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UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO - FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

ESCUELA DE MEDICINA HUMANA - CURSO INMUNOLOGIA BASICA MANUAL DE


PRACTICAS INMUNOLOGIA BASICA

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UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO


FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

INMUNOLOGÍA GENERAL
MANUAL DE PRÁCTICAS
2021 -I
ALUMNOS:
IRIGOIN ASTOPILCO, DIEGO
DOCENTE:
MEJÍA DELGADO ELVA
CURSO:
INMUNOLOGÍA GENERAL
HORARIO:
JUEVES 2:20PM – 5:55PM
NRC: 5496
TRUJILLO- PERÚ
2021
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PRACTICA 01

TAREAS DE LABORATORIO:

1. Esquematizar dos pictogramas de cada uno de los 5 tipos expuestos


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2. De forma sencilla esquematiza el laboratorio con sus pictogramas y diga el significado
de cada uno. Sugiera cambios.
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PRÁCTICA 02
TOMA DE MUESTRA PARA LA OBTENCIÓN DE SUERO Y PLASMA INTRODUCCIÓN

CUESTIONARIO:

1. ¿Cuál es el calibre de la aguja utilizada para el procedimiento de venopunción?

- Para realizar un hemograma se utiliza una aguja de diámetro de 0.8mm (21G) para
así poder evitar un daño en las células. Las agujas de 0.9-1.1mm de diámetro (20 G-
19 G) se usan para punción venosa en adultos.

2. ¿Por qué se utiliza una ligadura en el brazo para realizar la extracción sanguínea?

- Se utiliza la ligadura para detener el flujo sanguíneo y de esta manera destacar las
venas para facilitar la extracción de la sangre.

3. Como se debe de introducir el bisel de la aguja y ¿Por qué?

- Introducir la aguja con bisel hacia arriba, en dirección contraria al flujo sanguíneo,
con un ángulo de 15- 30º, para evitar irritar a las fibras nerviosas y causar dolor
innecesario.

4. Defina que es un anticoagulante

- Los anticoagulantes son fármacos que evitan la formación de coágulos sanguíneos.


Previene que los coágulos de sangre se hagan más grandes y traiga consecuencias
como ataques al corazón y derrames cerebrales.

5. ¿Qué diferencia hay entre suero y plasma?

SUERO PLASMA

-Es la parte líquida de la sangre que se obtiene -Parte líquida de la sangre cuando se
después de la coagulación inhibe la coagulación
-Se obtiene a través de la centrifugación de la -Se obtiene por la coagulación de la
sangre sin anticoagulantes sangre con anticoagulantes
-Se utiliza para pruebas serológicas -Se utiliza para pruebas de colesterol,
- Está conformado por: Agua, albúmina, glucosa, urea, enzimas.
globulinas, lipoproteínas, aminoácidos, -Los mismos que el suero, además de
hormonas, iones, glucosa fibrinógeno y factores de coagulación.

6. ¿Qué hacer en caso de no tener vena visible para la extracción sanguínea?


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Existen técnicas que nos ayudan a mejorar la visibilidad de las venas para así poder
conseguir la extracción de sangre:
- Cerrar el puño hace más prominente una vena
- Masajear el brazo
- Golpear con el dedo índice el lugar de punción
- Aplicar calor en dicha zona
- Dejar colgar el brazo para dificultar el retorno, y abrir y cerrar la mano en modo de
bombeo.

7. Componentes de los tubos vacutainer que se muestran y sus usos

● TUBO NEGRO
Contiene citrato de sodio, así como también EDTA. Este tubo se utiliza para almacenar
muestras de sangres que se les realizará pruebas de velocidad de sedimentación globular.

● TUBO LILA
Estos tubos contienen el EDTA, sal de potasio que se utiliza como anticoagulante. Se
utiliza para almacenar la muestra de sangre cuando se realicen pruebas hematológicas
(conteo de células sanguíneas) o realizar frotis para ser observadas en el microscopio.
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● TUBO ROJO
Los tubos plásticos contienen agentes coagulantes. Se utiliza cuando se necesita del suero
para hacer análisis. Su función de estos tubos es almacenar la muestra de sangre para
realizar a futuro pruebas químicas y serológicas
Los tubos de vidrio no contienen ningún líquido. Estos son usados para realizar estudios de
presencia de drogas o analizar anticuerpos.

● TUBO VERDE
Puede contener heparina de Sodio o heparina de litio los cuales son agentes
anticoagulantes que se utilizan para pruebas químicas clínicas en el plasma.

