Manual de Hematologa Serie Blanca

Universidad Veracruzana

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Hematologa Serie Blanca

ndice

Prctica no 1: Toma de muestra de sangre

Prctica no 2: Realizacin de frotis

Prctica no 3: Manejo de animales

Prctica no 4: Obtencin de muestra

Prctica no 5: Tincin

10

Prctica no 6: obtencin de leucocitos

12

Prctica no 7: Recuento de leucocitos

14

Prctica no 8: Morfologa de medula sea

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Prctica no 9: Tincin de medula sea

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Prctica no 10: Diferenciacin de clulas blasticas

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Practica no 1
Toma de muestra
1. Introduccin
Es el principal mtodo de extraccin de sangre en el laboratorio de anlisis
clnicos, ya que es relativamente fcil de realizar.
VENTAJAS.
Nos permite hacer mltiples exmenes y en repetidas veces si se desea,
con la misma muestra.
Las alcuotas de plasma y suero pueden congelarse para futura referencia.
DESVENTAJAS
Puede provocar la coagulacin de la sangre si el procedimiento lleva mucho
tiempo.
Algunos componentes no son estables en sangre anticoagulada.
Puede dificultarse en nios, pacientes obesos en estado de shock.
Puede ocasionarse hemlisis de las muestras afectando ciertas
determinaciones, por las siguientes causas:
-Por forzar el paso de la sangre al tubo
-Por agitar el tubo enrgicamente
-Por extraer sangre de un hematoma
2. Principio y metodologa
El sitio ms prctico para obtener sangre venosa es la flexura anterior del brazo,
de preferencia justo por arriba de alguna de las ramas venosas que all se
encuentran. Las venas superficiales de la cara anterior del antebrazo son las
ms comunes para la venopuncin. Las tres venas principales que se utilizan
son:
1) vena ceflica, ubicada en la parte superior del antebrazo y del lado del
pulgar de la mano.
2) vena baslica, ubicada en la parte inferior del antebrazo y del lado del
dedo meique de la mano
3) vena cubital mediana, que conecta las venas baslica y ceflica en la fosa
antecubital (flexin del codo) y es la vena de eleccin. Si el paciente aprieta el
puo despus de aplicar el torniquete, la vena se tornar ms prominente.
El torniquete facilita la obtencin. En los nios pequeos se pueden utilizar otros
sitios; si es as, es mejor que la sangre la obtenga alguna persona con
experiencia. Usar una aguja puntiaguda, nunca menor de calibre 21 y una jeringa

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de 5 ml de 10 ml. Tanto la aguja como la jeringa debern estar limpias, secas y
estriles. Con prctica se puede obtener sangre usando slo una aguja con un
tubo de goma por el que se deja correr la sangre hasta los tubos en los que se
recoge la muestra. Para esta tcnica se utilizan agujas de calibre 19.
3.

Lista de requerimientos
Tubos para Vacutainer
Aguja para Vacutainer
Camisa para Vacutainer
Jeringa
Torundas de algodn
Alcohol
Ligadura

4. Procedimiento
4.1
Indicaciones:
Asegurarse de que el paciente llegue en condiciones ptimas y
tranquilizarlo.
Checar el material para la extraccin
Debe indicarse al paciente la posicin correcta, que puede ser sentado
recostado, apoyando bien el brazo en posicin horizontal.
Elegir la vena adecuada, prefirindose la cubital mediana, la vena baslica,
la ceflica, las venas de la mueca, tobillo y mano, ya que resultan fciles
de palpar.
4.2
Tcnica:
1. Desinfectar la piel en el sitio de puncin con algodn mojado en un
desinfectante apropiado como alcohol de 70%.
2. Preparar la jeringa y la aguja, en su defecto la aguja con el contenedor en
el caso del sistema de tubos al vaco, cuidando que la tcnica sea
asptica.
3. Aplicar un torniquete en el brazo (por arriba del sitio de puncin),
suficientemente apretado para que restrinja el flujo de la sangre venosa.
4. Desinfectar nuevamente el sitio de puncin, y secar la piel con algodn
gasa limpios, secos y estriles.
5. Asegurarse de que el mbolo de la jeringa est hasta el fondo, es decir, que
la jeringa no contenga aire. Insertar la aguja de la jeringa en una vena con
un movimiento preciso.
6. Jalar lentamente el mbolo y obtener 2 a 3 ml de sangre.
7. Retirar la jeringa de la aguja y sustituirla por otra jeringa que contenga la
solucin anticoagulante de citrato de sodio. O directamente introducir el
tubo del sistema de vaco.
8. Obtener el volumen de sangre deseado jalando el mbolo muy despacio.

