Introducción

El centro internacional de la papa en contribución para el mejoramiento de la papa ha través del uso de la diversidad
y variabilidad genética presente en el cultivo. Cientos de cruzamientos controlados son realizados cada año para la
obtención de progenies, para las cuales son utilizadas diversos estudios genéticos, avances en los ciclos de selección
o para proporcionar a programas de los países en desarrollo familias segregantes que combinen características
deseables.
Cruzamientos realizados en la estación de Santa Ana en Huancayo situado en la sierra central del Perú a 3280 mm,
el centro de investigación cuenta con invernaderos, cobertores y laboratorios que hacen posible el mejoramiento
de la papa.
Modulo I.
Medidas Sanitarias
Al entrar en el invernadero la persona deberá desinfectar la suela de sus zapatos y de cualquier equipo rodante que
se desee ingresar en el tapete fitosanitario con cal. La cual estará ubicado en la entre sala del invernadero, en este
lugar deberá colocarse el mandil y proceder a lavarse las manos con jabón y secándose con papel toalla, luego se
desinfectará con alcohol al 70%. Para finalizar se enjuagará utilizando desinfectante yodoforo (detergente amplio
espectro y acción inmediata contra microorganismos) Este procedimiento deberá hacerse antes de iniciar y finalizar
la jornada en el invernadero para evitar que el material genético se contamine.
Modulo II. Manejo del invernadero
Siembra de progenitores
Las plantas de los clones elegidos como progenitores se establecerán provisionalmente en un invernadero hasta
trasladarse al invernadero definitivo. Se recomienda utilizar de 8 a 10 tubérculos por progenitor, tubérculos de 3 a
5 cm de diámetro y con brote de 2 buen tamaño se colocan individualmente en macetas de 4 pulgadas con sustratos
de tierra y muslo (en proporción 2 a 1) tubérculos se cubren con el sustrato y se distribuyen ordenadamente en las
mesas dejando su desarrollo por un periodo de 15 días antes de su traslado al invernadero de cruzamiento.
Condiciones y acondicionamiento del invernadero de cruzamiento.
En el invernadero donde se instala el bloque de cruzamientos no requiere de condiciones de temperatura y humedad
controladas debido a que los cruzamientos se realizan durante la época más favorable de desarrollo del cultivo. Por
ejemplo, en Perú en la sierra central se hace en noviembre a marzo y junio a septiembre. Sin embargo, estos factores
pueden ser monitoreados mediante sensores disponibles en el mercado.
En los casos que se cuenta con un progenitor que requiere de fotoperiodos largos para florecer el invernadero debe
contar con un sistema de iluminación artificial para extender las horas de luz (hasta 16 horas.) Se recomienda la
utilización de focos de luz blanca de 20 watts y luz amarilla de 100 watts para inducir a la floración. Como parte
del sistema de iluminación debe instalarse un temporizador para controlar automáticamente el encendido y apagado
de las luces en el tiempo predeterminado.
Instalación del bloque de cruzamientos
La instalación del bloque se inicia con la colocación de caña de bambú que servirá de soporte a las plantas durante
su desarrollo a una distancia de 30 cm cada uno. Se llena macetas de 10 pulgadas hasta 3 cuartas partes de su
volumen con un sustrato de tierra y musgo, además se añade 3 a 4gr de fertilizante preparado a una dosis de 180
unidades de N, 160 de P y 160 de K. Posteriormente se añade más sustrato y se compacta con un palo de madera,
esto se realiza hasta que se complemente el volumen de la maceta.
Las macetas con el sustrato bien afirmado se distribuyen al costado de cada caña de bambú. El invernadero queda
listo para utilizar las plantas que se utilizarán en el bloque de cruzamiento, las mismas que deberán a ver alcanzado
una altura de 15 cm.
Antes del traslado las plantas deberán pasar las pruebas de detección del virus T de la papa y el viroide del tubérculo
usado. Para ello se colectan uno a dos foliolos de la parte apical de la planta en bolsas de polietileno, previamente
identificadas con el código del clon y el número asignado a la planta. Las muestras se envían al laboratorio, de
acuerdo a los resultados de existir plantas infectadas deberán ser eliminadas junto con las que se encuentran a su
alrededor, de haber tenido un resultado negativo se recomienda realizar nuevamente las pruebas si nuevamente
resultan plantas infectadas se procede a eliminar todo el lote.
