dejar
reposar en la gradilla para esperar los resultados.

Resultados

Experimento 1

Reacción Cualitativa.

En nuestros resultados obtenidos pudimos notar que al final de la práctica y a la

hora de preparar nuestros tubos de ensayo en el equipo notamos que en los tres
tubos no hubo reacción sin embargo llegamos a la conclusión que la realización del
experimento no fue el adecuado ya que tuvo que haber cambiado la tonalidad y
nuestros tubos quedaron en una tonalidad transparente, aunque el profesor
comento que pudo haber sido que los reactivos tuvieran mucho tiempo y estuvieras
caducados.

Experimento 2

Hidrolisis del almidón y prueba de Azucares reductores.

En este experimento en el tubo 1 y 2 hubo una reacción positiva siendo que el tubo
1 dio una tonalidad azul lo que significa que el lugol al presenciar el almidón
reacciono con esa tonalidad y el tubo 2 igual tuvo una reacción, poco visible pero
igual notable, concluyendo a que, aunque sea un poco el reactivo fehling identifico
a los azucares reductores que tienen un grupo funcional.

Para los tubos 3 y 4 tuvimos un resultado distinto ya que después del traer los tubos
del baño maría no hubo ninguna reacción debido a que dejamos que pasara tiempo
en vez de haber colocado los reactivos con rapidez.
 Anexos

Cuestionario

¿Cuál es la estructura y función de los polisacáridos almidón y glucógeno?

El almidón: se catabolizará en glucosa para ser utilizado como energía para su

cuerpo; el almidón es un polímero de reserva energética que se encuentra
principalmente en los vegetales

El glucógeno: Es una reserva energética ya sea muscular o hepático, estas reservas

son una fuente de glucosa aportando a la circulación y mantener a niveles estables

Describa la secuencia de pasos del proceso de digestión mencionando los

nombres de las principales enzimas.

Boca: Saliva-amilasa- (ptialina cataliza la hidrolisis del almidón), el proceso de

absorción comienza en cavidad bucal como resultados dextrinas, glucosa, marosa.
malotrosa.

Esófago: 30% amilasa hidrolizada, la acción de la amilasa persiste en el bolo

alimenticio.

Estomago: el PH del estómago neutraliza la actividad enzimática 30-40% del

almidón hidrolizado

Duodeno: El páncreas secreta amilasa pancreática, el sustrato es el almidón y

producto será dextrina, maltosa, glucosa.

Yeyuno: Las enzimas se encuentran en los bordes de cepillo listas para catalizar y
digerir esos carbohidratos, los nutrientes son absorbidos mediante canales o
transportadores proteicas atreves de las paredes celulares del yeyuno como
glicoproteínas, glucoamilasa, isomaltasa, maltasa, sacarasa, y trehalasa, los
carbohidratos complejos que resisten la degradaciónenzimática continúan a IG.

¿Cuál es la diferencia entre a amilasa y B amilasa?

La ptialina secretada por las glándulas salivales quien comienza la degradación

gumica de almidón La amilasa pancreática que se encarga de degradar
químicamente carbohidratos en monosacaridos para ser absorbidos v obtener los
nutrientes necesarios en la digestión.

¿Cuáles son los niveles normales de amilasa salival? ¿En que pueden
alterarse? O a 137 U/L normalmente el aumento de valores pueden deberse a
enfermedades pancreáticas, inflamaciones agudas, neoplasias, necrosis,
obstrucciones del conducto pancreático o colédoco.

¿De qué manera reacciona el yodo con las cadenas del almidón antes y
después de hidrolizarlo? Anote los colores

La prueba de yodo es una reacción química usada para determinar la presencia o

alteración de almidón u otros polisacáridos una solución de yodo- diyodo disuelto
en una solución acuosa de yoduro de potasio que reacciona con almidón
produciendo un color púrpura; este tipo de prueba puede realizarse con cualquier
producto que contenga almidón como, por ejemplo: las papas, el pan o ciertos

La prueba de yodo se da como consecuencia de la formación de cadenas de

poliyoduro a partir de la reacción entre el almidón y el yodo presente en el reactivo
de lugol.

La amilasa y la amilopectina son componentes del almidón, pero la amilasa es de

estructura lineal, con enlaces (1-4), que forma hélices en donde se juntan las
moléculas de yodo formando un color azul oscuro; mientras que la amilopectina es
de estructura ramificada, con enlaces (1-4) (1-6), que forma hélices mucho más
cortas y las moléculas de yodo son incapaces de juntarse presentando un color
intermedio entre anaranjado o amarillo.

¿Qué especies animales segregan amilasa salival? Perro, gatos y equinos

Haga una comparación de la actividad de la amilasa salival y la amilasa pancreática.

La salival tiene una función menor ya que pocas especies la producen y comienza
a hidrolizar los enlaces glucosidicos del almidón mientras que la pancreática la
producen tosas las especies realizando la digestión de los carbohidratos

¿Cuáles son los niveles normales de amilasa en plasma sanguíneo y en orina?

En la orina es 26-21 U/h

Sangre 0-137 U/L

¿Qué es una enzima de escape y cuál es su importancia en el diagnóstico

clínico? Mencione ejemplos.

Las enzimas de escape, reciben este nombre debido a que cuando existe daño
tisular son vertidas al torrente sanguineo, por lo que la actividad de este tipo de
enzimas aumenta en la sangre. Esto es de gran utilidad en la cínica, ya que ayudan
en el diagnóstico de padecimientos en los que se presenta la necrosis en diferentes
órganos.

Algunos ejemplos serán el aumento de la actividad en suero de las transaminasas

glutámico pirúvica (TGP) y glutámico oxalacetica (TGO), que son indicativos de
procesos de escape de enzimas del miocardio (corazón) o del higado. En el caso
dela amilasa sérica, esta permite apoyar el diagnóstico de procesos inflamatorios
del páncreas; como las fosfatasas, de las cuales la alcalina (pH al que tiene
actividad optima) aumenta indicando problemas de raquitismo u osteomalacia,
mientras que un aumento de la fosfatasa acida de próstata está relacionada con el
carcinoma de este órgano.

Referencias

Amilasa. (s. f.). https://www.quimica.es/enciclopedia/Amilasa.html

La saliva como mecanismo de integridad bucal y sistémica. (2020, diciembre 1).

Dynamics® Dental. https://dynamics.dental/la-saliva-como-mecanismo-de-

integridad-bucal-y-sistemica/

Sánchez Martin M. Martín Sánchez M. T. pino G. (25 de noviembre de 2012)

Reactivo de Lugol: Historia de su descubrimiento y aplicaciones didácticas, PDF

[internet] Pag: 31-35 Disponible: http://www.scielo.org.mx/pdf/eq/v24n1/V24n1a6.pdf

Viviana E. Wiener Laboratorios S.A.I.C.- Rosario - Argentina Bioquímica Producto

Autorizado A.N.M.A.T: Amilasa 405 AA Método cinético a 405 m para la determinación

de amilasa en suero, plasma u orina. Sustrato CNPG3[internet] pag:

1-4 Disponible: https://www.wiener-

lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum

%20espanol/amilasa405aa_liquida_sp.pdf

Orgánica (FCAyF). Trabajo Práctico N° 7 - Hidratos de carbono[internet]

disponible http://blogs.unlp.edu.ar/quimicaorganica/2013/12/14/trabajo-practico-

no-7-hidratos-de-carbono/