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9. Soltar el torniquete y colocar una gasa seca sobre el sitio de la puncin,
retirando despus la aguja con un solo movimiento.
10. Presionar ligeramente la gasa sobre el sitio de puncin durante algunos
momentos y despus pedir al paciente que contine aplicando la presin
durante unos minutos.
11. Cuando la sangre se obtiene empleando slo una aguja sin jeringa, se
emplea el mismo procedimiento y cantidad de anticoagulante. Deben
usarse tubos graduados
para obtener la proporcin adecuada de
anticoagulante y sangre.
5. Esquemas

6. Observaciones
Para la toma de muestras es importante la prctica y la seguridad con la que se
hace, ya que eso depende de que las muestras sean tomadas correctamente y
tambin desarrollar el sentido de la sensibilidad para palpar y determinar cul es la
vena correcta para realizar la extraccin; tambin es indispensable que el material
no exceda su fecha de caducidad, ya que este tiene que estar en perfectas
condiciones.

Practica no 2

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Realizacin de frotis
1. Introduccin
Los extendidos de sangre se realizan dentro del estudio del hemograma
completo, bien de manera aislada .En ellos se pueden estudiar los eritrocitos,
los leucocitos y las plaquetas, y el propsito de ello es determinar las
caractersticas morfolgicas de cada tipo celular y evaluar la frecuencia relativa de
los distintos tipos de leucocitos.
Se deben teir con una de las tinciones de Romanowsky las cuales varan en sus
propiedades de tincin, y por lo tanto, es importante seleccionar una y
familiarizarse con ella. La coloracin de Wright es muy confiable y sencilla, pero
otras tambin lo son, tales como la de Giemsa. Leishman May-Grnwald, las
cuales son igualmente satisfactorias, aunque puede variar la tincin de un lote a
otro de colorante.
2. Principios y metodologa
Los frotis de sangre deben confeccionarse con lminas portaobjetos de vidrio que
previamente se hayan lavado y secado de manera conveniente, con la finalidad de
eliminar cualquier resto de grasa que pudiera quedar en ellos y evitar as una mala
calidad en la tincin. Los frotis de sangre son esenciales para el estudio
morfolgico y cuantitativo de las clulas sanguneas. Cuando un frotis se
encuentra bien realizado, se podrn distinguir en l tres reas importantes: la
cabeza zona de inicio, el cuerpo zona media y la cola rea final del mismo.
Un frotis no deber ser ni grueso ni delgado, pues en ninguno de ellos se podrn
apreciar bien las reas antes mencionadas. En un frotis bien realizado, la tincin
ser de mejor calidad.
3.

Lista de requerimientos
Caja de portaobjetos limpios
Gasas
Muestra de sangre
Pipeta Pasteur

4. Procedimiento
1. Colocar a una distancia de 1.5-1.9 cm del extremo derecho
de un
portaobjetos, una pequea gota de sangre obtenida por puncin capilar del
taln, del lbulo de la oreja por extraccin venosa.
2. Si se emplea sangre venosa mezclada con anticoagulante, el frotis deber
realizarse lo ms pronto posible, debido a que el contacto prolongado con
ste altera la morfologa celular.
3. Aproximar el portaobjetos extensor a la gota, dejando que hagan contacto y
que por capilaridad ste se extienda a lo largo del borde.

