Química Analitica General

Informe de
TRABAJO PRÁCTICO N° 4:

MÉTODOS ÓPTICOS DE ANÁLISIS: CUANTIFICACIÓN

ESPECTROFOTOMÉTRICA DE COLORANTES
PRESENTES EN GELATINAS COMERCIALES.

Comisión: 13A
Alumnos: Cardozo Brochero Leonela, Caro Florencia, Carol
Bortayro Consuelo.
OBJETIVOS

El objetivo del presente trabajo práctico es cuantificar los colorantes amarillo

ocaso (INS 110) y amaranto (INS 123) en gelatinas comerciales usando
espectrofotometría y calcular el %p/p de colorantes en el polvo de gelatina.

INTRODUCCIÓN:
En el siguiente trabajo práctico se realizó una cuantificación espectrofotométrica
de colorantes presentes en gelatinas comerciales. Para ello se prepararon soluciones
madres de los colorantes y con estas se prepararon las soluciones diluidas con un
volumen final de 50 mL. Luego se tomó la solución más concentrada y se hizo un
barrido desde los 380 nm hasta los 600. Una vez obtenidas las curvas espectrales (A
vs λ) se eligió la longitud de onda a la cual poseía un máximo de absorción. Una vez
elegidas las longitudes de onda de trabajo (una para cada colorante) se realizaron 4
curvas de trabajo (A vs C) , 2 para cada colorante.

PARTE EXPERIMENTAL:

1) Preparación de las soluciones:

AMARANTO: solución madre 0,2 g/L

Solución Solución madre Volumen final Concentración

(mL) (mL) (g/L)
1 0,1 mL 50 mL 0,0004 g/L
2 1,0 mL 50 mL 0,004 g/L
3 2,0 mL 50 mL 0,008 g/L
4 3,0 mL 50 mL 0,012 g/L
5 4,0 mL 50 mL 0,016 g/L
6 5,0 mL 50 mL 0,02 g/L
Cálculo de concentraciones:
➢ Solución 1:
1000 mL ——— 0,2 g
0,1 mL ——— x: 0,00002 g
➢ Solución 2:
1000 mL ——— 0,2 g
1 mL ——— x: 0,0002 g
➢ Solución 3:
1000 mL ——— 0,2 g
2 mL ——— x: 0,0004 g
➢ Solución 4:
1000 mL ——— 0,2 g
3 mL ——— x: 0,0006g
➢ Solución 5:
1000 mL ——— 0,2 g
4 mL ——— x: 0,0008 g
➢ Solución 6:
1000 mL ——— 0,2 g
5 mL ——— x: 0,001 g
50 mL ——— 0,00002 g
1000 mL ——— x: 0,0004 g
50 mL ——— 0,0002 g
1000 mL ——— x: 0,004 g
50 mL ——— 0,0004 g
1000 mL ——— x: 0,008 g
50 mL ——— 0,0006 g
1000 mL ——— x: 0,012 g
50 mL ——— 0,0008 g
1000 mL ——— x: 0,016g
50 mL ——— 0,001 g
1000 mL ——— x: 0,02 g
AMARILLO OCASO: solución madre 0,2 g/mL

Solución Solución madre Volumen final Concentración

(mL) (mL) (g/L)
1 0,1 mL 50 mL 0,0004 g/L
2 1,0 mL 50 mL 0,004 g/L
3 2,0 mL 50 mL 0,008 g/L
4 3,0 mL 50 mL 0,012 g/L
5 4,0 mL 50 mL 0,016 g/L
6 5,0 mL 50 mL 0,02 g/L
Cálculo de concentraciones:

➢ Solución 1:
1000 mL ——— 0,2 g 50 mL ——— 0,00002 g
0,1 mL ——— x: 0,00002 g 1000 mL ——— x: 0,0004 g
➢ Solución 2:
1000 mL ——— 0,2 g 50 mL ——— 0,0002 g
1 mL ——— x: 0,0002 g 1000 mL ——— x: 0,004 g

➢ Solución 3:
1000 mL ——— 0,2 g 50 mL ——— 0,0004 g
2 mL ——— x: 0,0004 g 1000 mL ——— x: 0,008 g

➢ Solución 4:
1000 mL ——— 0,2 g 50 mL ——— 0,0006 g
3 mL ——— x: 0,0006g 1000 mL ——— x: 0,012 g

➢ Solución 5:
1000 mL ——— 0,2 g 50 mL ——— 0,0008 g
4 mL ——— x: 0,0008 g 1000 mL ——— x: 0,016g

➢ Solución 6:
1000 mL ——— 0,2 g 50 mL ——— 0,001 g
5 mL ——— x: 0,001 g 1000 mL ——— x: 0,02 g
2) Obtención de las curvas espectrales:

Para obtener estas curvas, se corrió la línea de base con agua destilada entre 600
nm y 380 nm para obtener el “cero de absorbancia”.
Posteriormente, se tomó la solución número 6 de cada colorante en el mismo
rango (600-380 nm) y así se obtuvo el valor del máximo de absorbancia a una
longitud de onda.