● TUBO GRIS

Los tubos grises contienen fluoruro y oxalacetato de Potasio. El oxalacetato funciona como
un anticoagulante y el fluoruro detiene la acción de las enzimas sobre la glucosa. Estos
tubos son utilizados para realizar determinaciones de glucosa en la sangre.

● TUBO NARANJA

Son usados para obtener de manera rápida una muestra para ser estudiada. Presenta un
activador de coagulación llamado trombina. Se usan casos de urgencia de obtención de
muestra.

● TUBO AMARILLO

Estos tubos presentan en su interior un agente coagulante junto con un gel separador de
suero. Este se utiliza para realizar estudios de pruebas clínicas y las determinaciones del
Suero. Esto facilita el proceso de realizar los estudios en una misma muestra.

● TUBO CELESTE
Este tubo contiene citrato de sodio, es un anticoagulante que puede ser reversible que diluye
bien la sangre. Es utilizado para realizar las pruebas de coagulación de la sangre.
Tiempo de Protrombina: Mide el tiempo en que la porción líquida se coagula.
Tiempo de Tromboplastina: Mide el tiempo que toma la sangre coagularse y define si hay
problemas de sangrado o coagulación.
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PRÁCTICA 03: EL HEMOGRAMA

CUESTIONARIO

1. Explique el fundamento del colorante de Wright.


El colorante de Wright es un Romanowski se utiliza como método de tinción específico para
determinar la morfología de las células sanguíneas y médula ósea. Es muy sensible a las
variaciones del pH.
Es policromático ya que está compuesto por:
- Colorante básico: Azul de metileno y sus derivados.
- Colorante ácido: Eosina.
- Metanol (Se encarga de fijar el frotis sanguíneo al portaobjetos).
- Buffer (Regula el pH resultante de la interacción de los dos colorantes).
La acción combinada de estos colorantes produce el efecto Romanowski que da una coloración
púrpura a los núcleos de los leucocitos y a los gránulos neutrófilos y da color rosado a los
eritrocitos.
Por lo tanto, al momento de la tinción sucede lo siguiente:
- El azul de metileno es un componente con pH básico que tiñe de color azul las partes
acidas de las células como: Ácidos nucleicos, gránulos de los neutrófilos y proteínas
ácidas.
- La eosina es un colorante acido que tiñe de color rojizo o rosado a las partículas
básicas de la célula. Se une a la hemoglobina y gránulos de los eosinófilos.
- El balance entre el azul de metileno y la Eosina proporciona una tonalidad más o
menos violeta de diferentes tonalidades.

2. Cómo haría el recuento de G.B. si no cuenta con la pipeta de Thoma.


En el caso de no tener la pipeta de Thoma, podríamos utilizar el método indirecto este
consiste en utilizar una lámina de hemograma se deben contar 20 campos de 100 glóbulos
rojos en cada campo. Luego se realiza el recuento de plaquetas en cada uno de los campos
y el resultado será cada cuanta plaqueta hay en 100 glóbulos rojos.
Posteriormente de realizar el procedimiento aplicado lo que se hace es analizar mediante el
uso de la tabla de valores de porcentaje del hematocrito y el número de glóbulos rojos porque
así se podrá hallar el número de plaquetas por mm2.

3. Ud. cuenta 10 campos de 100 G.R. c/u y cuenta un total de 25 plaquetas. Si se tiene
el dato que el paciente tiene 40 de Hto. ¿Cuál es el número de plaquetas por mm3?
Escriba sus cálculos

Utilizaremos el método indirecto de reencuentro de plaquetas:


Paso 1: Analizamos los datos
Datos:
Hto:40%
Cantidad de plaquetas: 25 en 10 campos de 100 G.R c/u
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Paso 2: Reemplazar los datos en la siguiente fórmula
X = G.R por mm3 de %Hto X N. plaquetas
100 G.R
Si en 40% de Hto hay= 4`400 000

X= 4 400 000 GR mm3 X 25 plaquetas


1000 GR
Respuesta: 110 000 plaquetas x mm3.

4. Dibuje las células sanguíneas observadas en práctica, señalando su nombre.


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5. Pegue fotos de células observadas en práctica, señalando su nombre y aumento.