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4. Se desliza el portaobjetos extensor hacia el extremo contrario, para lograr una
pelcula delgada de sangre.
5. Dejar secar y teir.
5. Esquemas

6. Observaciones
Para obtener buenos frotis en necesario cumplir con estos requisitos:
- La cabeza ha de estar cerca de uno de los extremos del porta.
- La cola debe estar cercana al otro extremo del porta, pero sin llegar a l.
- El borde de la cola tiene que estar finamente deshilachado.
- Toda la extensin ha de ser fina y homognea.
- Los bordes laterales de la extensin deben estar separados de los bordes
del porta por 1 mm aproximadamente.
- Una extensin normal ha de tener una longitud de las partes del
portaobjetos.

Practica no 3
Manejo de animales
1. Introduccin

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El uso de animales de laboratorio en estudios de investigacin biomdica y
produccin de reactivos biolgicos en general, requiere que stos sean los
apropiados para que proporcionen la seguridad en los resultados esperados, para
ello, es necesario contar con bioterios que brinden animales de calidad
microbiolgica y genticamente definidos mantenidos bajo condiciones
estandarizadas y de acuerdo con normas internacionales establecidas. El animal
de laboratorio tiene que ser respetado como ser vivo, entender que padece
necesidades y sufre dolor, por ley es obligacin del personal que lo cuida,
mantiene y utiliza (investigador), asegurar su bienestar y confort mientras viva.
2. Principio y metodologa
Lo que se busca con este mtodo es matar al ratn de una manera rpida, fcil y
sobre todo sin sufrimiento.
Los investigadores y profesores deben asegurarse de que todas las personas que
utilicen animales bajo su supervisin hayan recibido entrenamiento en los
procedimientos experimentales, en el cuidado, mantenimiento y manejo de las
especies que estn utilizando.
3. Lista de requerimientos
Rata o ratn
Estuche de diseccin
Cloroformo
Vaso de precipitado de 1000 ml
4.
1.
2.
3.
4.

Tcnica
Poner al ratn sobre una superficie limpia y lisa.
Tranquilizar al ratn, frotando su cabeza con los dedos.
Sujetar al ratn por el cuello y la cola; tratando se sujetarlo firme.
Dar un tirn fuerte, tratando de no arrancarle la cola.

En caso de tener dificultades a la hora de ejecutar esta tcnica se puede dormir al

animal.
1. Colocar al ratn sobre una superficie lisa
2. Colocar algodn, impregnado de cloroformo
3. Colocar el vaso de precipitado boca abajo con el ratn y el algodn con
cloroformo dentro.
4. Esperar a que se duerma para proceder con la diseccin.

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5. Esquemas

6. Observaciones
En la actualidad son innegables las contribuciones que diversas investigaciones
basadas en el empleo de animales de laboratorio han dado al desarrollo de las
ciencias biolgicas, las cuales han permitido prevenir y curar diversas
enfermedades, mejorando la calidad y la expectativa de vida. As, es claro que los
grandes descubrimientos biomdicos y sus constantes avances dependen en gran
medida de la investigacin que se realiza en los animales de laboratorio.

Practica no 4

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Obtencin de muestra
1. Introduccin
La mdula sea es un tipo de tejido que se encuentra en el interior de los huesos
largos, vrtebras, costillas, esternn, huesos del crneo, cintura escapular y pelvis.
Todas las clulas sanguneas derivan de una sola clula precursora
hematopoytica multipotencial ubicada en la mdula sea.
La mdula sea roja, a la que se refiere habitualmente el trmino mdula sea, es
el lugar donde se produce la sangre (hematopoyesis), porque contiene las clulas
precursoras que originan los tres tipos de clulas sanguneas que son los
leucocitos, hemates y plaquetas. La mdula sea puede trasplantarse, ya que
puede extraerse de un hueso de donante vivo, generalmente del esternn o de la
cadera, mediante una puncin y aspiracin y transfundirse al sistema circulatorio
del receptor si existe compatibilidad del sistema HLA (compatibilidad de rganos
entre donante y receptor). Las clulas precursora transfundidas anidarn en la
mdula sea de los huesos del receptor.
2. Principio y metodologa
Esta tcnica nos va a permitir obtener leucocitos en sus formas inmadura, para
lograr identificarlos.
Ya que se lograr obtener de una manera fcil y rpida.
3. Lista de requerimientos
Solucin fisiolgica
Tubo de ensaye de 13 x100
Jeringa de insulina
Caja Petri
Media
Centrifuga
1.
2.
3.
4.
5.
6.

