“Año de la unidad, la paz y el desarrollo”

UNIVERSIDAD NACIONAL TORIBIO RODRÍGUEZ DE MENDOZA DE

AMAZONAS

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
ASIGNATURA:
MICROBIOLOGÍA MÉDICA BÁSICA
DOCENTE:
CHRISTIAN JUNNIOR CAMPOS MONTEZA
ESTUDIANTES:
 BARBOZA IRIGOIN CRISTIAN
 FERNÁNDEZ COLLANTES CAREN MILEENE IBETHS
 GUERRA NAVARRO JHON EDWAR
 LARA RODRIGUEZ DEISY
 SANDOVAL CUYAN OLENKA MARICRUZ
 TENAZOA PORTOCARRERO EDDIE MAURICIO
INFORME:
PRÁCTICA 07 - DIAGNÓSTICO DE TUBERCULOSIS

CHACHAPOYAS
2023- II
I.) INTRODUCCIÓN.

El diagnóstico temprano y preciso de la tuberculosis es esencial para controlar

la propagación de esta enfermedad infecciosa. Una de las técnicas utilizadas
para detectar la presencia de Mycobacterium tuberculosis, el agente causante
de la tuberculosis, es la coloración Ziehl Nelseen.
La técnica de coloración Ziehl Nelseen se basa en la propiedad de las bacterias
resistentes al ácido-alcohol, como Mycobacterium tuberculosis, de retener un
colorante fucsina básico incluso después de ser sometidas a la acción de un
agente de decoloración, como el ácido-alcohol. Esta técnica permite teñir las
bacterias de color rojo intenso, lo que facilita su identificación y diagnóstico
en muestras clínicas.
Además, la coloración Ziehl Nelseen tiene varias ventajas y desventajas en su
aplicación para el diagnóstico de tuberculosis, por ejemplo, en ventajas
tenemos, la rapidez de la técnica de coloración Ziehl Nelseen ya que este
permite obtener resultados en un tiempo relativamente corto, lo que facilita un
diagnóstico temprano y una intervención oportuna. También, la técnica es
relativamente sencilla de realizar y no requiere equipos o reactivos
especializados, lo que la hace accesible en diferentes entornos de laboratorio
y lo más importante la Identificación visual, ya que permite la identificación
visual de las bacterias ácido-alcohol resistentes, como Mycobacterium
tuberculosis, a través de la observación microscópica directa. Esto facilita la
detección de la presencia de la bacteria en muestras clínicas.
Como algunas desventajas tenemos, este reactivo limitada la sensibilidad,
pues este puede variar y ser limitada, especialmente en casos de tuberculosis
primaria y extrapulmonar. La presencia de un número suficiente de bacilos
ácido-alcohol resistentes en la muestra es necesario para obtener un resultado
positivo, lo que puede afectar la sensibilidad de la técnica. También este nos
puede dar como resultado posibles falsos negativos, ya que una tinción
negativa no excluye la presencia de tuberculosis, pues factores como el tipo
de muestra y la población estudiada pueden influir en los resultados. Por lo
tanto, se recomienda el procesamiento de varias muestras para aumentar la
sensibilidad de la técnica, otras más por agregar también está la dependencia
de la habilidad del observador, ya que la interpretación de los resultados de la
 coloración Ziehl Nelseen puede depender de la habilidad y experiencia del
observador, lo que puede introducir cierto grado de subjetividad en el
diagnóstico.
Es importante tener en cuenta que estas ventajas y desventajas pueden variar
dependiendo del contexto específico de aplicación y las condiciones del
laboratorio.
En este informe de laboratorio, se presentarán los procedimientos y resultados
obtenidos al aplicar la técnica de coloración Ziehl Nelseen para el diagnóstico
de tuberculosis en las muestras clínicas.

II.) OBJETIVOS.

 Demostrar a través de la prueba rápida de esputo, la existencia de colonias

m. Tuberculosis, para uso de la práctica clínica
 A través de agar Ogawa y medios de crecimientos, evaluar la existencia
de m. Tuberculosis mediante su crecimiento en cultivo (prueba de alta
sensibilidad), con registro de 8 semanas, para la correcta evaluación del
paciente en futuras prácticas clínicas.
 Dar seguimiento a las pruebas realizadas, dado la baja sensibilidad de la
prueba de baciloscopia y el tiempo de espera del estudio por cultivo

III.) MARCO TEÓRICO.