NOMBRE: NEUTRÓFILO NOMBRE: LINFOCITO


AUMENTO: 1600X AUMENTO: 1600X

NOMBRE: EOSINÓFILO NOMBRE: MONOCITO


AUMENTO: 1600X AUMENTO: 1600X

NOMBRE: BASÓFILO
AUMENTO: 1600X
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PRÁCTICA NO. 04 VÍAS DE INOCULACIÓN EN ANIMALES
DE EXPERIMENTACIÓN

TAREA DE LABORATORIO: COLOCAR SUS FOTOS DE LA PRÁCTICA


Se escoge el animal Vía oral

Vía intraperitoneal Vía intradérmica

Vía intramuscular Vía por punción cardiaca


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CUESTIONARIO:

1. Anote los usos de la inoculación.


A. Vías de Inoculación:
Estas son de dos tipos: vía oral y vía parental.
- Vía oral: Utiliza la forma natural de absorción que es el intestino, aunque dichas
sustancias no solo se ingieren por la boca, sino que se depositan directamente en otros
tramos del intestino como el recto. La sustancia se suministra en el alimento, en el agua
de bebida, o bien mediante la administración forzada utilizando una sonda. Lo ideal es
mediante sonda orogástrica
- Vía parenteral: Esta vía implica la ruptura de las barreras del organismo, la piel y las
mucosas para depositar las sustancias en tejidos o cavidades internas del organismo.
Esta se puede hacer dentro de la piel (vía intradérmica), o debajo de ella en el tejido
subcutáneo (vía subcutánea), en los músculos (vía intramuscular), en venas (vía
intravenosa), o en cavidades como la pleura (vía intrapleural) o peritoneal (vía
intraperitoneal).

B. Usos
Tipo de vías Beneficios y usos

Vía oral USO: Comúnmente para la ingesta de fármacos, produce efecto


tanto local como sistémico.

Vía intradérmica USO: Pruebas cutáneas y vacunas.


CANTIDAD: No mayor a 0,3 ml.
OBJETIVO: Fines terapéuticos preventivos o de diagnóstico como
diferentes test.

Vía subcutánea USO: Para estudios de inflamación, sensibilización, diagnóstico de


flujo sanguíneo cutáneo y en inmunología. Como vacunas,
heparina e insulina.
Permite la administración de microcristales, suspensiones o pallets
que forman pequeños depósitos para absorber el medicamento por
un largo tiempo y de forma sostenida.
CANTIDAD: Permite la administración de pequeños volúmenes.
DURACIÒN: Al utilizar esta vía de administración se busca una
absorción lenta, duradera y sostenida.

Vía intramuscular USO: Vacunas, analgésicos, antiinflamatorios, antibióticos,


corticoides, etc.
CANTIDAD: Se puede administrar en volúmenes mayores e
irritantes.
Se puede administrar cuando el sistema gastrointestinal está
alterado. Se aplica en un paciente sin movilización.
DURACIÒN: La absorción es más rápida que la vía subcutánea. El
tejido muscular está muy vascular izado, por lo que el líquido
inyectado se difunde entre las fibras musculares y se absorbe
rápidamente.

Vía intraperitoneal Uso: Casos de insuficiencia renal, eliminación de urea y de potasio


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en exceso y en las intoxicaciones por barbitúricos y salicilatos.

Vía cardiaca Uso: Actuar rápidamente en el miocardio en casos graves de


urgencia.
Duración y efecto: Rápido.

2. Anote los usos de la venopunción.


https://es.slideshare.net/DIANNAHL/venopuncin-y-administracin-de-medicamentos
A. Venopunción: Procedimiento mediante el cual se realiza la punción de una vena a través
de la piel utilizando una aguja de inyección endovenosa, también se les conoce con los
nombres de extracción de sangre y flebotomía.

B. Beneficios o propósitos de su uso:


- Duración: Es la más técnica de administración más rápida de todas, ya que va de
frente al torrente sanguíneo.
- Usos: medicación urgente, tratamientos de sueroterapia y administración de
fármacos diluidos.
- Reemplazo de fluidos y electrolitos: Empleamos este método con el fin de
administrar agua, electrolitos y nutrientes para satisfacer necesidades básicas del
paciente.
- Colección de muestras de sangre: Se extraen generalmente de 5 a 25 ml de
sangre para que la muestra sea considerada adecuada; La sangre se coloca en un
tubo de ensayo preparado con un anticoagulante para transportarla y conservarla de
manera adecuada según los requerimientos del laboratorio que procesa la muestra.
En la donación de sangre se extraen entre 350 y 500 cc. Los exámenes hechos en
sangre o partículas de esta suministran información importante al médico sobre la
salud de los pacientes, orientando así al diagnóstico y tratamiento.
- Administración de medicamentos: El objetivo principal es la administración de
fármacos directamente al torrente sanguíneo facilitando así la obtención de
concentraciones altas y precisas.
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PRÁCTICA 05
FAGOCITOSIS IN VIVO

TAREA DE LABORATORIO

1. ¿Cuál es la finalidad de inocular primero el germen muerto?


Para matar a la bacteria, pero mantendrá sus propiedades antigénicas activados.