4. Tcnica
Una vez que se obtuvo el fmur del ratn, con unas tijeras se cortan la
epfisis de cada extremo.
Con ayuda de la jeringa de insulina, que contiene solucin fisiolgica se
introduce la aguja en el hueso y se descarga poco a poco la solucin. Y se
procede a seguirse lavando.
Con la ayuda de la media se intentara colar la solucin que se obtuvo del
lavado de fmur.
Se meter a centrifugar 3 min. A 2500 rpm.
Se decantara lo ms posible la muestra.
Y con el sobrante se realizaran frotis para despus ser teidos.
5. Esquemas

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6. Observaciones
Es necesario realizar un buen lavado de fmur, ya que as obtendremos ms
clulas.
Adems que es muy necesario decantar lo ms posible la muestra.
Una correcta realizacin de frotis es lo fundamental para observar las clulas.

Practica no 5
Tincin

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1. Introduccin
La finalidad de la tincin de Wright es lograr que el alumno se sienta capacitado
para preparar adecuadamente algunos de los reactivos y colorantes ms
comnmente empleados en las reas de hematologa y microbiologa, que como
qumico clnico tiene la obligacin de conocer y dominar.
2. Principio y metodologa
A los colorantes de les puede clasificar en tres grupos:
1) cidos. Son aquellos constituidos por sales cuya base es incolora y cuyo cido
es coloreado. A este grupo pertenecen las eosinas. Estas soluciones se usan para
la coloracin citoplasmtica coloracin de fondo.
2) Bsicos. Son aquellas sales de cido incoloro y base coloreada como el
clorhidrato de azul de metileno. Estos colorantes tien por lo general algunos
elementos del ncleo.
3) Neutros. Son aquellas sales con el cido y la base coloreados, por ejemplo, los
eosinatos de azul y azur de metileno, los ms empleados en hematologa. El
mtodo de Romanowsky, que emplea estos colorantes, ha sido la base de las
coloraciones panpticas utilizadas en la actualidad ya que ha tenido un gran xito
en la tincin diferencial de la mayora de las estructuras normales y anormales de
la sangre. La mayor parte de estos colorantes policromos derivados del mtodo
de Romanowsky, se disuelven en alcohol metlico, combinando as, la fijacin con
la tincin. Los ms conocidos de todos ellos, son los de Giemsa y de Wright.
3.

Lista de requerimientos
Kit de tincin rpida de Wright
Frotis
Gasas

4. Tcnica
1. Con una pinza sujetar el portaobjetos
2. Realizar 5 inmersiones con el fijador y quitar el exceso de reactivo con una
gasa
3. Realizar nuevamente 5 inmersiones con el reactivo 2 y con ayuda de la
gasa quitar el exceso de reactivo.
4. Y por ltimo realizar 5 inmersiones en el reactivo 3.
5. Enjuagar y secar.

5. Esquemas

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6. Observaciones
El alumno deber ensayar tiempos hasta ajustar aquellos que ms convengan
para una ptima coloracin.
Los resultados esperados en la tincin sern los siguientes:
Hemates en color rosa.
Ncleos de los leucocitos de azul prpura, con la cromatina y paracromatina
netamente diferenciadas.
Grnulos neutrfilos del citoplasma, lila violeta
Grnulos eosinfilos, rojo tirando a naranja.
Grnulos basfilos, prpura tirando a azul oscuro.
Plaquetas, color lila oscuro.
Citoplasma de los linfocitos, azul claro.
Citoplasma de los monocitos, ligero azul.