Pérez, M. & Tuñez, V. & García, M. & Lado, F. (2002). Explicarón sobre
la Tuberculosis diciendo lo siguiente, la tuberculosis es una enfermedad
humana causada por bacterias del género Mycobacterium. Dentro de este
género, hay tres especies que pertenecen al complejo M. tuberculosis: M.
tuberculosis, M. bovis y M. africanum. M. tuberculosis es la especie más
comúnmente aislada, M. bovis produce una enfermedad clínicamente
indistinguible de la causada por M. tuberculosis, y M. africanum causa
enfermedad en África tropical y se considera una forma intermedia entre M.
tuberculosis y M. bovis.
Arteta, A. & Arias, L. & Cavidad, C. (2022). Dijeron que la tuberculosis es
una enfermedad crónica y contagiosa caracterizada por la formación de
granulomas y puede ser potencialmente mortal. Es causada por bacterias del
 género Mycobacterium, que son Gram positivas y resistentes al ácido-alcohol.
Esta enfermedad afecta principalmente los pulmones.
Graterol, O. & Barreto, M. & Ramos, N. & Fernández, Sandra. & Da
Mata, O. & Angulo, J. (2016). Explicaron sobre la coloración Ziehl Nelseen,
expresando lo siguiente, la técnica de tinción de Ziehl Neelsen (ZN) es
utilizada para teñir microorganismos y facilitar la identificación de patógenos,
como Mycobacterium tuberculosis, que es el causante de la tuberculosis. Esta
técnica requiere el uso de tres soluciones: Carbol Fucsina Fenicada (también
conocida como Fucsina Básica), Azul de Metileno al 1% y una Solución
Decolorante.
Escalante, M. & Pérez, N. & Sánchez, G. & Pedragosa, V. & Candala, D.
& Berrocal, A. (2021). Explicaron que la tinción Ziehl Neelsen (ZN) es una
técnica de coloración diferencial utilizada para identificar bacilos ácido-
alcohol resistentes (BAAR), que incluyen micobacterias como los agentes
causantes de enfermedades como la tuberculosis (TBC) y la lepra.
Desarrollada en 1883 por Franz Ziehl y Friedrich Neelsen, esta técnica permite
un diagnóstico rápido y presuntivo de la infección por micobacterias,
especialmente la tuberculosis.
Expresado todo lo anterior podemos concluir que la tuberculosis es una
enfermedad altamente potencial y de gran incidencia en la actualidad pero que
puede ser diagnosticada gracias a la coloración Ziehl Nelseen y ser tratada
correspondientemente y más aún si es temprana.

IV.) MATERIALES Y MÉTODOS

A. Materiales de la prueba de esputo.

1.) Muestra de esputo 2.) Hoja de registro. 3.) Mechero

 4) Aplicador 5) Portaobjetos 6.) Asa bacteriológica
de madera

PROCEDIMEINTO:

1.) Colocar una pequeña cantidad de 2.) Con la asa bacteriológica

esputo con la ayuda del aplicador esparcilo por la lamina
de madera en la lamina portaobjetos para realizar el
portaobjeto. extendido; flamear la lamina
hasta que se seque para
luego llevarle ala
coloración.

 PROSESO PARA LA COLORACIÓN DE ZIEHL NEELSEN.

 1.) Con ayuda de un soporte 2.) Cubrir la lamina con colorante
echo de papel sostener la lamina fucsina basica fanicada todo el
con el extendido hacia arriba. extendido.

3.) Llebarlo al mechero y 4.) Pasados los 5 minutos con

calentar asta que salga humo cuidado colocamos el alcohol
este proceso lo realizamos tres ácido y dejamos reposar por 2
veces y dejar reposar 5 minutos. minutos

5.) Pasados los dos minutos 6.) Para finalizar se lava con agua y
con cuidado se lava la muestra se deja secar.
y colocamos azul de metileno y
se deja reposar por un minuto
7.) Cuando la muestra este completamente
seca se coloca el aceite de inverción para
luego llevarlo al microscopio par poder
observarlo.

