INSTITUTO DE

CIENCIAS Y ESTUDIOS
SUPERIORES DE
TAMAULIPAS

Lic. Médico cirujano

Parasitología

ALUMNO:
Islas Corona Luis Felipe

DOCENTE:
Q.F.B Nava Diguero
María Elena
GRUPO “3 A “

Tampico, Tamaulipas

Técnica de Ritchie

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MÉTODOS DE CONCENTRACIÓN

Técnica de Ritchie o de sedimentación por centrifugación y flotación

(mixto, con fijador).

Objetivo:

•Conocer el desarrollo de la técnica de Ritchie.

•Relacionar con el conocimiento teórico.

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 Introducción:

Son estructuras observables en el laboratorio por medio del microscopio por

personal entrenado.

Estos cristales son evidenciados principalmente en el exámen general de las

heces, pero pueden estar localizados en distintos tejidos del cuerpo y en
diferentes fluidos biológicos como el esputo o secreciones nasales.

Los cristales de Charcot-Leyden corresponden a moléculas derivadas de

nuestras células de defensa de primera línea: leucocitos del tipo basófilo y
eosinófilo, quienes participan en respuesta de procesos inflamatorios
principalmente alérgicos oDe este modo el hallazgo de estos cristales es
sugestivo de tales procesos, pero se requiere de un apoyo diagnóstico
adicional.

Así mismo su ausencia no excluye las anteriores situaciones.

Cuando la molestia inflamatoria es a nivel del tracto digestivo otras pruebas del
orden inflamatorio ayudan a la conformación del diagnóstico por ejemplo el perfil
gástrico o gastro test que incluye: calprotectina, transferrina, sangre oculta,
lactoferrina.

Si la molestia irritativa se relaciona con ciertos tipos de alimentación su médico

indicará estudios adicionales de intolerancias, que frecuentemente están
asociadas a lactosa o a gluten, para los cuales el laboratorio también tiene a
disposición otras determinaciones específicas de intolerancia a la lactosa y el
perfil de celiaquía usado para establecer problemas en el manejo del gluten
parasitarios.

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Fundamento.

Se basa en la concentración de los quistes y huevos por sedimentación

mediante la centrifugación, con la ayuda de formol y éter para separar y
visualizar los elementos parasitarios.
Las sustancias químicas, como lo son el formaldehído y el éter, permiten
remover material lípido y coloidal y obtener así un sedimento más “puro”.
Además, la formalina conserva huevos, larvas y quistes, por lo que el material
puede examinarse horas o incluso días después.
La finalidad de repetir el proceso de centrifugación con solución salina, es
porque de esa manera también se elimina la mayor cantidad de restos
fecales, vegetales y grasas que estén presentes, que intervienen la mayoría
de las veces en la visualización microscópica.
La función de la centrifuga en esta práctica es de suma importancia, puesto
que utiliza la fuerza centrípeta para separar sustancias de diferentes
densidades. Al centrifugar la mezcla del sedimento con el formol y el éter se
menciona la presencia de 4 capas, las cuales son:

1. Éter en la superficie

2. Un tapón de restos fecales y grasos

3. Formaldehído

4. Sedimento en el fondo del tubo, conteniendo los elementos parasitarios.

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Material y reactivos:

Gradilla de tubos de ensayo.

Tubos de ensayo 13 x 100

Vaso de precipitado 50 ml

Pipetas Pasteur.

Lámina portaobjetos.

Laminillas cubreobjetos.

Hisopos.

Solución de formol 10%.

Solución fisiológica.

Éter etílico.

Lugol.

Bajalengua

Microscopio binocular.

Procedimiento.

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1. Colocar en el vaso de precipitado de 50 ml 1 a 2 g de muestra de heces,
agregar 8 ml de solución fisiológica, homogeneizar.
2.Vaciar en el tubo de 13:100 el homogenizado y centrifugar a 2 000 r.p.m.
por 2 a 3 minutos
3.Descartar el sobrenadante y repetir varias veces el paso anterior hasta que
se observe el sobrenadante limpio.
4.Decantar el sobrenadante, agregar al sedimento 6 ml de solución de formol
al 10%, homogeneizar y dejar reposar 5 minutos, luego de los cuales se
agrega 3 ml de éter.
5.Tapar el tubo y agitar cuidadosamente para evitar la salida del material.

6.Eliminar las capas formadas de sobrenadante, de ser necesario, con ayuda

de un hisopo.
7.Retirar la tapa, centrifugar el tubo de 2 000 a 3 000 r.p.m. por 3 minutos.
8.Depositar una gota de lugol en la lámina portaobjeto, y con ayuda de una
pipeta Pasteur, tomar una porción del sedimento para mezclarlo con la
solución de lugol.
9.Cubrir con una laminilla cubreobjeto y observar al microscopio.

VARIANTE DEL MÉTODO

1.Con el abate lengua de madera se coloca aproximadamente 2 gr. De

materia fecal en el vaso de precipitado, se añade 10 ml de solución salina y
se homogeniza.
2. Se filtra la suspensión atreves de la gasa colocando en el embudo, se
recoge el filtrado en el tubo cónico.
3. Se centrifuga la suspensión durante 2 min a 2000rpm.
4. Se decanta el sobrenadante y se resuspender el sedimento con solución
salina, centrifugar, decantar y resuspender 2 veces más. Hasta que el
sobrenadante sea claro.

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5. Al último sedimento se agregan 6ml de solución de formaldehido al 10%,
se mezcla y se deja reposar durante 5 min.
6. Se añaden después 3 ml de éter, se tapa el tubo con tapón de caucho y
se agita enérgicamente durante 3 min.
7.Eliminar las capas formadas y centrifugar durante 3 minutos a 2000rpm.
8. con la pipeta Pasteur tomar una porción del sedimento y colocar una
gota de en un portaobjetos. Se observa la preparación con los objetivos de
10xy 40x.

Fotos

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Observación.

Resultado.

.
Conclusión

Bibliografía

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https://www.labsaenzrenauld.com/tienda/heces/cristales-de-charcot-leyden/
https://revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/download/974/1089/4
595#:~:text=Los%20cristales%20de%20Charcot%2DLeyden%20obtenidos%2
0de%20las%20heces%20reaccionan,de%20los%20eosin%C3%B3filos%20(1
0).