UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE SINALOA

INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA
INGENIERÍA DE BIOPROCESOS

“Informe de simulación de un bioproceso reactivo”

Docente: M.C. Victor Alfonso Rodriguez Tirado

Jazmín Alejandra González Cedano

2021030407
BT-72

Mazatlán, Sinaloa diciembre del 2023

OBJETIVO GENERAL
A partir del programa de simulación SuperPro designer, elaborar un bioproceso
reactivo para la obtención de un metabolito de interés y determinar la rentabilidad de
llevar a cabo el proceso.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS
● Elaborar un bioproceso de producción de somatropina a nivel industrial en
SuperPro designer
● Determinar las operaciones unitarias del downstream
● Hacer una evaluación económica del proceso
● Determinar si es viable o no
INTRODUCCIÓN

La somatropina es una hormona de crecimiento humano que desempeña un papel

crucial en el crecimiento, desarrollo y mantenimiento de diversos tejidos y órganos
en el cuerpo. Naturalmente se produce por la glándula pituitaria, ubicada en el
cerebro, y estimula el crecimiento de huesos, músculos y otros tejidos, sin embargo,
existen personas que presentan dificultades para producirla normalmente. Es por
ello que se buscó una forma de poder suplir esta deficiencia de la hormona.

Actualmente la somatropina es producida en laboratorios por medio de la ingeniería

genética, que creó la hormona recombinante a partir de microorganismos como
E.coli, lo que ha permitido su producción a nivel industrial en empresas
farmacéuticas. Esta producción de somatropina ha sido fundamental para abastecer
la demanda médica de esta hormona, especialmente en el tratamiento de trastornos
del crecimiento de niños en y en algunas condiciones médicas en adultos.

En este contexto, el presente trabajo presenta un diseño de proceso que apunta a

una producción anual de 221.96 kg de somatropina. Este proyecto se ha
estructurado considerando diversos aspectos, como el costo del equipo, la materia
prima empleada en el proceso y los salarios de los operadores. El resultado es un
costo de producción anual de 49,983,000.

El proceso de producción propuesto tiene una duración de 7909.37 horas al año,

distribuidas en 288 ciclos de 27.46 horas por ciclo. Esta planificación detallada
refleja la eficiencia y la optimización de recursos en la línea de producción,
permitiendo abordar de manera efectiva la demanda del mercado en constante
crecimiento para la somatropina.
DESCRIPCIÓN DEL BIOPROCESO
El proceso está diseñado para que la producción de somatropina se haga de la
siguiente manera:
El biorreactor tiene una capacidad de producción de 1500 L, y la fermentación tiene
una duración de 18 horas.
Cada lote de producción comienza con la preparación del medio de cultivo que
contiene sales, glucosa y agua. 120 L de este medio se utilizan para la fermentación
semilla, de la cual posteriormente se pasa al tanque de fermentación de 1500 L y se
hace la fermentación por 18 horas para obtener la E. coli que contiene la
somatropina en su interior. Posteriormente se hace una ultrafiltración para separar la
biomasa del medio, y luego se hace una homogeneización para romper la célula y
que la hormona se libera. Una vez liberada la hormona se procede a una
precipitación con Urea y NaOH, de la cual se obtiene el precipitado después de una
doble centrifugación. Para la purificación se llevan a cabo dos cromatografías, una
de intercambio iónico y otra de gel. Por último se hace una liofilización para guardar
la hormona purificada.

El proceso tiene una capacidad de producción anual del metabolito de 221.96 kg . El

proceso está dividido en:

➢ Fermentación
- Agitación del medio
- Esterilización
- Fermentación semilla
- Fermentación

➢ Recuperación
- Ultrafiltración
- Homogenización

➢ Concentración
- Precipitación
- Centrifugación (2 veces)

➢ Purificación
- Cromatografía de intercambio iónico
- Cromatografía en gel

➢ Acabado
- Liofilización
FERMENTACIÓN
El proceso comienza con la preparación del medio de fermentación, que contiene
glucosa y sales. El medio se prepara en un tanque de mezcla, el cual se carga con
el medio y agua y se procede a la agitación de este.
Posteriormente, el medio de fermentación se transfiere a un esterilizador, que
esteriliza el medio antes de enviarlo al fermentador semilla y de producción.
El inóculo para cada lote se prepara en un fermentador de semilla. El crecimiento de
biomasa comienza inicialmente en un fermentador de semilla de 120 L, para permitir
un mayor control y la posibilidad de eliminar lotes contaminados, y el cual se utiliza
como inóculo en la fermentación. Los tiempos de fermentación es de 12 horas y 18
para la fermentación principal, la temperatura se mantiene a 30°C durante cada
fermentación de semilla. La reacción que se lleva a cabo es la siguiente:
30 Glucosa + 5.33 Oxígeno + 6 sales + 2.1 Amonio 16.24 Biomass + 22.09
Carbon Dioxide + 3 Water
La duración del ciclo del fermentador de producción principal es de 18 horas.
Los fermentadores de semilla y el fermentador principal tienen las siguientes
operaciones:
➔ Entrada de sustrato. Se carga una cantidad adecuada de sustrato (glucosa).
➔ Entrada de Inóculo. El inóculo se extrae del fermentador de semilla anterior.
➔ Fermentación. La fermentación comienza tan pronto como se han cargado
agua, sustrato e inóculo en el fermentador.
➔ Transferencia-Salida. Al final de la fermentación, se vacía el recipiente.

Para facilitar la transferencia de oxígeno y la difusión en los fermentadores de

semilla y producción, se introduce aire y amonio. El aire se suministra por un
compresor que posteriormente se mezcla con el amonio y se filtra para poder ser
empleado en la fermentación.