Practica no 6

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Obtencin de leucocitos
1. Introduccin
Los leucocitos son clulas que estn principalmente en la sangre y circulan por
ella con la funcin de combatir las infecciones o cuerpos extraos; pero en
ocasiones pueden atacar los tejidos normales del propio cuerpo. Es una parte de
las defensas inmunitarias del cuerpo humano.
Hay diferentes grupos de leucocitos: los llamados polimorfonucleares (neutrfilos,
eosinfilos y los basfilos) y los mononucleares (los linfocitos y los monocitos).
El origen de todas las formas de leucocitos es a partir de clulas precursoras de la
mdula sea.
2. Principio y metodologa
La modificacin de la cantidad de leucocitos puede orientar al diagnstico de
enfermedades infecciosas, inflamatorias, cncer y leucemias, y otros procesos.
Por ello el recuento es muy orientativo en diferentes enfermedades. Adems el
porcentaje de cada grupo de leucocitos nos ofrecer una mayor informacin para
precisar un diagnstico.
Cuando en la medicin de leucocitos se ven clulas jvenes aparecen los
neutrfilos en forma de ncleo en forma de bastn (cayados), y un aumento del
porcentaje de los leucocitos polimorfonucleares, esto se denomina como
desviacin "a la izquierda". Este trmino sugiere infecciones bacterianas agudas.
El estudio de los leucocitos se realiza habitualmente en un estudio de
hematimetra y recuento leucocitario completo.
3.

Lista de requerimientos
Tubos para Vacutainer
Aguja para Vacutainer
Camisa para Vacutainer
Jeringa
Torundas de algodn
Alcohol
Ligadura
Cmara de Neubauer
Reactivo de Turk

4. Tcnica
1. Para realizar este anlisis no se precisa estar en ayunas.

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2. Para realizar la toma se precisa de localizar una vena apropiada y, en
general, se utilizan las venas situadas en la flexura del codo. La persona
encargada de tomar la muestra utilizar guantes sanitarios, una aguja (con
una jeringa o tubo de extraccin). Le pondr una ligadura en el brazo para
que las venas retengan ms sangre y aparezcan ms visibles y accesibles.
3. Limpiar la zona de puncin con un antisptico y mediante una palpacin
localizar la vena apropiada y acceder a ella con la aguja. Le soltarn la
ligadura.
4. Cuando la sangre fluya por la aguja el sanitario realizar una aspiracin
(mediante la jeringa o mediante la aplicacin de un tubo con vaco). Al
terminar la toma, se extrae la aguja y se presiona la zona con una torunda
de algodn para favorecer la coagulacin y se le indicar que flexione el
brazo y mantenga la zona presionada.
5. Homogenizar la sangre, cargar la pipeta de conteo de leucocitos hasta la
lnea que marca 0.5.
6. Terminar de llenar la pipeta con Turk. Homogenizar, desechar las primeras
3 gotas.
7. Cargar la cmara de Neubauer por succin.

5. Esquemas

6. Observaciones
El recuento de leucocitos es una prueba de rutina en la mayora de los laboratorios
clnicos. Para la realizacin de la prueba es necesario el alistamiento de una

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muestra de sangre. El cido actico contenido en la solucin acta como
hemolizante de los eritrocitos y el colorante tie los leucocitos.
Posteriormente se cuenta el tipo de clula deseado en un volumen definido y se
calcula el nmero de clulas en un micro litro de sangre

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Practica no 7
Recuento de leucocitos
1. Introduccin
Los leucocitos combaten las infecciones. El recuento de glbulos blancos forma
parte del recuento sanguneo completo que se hace para vigilar sus
concentraciones de clulas sanguneas. Existen varios tipos de leucocitos. Un
anlisis diferencial incluye ms detalles acerca del recuento de leucocitos.
El anlisis de sangre es una prueba clnica habitual que aporta informacin de
gran valor para el diagnstico, ya que las alteraciones en el nmero, la forma y la
funcin de las clulas sanguneas, permiten orientar el diagnstico y la necesidad
de otras pruebas complementarias.
2. Principio y metodologa
El recuento de leucocitos es una prueba de rutina en la mayora de los laboratorios
clnicos. Para la realizacin de la prueba es necesario el alistamiento de una
muestra de sangre. El cido actico contenido en la solucin acta como
hemolizante de los eritrocitos y el colorante tie los leucocitos.
Posteriormente se cuenta el tipo de clula deseado en un volumen definido y se
calcula el nmero de clulas en un micro litro de sangre
3.

