GRUPO DE LABORATORIO MIÉRCOLES “A”.

SEMESTRE 2-2023
 EL REPORTE DE LABORATORIO CORRESPONDIENTE A LA PRÁCTICA #3 LO ENTREGARÁN COMO
FECHA TOPE EL DÍA JUEVES 08 DE FEBRERO DE 2024 (10:00 AM)
 PARA ENTREGAR SU REPORTE, ESTABLEZCAN A SU CONVENIENCIA GRUPOS DE 4 PERSONAS CADA
UNO (POR LA CANTIDAD DE ESTUDIANTES TOTALES, HABRÁ 1 ÚNICO GRUPO CON 3 PERSONAS)
 SIGAN LAS PAUTAS DADAS A INICIO DE SEMESTRE CON RELACIÓN A LA ENTREGA DE LOS REPORTES
DE LABORATORIO (MANUSCRITO, ESCRITO A BOLIGRAFO, HOJA DE RAYAS, Y CON LAS PARTES YA
SABIDAS: MEMBRETE, SIGNIFICANCIA CLÍNICA, RESULTADOS, ANÁLISIS Y REFERENCIAS
BIBLIOGRÁFICAS).
 TODOS LOS GRUPOS TRABAJARÁN CON LOS MISMOS DATOS.
 PARA CONSULTAS CON EL PROFESOR, HACERLO VIA CORREO ELECTRÓNICO rafaeldgp18@gmail.com
O PRESENCIALMENTE CUANDO ESTÉ EN LA OFICINA-SECRETARÍA DE BIOQUÍMICA.

A CONTINUACIÓN LOS RESULTADOS:

TABLA 1.- RESULTADOS DEL ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA AMILASA SALIVAL
ANTE DIFERENTES VARIABLES: [S], [E], TEMPERATURA, pH Y SUSTANCIAS.

EXPERIENCIA: ABS ABS mmoles mmoles mmoles Vo

CONTROL EXPERIMENTAL NO METABOLIZADOS (MMOLES/MIN)
SUSTRATO TOTALES METABOLIZADOS
-3
1,0 ml 1.196 0.165 4.09 x10
-3
1,5 ml 1.746 0.232 6.14 x10
-3
2,0 ml 2.293 0.294 8.18 x10
-3
2,5 ml 2.850 0.365 10.22 x10
-3
3,0 ml 3.406 0.930 12.27 x10
EXPERIENCIA: ENZIMA
-3
0,2 ml 0.302 4.09 x10
-3
0,4 ml 1.372 0.225 4.09 x10
-3
0,6 ml 0.133 4.09 x10
-3
0,8 ml 0.077 4.09 x10
EXPERIENCIA: TEMPERATURA
-3
0 ºC 1.336 1.328 4.09 x10
-3
37 ºC 1.264 0.023 4.09 x10
-3
40 ºC 1.408 0.895 4.09 x10
-3
50 ºC 1.276 1.179 4.09 x10
-3
65 ºC 1.270 1.266 4.09 x10
EXPERIENCIA: pH
-3
pH 4 1.273 1.266 4.09 x10
-3
pH 5 1.267 1.169 4.09 x10
-3
pH 7,2 1.210 0.012 4.09 x10
-3
pH 8 1.066 0.985 4.09 x10
-3
pH 10 1.300 1.288 4.09 x10
EXPERIENCIA: SUSTANCIAS X
X1= 0.5 ml ÁCIDO SULFÚRICO 5mmol/l
-3
1,0 ml Sustrato 1.100 0.993 4.09 x10
-3
1,5 ml Sustrato 1.666 1.544 6.14 x10
-3
2,0 ml Sustrato 2.150 2.016 8.18 x10
-3
2,5 ml Sustrato 2.658 2.524 10.22 x10
X2= 0.5 ml Acarbosa al 0,1%
-3
1,0 ml Sustrato 1.100 0.270 4.09 x10
-3
1,5 ml Sustrato 1.666 0.765 6.14 x10
-3
2,0 ml Sustrato 2.150 1.262 8.18 x10
-3
2,5 ml Sustrato 2.658 1.776 10.22 x10
X3= 0.5 ml NaCl al 0.9%
-3
1,0 ml Sustrato 1.100 0.092 4.09 x10
-3
1,5 ml Sustrato 1.666 0.121 6.14 x10
-3
2,0 ml Sustrato 2.150 0.186 8.18 x10
-3
2,5 ml Sustrato 2.658 0.707 10.22 x10

Prof. Rafael González P.

1.- PARA OBTENER LOS MILIMOLES TOTALES DE ALMIDÓN, SE PROCEDIÓ A LO SIGUIENTE:

TOMANDO 342.2 GR/MOL COMO EL PESO MOLECULAR PROMEDIO DEL ALMIDÓN, Y 1.4 GR/L COMO LA CONCENTRACIÓN A
LA CUAL SE PREPARÓ EL SUSTRATO; SE REALIZA EL CÁLCULO DE LOS MILIMOLES TOTALES DE ALMIDÓN SEGÚN EL
VOLUMEN AGREGADO A LOS TUBOS, DE LA SIGUIENTE FORMA:

1.4 𝑔𝑟 1 𝑚𝑜𝑙 1000 𝑚𝑚𝑜𝑙

PARA 1ml O 0.001 L × × × 0.001 𝑙 = 4.09 𝑥 10−3 𝑚𝑚𝑜𝑙/𝑙
1𝑙 342.2 𝑔𝑟 1 𝑚𝑜𝑙

1.4 𝑔𝑟 1 𝑚𝑜𝑙 1000 𝑚𝑚𝑜𝑙

PARA 1,5ml O 0.0015 L × × × 0.0015 𝑙 = 6.14 𝑥 10−3 𝑚𝑚𝑜𝑙/𝑙
1𝑙 342.2 𝑔𝑟 1 𝑚𝑜𝑙

1.4 𝑔𝑟 1 𝑚𝑜𝑙 1000 𝑚𝑚𝑜𝑙

PARA 2,0ml O 0.002 L × × × 0.002 𝑙 = 8.18 𝑥 10−3 𝑚𝑚𝑜𝑙/𝑙
1𝑙 342.2 𝑔𝑟 1 𝑚𝑜𝑙

1.4 𝑔𝑟 1 𝑚𝑜𝑙 1000 𝑚𝑚𝑜𝑙

PARA 2,5ml O 0.0025 L × × × 0.0025 𝑙 = 10.22 𝑥 10−3 𝑚𝑚𝑜𝑙/𝑙
1𝑙 342.2 𝑔𝑟 1 𝑚𝑜𝑙

1.4 𝑔𝑟 1 𝑚𝑜𝑙 1000 𝑚𝑚𝑜𝑙

PARA 3,0ml O 0.003 L × × × 0.003 𝑙 = 12.27 𝑥 10−3 𝑚𝑚𝑜𝑙/𝑙
1𝑙 342.2 𝑔𝑟 1 𝑚𝑜𝑙

2.- PARA CADA UNA DE LAS EXPERIENCIAS EJECUTADAS EN EL LABORATORIO ([S], [E], TEMPERATURA, pH, Y EFECTO DE
SUSTANCIAS) SE HAN DE CALCULAR LOS MILIMOLES DE ALMIDÓN NO METABOLIZADOS A TRAVÉS DE UNA REGLA DE 3;
EMPLEANDO LA CONCENTRACIÓN TOTAL DE ALMIDÓN Y ABSORBANCIA DEL TUBO CONTROL QUE CORRESPONDA.

EJEMPLO:
ABS TUBO CONTROL → MILIMOLES TOTALES DE ALMIDÓN (SEGÚN VOLUMEN DE ALMIDÓN DE ESE TUBO)
ABS TUBO EXPERIMENTAL → ¿?

3.- UNA VEZ CALCULADOS LOS MILIMOLES NO METABOLIZADOS, SE OBTENDRÁN LOS MILIMOLES METABOLIZADOS DE
ALMIDÓN CON UNA RESTA.

MILIMOLES METABOLIZADOS= MILIMOLES TOTALES – MILIMOLES NO METABOLIZADOS

4.- COMPLETE LA TABLA Nº 1 (ADJUNTA) DE ACUERDO A LOS RESULTADOS QUE VAYA OBTENIENDO EN LOS PASOS 2 Y 3.
-3
SE RECOMIENDA QUE EN CADA CASILLA EXPRESE SUS RESULTADOS USANDO LA BASE-EXPONENTE x10 PARA
UNIFICAR CRITERIOS Y MAYOR FACILIDAD PARA REALIZAR SUS GRÁFICAS E INTERPRETAR-ANALIZAR RESULTADOS.

5.- DETERMINE LA Vo (VELOCIDAD INICIAL) Y EXPRÉSELA EN MMOLES/MIN. LA Vo SE CALCULA DIVIDIENDO EL VALOR DE

LOS MILIMOLES METABOLIZADOS ENTRE EL TIEMPO DE REACCIÓN ENZIMÁTICA LLEVADA A CABO EN EL LABORATORIO
(2MIN).

6.- RECUERDE QUE DEBE REALIZAR LAS GRÁFICAS EN PAPEL MILIMETRADO. EN SU REPORTE DE RESULTADOS DEBE
INCLUIR LAS SIGUIENTES GRÁFICAS:
 SUSTRATO: Vo vs MILIMOLES TOTALES DE ALMIDÓN
 ENZIMA: Vo vs CANTIDAD DE ENZIMA (ML)
 pH: Vo vs pH DE LOS BUFFERS
 TEMPERATURA: Vo vs TEMPERATURAS DE INCUBACIÓN (ºC)
 SUSTANCIAS: Vo vs MILIMOLES TOTALES DE ALMIDÓN

7.- INTERPRETE-ANALICE CADA GRAFICA Y DISCUTA EL COMPORTAMIENTO EXPERIMANTAL Y TEÓRICO DE LA AMILASA

SALIVAL. (UTILICE APOYO BIBLIOGRÁFICO). PLANTEE CÓMO A PARTIR DE LOS DATOS OBTENIDOS PUDIERA
DETERMINARSE VMÁX Y KM DE LA AMILASA SALIVAL.

8.- ADICIONALMENTE, CADA GRUPO DEBE INCLUIR EN SU REPORTE DE RESULTADOS (A MANERA DE ANEXO) UN
ARTÍCULO DE REVISTA CIENTÍFICA CON SU SESPECTIVO ANÁLISIS. EL TEMA DE DICHO ARTÍCULO DEBE GIRAR EN
TORNO A ALGUNA ENZIMA CUYA CONCENTRACIÓN SEA DE UTILIDAD PARA EL CONTROL-SEGUIMIENTO- DIAGNÓSTICO
CLÍNICO. LA FECHA DEL ARTÍCULO SELECCIONADO NO DEBE TENER UNA FECHA DE PUBLICACIÓN MAYOR A 10 AÑOS.

Prof. Rafael González P.