BIOQUÍMICA

Instituto de Ciencias Naturales

LABORATORIO 5

METABOLISMO AERÓBICO
RESULTADOS DE APRENDIZAJE

• Identificar la clasificación, función y regulación de las enzimas analizando factores

físicos y químicos del medio.

• Explicar los procesos catabólicos y anabólicos de carbohidratos, lípidos y compuestos

nitrogenados y su regulación por medio de la identificación de las rutas metabólicas
según las condiciones fisiológicas.

• Analizar resultados experimentales de laboratorio mediante la aplicación de principios

fisicoquímicos y fisiológicos, con el uso de herramientas computacionales.

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METABOLISMO AERÓBICO
• El metabolismo es el proceso global mediante el cual los sistemas vivos adquieren y utilizan
energía para realizar sus diferentes funciones.

➢ Las vías metabólicas son una serie de reacciones enzimáticas consecutivas que generan productos
específicos.
➢ Las vías que componen el metabolismo se pueden clasificar en dos categorías:

Catabolismo Anabolismo
Las que participan en la degradación Las que intervienen en la biosíntesis

➢ Las dos grandes vías del metabolismo celular están necesariamente conectadas a través de moléculas
con funciones muy definidas. Por un lado, las vías se conectarán a través de moléculas
transportadoras de energía (ciclo del ATP), pero existe, además, una clara conexión con moléculas
encargadas de la transferencia de electrones.

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METABOLISMO AERÓBICO

➢ La principal molécula transportadora de energía es el ATP

➢ Las moléculas trasportadoras de electrones son nucleótidos como el

NADH y el NADPH.

➢ Todas las reacciones del metabolismo están estrechamente

relacionadas e interconectadas.

➢ Para facilitar el estudio y la comprensión de las rutas metabólicas, el

metabolismo se divide clásicamente en varias etapas:
❑ Tres para el catabolismo y
❑ Tres para el anabolismo.
ETAPAS DEL CATABOLISMO

➢ ETAPA I: Comprende la digestión de las

grandes macromoléculas o biopolímeros a sus
moléculas precursoras o monómeros.

➢ ETAPA II: Los monómeros se convierten en un

reducido número de especies metabólicas
intermediarias más sencillas.

➢ ETAPA III: En esta última etapa, tanto el grupo

acetilo del acetil CoA como los demás
productos de la etapa anterior se canalizan
hacía una ruta catabólica final común, en la
que, en último término, pueden ser oxidados,
dando dióxido de carbono y agua.

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La C.T.E sirve para producir grandes cantidades de energía
en forma de ATP, gracias a la oxidación de las coenzimas
NADH y FADH2, que se originan en las rutas del
catabolismo, especialmente en la glucólisis, -oxidación y
ciclo de Krebs.
(Bioquímica conceptos esenciales, Feduchi, 2011)

La glucólisis y el ciclo de Krebs generan por sí una cantidad

relativamente baja de energía en forma de ATP.
Reducen en total:
10 moles de NAD+ a NADH y
2 moles de FAD a FADH2 por mol de glucosa.

La re-oxidación de estos transportadores electrónicos

reducidos genera la mayor parte de la energía necesaria
para la síntesis de ATP.

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CADENA TRANSPORTADORA DE ELECTRONES Y FOSFORILACIÓN OXIDATIVA
COMPLEJOS PROTEICOS
EN ESTE PRÁCTICO SE REVISARÁ:

➢ Funcionamiento del Complejo IV (Citocromo Oxidasa) que es capaz de

oxidar al p-fenilendiamina (p FDH2 )

CN-
Citocromo Oxidasa
p FDH2 p FD
(Estado Reducido) (Estado Oxidado)
e- Color Oscuro
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.
ANÁLISIS CUALITATIVO
1. Seguimiento de la reacción catalizada por el Complejo IV o Citocromo Oxidasa:
Prepare una batería de tubos debidamente marcados según la siguiente tabla:

- Mezcle bien el contenido de cada tubo e incube a 37ºC hasta cuando aparezca el complejo coloreado.
- Tome fotos a tiempo inicial y a tiempo 10 minutos.
 Seguimiento de la reacción catalizada por el Complejo IV o
Citocromo Oxidasa

Esperar 10 min

Blanco 1 2 3
EN ESTE PRÁCTICO SE REVISARÁ:

➢ Funcionamiento de la Succinato Deshidrogenasa, que es capaz de reducir al Azul

de metileno (indicador).

MeB MeB-H2 Azul de Metileno (MeB)

Estado Oxidado Estado Reducido

Color Azul Incoloro

MALONATO
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
2. Seguimiento de la reacción catalizada por la Succinato Deshidrogenasa:

✓ Prepare una batería de tubos debidamente marcados según la siguiente tabla:

✓ - Antes de agregar el extracto enzimático, deje los tubos incubando a 37ºC durante 10
minutos, y sin retirarlos del baño termorregulado, agregue el extracto enzimático, inmediatamente
agite bien y coloque el aceite mineral.

✓ Espere a que los tubos se decoloren.

✓ Tomar fotografía al inicio y al finalizar el ensayo.
✓ Comente los resultados obtenidos en cada tubo.
 Seguimiento de la reacción catalizada por la
Succinato Deshidrogenasa

Incubar a 37°C
y esperar 10 min

Blanco 1 2 3 4 Incubar a 37°C

y esperar 10 min