Universidad de San Carlos de Guatemala

Facultad de Ciencias Médicas

Segundo Año, Unidad de Bioquímica

Hoja de Trabajo

Practica de Laboratorio No.9

Elaborado por:

Nombre del estudiante Carné Teléfono Correo Institucional

María Fernanda López del Cid 202104859 45173079 2836787391101@medicina.usac.edu.g

Andres Jose Gomez Del Cid 202101074 35989846 3678746600101@medicina.usac.edu.gt

Angie Cristabel Catalán Sánchez 202110290 49849878 3706417360208@medicina.usac.edu.gt

José Fernando Mejía Monroy 201901061 44873266 3055927420301@medicina.usac.edu.gt

Andrés Emilio Hurtarte Garrido 202108829 41835187 3009329440101@medicina.usac.edu.gt

Emmily Marcela Girón Barrera 202004494 42457470 3728716070101@medicina.usac.edu.gt

José Pablo Guoz Rodas 202104605 45852194 2994786960101@medicina.usac.edu.gt

Edin Ricardo González Elizondo 202107386 59852980 3942276380101@medicina.usac.edu.gt

Luisa Fernanda Guacamaya Rodríguez 202102100 41927084 2998999420101@medicina.usac.edu.gt

Mireya Abigail Barrios Méndez 202107351 31076016 3534643680101@medicina.usac.edu.gt

Francisco Javier Cruz Cifuentes 202146314 47587362

Unidad Didáctica de Bioquímica

Grupo 20
Docente: Dra. Leslie Estrada
Horario: Miércoles 10:00 a.m -12:00 p.m
 PRÁCTICA DE LABORATORIO 9
TEMA: COAGULACIÓN SANGUÍNEA
Lectura obligatoria: Bioquímica E. Abalí 8ª edición capítulo 36 pág. 582-594.
Harper Bioquímica Ilustrada. Capítulo 55 páginas 669- 680
Revisado y modificado por: Dra. Angelica Girón, Carmen Aída Martínez

CONTENIDO
● Conceptos básicos: coagulación, hemostasia, trombo, anticoagulantes, trombolíticos, plaquetas,
plasma, suero
● Hemostasia
● Fases de la activación plaquetaria
● Cascada de la coagulación
● Fibrinolisis
● Anticoagulantes, antiplaquetarios y trombolíticos
● Patologías secundarias a trastornos de coagulación
● Pruebas de coagulación: valores normales (Tiempo de Sangría, Tiempo de Coagulación, Tiempo
de Protrombina, Tiempo de Tromboplastina Parcial Activada, Tiempo de Retracción del Coágulo)

PROPÓSITO DE LA PRÁCTICA

Con el estudio y desarrollo del presente laboratorio, el estudiante adquiere el conocimiento y

desarrolla la habilidad para:

1. Definir los conceptos básicos del tema

2. Explicar el proceso e importancia de la hemostasia
3. Describir y explicar las diferencias entre el trombo rojo y el trombo blanco
4. Identificar por número, nombre y función los factores de la coagulación
5. Describir las vías intrínseca, extrínseca y común de la cascada de la coagulación, identificando
sus componentes
6. Identificar los factores dependientes de vitamina K, y la función de ésta en su activación
7. Identifica el mecanismo de acción de: aspirina, cumarínicos, heparina, oxalato, citrato.
8. Relaciona la deficiencia de los factores de la coagulación y las patologías secundarias
9. Interpreta los valores normales de las pruebas de coagulación
PROCEDIMIENTO

● 6cc de sangre venosa de uno de los estudiantes (no es necesario que esté en ayunas)

1. Jeringa descartable de 10cc con aguja No 20 o 21, ligadura, algodón y alcohol para antisepsia.
2. Dos tubos de centrífuga, uno de ellos con anticoagulante
3. Un tubo de ensayo
4. Una pipeta de Pasteur.
5. Un tubo de hemólisis.
6. Una centrífuga.
7. Cronómetro.
8. 3 pares de guantes de látex.