RECUPERACIÓN Y CONCENTRACIÓN
Después de completar la fermentación, la masa celular debe separarse del caldo de
fermentación. La biomasa se recupera mediante una filtración. La cual
posteriormente se homogeniza en un homogenizador para hacer rompimiento
celular y obtener la hormona del interior de la célula.
Para concentrar esta hormona se hace un precipitación con hidróxido de sodio en
un tanque de mezclado, y luego se hace una centrifugación dos veces seguidas
para obtener el precipitado concentrado de la hormona.

PURIFICACIÓN Y ACABADO
La purificación de la hormona se lleva a cabo mediante dos cromatografías una de
intercambio iónico y la otra de gel.
En la primer cromatografía se emplea un buffer de cloruro de potasio, cloruro de
potasio, y otros elementos para equilibrar la columna, posteriormente se carga la
columna, reteniendo la hormona en la columna, con un buffer se lleva a cabo el
lavado y la elución se lleva a cabo mediante agua ultra pura y un buffer de cloruro
de sodio y difosfato de sodio. Por último, se realiza un segundo lavado donde
obtenemos la hormona que se utiliza en la siguiente cromatografía para purificarla
aún más.
En la cromatografía en gel se lleva a cabo el equilibrio de columna con un buffer de
cloruro de sodio, se carga la columna y posteriormente se hace un lavado con un
buffer de sodio dihidrogenofosfato, se hace una elución con otro buffer y por último
una regeneración donde obtenemos la hormona purificada.
Por último se lleva a cabo una liofilización para preservar la hormona, que
posteriormente se almacena hasta su uso.
BALANCES DE MATERIA
Para llevar a cabo el proceso de obtención de somatropina se necesitan de
diferentes materias primas que se detallan en la siguiente tabla:

Tabla 1: Requerimientos de las materias primas en kg por año de todo el proceso.

Tabla 2. Requerimientos de materia prima en la fermentación

Tabla 3. Requerimientos de materias primas en la concentración.
Tabla 4. Requerimientos de materias primas durante la purificación.
PLANEACIÓN DEL PROCESO
El proceso tiene una duración de 27.46 horas lo que es un poco más de 1 día. Este
es el tiempo transcurrido desde el inicio de un lote dado, es decir, la preparación del
primer fermentador de semilla hasta el final de ese lote en particular. Sin embargo,
el tiempo real de ciclo de lote es solo de 16 horas debido al hecho de que los
procedimientos individuales en este proceso son mucho más cortos que el tiempo
total de lote, y se utilizan múltiples equipos (en modo escalonado) en diversas
partes del proceso.
El proceso inicia con la preparación del medio de fermentación, que contiene
glucosa y sales.
La duración del ciclo del fermentador principal es de 18 horas.
Después de la fermentación, a la masa celular se le hace un rompimiento celular y
se concentra lo que se libera del rompimiento.
La somatropina se precipita y luego se purifica con cromatografía en gel y de
intercambio iónico.
Se lleva a cabo una liofilización para almacenar la hormona.
En el siguiente diagrama se muestran los tiempos de duración y el inicio y
finalización de cada una de las etapas del bioproceso:
Figura 1: Diagrama de Gantt por etapas del bioproceso.

Figura 2. Diagrama de Gantt para múltiples batch.

EVALUACIÓN ECONÓMICA

Tabla 5. Estimación de capital fijo

Tabla 6. Costo del equipo a utilizar
 Tabla 7. Tabla del reporte Itemized cost

CONCLUSIÓN

En conclusión, el bioproceso diseñado en SuperPro Designer para la producción de

somatropina presenta un enfoque eficiente que aborda tanto aspectos técnicos
como económicos. La rentabilidad del proceso dependerá de la demanda del
mercado y de la capacidad de la empresa para posicionarse competitivamente en la
industria farmacéutica. Este enfoque puede contribuir significativamente a satisfacer
las necesidades médicas de aquellos que requieren tratamiento con somatropina,
ofreciendo una alternativa viable y eficiente a nivel industrial.
La capacidad de producción anual de 221,96 kg de somatropina es resultado de una
cuidadosa planificación y optimización de las operaciones unitarias en cada fase del
bioproceso. La duración total del proceso, distribuida en 288 ciclos de 27,46 horas
cada uno, refleja una eficiencia operativa que permite cumplir con la demanda del
mercado de manera efectiva.

El análisis económico del proceso revela un costo de producción anual de

49,983,000, teniendo en cuenta factores como el equipo, la materia prima y los
salarios de los operadores. Este valor es esencial para determinar la rentabilidad del
proceso, y su comparación con los beneficios potenciales derivados de la
comercialización de la somatropina permitirá tomar decisiones informadas sobre la
viabilidad económica del proyecto.

La metodología empleada en la producción de somatropina a través de la ingeniería

genética y la utilización de microorganismos modificados ha demostrado ser una
alternativa eficaz y escalable a nivel industrial. La utilización de E. coli como
huésped para expresar la somatropina ha permitido obtener un producto final con
alta pureza y similitud estructural a la hormona natural.

REFERENCIAS
Yutong Zhao (2020) Recombinant Bovine Somatotropin. IOP Conf. Ser.: Earth
Environ. Sci. 440 022034

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Khan, R. H., AppaRao, K. B. C., Eshwari, A. N. S., Totey, S. M., and Panda, A. K.
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Amulya K. Panda (2000) Optimization of Inclusion Body Solubilization and
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182–192 doi:10.1006/prep.1999.1179, available online at http://www.idealibrary.com