ENSAYO:

“MEDIOS DE CULTIVO Y TINCIONES”

MICROBIOLOGÍA.

INGENIERÍA BIOQUÍMICA.

PRESENTA:

EDWIN ARIEL JIMÉNEZ TRINIDAD.

7° “B”

MAESTRA:

CARLA GABRIELA VARGAS VÁZQUEZ.

JIQUILPAN MICH. A 4 DE OCTUBRE DE 2023.

 MEDIOS DE CULTIVO Y TINCIONES.

MEDIOS DE CULTIVO.
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros
componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los
microorganismos. La diversidad metabólica de estos es tan grande que la variedad
de medios de cultivo es enorme, no existiendo un medio de cultivo universal
adecuado para todos ellos, ni siquiera refiriendonos a las bacterias con exclusividad.
Existen diferentes tipos de medios de cultivos que son importantes ya que permiten
el crecimiento y desarrollo de microorganismos utilizados en laboratorios clínicos e
industriales, especialmente en el área de microbiología.
 Agar. Se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios de
cultivo. En el agar bacteriológico el componente dominante es un
polisacárido que se obtiene de ciertas algas marinas y que presenta la
indudable ventaja de que a excepción de algunos microorganismos marinos,
no es utilizado como nutriente. Un gel de agar al 1-2% se licua alrededor de
los 100ºC y se gelifica alrededor de los 40ºC, dependiendo de su grado de
pureza.
 Estractos. Su preparación consiste en que ciertos órganos o tejidos
animales o vegetales (p.e. carne, hígado, cerebro, semillas, etc.) son
extraídos con agua y calor y posteriormente concentrados hasta la forma final
de pasta o polvo. Estos preparados deshidratados son a menudo empleados
en la elaboración de los medios de cultivo. Los más utilizados son el extracto
de carne, de levadura y el de malta.
 Peptonas. Son mezclas complejas de compuestos orgánicos, nitrogenados
y sales minerales, que se obtienen por digestión enzimática o química de
proteínas animales o vegetales (soja caseína carne, etc.). Las peptonas son
muy ricas en pépticos y aminoácidos, pero pueden ser deficientes en
determinadas vitaminas y sales minerales.
 Fluidos corporales. Con frecuencia es necesario añadir a los medios de
cultivo de algunos patógenos sustancias como sangre completa, sangre
 desfibrilada, plasma o suero sanguíneo, sobre todo para conseguir el primer
aislamiento a partir del hospedador. La sangre no puede ser esterilizada, y
por tanto debe de ser obtenida en condiciones asépticas directamente de un
animal sano, y adicionada al medio de cultivo después de que este haya sido
auto clavado. Los fluidos corporales no solo aportan factores de crecimiento
sino que también aportan sustancias que neutralizan a inhibidores del
crecimiento de algunas bacterias.
 Sistemas amortiguadores. Para mantener el pH dentro del rango optimo
del crecimiento bacteriano a veces, es necesario añadir algunos
componentes al medio de cultivo. Debido a que la mayoría de as bacterias
son neutrófilas, se suelen emplear sales del tipo de los fosfatos bisodicos ò
bipotásicos u otras sustancias como las peptonas para prevenir la desviación
del pH.
 Agentes reductores. Con el objetivo de crear en los medios de cultivo
condiciones que permitan el desarrollo de los gérmenes microaerofilos ò
anaerobios se añaden estos agentes reductores siendo, los mas empleados
la cisteina y el tioglicolato entre otros.
 Indicadores de PH. Con el objeto de poder detectar variaciones en el pH
debido a fermentaciones u otros procesos, se hace necesario a veces añadir
indicadores acido-base que nos lo indiquen.
 Agentes selectivos. La adición de determinadas sustancias a un medio de
cultivo puede convertirlo en selectivo. Así, por ejemplo, la adición de cristal
violeta, sales biliares, azida sodica, telurito potasico, antibióticos, etc., a la
concentración adecuada hará que actúen como agentes selectivos frene a
determinados microorganismos.
 TINCIONES.
Son procedimientos para teñir las bacterias; permiten observar coloreadas las
bacterias que normalmente no serían visibles al microscopio óptico por ser
transparentes. Las tinciones se efectúan generalmente sobre bacterias desecadas
y calentadas para coagular sus proteínas (fijación).
Existen varios tipos de tinciones, los mas communes son las siguientes:
 Tinción de Gram. Es un procedimiento de gran utilidad empleado en los
laboratorios donde se manejan pruebas microbiológicas. Es definida como
una tinción diferencial, ya que utiliza dos colorantes y clasifica a las bacterias