● Rotule los 3 tubos de ensayo, colocando el número 1 al que tiene anticoagulante, el número 2 y
3 a los que no tienen.
● Extraiga una muestra de 6 ml de sangre venosa del donador.
● Separe la aguja de la jeringa y descártela en el guardián.
● Vierta 2 ml de sangre en cada uno de los tubos de ensayo rotulados (despacio para no
hemolizarla)
● Centrifugue los tubos 1 y 2 a 3000 rpm, durante 10 minutos.
● Tubo de ensayo No 3:

o Realice observaciones cada minuto del contenido del tubo de ensayo, hasta que
coagule. Para ello movilícelo cuidadosamente hasta que pueda girarlo 180° sin que el
contenido se derrame.
o Déjele reposar por aproximadamente 15 minutos y realice las anotaciones pertinentes

● Tubo No 1:

o Extraiga el tubo de la centrifuga con cuidado de no agitarlo. Realice una observación de

los cambios ocurridos y compárelos con el tubo centrifugado sin anticoagulante (tubo
No 2).
o Explique el proceso bioquímico que ocurrió en dicho tubo.

● Tubo No2:
o Extraiga el tubo de la centrífuga, cuidando de no agitarlo. Observe las fases que se han
formado. Déjele reposar por al menos 5 minutos más.
o Sin remover el contenido, con la pipeta de Pasteur extraiga el sobrenadante obtenido y
viértalo en el tubo de hemólisis.
o Con la pipeta de Pasteur, separe cuidadosamente el tapón blanquecino de las paredes
del tubo de centrífuga y explique ¿qué ocurre?
o Extraiga con la misma pipeta de Pasteur el tapón blanquecino, colóquelo en la palma
de la mano protegida por el guante.
 o Tome entre sus dedos el tapón blanquecino y examinarlo cuidadosamente con
su profesor.

VALORES NORMALES DE LABORATORIO

De las siguientes pruebas investigue su valor diagnóstico:

Prueba Valores normales Utilidad diagnóstica

Recuento de plaquetas 150,000-450,000/ mL Se utiliza para el control o diagnóstico de

afecciones que causan demasiado sangrado o
coagulación, como por ejemplo comprobar el
funcionamiento de las plaquetas durante un
procedimiento quirúrgico complejo, para
evaluar pacientes que tienen antecedentes de
trastornos hemorrágicos o vigilar una persona
que toma anticoagulantes.

Tiempo de sangrado 3-7 minutos Se utiliza para evaluar la disfunción

plaquetaria y la integridad de la pared
vascular, como el número de plaquetas y de
las proteínas de adhesión y la formación del
tapón plaquetario.

Tiempo de coagulación (Lee- Para evaluar el tiempo en que la sangre

White) 5-10 minutos
tarda para coagularse, ayudando a
determinar si se tienen problemas de
sangrado o si la sangre no coagula
adecuadamente.

Tiempo de protrombina 10-14 segundos Se utiliza para evaluar si la warfarina, el cual

es un medicamento anticoagulante, está
haciendo efecto deseado, también para
averiguar la causa de los coágulos
sanguíneos anormales, averiguar la causa
de un sangrado inusual, el funcionamiento
de coagulación antes de una operación y
para detectar problemas en el hígado.

INR 0.8-1.2 Es un índice que nos indicará el tiempo en

el que tarda la sangre en coagularse, igual
 evalúa la efectividad de la anticoagulación
con antagonistas de la vitamina K y poca
utilidad en otros estados de coagulación
como la insuficiencia hepática.

Tiempo de tromboplastina parcial Mide la eficacia de la vía intrínseca de

activado 25-45 segundos
activación de la coagulación, valorando la
actividad de los factores de coagulación
plasmáticos. Una de sus aplicaciones
importantes es para monitorizar
tratamientos anticoagulantes y diagnosticar
diátesis hemorrágicas congénitas y
adquiridas.

Tiempo de trombina 9-35 segundos Se utiliza cuando se sospecha de sangrados

o formación de coágulos de manera
inexplicable o extraña, también con
trastornos relacionados con la disminución
en la cantidad de fibrinógeno o en una
posible disfuncionalidad. Se pueden
diagnosticar problemas como
enfermedades hepáticas, algunos tipos de
cáncer, anticuerpos contra el fibrinógeno,
coagulación intravascular diseminada, y
utilizarse de control antes de un
procedimiento quirúrgico.

Fibrinógeno 200-400 mg/dL Se usa para determinar qué tanto

fibrinógeno tiene un a persona en la
sangre, puede diagnosticar cuando el
cuerpo usa demasiado fibrinógeno como en
la coagulación intravascular diseminada,
deficiencia de fibrinógeno adquirida o
congénita, fibrinólisis, o cuando hay
hemorragias.

