PRACTICA N° 4: DETERMINACION DE CARBOHIDRATOS TOTALES POR METODO DE ACIDO

SULFURICO-FENOL EN UNA MUESTRA DE JUGO PROCESADO

NATALY MELO ORTIZ

ANGIE MARCELA GONGORA CORDERO

PRESENTADO A: PROF. MIGUEL ÁNGEL RAMÍREZ NIÑO

Qco-UIS, MSc-UPRM

LABORATORIO DE QUÍMICA AGROINDUSTRIAL

UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS, VEREDA BARCELONA.

PROGRAMA DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL
ESCUELA DE INGENIERÍA EN CIENCIAS AGRÍCOLAS
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Y RECURSOS NATURALES
VILLAVICENCIO, COLOMBIA.
2019
 DETERMINACION DE CARBOHIDRATOS TOTALES POR METODO DE ACIDO SULFURICO-
FENOL EN UNA MUESTRA DE JUGO PROCESADO

1. OBJETIVOS

● Determinar el contenido de carbohidratos totales en una muestra de jugo o bebida

procesada.
● Conocer la técnica de espectroscopia visible como herramienta de análisis químico
de alimentos, y su utilización en la preparación de curvas de calibración.

2. DATOS
2.1. ABSORBANCIA A PARTIR DE SOLUCIONES DE CALIBRACIÓN DE GLUCOSA
Tabla No.1 Datos de las soluciones de calibración de glucosa, absorbancias obtenidas
para la realización de la curva de calibración # 2.
TUBO ABSORBANCIA (A) PROMEDIO A
1 0,00 0,00 0,00 0,000
2 0,152 0,153 0,153 0,152
3 0,304 0,303 0,305 0,304
4 0,487 0,495 0,484 0,488
5 0,637 0,672 0,642 0,650
6 0,755 0,751 0,755 0,753
7 0,852 0,860 0,861 0,857
8 0,988 0,997 0,998 0,994
9 1,076 1,075 1,082 1,077
10 1,195 1,194 1,197 1,195

2.2. DATOS DEL JUGO Y DE LA MUESTRA DEL JUGO NECTAR CALIFORNIA

Tabla No. 2. Datos de muestra tomada del Jugo néctar california
JUGO NECTAR CALIFORNIA
Peso Jugo Peso Muestra
318,4669g 3,7682 g

2.3. ABSORBANCIA DE UNA MUESTRA DE JUGO PROCESADO

 Tabla No. 3. Datos de las absorbancias obtenidas de la muestra del jugo NECTAR
CALIFORNIA (solución diluida No.2).
TUBO MASA ABSORBANCIA (A) PROMEDIO A
MUESTRA 1 2 3
1 0,20 0.351 0.350 0.353 0.351
2 0,30 0.596 0.578 0.592 0.588
3 0,50 0.923 0.924 0.930 0.925

2.1. MUESTRA
2.1.1. JUGO NECTAR CALIFORNIA

Gráfico No. 2. Etiqueta nutricional del jugo NECTAR CALIFORNIA DE MANZANA

 Grafica No.1. Curva de Calibración del Patrón Glucosa 100 µg/mL

3. CALCULOS
3.1. DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN EN LAS MUESTRAS DE JUGO NÉCTAR
CALIFORNIA
y= mx + b
y = 0,0137x - 0,0391

Despejamos la variable X en la ecuación de la recta obtenida.

y+ b
X=
m
y+ 0,0 391
x = 0.013 7

Siendo y el valor de la absorbancia para cada muestra y x la concentración µg/mL

3.2.1. CONCENTRACIÓN DE LA MUESTRA EN EL TUBO No. 1.

0. 351+0.0 391
X1= =28.47 µg /mL
0.0137
28.47 µg/ml x 2,0 ml
X1= =284.7 µg/mL
0,20 ml
284.7 µg/mL x 100 mL
X1= =1138.8 µg /mL
25 mL
µg 1g
X 1 =1138.8 x =1.1388 x 10−3 g
mL 1.0 x 106 µg
 g
X 1 =250 mL x 1.1388 x 10−3 =0.2 847 g
mL
0.2 847 g
%p / p 1= x 100 %=7.55 %p / p
3.7682 g