Colorante Amaranto Colorante Amarillo Ocaso

λ= 520 nm λ= 480 nm

Como ambas gelatinas contienen ambos colorantes y a pesar de que sus

máximos se encuentran a diferente longitud de onda, ambos colorantes absorben a las
dos longitudes de onda. Entonces, se realizó la curva de calibración para cada
colorante, a cada longitud de onda, por lo que en total se realizaron 4 curvas de
calibración.

3) Curvas de calibración a los máximos de longitudes de onda de ambos

colorantes:

Para la obtención de estas curvas de calibración se empezó a medir las Abs en el

espectrofotómetro, desde la solución de menor concentración a la de mayor
concentración para minimizar el error. De esta forma, se obtienen los valores del
Coeficiente de extinción (Ɛ) a las diferentes longitudes de onda para finalmente
calcular las concentraciones de los colorantes, en los productos comerciales.
Solución Solución madre Concentració Absorbancia Absorbancia
de Amaranto n (g/mL) a λ=520 nm a λ=480 nm
(mL)

1 0,1 mL 0,0004 g/L 0,008 0,011

2 1,0 mL 0,004 g/L 0,128 0,090

3 2,0 mL 0,008 g/L 0,255 0,175

4 3,0 mL 0,012 g/L 0,393 0,267

5 4,0 mL 0,016 g/L 0,543 0,363

6 5,0 mL 0,02 g/L 0,673 0,451

Pendiente ε. b (L/ g.cm) 34,12249 ± 22,54753 ±

0,40262 0,20717

Ordenada -0,01017 ± -8,11759E-4 ±

0,00488 0,00251
Solución Solución madre Concentración Absorbancia Absorbancia
de Amarillo Ocaso (g/mL) a λ=520 nm a λ=480 nm
(mL)

1 0,1 mL 0,0004 g/L 0,011 0,019

2 1,0 mL 0,004 g/L 0,109 0,189

3 2,0 mL 0,008 g/L 0,219 0,374

4 3,0 mL 0,012 g/L 0,33 0,571

5 4,0 mL 0,016 g/L 0,44 0,76

6 5,0 mL 0,02 g/L 0,545 0,944

Pendiente ε. b (L/ g.cm) 27,34738 ± 47,35595 ±

0,10714 0,20186

Ordenada 3,69721E-4 ± -5,49927E-4 ±

0,0013 0,00244
4) Determinación de la absorbancia de cada una de las muestras:

Gelatina de frutilla Gelatina de naranja

Masa: ( 2,5090 ± 0,0002) g Masa: (2,5018 ± 0,0002) g
Dilución: 1/10 Dilución: 1/10
Absorbancia Absorbancia
520 nm 480 nm 520 nm 480 nm
0,212 0,207 0,176 0,252

5) Cálculo del contenido de colorante en las muestras analizadas:

Mediante el siguiente sistema de dos ecuación podemos calcular las

concentraciones(%p/p) de ambos colorantes en cada gelatina:

Aλ=520 = ε(AM)λ=520 · b · CAM + ε(AO)λ=520 · b · CAO (1)

Aλ=480 = ε(AM)λ=480 · b · CAM + ε(AO)λ=480 · b · CAO (2)
Gelatina de frutilla:

(1) 0,212 = 34,12249 · CAM + 27,34738 · CAO

0,212 - 34,12249 · CAM = 27,34738 · CAO
( 0,212 − 34,12249.𝐶𝐴𝑀
27,34738 ) =C AO

(2) 0,207 = 22,54753 · CAM + 47,35595 · CAO

0,207 = 22,54753 · CAM + 47,35595 · ( 0,212 − 34,12249.𝐶𝐴𝑀
27,34738 )
10,0394614 − 1615,90293.𝐶𝐴𝑀
0,207 = 22,54753 · CAM + 27,34738
0,207 = 22,54753 · CAM + 0,3671087102 - 59,08803439 · CAM
0,207 - 0,3671087102 = 22,54753 · CAM - 59,08803439 · CAM
-0,1601087102 = -36,54050439 · CAM
− 0,1601087102
− 36,54050439
= CAM
0,004381677617 g/L = C AM

