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Prueba de tamizaje
para detección de CaCu

Información Científica
 INVESTIGACIÓN PRE-CLÍNICA
Análisis in vitro
de secretomas por
cromatografía líquida
Identificación de proteínas de membrana.
Se encontraron 17 proteínas con un patrón
diferencial de expresión. Las proteínas
identificadas se distribuyeron de acuerdo con su
patrón de expresión encontrándose 17 proteínas
sobre expresadas.

Análisis in vivo
de secretomas
por Western Blot
Análisis de las proteínas
compartidas presentes en el
suero de los ratones inoculados
con líneas celulares de cáncer
cervicouterino.

Este análisis ayudó a saber si las proteínas del Se analizaron proteínas del secretoma in vitro que
secretoma in vitro pudieran ser candidatas a pudieran ser candidatas a biomarcadores séricos.
biomarcadores séricos.

Detección de
marcador 1 en10
pacientes por
Western Blot
Validación de la proteína
como biomarcador en sueros
de pacientes con cáncer
cervicouterino

Para conocer el potencial de la proteína como El estudio reveló que todos los sueros de los
biomarcador candidato, se realizó un estudio pacientes con CaCu analizados expresaron mismas
exploratorio con una cohorte de 10 pacientes líneas celulares, y en los sueros de los controles no
con CaCu y 10 controles negativos. se observó expresión de dichas líneas celulares.

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 INVESTIGACIÓN CLÍNICA /OBJETIVO

Evaluar y verificar proteínas en suero y en el epitelio cervical como

potenciales biomarcadores del cáncer cervicouterino en pacientes con
lesiones intraepiteliales cervicales y con lesiones invasoras del cérvix uterino.

Se realizó un análisis bivariado y multivariado con

base en los grupos de estudio a fin de determinar si
los biomarcadores probados son confiables para la
lesión precancerosa o cáncer invasivo y sus
controles negativos.

Los ensayos de inmunodetección se realizaron en un

laboratorio de Especialidades Inmunológicas (LEI),
laboratorio autorizado por la COFEPRIS, que cuenta
con los equipos, insumos y personal necesarios para
la realización de los experimentos.

Más de 500 mujeres participaron en el estudio

Resultados: Dot blot.

Determinación de la expresión de 20
posibles biomarcadores circulantes para
detectar LBG, LAG o CaCu.
Dot blot. . Determinación de la expresión de 20 posibles biomarcadores circulantes para detectar LGCL,
HGCL o CaCu Los datos mostraron cambios de expresión significativos para PRX1, PRX2 y PRX3. Mientras
tanto, la expresión de PRX7 y PRX16 mostró una tendencia al aumento, pero esto no fue estadísticamente
significativo. Las proteínas restantes no mostraron cambios de expresión estadísticamente significativos en
ninguno de los grupos estudiados. Los datos son la media ± SEM de cinco experimentos realizados por
triplicado. PRX3: ** P ≤ 0,0135 (ANOVA de una vía; prueba Post hoc de Bonferroni); PRX1: ** P ≤ 0,0001
(ANOVA de una vía; prueba Post hoc de Bonferroni); PRX16: ** P ≤ 0,0135 (One Way ANOVA; Post hoc test
de Bonferroni). Los datos se analizaron con el software GraphPad Prism 9.0
Molecular Oncology Journal
.

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 Resultados: Western Blot.

2 Biomarcadores para CaCu

Sensibilidad 95 %
Especificidad 83% y 90%

Una vez identificadas las proteínas con potencial para ser biomarcadores de CaCu, se evaluó su expresión mediante Western Blot.
Todas estas proteínas mostraron la misma tendencia observada previamente por Dot Blot, con una sobreexpresión significativa
en CaCu en comparación con los controles. El análisis ROC mostró valores de AUC relativamente altos para PRX1 (AUC= 0,9784) y
PRX2 (AUC= 0,9937), así como una sensibilidad y especificidad relativamente altas: sensibilidad de PRX1: 100 %; especificidad
PRX1: 83%); Sensibilidad PRX2: 100%; Especificidad PRX2: 90%) (Figura 2 A-D).
Expresión de proteínas circulantes. A-C) Western Blot. PRX1 y PRX2 aumentaron significativamente en muestras de CaCu en
comparación con los controles, pero su expresión no fue estadísticamente diferente en LGCL o HCL en comparación con los otros
grupos. D-E) Curvas ROC. El análisis de datos mostró valores de AUC (Área bajo la curva) relativamente altos para cada uno de los
biomarcadores estudiados. Los datos son la media ± SEM de tres experimentos realizados al menos por triplicado. ***P ≤ 0,0004;
Prueba t de Student versus el control. *P ≤ 0,0229; Prueba t de Student versus el control Los datos se analizaron con el software
GraphPad Prism 9.0.

Resultados: ELISA

1 Biomarcador para
LAG y LBG

* Lesión de alto grado (LAG)

* Lesión de bajo grado (LBG)

CONDITION AUC value Sensitivity (%) Specificity (%) La expresión de la proteína PRX7 se probó por ELISA. Los resultados mostraron un aumento estadísticamente
significativo de PRX7 en los grupos LGB (**p≤ 0.0046; prueba t de Student versus control) y LAG (*p≤ 0.0415;
0.94 + prueba t de Student versus control) (Figura 3A). El análisis ROC mostró valores de AUC (área bajo la curva)
LBG - 0.051 100 80
relativamente altos para LBG y LAG (Figura 3B-E). La sensibilidad y especificidad de LBG fueron 100 y 91,67 %,
respectivamente. Mientras tanto, el grupo LAG mostró 80 y 70% de sensibilidad y especificidad respectivamente.
LAG 0.833 +
- 0.08892 91.67 70 Expresión de PRX7 circulante por ELISA. A) La expresión de PRX7 aumentó significativamente en pacientes con
LBG y LAG. Aunque los pacientes con CC también mostraron un aumento en la expresión de esta proteína, esto no
CaCu 0.7083 +
- 0.113 75 70 fue estadísticamente significativo. (B-E) Análisis ROC. Este análisis mostró valores de AUC relativamente altos para
todos los grupos estudiados; los grupos LGB y LAG mostraron una sensibilidad y especificidad muy altas.

Conclusión
Los biomarcadores El uso de biomarcadores séricos y de membrana celular
pueden ser usadas para la detección de lesiones
proteicos son una opción precancerosas y CaCu en pacientes, y ser llevadas a
para la detección pruebas rápidas de inmunodetección, haciendo más
accesible, sensible, rápido y poco invasivo este tamizaje,
oportuna de las lesiones pudiendo afectar en la incidencia y mortalidad del CaCu.
precancerosas y el CaCu Por lo que se propone su uso para apoyar el diagnóstico
clínico de la mujer mexicana.

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