Instalación de las plantas
Para esto se procede a remover las plantas de las macetas volteando la maceta y aplicando un golpe en la base de
la misma. Permitiendo así recibir la planta junto con su sustrato, la planta se coloca inmediatamente en una de las
macetas que contiene el suelo compactado sujeta a la caña de bambú con uno o dos amarres. De esta manera la
planta queda fija a la caña de bambú, luego se procede a remover con agua corriente el sustrato que cubre el
tubérculo madre, dejando expuesto sus raíces y estolones, los estolones deben retirarse conforme desarrollen con
un bisturí previamente desinfectado en una solución de hipoclorito de calcio. Permitiendo inducirá la planta a la
fase fe floración el mayor tiempo posible, y no cambie su desarrollo de la fase vegetativa de floración a la fase de
tuberización y senescencia.
Modelo III
Cruzamientos
Llegada la época de floración se colectan las flores de las plantas que se utilizaran como progenitores masculinos,
las flores a colectar deben estar completamente abiertas con las anteras próximas a la dehiscencia. O
completamente dehiscentes lo que se observa por el color marrón claro del poro apical. Las flores se separan de la
planta por el pedúnculo y se depositan en un papel manteca o en bolsitas de papel crep correctamente identificadas
con el número o código del progenitor, las muestras de flores son llevadas al laboratorio.
Con las manos desinfectadas con alcohol se extraen las anteras una por una con ayuda de una pinza, este mismo
procedimiento puede realizarse también con las manos, se elimina el pistilo y se coloca el cono de antera sobre un
pedazo de papel manteca, se dobla el papel manteca dejando el cono de anteras en el interior luego se doblan los
extremos para cerrarlos y evitar que el polen escape durante la manipulación, inmediatamente después los sobre
que tienen las anteras se ponen a secar durante 24 horas sobre una mesa acondicionada con focos incandescentes
de 100 watts, manteniéndose en una temperatura óptima de 25°C . Luego se desinfecta las manos y aparatos utilizar
para la extracción del polen, se comienza a sacudir las anteras mediante un vibrador en la parte externa de la
envoltura, luego se abre la envoltura, se eliminan las anteras ya vacía y se junta el polen.
Distribuyéndole en una o más capsulas de gelatina debidamente identificadas., Se cierra la capsula y con ligeros
golpes se deja caer el polen hacia la base de la misma, una vez terminado esto se coloca la capsula en un contenedor
de forma vertical, los instrumentos se vuelven a desinfectar para la extracción de otras muestras de anteras. Para el
almacenamiento se prepara en un envase plástico con gel de sílice, es un agente desecante que evita el deterioro
del polen por la húmeda. Se coloca el contenedor con las capsulas de polen sobre el gel, o en caso de no tener un
contenedor de soporte las capsulas se colocan directamente sobre este.
El envase se cierra con un pedazo de lámina plástica de parafina sensible o parafil. Lo suficiente largo para que se
pudiera girara varias veces alrededor de la tapa. Finalmente se identifica el envase y se almacena a 4°C para un
periodo de corto plazo, máximo de dos semanas.
Emasculación de plantas que se utilizarán como progenitores femeninos.
Las flores que se utilizaran como progenitores femeninos se preparan para su polinización dentro de las primeras
horas de la mañana 7 a 10 am. Este procedimiento se inicia con la selección de una inflorescencia que contenga 5
a 6 botones florales de tamaño homogéneo y próximos a la apertura. Las flores abiertas y botones pequeños son
removidos. A los botones seleccionados se procede a la emasculación con ayuda de una pinza, se abre los botones
florales y se remueve las anteras, evitando dañar el pistilo. De esta manera quedan listo para su polinización al día
siguiente.
Polinización
Al día siguiente por la mañana los botones emasculados abrirán sus pétalos completamente, exponiendo el pistilo,
el mismo que estará receptivo para la polinización.
La cápsula de gelatina correspondiente al progenitor masculino que será utilizada en la polinización según el plan
de cruzamientos, se abre cuidadosamente y se aproxima al pistilo, lo suficiente para lograr que el estigma haga
contacto con el polen. Este procedimiento se repite con cada una de las flores de la inflorescencia, se procede a
colocar la etiqueta del cruce alrededor del pedúnculo de la inflorescencia la misma que identifica los progenitores
utilizados (Iniciando con el código del progenitor femenino seguido por una x y el número o código del progenitor
masculino, número de flores polinizadas y fecha de polinización).