en dos grandes grupos: bacterias Gram negativas y bacterias Gram positivas.
Fue desarrollada por el científico danés Hans Christian Gram en 1884; hoy
en día, sigue siendo una de las tinciones más utilizadas universalmente
debido a lo económico, sencillo y eficaz que resulta. 2 Los principios de la
tinción de Gram están basados en las características de la pared celular de
las bacterias, la cual le confiere propiedades determinantes a cada
microorganismo. La pared celular de las bacterias Gram negativas está
constituida por una capa fina de peptidoglicano y una membrana celular
externa, mientras que las bacterias Gram positivas poseen una pared celular
gruesa constituida por peptidoglicano, pero no cuentan con membrana
celular externa; así pues, la composición química y el contenido de
peptidoglicano en la pared celular de las bacterias Gram negativas y Gram
positivas explica y determina las características tintoriales.
 Tinción de Wright. Es una técnica que se emplea generalmente para la
diferenciación de elementos celulares de la sangre y es clasificada como una
tinción policromática, dado que puede teñir compuestos ácidos o básicos
presentes en una célula. 0 Fue desarrollada por el patólogo James Homer
Wright en 1902 a partir de la modificación de la ya existente tinción de
Romanowsky, utilizada para diferenciar elementos formes de la sangre. Esta
tinción tiene diversos usos en microbiología; en la parasitología, se le emplea
en la búsqueda de hematozoarios como Plasmodium spp. El reactivo de
Wright está compuesto por eosina y azul de metileno, cuando éste se oxida
 se conoce como azur B a una concentración de 0.8 g/L empleando como
solvente alcohol metílico. La eosina es un colorante ácido que tiene afinidad
por componentes alcalinos. Existen dos compuestos conocidos como eosina
y que están intrínsecamente relacionados: eosina Y, conocida también como
tetrabromofluoresceína –o, comúnmente, eosina amarilla–, y la eosina B,
conocida como dibromodinitrofluoresceína o eritrosina B azulada
 Tinción de Ziehl-Neelsen. Es la técnica comúnmente usada en el
diagnóstico rutinario de tuberculosis. Esta tinción permite diferenciar a las
bacterias en dos grupos: aquellos que son capaces de resistir la decoloración
con alcohol-ácido y aquellos que no lo son. La sensibilidad de esta tinción
para identificar bacilos ácido-alcohol resistentes es del 74% y la especificidad
del 98%, teniendo un límite de detección de 5,000-10,000 bacilos/mL de
muestra. El agente etiológico de la tuberculosis fue descrito por Heinrich
Hermann Robert Koch, quien, basándose en las características de las
micobacterias, desarrolló una de las primeras tinciones utilizando azul de
metileno seguido de la tinción de Bismarck.
 Tinción negative. Fue desarrollada originalmente para microscopia de luz
con el fin de rodear y delinear las bacterias no teñidas u otros materiales
biológicos. Este método es muy útil, aunque está limitado por la presencia de
un fondo oscuro que no permitirá la correcta identificación de forma nítida y
detallada de los componentes de dichas estructuras. En microbiología, la
tinción negativa proporciona un resultado presuntivo de la presencia de
Cryptococcus neoformans, microorganismo causante de meningitis en
pacientes con inmunosupresión, siendo la técnica más utilizada para poner
de manifiesto su cápsula.
 Tinción de azul algodón de lactofeno. La tinción de azul algodón de
lactofenol no es considerada una tinción diferencial, sin embargo, posee
características tintoriales que permiten observar cada uno de los
componentes fúngicos y apreciar fácilmente las estructuras para una
adecuada identifi cación.
 CONCLUSIONES.
Para concluir podemos decir que los medios de cultivo son practicas muy
importantes que se hacen en las industrias de alimentos, por lo que son muy útiles
para poder observar y crear nuevos microorganismos en los que queremos ver
como actuan e incluso encontrar nuevos microorganismos. Constituyen el aporte de
nutrientes indispensables para el crecimiento de los microorganismos, y su
composición precisa dependerá de la especie que se quiera cultivar.
Por otro lado, las técnicas de tinción tienen como finalidad crear un contraste entre
la célula y el medio que la rodea. Una de las más importantes, por tanto su aplicación
clínica y por su practicidad, es la tinción de Gram. Esta técnica es fundamental en
el estudio de la microbiología, y el conocimiento de su correcta realización es
practicamente obligatorio.