Productos de degradación de Se utiliza para diagnosticar problemas de

fibrina 0-11 (<10mg/mL)
coagulación, cardiopatías congénitas,
coagulación intravascular diseminada, bajo
nivel de oxígeno en la sangre, infecciones,
leucemia, enfermedades hepáticas,
preeclampsia, desprendimiento prematuro de
la placenta, transfusión de sangre reciente,
insuficiencia renal, rechazo al trasplante de
órgano, coágulos sanguíneos grandes.

Dímero D <500ng/mL Esta prueba se suele usar para averiguar si se

tiene un trastorno de la coagulación de la sangre
como la trombosis venosa profunda, embolia
pulmonar, coagulación intravascular diseminada y
obstrucciones de suministro de sangre al cerebro.
Tubo 1: Tubo con oxalato de calcio + 2 ml de sangre, centrifugada

● Cuáles son las fases que observa en el tubo de ensayo, después de la centrifugación.

En el tubo No.1 (con anticoagulante) observamos la separación del líquido y las células sin coagular ya que los
factores de coagulación permanecen sin usar en el plasma, por lo que se observa un líquido amarillento
brillante. Solo sucede la agregación plaquetaria.

● Diferencia entre suero y plasma

Plasma: sangre completa , sin células. Se obtiene por centrifugación de la sangre. Suero: sangre completa,
sin factores de coagulación.

Plasma y suero son partes importantes de la sangre. La sangre se compone de plasma, suero, glóbulos
blancos y globos rojos. La principal diferencia entre plasma y suero se encuentra en sus factores de
coagulación.

Una sustancia llamada fibrinógeno es esencial en la coagulación de la sangre. El plasma sanguíneo contiene
este fibrinógeno. Básicamente, cuando se separan el suero y plasma de la sangre, el plasma aún conserva el
fibrinógeno que ayuda a la coagulación, mientras que el suero es la parte de la sangre que queda después de
quitar este fibrinógeno.

● Explique la razón por la cual no ocurrió la coagulación en este tubo de

ensayo Esto debido a que se empleó el uso de un anticoagulante bastante

común, el cual actúa directamente sobre el factor de coagulación IV (calcio) y

evitando la acción de este por lo tanto entorpece la coagulación.

Tubo 2: Tubo con 2 ml de sangre, sin anticoagulante, centrifugada

● ¿Qué vía inicia la formación del coágulo en el tubo que se centrifugó sin anticoagulante?
Vía intrínseca
● ¿Cuáles son los factores de la coagulación que participan en la “fase de contacto”?
Factor XII, XI, IX, VIII y X.
● ¿Cuál es la diferencia entre el trombo blanco y rojo?
El trombo blanco es el que cuenta con plaquetas en su composición, mientras que el trombo rojo cuenta con
mayor cantidad de eritrocitos y fibrina.

Tubo 3: Tubo con 2ml de sangre, sin anticoagulante, sin centrifugar

● ¿Qué vía inicia la formación del coágulo en el tubo de ensayo?

● Enumere la secuencia de la activación de los factores de coagulación en la formación del
trombo en el tubo de ensayo:
❖ Factor III
❖ Factor VII
❖ Factor IX
 ❖ Factor X
❖ Factor II (Protrombina a trombina)
❖ Fibrinógeno a fibrina
❖ Formación del coágulo

● Enumere los factores de la cascada de la coagulación que requieren de la participación del calcio
❖ Factor IV (Calcio)
❖ Factor VII (Proconvertina)
❖ Factor IX (Christmas)
❖ Factor X (Stuart-Prower)
❖ Factor II (Protrombina)

● ¿Cuál es el tiempo normal de formación del trombo en un tubo de vidrio?

El tiempo normal para la formación del trombo en un tubo de vidrio es de 15 a 20 minutos.

● Qué diferencia observa entre el coágulo formado en el tubo de ensayo 3 con el observado en
el tubo 2.
En el tubo No. 2 se observa que el coágulo es de un color blanco, era más frágil y más pequeño,
ya que este tenía plaquetas y fibrinas que también no presentaba una gran cantidad de
eritrocitos. En el tubo No. 3 se observa que el coágulo tiene de un color rojo, era más resistente
(elástico) y resistente, por lo que estaba formado mayormente de eritrocitos y fibrina
● Al examinar el trombo y extenderlo, observó que era flexible y resistente a la tracción, ¿A
qué factor de la coagulación corresponde este fenómeno?