2. ¿Cuál es el papel de la saponina?


La saponina actuará como un adyuvante, ayudando a que la bacteria pueda permanecer
antigénica por más tiempo.

3. ¿Por qué se inocula por segunda vez el germen vivo?


Porque después de realizar el frotis y usar la coloración Wright, se pueda realizar el recuento
de bacterias libres y fagocitadas, ya que al hacer el estudio al microscopio se observará al
polimorfonuclear el cual dentro de él encontramos neutrófilos y macrófagos, así veremos
bacterias en su interior y bacterias afuera del mismo, es decir se podrá expresar en
porcentaje cuántas bacterias ya fueron fagocitadas.

4. COLOCAR LAS FOTOS DE SU PROCEDIMIENTO

1. Obtención del inóculo bacteriano 2. Inoculación: PRIMERA FASE


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4. Disección de las ratas


3. Inoculación: SEGUNDA FASE
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PRÁCTICA 06
HIPERSENSIBILIDAD TIPO 1: SHOCK ANAFILACTICO
TAREA DE LABORATORIO

Esquematice y explique la fase sensibilizarte y la fase desencadenante

SENSIBILIZACIÓN: Comprende:

● Producción de IgE frente al primer contacto sensibilizante con el antígeno.

● Unión de la IgE a receptores específicos en la superficie de mastocitos y


basófilos.

DESENCADENANTE: Produce:

● Reexposición al antígeno e interacción del mismo con la IgE específica

● Activación celular y liberación de mediadores químicos.


● Acción de los mediadores sobre los diferentes tejidos.
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PRÁCTICA 07
TAREA DE LABORATORIO

1. Explique a qué tipo de reacción serológica corresponde la determinación del


grupo sanguíneo.

La determinación del grupo sanguíneo corresponde a la reacción serológicas de


aglutinación, ya que al enfrentarse el Ag forme del eritrocito con el Ac del reactivo en el
soporte, se observará o no la aglutinación.

2. Explique porque una persona del grupo A no puede ser donador para un receptor
del grupo B.

GRUPO A GRUPO B

Anticuerpo en plasma Anti-B Anti A

Antígeno en superficie de Ag A Ag B
eritrocito

Porque el grupo A contiene en su superficie antígeno A, por ende, cuando lo reciba el


receptor grupo B que contiene anti-A, este anticuerpo reaccionaría con el Ag A de la
superficie de sus eritrocitos donantes y esto ocasiona aglutinación en los eritrocitos donados,
haciendo que sean incompatibles.

3. Explique porque el grupo “O” es considerado donador universal.

GRUPO O

Anticuerpo en plasma Anti-A y Anti-B

Antígeno en superficie de eritrocito No tiene

Porque no contiene antígenos en su superficie eritrocitaria, por ende, no tendrá reacción


Ag-Ac cuando ingrese al organismo receptor, ya que los anticuerpos del receptor no
encontrarán antígenos con el cual reacciona, haciendo que el grupo O sea compatible con
todos por eso se le conoce como donador universal.
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4. Explique porque el grupo “AB” es considerado como receptor universal.

GRUPO AB

Anticuerpo en plasma No tiene anticuerpos

Antígeno en superficie de eritrocito Ag A y Ag B

Porque no contiene anticuerpos en el plasma, por ende, puede recibir todo tipo de grupo, ya
que los Ag del donante no encontrarán anticuerpos con los cuales reaccionar en el plasma
del receptor, por ende, no aglutinarán.

5. Usando cuadrado de Punnet, establezca la descendencia entre un padre grupo


“A” y la madre grupo “B”

Fenotipo Genotipo

Padre A AA, AO

Madre B BB, BO

Posibilidades: AA x BB, AO x BO, AO x BB y AA x BO


Primera posibilidad: AaxBB

A A

B AB AB

B AB AB
100% de la descendencia tendrá grupo AB
Segunda posibilidad: AoxBO

A O

B AB BO

O AO OO
En la descendencia, 25% será grupo AB, 25% será grupo A, 25% será grupo B y 25% será
grupo O.
Tercera posibilidad: AOxBB
A O

B AB BO

B AB BO
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En la descendencia, 50% será grupo AB y 50% será grupo B.
Cuarta posibilidad: AAxBO
A A

B AB AB

O AO AO
En la descendencia, 50% será grupo AB y 50% será grupo A.