3.2.1. CONCENTRACIÓN DE LA MUESTRA EN EL TUBO No. 2.

0. 588+0.0 391
X2= =45.77 µg /mL
0.0137
45.77 µg /ml x 2,0 ml
X2= =3 05.133 µg/mL
0,30 ml
305.133 µg/mL x 100 mL
X2= =3051.33 µg /mL
10 mL
µg 1g
X 2 =3051.33 x =3.051 x 10−3 g
mL 1.0 x 106 µg

g
X 2 =250 mL x 3.051 x 10−3 =0. 762 g
mL
0. 762 g
%p / p 2= x 100 %=20.22 %p/ p
3. 7682 g

3.2.1. CONCENTRACIÓN DE LA MUESTRA EN EL TUBO No. 3.

0.925+ 0.0391
X3= =70.372 µg /mL
0.013 7
70.372 µg /ml x 2,0 ml
X3= =281.488 µg / mL
0 , 5 0 ml
281.488 µg/mL x 100 mL
X3= =2814.88 µg /mL
10 mL
µg 1g
X 3 =2814.88 x =2.814 x 10−3 g
mL 1.0 x 10 µg
6

g
X 3 =250 mL x 2.814 x 10−3 =0. 703 g
mL
0. 703 g
%p / p 3= x 100 %=18.65 %p / p
3. 7682 g
 3.3. CONCENTRACIÓN DE LA MUESTRA DE JUGO
● PROMEDIO DE LAS CONCENTRACIONES TOTALES DE LAS MUESTRAS EN LOS
TUBOS

n
1 a + a +…+ an
PROMEDIO= ∑ ❑a 1= 1 2
n i=1 n
7 .55+20.22+ 18.65
PROMEDIO=
3
PROMEDIO=15.47 %p / p

● DESVIACION ESTANDAR
n

S=
√ ∑ ❑ ( x 1−X )2
i=1
n−1

(7. 55−15.47)2 +(20.22−15.47)2+(18.65−15.47)2

S=
√ 2
S=6.90

● COEFICIENTE DE VARIANZA
S 6.90
%CV = x 100= x 100=4 4 . 60 %
X 15.47

 MASA CARBOHIDRATOS TOTALES EN LA MUESTRA DE JUGO NECTAR CALIFORNIA

15.47 g carbohidratos
318.4669 g muestra x =4 9.26 g carbohidratos
100 g muestra
● EROR RELATIVO

X −µ
Er= x 100 %
µ
 26 .00 g−4 9 . 26 g
Er= x 100 %=−47.22%
4 9.26 g

4. RESULTADOS
4.1. DETERMINACIÓN DE CARBOHIDRATOS TOTALES EN LA MUESTRA DE JUGO
Tabla No. 4. Resultados de la determinación de la concentración y la masa de
carbohidratos totales de las muestra de jugo néctar california.
CONCENTRACIÓN DESVIACIÓN COEFICIENTE DE CARBOHIDRATOS EROR
PROMEDIO ESTÁNDAR VARIACIÓN TOTALES (g) RELATIVO (%)
15,47 % p/p 6,90 44.60% 49.26 -47.22

5. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Según el Ministerio de la Protección Social de la Republica de Colombia, encargada del
cumplimiento de etiquetado nutricional en productos enlatados de consumo humano
define mediante la resolución Numero 333 de 2011 a los Carbohidratos totales como:
“Todos los mono, di, oligo y polisacáridos, incluidos los polialcoholes presentes en el
alimento”. Para el análisis de carbohidratos totales contamos con una solución patrón de
glucosa (100 µg/ml) y su respectiva curva de calibración, la cual debe ser recta y
directamente proporcional para ambas funciones, al no obtener esta recta, aplicamos
mínimos cuadrados, por esta razón se utilizó diferentes volúmenes utilizados en el patrón
glucosa, se halló la concentración de cada una de las soluciones mediante la fórmula,
V1C1=V2C2, despejando a y reemplazando por sus respectivos datos, estas disoluciones se
llevaron al espectrofotómetro para medir su absorbancia de luz en donde por cada
muestra se le realizaron 3 pruebas (se le midieron la absorbancia) para tener una mejor
precisión en los resultados. Con los datos obtenidos con cada promedio de absorbancia de
cada patrón de glucosa se realizo una curva de calibración (no se utilizó el promedio de
absorbancia del tubo 10 para la realización de la curva de calibración ya que su resultado
sobrepasa a 1 y esto lleva a que la curva se indetermine hacia ∞), obteniendo una
ecuación y = mx + b, con pendiente (m) de 0.0137, intercepción (b) de -0.0391 (y es la
absorbancia y x la concentración), y con una R2 con valor de 0.9896.

Teniendo la ecuación de la recta de la curva de calibración “Absorbancia vs

Concentración”, se continuo con la determinación de las concentraciones de la muestra
(3.7682 g), inicialmente diluida en un matraz de 250 mL (solución diluida No.1),
extrañándose una alícuota de 10 mL y diluyéndola en una matraz de 100 mL (solución
diluida No.2), de la última solución diluida se obtuvieron las muestras con un volumen de
muestra de 0.2 mL, 0.4 mL y 0.5 mL, respectivamente, de las cuales también se tomaron
tres datos de absorbancia por medio del espectrofotómetro. Después de cada uno de los
cálculos realizados se obtuvo concentraciones promedio en %p/p de 15.47 ± 6.90 con un
coeficiente de varianza del 44.60%. Estos resultados muestran un porcentaje de exactitud
muy bajo ya que la desviación estándar es muy alta

Con los datos obtenidos mediante procesos de cálculos se determinó la masa de los
carbohidratos totales de 49.26 g de la totalidad de la muestra de jugo néctar california
con un masa total de 318.4669 g, realizando una comparación directa con los datos
teóricos de la etiqueta nutricional de 26 g de carbohidratos totales, sacando el error
relativo de estos dos datos, el teórico y el experimental, arrojando un error relativo del
-47.22 % una diferencia muy notoria casi la cantidad del doble es decir que pudo ocurrir
un error durante el desarrollo de la toma de Las muestras. se puede decir que el análisis
por el método de ácido sulfúrico fenol y mediante el espectrofotómetro a 490 nm es muy
preciso, dándonos unos niveles muy elevados de confianza a la realización de este método
de obtención de carbohidratos de cualquier bebida procesada envasada que se pueda o
que se quiera conocer este dato. Se puede observar a partir de estos resultados que se
realizó la practica con poca exactitud, estos pudo ser a causa de la mala utilización de los
instrumentos del laboratorio y no seguir las instrucciones del docente.

6. CONCLUSIONES

 Se llevó a cabo una serie de procedimientos en los cuales se pudo determinar el

contenido de carbohidratos totales en una muestra de jugo nectar california, por
medio del método de ácido sulfúrico-fenol, lo cual arrojo resultados poco precisos,
debido al mal desarrollo de la practica por parte de los estudiantes.

7. BIBLIOGRAFÍA
 HART F. L., y FISHER H. J. Análisis moderno de los alimentos. 2 a Edición. España,
Editorial Acribia, 1991.

 PEARSON, D. Técnicas de laboratorio para el análisis de alimentos. 1ª Edición.

España, Editorial Acribia, 1986.

 LABORATORIO DE ALIMENTOS I. Fundamentos y técnicas de análisis de alimentos.

México, Departamento de alimentos y biotecnología, Facultad de química,
UNAM, 2007-2008.

 MINISTERIO DE PROTECCION SOCIAL. Resolución Nº 333 de 2011. Republica de

Colombia. Internet: https://www.invima.gov.co/images/stories/
resoluciones/Res_333_de_feb_2011_Rotulado_nutricional.pdf