Lista de requerimientos
Cmara de Neubauer
Microscopio
Pipeta para leucocitos
Reactivo de Turk

4. Tcnica
1. Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. y contar
en los 4 cuadrados angulares.
2. En el recuento se incluyen las clulas que cubren o tocan por dentro o por
fuera las lneas limitantes superior e izquierda en el cuadro pequeo de
recuento y no se consideran los que estn en los lmites inferior y derecho.
3. Multiplicar por 50 el promedio de los leucocitos con la siguiente frmula
4. Clulas contadas x (dilucin) x 10/4 (nm. De cuadros).

5. Esquemas

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6. Observaciones
El nmero normal de leucocitos en la sangre es 4,500 a 10,000 por microlitro.
Este examen se har para averiguar cuntos leucocitos produce el organismo. El
cuerpo humano produce ms glbulos blancos cuando se tiene una infeccin o
una reaccin alrgica.

Practica no 8
Morfologa de medula sea

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Hematologa Serie Blanca
1. Introduccin
El estudio medular es un procedimiento especializado de gran utilidad clnica.
Puede ser realizado tanto por aspirado como por biopsia percutnea segn las
caractersticas clnicas del paciente y el diagnstico presuntivo. El estudio medular
permite identificar las diferentes series hematopoyticas, estudiar el estroma
medular y obtener material para estudios bacteriolgicos, micolgicos, de
citometra de flujo y genticos entre otros.
La decisin de solicitar un estudio de mdula sea debe basarse en la hiptesis de
que los hallazgos que se esperan del estudio justifiquen someter al paciente al
riesgo y la molestia, a pesar de stos ser mnimos.
Los hallazgos medulares esperados (o inesperados) en parte dependen del
cuadro clnico, de los hallazgos en sangre perifrica y de la informacin que se
requiere en algunos casos especficos. En la actualidad el estudio medular hace
parte integral del estudio sistematizado de un importante nmero de
enfermedades hematolgicas, infiltrativas y neoplsicas que estn bien
protocolizadas. Debido a que el aspirado de mdula sea est virtualmente libre
de riesgo (excepto si se hace en el esternn) y que la biopsia medular es un
procedimiento invasivo mnimo, el estudio se recomienda en todos los casos en
donde se pueda justificar un probable beneficio con la informacin obtenida.
2. Principio y metodologa
Los extendidos de mdula sea se colorean con Wright siguiendo la tcnica usual.
Inicialmente son observados macroscpicamente para determinar la presencia de
partculas. Luego el extendido es examinado en bajo poder (10X) para apreciar la
relativa cantidad de grasa y de contenido celular hematopoytico de acuerdo al
cual la mdula se puede clasificar como: hipocelular, normocelular e hipercelular.
Despus de la observacin en 10X el extendido se examina con objetivo de 100X
localizando los campos donde se hallan las partculas y se procede al anlisis de
las clulas sanguneas que habitan en la mdula sea. Se establece la relacin
del nmero de las clulas blancas frente al nmero de clulas rojas nucleadas.
Esta proporcin se denomina relacin mielo - eritroide (M:E). Para estimar esta
relacin es necesario la identificacin y tabulacin de 300 - 500 clulas nucleadas.
Se observa aumento en la relacin mielo-eritroide, cuando se aumentan los
precursores mieloides como sucede en los procesos inflamatorios agudos,
leucemias o cuando se disminuyen los precursores eritroides como en la
insuficiencia renal crnica. Una disminucin en la relacin mielo-eritroide se
presenta cuando se disminuyen los precursores mieloides como en la anemia
aplstica o cuando aumentan los precursores eritroides como en las anemias
hemolticas y megaloblsticas.
En forma simultnea se realiza una valoracin cuidadosa de la morfologa de las
diferentes lneas celulares: serie eritroide, granuloctica, linfoide, monoctica,
megacarioctica, clulas plasmticas y otras clulas.