Dicho fenómeno se debe al factor XIII (Factor estabilizador de la fibrina) el cual es activado
por la trombina y el calcio. Contribuye a la estabilización del coágulo sanguíneo al catalizar la
formación de enlaces covalentes entre las cadenas de fibrina.

● ¿Qué factor de la coagulación activa al factor XIII?

Trombina en la Vía Común
GLOSARIO
● Coagulación: proceso por el que la sangre líquida pasa a convertirse en coágulos de sangre semisólidos. Este
proceso ayuda a evitar que se pierda sangre al dañarse los vasos sanguíneos.
● hemostasia: Contención o detención de una hemorragia mediante los mecanismos fisiológicos del organismo
o por medio de procedimientos manuales, químicos, instrumentales o quirúrgicos.
● trombo: Coágulo de sangre que se forma en el interior de un vaso sanguíneo.
● Anticoagulantes: Sustancia que se usa para prevenir y tratar los coágulos de sangre en los vasos sanguíneos y
el corazón. También se llama diluyente de la sangre.
● trombolíticos: Los trombolíticos son medicamentos que tienen la capacidad de disolver coágulos de sangre, o
trombos, que han bloqueado el flujo de sangre en los vasos sanguíneos.
● plaquetas: fragmentos de células muy grandes de la médula ósea que se llaman megacariocitos.
● plasma:
● Parte líquida de la sangre, linfa, líquido intersticial y cefalorraquídeo desprovisto de células; está formado por
agua, proteínas, glúcidos y lípidos mayoritariamente.
● suero: Sustancia acuosa que se separa de un líquido orgánico cuando este se encuentra fuera del organismo y
se ha coagulado.
● Trombosis: afección que ocurre cuando se forma un coágulo de sangre en una vena profunda. Estos coágulos
por lo general se forman en la parte inferior de las piernas, los muslos o la pelvis, pero también pueden
aparecer en el brazo.
 Bibliografía

Pruebas de plaquetas [en línea]. Medlineplus.gov. [citado 22 JUL 2023]. Disponible en:
https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/pruebas-de-plaquetas/

Tiempo de sangría [en línea]. Medlineplus.gov. [citado 22 JUL 2023]. Disponible en:
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003656.htm

Tiempo parcial de tromboplastina (TPT) [en línea]. Medlineplus.gov. [citado 22 JUL 2023]. Disponible en:
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003653.htm

Prueba de tiempo de protrombina e INR (TP/INR) [en línea]. Medlineplus.gov. [citado 22 JUL 2023]. Disponible en:
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https://www.saludcastillayleon.es/AulaPacientes/es/cuidados-recomendaciones/recomendaciones-personas-tratamiento-
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Tiempo de tromboplastina parcial activado [en línea]. Empendium.com. [citado 22 JUL 2023]. Disponible en:
https://empendium.com/manualmibe/tratado/chapter/B76.VI.C.5.18.

Trombina: cómo medirla y para qué sirve [en línea]. Laboratorio Ámbar. 2023 [citado 22 JUL 2023]. Disponible en:
https://ambar-lab.com/trombina/

Examen de fibrinógeno en la sangre [en línea]. Medlineplus.gov. [citado 22 JUL 2023]. Disponible en:
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Análisis de productos de la degradación de la fibrina [en línea]. Medlineplus.gov. [citado 22 JUL 2023]. Disponible en:
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[cited 2023 Jul 18]. Available from:

http://chrome-extension://efaidnbmnnnibpcajpcglclefindmkaj/https://www.agro.uba.ar/users/catala/C3%20SANGRE.pdf

Plasma y suero: diferencias [Internet]. Sld.cu. [cited 2023 Jul 18]. Available from:
https://especialidades.sld.cu/hematologia/2012/11/07/la-diferencia-entre-plasma-y-suero/
BIBLIOGRAFÍA

1. Abali E, et al. Bioquímica. España. Wolters Kluwer; 2022

2. Baynes J et al. Bioquímica Médica. Barcelona España: Elsevier; 2018.
3. Rodwell V, et al. Harper Bioquímica Ilustrada. México: McGraw Hill education; 2018.
4. López-Santiago N. Pruebas de Coagulación. Acta Pediátrica Mex. 2016 jul;37(4):241-245.