TINCION

UNIVERSIDAD ESTAL DEL VALLE DE

TOLUCA
T i n c I o n
LIC. EN QUIROPRÁCTICA

Elaborado : BELTRÁN JARDÓN ITZEL NATALIA

Marzo 2021

GRAM
g r a m

En la década de 1880, en un
Historia hospital de Berlín trabajó el
médico danés Hans Christian
Gram, quién desarrolló la más
importante tinción bacteriológica. Él desarrolló una
técnica de tinción en la cual observaba bacterias en
tejidos de pulmones de pacientes que morían de
neumonía, dichas bacterias presentes en la muestra
tomaban diferentes coloraciones cuando se les
colocaban distintos colorantes. Gram debía realizar
un frotis en una lámina porta-objetos y dejarlo
secar al aire, fijar con la ayuda de un mechero y,
posteriormente, agregar solución de cristal violeta.
Lavar con agua y añadir solución de Lugol, el cual
actúa como mordiente. Luego, agregar etanol para
decolorar y, a continuación, dejar secar y observar
al microscopio. Básicamente esta es la metodología
que conocemos hoy en día; sin embargo, observamos
que Gram no utilizó un colorante de contraste. En
efecto, años más tarde el patólogo alemán Carl
Weigert, director de la Fundación Senckenberg de
Frankfurt, añadió el paso final de este método,
utilizando para ello safranina, la cual permitía la
observación, con mayor nitidez, de las bacterias
Gram-negativas. El procedimiento que desarrolló,
ahora llamado tinción de Gram, demostró dos
categorías generales de bacterias que causaban
neumonía: algunas se teñían de violeta y otras se
teñían de rojo.

La tinción de Gram es de gran

utilidad para realizar el examen
directo de muestras clínicas,
porque permite determinar la
calidad de ellas, la respuesta
inflamatoria, la naturaleza y
cantidad de microorganismos
presentes y el germen predominante
Aplicaciones en una infección mixta o con
muestras contaminadas con biota
normal. Adicionalmente, se puede correlacionar el
resultado del examen directo con el resultado de los
cultivos y de esta manera, disponer de un adecuado
control de calidad.
❖ El diagnóstico rápido de microorganismos
presentes en fluidos corporales estériles, como
el líquido cefalorraquídeo, líquido pleural,
peritoneal o articular, es de gran importancia
para el diagnóstico de infecciones que, en estas
localizaciones, son generalmente graves y con
secuelas.
La tinción de Gram constituye una herramienta de
gran utilidad en el diagnóstico etiológico; sin
embargo, la sensibilidad de esta técnica es variable
según el tipo de muestra y la carga bacteriana
presente en ella. La concentración de la muestra,
como un paso previo a su tinción mejora el
rendimiento, por lo que es recomendable su uso de
rutina
❖ Diagnóstico de vaginosis bacteriana. Nugent y
col, idearon un método de cuantificación para
mejorar la correlación del Gram con la vaginosis
bacteriana. Cada morfotipo bacteriano encontrado
 en la coloración (Bacilos grampositivos:
Lactobacillus sp., cocobacilos Gram variables:
G. vaginalis + Bacteroides sp. y bacilos curvos
Gramnegativos: Mobiluncus) es cuantificado de
1+ a 4+. Una vez establecida la cantidad de
bacterias se les asigna un puntaje: Si la suma
de los puntajes es 7 o más, es compatible con
vaginosis bacteriana; 4 a 6 es denominado
‘intermedio’ y 0 a 3, normal (20). Una notable
ventaja del Gram vaginal, es que ha demostrado
muy buena correlación con el diagnóstico
clínico, siendo, además, rápido y de bajo costo.
Además, permite observar alteraciones de la
flora vaginal sin que existan evidencias
clínicas de vaginosis bacteriana, razón por la
cual ha sido considerado por diversos autores
como una técnica objetiva, con un nivel elevado
de reproducibilidad en las distintas poblaciones
estudiadas
❖ Diagnóstico precoz de la gonorrea y su
tratamiento.
La sensibilidad de la tinción de Gram para
detectar N. gonorrrhoeae es próxima al 100% en
los casos sintomáticos de uretritis, aunque solo
del 50% al 70% en pacientes asintomáticos. La
sensibilidad en ambos grupos se acerca al 100%,
es decir, que los resultados falsos positivos
son excepcionales. El diagnóstico presuntivo de
infección por Neisseria gonorrhoeae en hombres
sintomáticos, se realiza a partir de frotis de
exudados uretrales coloreados por Gram, al
observarse los típicos diplococos Gram negativos
dentro de leucocitos polimorfonucleares,
representando una herramienta clave para el
diagnóstico den enfermedades de transmisión
sexual.
 ❖ Pasos en la técnica de
tinción de Gram
1. Hacer el frotis de
manera regular
Desarrollo de la técnica
2. Fijarlo a la flama
3. Cubrir con cristal
violeta durante 1 minuto y después lave
ligeramente con agua corriente
4. Cubrir con yodopovidona (Lugol) durante 1 minuto
5. Lavara con agua corriente
6. Decolorar con alcohol-acetona (1:1)
7. Lavar con agua corriente
8. Cubrir con safranina durante 30 segundos
9. Lavar con agua corriente
10. Dejar secar y observar al microscopio

FUENTES
https://www.revista-portalesmedicos.com/revista-medica/coloracion-gram-diagnostico-
microbiologico/

http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562003000200020

https://www.ugr.es/~pomif/pom-bac/pb-iii/pb-iii-3-gram.htm

https://www.google.com/url?sa=t&source=web&rct=j&url=https://www.medigraphic.com/pdfs/cos
metica/dcm-
2018/dcm182n.pdf&ved=2ahUKEwis04mDidnvAhVimK0KHWf1D8MQFjABegQIAxAG&usg=AOvVaw3d
uu2XgA8w092fUMLMXwYB&cshid=1617150710448