6. Usando cuadrado de Punnet, establezca la descendencia entre un padre del


grupo “O” y la madre del grupo “AB”

Fenotipo Genotipo

Padre O OO

Madre AB AB

Posibilidades: OO x AB

O O

A AO AO

B BO BO
La descendencia será 50% de grupo A y 50% de grupo B.
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7. Con esquemas, explique en qué consiste la eritroblastosis fetal, proceso que
puede presentarse en algunos embarazos como consecuencia del factor Rh.
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PRÁCTICA 8
TAREA DE LABORATORIO:

1. Defina que es una reacción serológica directa e indirecta


- Reacción serológica directa: Es el método de laboratorio basado en la reacción
antígeno-anticuerpo en la cual se quiere investigar el antígeno.
- Reacción serológica indirecta: Es el método de laboratorio basado en la reacción
antígeno-anticuerpo en la cual se quiere investigar al anticuerpo.

2. Defina qué es una reacción serológica de aglutinación y precipitación


- Reacción serológica de aglutinación: Es un método de laboratorio basado en la
reacción antígeno-anticuerpo, en la cual el antígeno es forme y cuando enfrentamos el
Ag con el Ac sobre un soporte, la reacción se visualiza macroscópicamente.
- Reacción serológica de precipitación: Es el método de laboratorio basado en la
reacción antígeno-anticuerpo, en la cual el antígeno es soluble y cuando enfrentamos
al Ag con su Ac la reacción no se puede observar. Para poder observarlo, se necesita
un soporte de gel para que tanto Ag soluble como Ag puedan migrar y cuando se
encuentren en concentraciones equivalentes, la reacción Ag Ac se visualiza mediante
una línea de precipitación.

3. Defina que es una reacción de aglutinación pasiva

Se refiere a la aglutinación de las células recubiertas de antígeno o a las partículas inertes


que son portadoras pasivas de antígenos solubles. Consiste en absorber al anticuerpo
sobre soportes de látex que cuando reacciona con su Ag solube, la reacción se convierte
en aglutinación y ya será visible.
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4. Diga a qué tipo de reacción serológica corresponden las pruebas realizadas en el
laboratorio.
Las pruebas realizadas en el laboratorio generalmente son de tipo aglutinación.

5. Diga porque las pruebas de VDRL y RPR son consideradas no treponémicas.


Mencione qué pruebas serológicas son del tipo treponémicas.

Son consideradas no treponémicas porque estas pruebas detectan anticuerpos reagínicos


contra antígenos generados comúnmente por los tejidos dañados por el T. Pallidum en vez
de detectar anticuerpos IgG e IgM específicos contra T. Pallidum.
Los antígenos generados en tejido dañado por T pallidum son cardiolipina para VDRL y
cardiolipina, lecitina y colesterol para RPR.
Pruebas serológicas del tipo troponénimas comprenden:
FTA-ABS (Fluorescent treponemal antibody absorption), y sus variantes FTA-ABS-DS
(FTA-double staining), 19S-IgM-FTA-ABS; MHA-TP (Microhemaglutinación para T.
pallidum), y TPI (T pallidum immobilization).
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PRACTICA N°9
ELISA
Ensayo por Inmunoabsorción Ligado A Enzima

II. TAREAS DE LABORATORIO

1. Con esquemas, explicar el fundamento de los distintos tipos de ELISA


mencionados.
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2. Colocar tus fotos de la práctica


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PRÁCTICA 10
PRUEBAS RÁPIDAS DE DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO

FUNDAMENTO

Para que sea posible que funcione esta prueba se basa en los que es la gonadotropina
coriónica humana, esta hormona glicoproteína es producida por la placenta poco después
de la fertilización. Durante el embarazo normal, la hCG se puede detectar en orina y suero
o plasma tan pronto como 7-10 días después de la concepción. La aparición de hCG en
orina y suero o plasma poco después de la concepción y su rápido aumento de
concentración después del inicio del crecimiento gestacional lo convierten en un excelente
marcador para la detección temprana del embarazo.
El casete de prueba rápida de embarazo hCG es unos inmunoensayos cromatográfico
rápido para la detección cualitativa de gonadotropina coriónica humana en orina, suero o
plasma para ayudar en la detección temprana del embarazo para esto se usa dos líneas para
dirigir los resultados. La prueba utiliza una mezcla de anticuerpos que comprenden un anticuerpo
monoclonal Hcg para detectar selectivamente niveles altos de Hcg. La línea de control consta de
anticuerpos policlonales y coloidal. Las muestras positivas reaccionan con el conjugado anticuerpo
específico de colorhCG para formar una línea de color en la zona de la prueba de la membrana. La
ausencia de esta línea de color sugiere un resultado negativo, pero además como su propia palabra
dice “control” una línea siempre aparecerá en la respectiva zona lo que muestra una reacción en la
muestra y que funciona.
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