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Hematologa Serie Blanca
3.

Lista de requerimientos
Muestra
Pipeta Pasteur
Portaobjetos
Kit de tincin de Wright
Gasas
Aceite de inmersin

4. Tcnica
1. Realizar extendidos de la muestra de medula sea.
2. Teir los frotis con el kit de tincin de Wright rpida y enjuagar
perfectamente.
3. Dejar secar los frotis.
4. Aadir una gota de aceite de inmersin.
5. Enfocar con el ocular de 100x.
6. Observar los diferentes estadios del linaje celular.
5. Esquemas

6. Observaciones
En los adultos sanos, hay un pequeo porcentaje de clulas con cambios
displsicos. Para un diagnstico de SMD se necesita como mnimo un 10% de
clulas displsicas por linaje para distinguirlos de la displasia menor. Adems,
deben observarse cambios displsicos en al menos 2 de los 3 linajes de clulas
hematopoyticas.

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Hematologa Serie Blanca

Practica no 9
Tincin de medula sea
1. Introduccin
Los extendidos de mdula sea se colorean con Wright siguiendo la tcnica usual.
Inicialmente son observados macroscpicamente para determinar la presencia de
partculas. Luego el extendido es examinado en bajo poder (10X) para apreciar la
relativa cantidad de grasa y de contenido celular hematopoytico de acuerdo al
cual la mdula se puede clasificar como: hipocelular, normocelular e hipercelular.
Despus de la observacin en 10X el extendido se examina con objetivo de 100X
localizando los campos donde se hallan las partculas y se procede al anlisis de
las clulas sanguneas que habitan en la mdula sea. Se establece la relacin
del nmero de las clulas blancas frente al nmero de clulas rojas nucleadas.
Esta proporcin se denomina relacin mielo - eritroide (M:E). Para estimar esta
relacin es necesario la identificacin y tabulacin de 300 - 500 clulas nucleadas.
Se observa aumento en la relacin mielo-eritroide, cuando se aumentan los
precursores mieloides como sucede en los procesos inflamatorios agudos,
leucemias o cuando se disminuyen los precursores eritroides como en la
insuficiencia renal crnica. Una disminucin en la relacin mielo-eritroide se
presenta cuando se disminuyen los precursores mieloides como en la anemia
aplstica o cuando aumentan los precursores eritroides como en las anemias
hemolticas y megaloblsticas.
En forma simultnea se realiza una valoracin cuidadosa de la morfologa de las
diferentes lneas celulares: serie eritroide, granuloctica, linfoide, monoctica,
megacarioctica, clulas plasmticas y otras clulas.
2. Principio y metodologa
Los SMD son un grupo heterogneo de enfermedades, y el diagnstico y la
evaluacin del pronstico se basan en su clasificacin en subtipos (tabla). Se han
identificado subtipos a partir de las caractersticas compartidas de morfologa
celular y se han desarrollado dos sistemas principales de clasificacin basados en
estos subtipos (el sistema FAB [francs-estadounidense-britnico] y el sistema de
la Organizacin Mundial de la Salud [OMS]). El resultado clnico de los pacientes
puede evaluarse utilizando el ndice internacional de pronstico (IPSS) o el ndice
de pronstico basado en la clasificacin de la OMS (WPSS).
3.

Lista de requerimientos
Portaobjetos
Muestra de medula sea
Kit de tincin de Wright rpida
Gasas

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Hematologa Serie Blanca
4. Tcnica
1. Realizar extendidos de medula sea, y ponerlos a secar.
2. Teir con la tcnica de tincin de Wright rpida; que consiste en 5
inmersiones con cada reactivo, tratando de retirar el exceso de colorante
para no contaminar los otros reactivos. Una vez que paso por los 3
reactivos enjuagar.
3. Dejar secar y montar en el microscopio.
5. Esquemas

6. Observaciones
Debido a que los sndromes mielodisplsicos son un grupo heterogneo de
enfermedades, el diagnstico y la evaluacin del pronstico se basan en su
clasificacin en subtipos.
El examen morfolgico de las clulas sanguneas y de la mdula sea es
necesario para realizar el diagnstico definitivo y la clasificacin de los sndromes
mielodisplsicos.
Para un diagnstico de sndromes mielodisplsicos se necesita como mnimo un
10% de clulas displsicas por linaje para distinguirlos de la displasia menor.
Adems, deben observarse cambios displsicos en al menos 2 de los 3 linajes de
clulas hematopoyticas.