(1) ( 0,212 − 34,12249 . 0,004381677617

27,34738 ) =CAO

0,002284908073 g/L = C AO

→ %p/p de Amaranto
1000 mL de solución problema ———— 0,004381677617 g de amaranto
10 mL de solución problema ———— x: 4,3816776x10 -5 g de amaranto
1 mL de solución madre ———— 4,3816776x10 -5 g de amaranto
50 mL de solución madre ———— x: 2,19x10 -3 g de amaranto
2,5090 g de gelatina de frutilla———— 2,19x10-3 g de amaranto
100 g de gelatina de frutilla ———— x: 0,0873%
La concentración del colorante Amaranto en la gelatina de frutilla es 0,0873% P/P.

→ %p/p de Amarillo Ocaso

1000 mL de solución probelma ———— 0,002284908073g de amarillo ocaso
10 mL de solución problema ———— x: 2,2849x10 -5 g de amarillo ocaso
1 mL de solución madre ———— 2,2849x10 -5 g amarillo ocaso
50 mL de solucíon madre———— x: 1,142454x10 -3 g amarillo ocaso
2,5090 g de gelatina de frutilla ———— 1,142454x10-3 g amarillo ocaso
100 g de gelatina de frutilla———— x: 0,0455%
La concentración del colorante Amarillo Ocaso en la gelatina de frutilla es de
0,0455% P/P.

Gelatina de naranja:

(1) 0,176 = 34,12249 · CAM + 27,34738 · CAO

0,176 - 34,12249 · CAM = 27,34738 · CAO
( 0,176 − 34,12249.𝐶𝐴𝑀
27,34738 ) =C AO

(2) 0,252 = 22,54753 · CAM + 47,35595 · CAO

0,252 = 22,54753 · CAM + 47,35595 · ( 0,176 − 34,12249.𝐶𝐴𝑀
27,34738 )
8,3346472 − 1615,90293.𝐶𝐴𝑀
0,252 = 22,54753 · CAM + 27,34738
0,252 = 22,54753 · CAM + 0,3047694953 - 59,08803439 · CAM
0,252 - 0,3047694953 = 22,54753 · CAM - 59,08803439 · CAM
- 0,0527694953 = - 36.54050439 · CAM
− 0,0527694953
− 36.54050439
= CAM
0,001444137025 g/L = C AM

(1) ( 0,176 − 34,12249 . 0,001444137025

27,34738 ) =CAO

0,004633805827 g/L = C AO

→ %p/p de Amaranto
1000 mL solución problema———— 0,001444137025 g de amaranto
10 mL solución problema ———— x: 1,444x10 -5 g de amaranto
1 mL solución madre ———— 1,444x10 -5 g de amaranto
50 mL solución madre———— x: 7,22x10 -4 g de amaranto
2,5018 g de gelatina de naranja ———— 7,22x10-4 g
100 g de gelatina de naranja ———— x: 0,0289%
La concentración del colorante Amaranto en la gelatina de naranja es 0,0289%
P/P.
→ %p/p de Amarillo Ocaso
1000 mL solución problema ———— 0,004633805827 g amarillo ocaso
10 mL solución problema ———— x: 4,6338x10 -5 g amarillo ocaso
1 mL solución madre ———— 4,6338x10 -5 g amarillo ocaso
50 mL solución madre ———— x: 2,3169x10 -3 g amarillo ocaso
2,5018 g de gelatina de naranja———— 2,3169x10-3 g amarillo ocaso
100 g de gelatina de naranja ———— x: 0,0926%
La concentración del colorante Amarillo Ocaso en la gelatina de naranja es de
0,0926% P/P.

CONCLUSIÓN:
Podemos decir que para determinar la concentración de una solución a
través del método espectrofotométrico resulta beneficioso ya que es un
método no destructivo, es decir, que la muestra se puede volver a recuperar
y utilizar.
Y con respecto a los resultados obtenidos en el práctico, podemos decir que
viendo las curvas espectrales de los colorantes amaranto y amarillo ocaso
se dejó en manifiesto que, a las longitudes de onda 520 nm y 480 nm
respectivamente, tienen un máximo de absorbancia.
Luego, para medir la absorbancia de las muestras problemas, tomamos 1
mL de cada una y lo llevamos a un volumen final de 10 mL ya que sino
estas soluciones estarían muy concentradas y no cumplirían con la
linealidad de la Ley de Lambert y Beer. Una vez obtenidas esas
absorbancias de las muestras problemas ,con las curvas de trabajo pudimos
calcular las concentraciones de las muestra problema utilizando la Ley de
Lambert y Beer.