RESULTADO:

Resultado negativo para tuberculosis y se

muestra la presencia de leucocitos
(infección)
B. Materiales para la siembra en el cultivo OGAWA

Hidróxido de Medio ogawa Estufa Muestra de esputo

NaOH. esterilizadora

Pipeta Pasteur Jeringa Cabina de bioseguridad

descartable.

PROCEDIMIENTO:

 En la cabina de bioseguridad con  Llevar a una estufa

la pipeta Pasteur coger 1ml de esputo y esterilizadora a 37°C y dejar
colocar en hidróxido de sodio para de 15 a 20 minutos.
descontaminar la muestra lo tapamos y
homogenizamos.
 Siembra en el medio OGAWA.

 Pasado los 20 minutos en la

cabina de bioseguridad
extraemos la muestra de
esputo + hidróxido de sodio
con la ayuda de la jeringa
una cantidad de 0.1ml.

 Se ase el cultivo en medio

OGAWU finalmente tapar
y rotularlo el medio.

 Se lo lleva a incubarlo por

8 semanas el registro se
hace cada 7 días; por lo
tanto, los resultados se
verán dentro de 8 semanas

C. Materiales para el diagnóstico de tuberculosis con muestras figadas:

Microscopio Muestra fijadas

RESULTADOS:
  (3+) indica más de 10  Resultado negativo no se
BAARR/por campo en 20 observa BARR en 100
campos campos.

V.) CONCLUSIONES

En conclusión, las pruebas diagnósticas para la detección de m. Tuberculosis,

tales como la baciloscopia o el cultivo en agar, son muy importantes, tanto por
su especificidad como su sensibilidad. Y nos apoyamos de estos en la práctica
clínica, por el tiempo en concreto, que nos permite evaluar y dar tratamiento
a un paciente, el cual pudiese estar creando nuevas colonias de m.
Tuberculosis en tejidos propensos a ser invadidos, tales como pulmón, así
como hígado, y meninges.
Por otra parte, es importante indicar que se debe evaluar inicialmente de forma
correcta las características de la muestra del paciente (esputo), los cuales irán
plasmados en un formato de solicitud de cultivo de tbc, de tal forma que se
detalle la morfología de este. Y en la práctica realizada se pudo concretar de
forma específica, y siendo negativa la prueba a la baciloscopia, se pudo
aprender a realizar este tipo de procedimiento, y cuya práctica en las labores
médicas a realizar será de gran importancia, por lo agresivo que puede llegar
a ser la micobacteria tuberculosis, una vez invadido el tejido vivo.

VI.) REFERENCIAS

 Pérez, M. & Tuñez, V. & García, M. & Lado, F. (2002). Diagnóstico

Microbiológico de la Tuberculosis. Elsevier. https://www.elsevier.es/es-
revista-medicina-integral-63-articulo-diagnostico-microbiologico-
tuberculosis-13029946
 Arteta, A. & Arias, L. & Cavidad, C. (2022). Coloración de Ziehl-Neelsen
en el laboratorio de patología: rendimiento y contribución al diagnóstico de
micobacterias en el lavado broncoalveolar. Pubmed.
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC9536814/

 Graterol, O. & Barreto, M. & Ramos, N. & Fernández, Sandra. & Da Mata,
O. & Angulo, J. (2016). Diseño del Kit de Tinción Ziehl Nelseen del Instituto
Nacional de Higiene Rafael Range. Scielo.
https://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0798-
04772016000100003#:~:text=La%20tinci%C3%B3n%20de%20Ziehl%20N
eelsen,y%20Soluci%C3%B3n%20Decolorante%2C%20que%20se

 Escalante, M. & Pérez, N. & Sánchez, G. & Pedragosa, V. & Candala, D.

& Berrocal, A. (2021). Detección del Género Mycobacterium con Tinción
Diferencial de Ziehl Nelseen. Revista Sanitaria de Investigación.
https://revistasanitariadeinvestigacion.com/deteccion-del-genero-
mycobacterium-con-tincion-diferencial-de-ziehl-neelsen/