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Hematologa Serie Blanca

Practica no 10
Diferenciacin de clulas blasticas
1. Introduccin
Las clulas sanguneas del adulto se forman, con la excepcin de los linfocitos,
exclusivamente en la mdula sea
La funcin principal de la mdula sea es la produccin de clulas sanguneas
diferenciadas. Estas derivan de clulas troncales multipotenciales con capacidad
de renovacin, capaces de diferenciarse. Esta ltima capacidad lleva a la
produccin de clulas unipotenciales dan origen a las lneas celulares
eritropoytica, granulopoytica y trombopoytica. Las clulas unipotenciales estn
en una etapa activa del ciclo celular, con capacidad de autorrenovarse y proliferar
por tiempo prolongado. Sin embargo, estas clulas necesitan del estmulo humoral
de ciertas sustancias con 2capacidad hematopoytica. La mejor conocida de
estas es la eritropoyetina, que es elaborada por el rin en respuesta a la
hipoxemia y que estimula la produccin de eritrocitos. Tambin se conoce la
existencia de leuco y trombopoyetinas.
2. Principio y metodologa
El sistema hematopoytico est compuesto por diferentes tipos celulares que
derivan de la diferenciacin y expansin de progenitores inmaduros. Su
funcionamiento correcto asegura la produccin de las clulas responsables del
transporte de oxgeno, la coagulacin sangunea y la inmunidad. Se organiza
como una jerarqua en la que las relaciones entre los diferentes tipos celulares se
basan en la capacidad de proliferacin y de diferenciacin celular. El
funcionamiento normal de la hematopoyesis resulta de la interaccin entre
mecanismos intracelulares y la influencia del microambiente donde se desarrollan
las clulas hematopoyticas.
Diariamente miles de millones de clulas hemticas maduras, principalmente
eritrocitos y granulocitos, mueren y son eliminadas de la circulacin. Un nmero
equivalente de 3 clulas jvenes alcanza la sangre perifrica (SP), de manera que
se compensa la prdida ya sealada. La hematopoyesis hace referencia a este
proceso continuo de produccin de clulas hemticas.
El sistema hematopoytico est compuesto por diferentes tipos celulares
organizados jerrquicamente. Mientras su desarrollo y maduracin sucede en
localizaciones anatmicas concretas, los elementos maduros y, en menor medida,
los inmaduros circulan juntos por la SP.
3.

Lista de requerimientos
Aceite de inmersin
Frotis
Microscopio

22
Hematologa Serie Blanca
4.

Tcnica
Colocar una gota de aceite de inmersin sobre el frotis.
Enfocar en el microscopio con el ocular de 100x.
Distinguir los diferentes estadios de los linfocitos.

5. Esquemas

6.

Observaciones

El sistema hematopoytico est compuesto por diferentes tipos celulares que

derivan de la diferenciacin y expansin de progenitores inmaduros. Su
funcionamiento correcto asegura la produccin de las clulas responsables del
transporte de oxgeno, la coagulacin sangunea y la inmunidad. Se organiza
como una jerarqua en la que las relaciones entre los diferentes tipos celulares se
basan en la capacidad de proliferacin y de diferenciacin celular.
El funcionamiento normal de la hematopoyesis resulta de la interaccin entre
mecanismos intracelulares y la influencia del microambiente donde se desarrollan
las clulas hematopoyticas.
Este grupo de clulas es el responsable de la generacin continua y de por vida
de todas las dems clulas hemticas. Son las clulas con la mxima capacidad
de autorrenovacin y diferenciacin, caractersticas que se van perdiendo
conforme las clulas hematopoyticas se diferencian en elementos ms maduros.