UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SAN LUIS POTOSÍ

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA II

NOMBRE DE LA PRÁCTICA: Practica 3. Digestión de proteínas por acción de pepsina y

…………………………………..tripsina

GRUPO: B HORA: martes 7:00-10:00. EQUIPO: 2

FECHA DE ENTREGA: 12/10/2021

INTEGRANTES:

1.López Villagrán Daniela Montserrat

2.Monjarás Ruiz Cristina

3.Montejano Almaguer Hilda Adriana

CALIFICACIÓN
CRITERIO EVALUADO VALOR DEL CRITERIO (%)
OBTENIDA (%)
PRACTICA PRACTICA NO
1 2
PRESENCIAL PRESENCIAL
Cálculos previos a la practica 10 10
Diagrama de flujo/Participación 5 10
Habilidad en el manejo de
20 ---------
material y equipo de laboratorio
Reporte* 25 30
Discusión y conclusiones de la
40 50
práctica
TOTAL 100 100
 3.6 Reporte de la práctica

1. Esquematice el mecanismo de activación de la pepsina.

Gastrina

Células parietales Células principales

HCl pepsinógeno

Precursor inactivo o
zimógeno, se convierte a
pepsina pepsina activa por
ruptura autocatalítica a
pH bajo

Hidroliza proteínas
ingeridas en los
enlaces peptídicos
Proteasas y
que están en el lado
peptonas
amino-terminal de
F.W, Y.

2. Esquematice el mecanismo de activación de la tripsina.

A medida que el contenido La secretina La entrada de

ácido del estómago pasa al estimula al páncreas aminoácidos al
secretina
intestino delgado para que secrete duodeno produce
desencadena bicarbonato la liberación de

Estimula la secreción de enzimas

El tripsinógeno se pancreáticos como: tripsinógeno, el
colecistoquinina
convierte a su forma quimotripsinógeno y las
activa procarboxipeptidadas A y B

La tripsina libre Cataliza la conversión

Tripsina por la
enteroptidasa de más tripsinógeno
en tripsina
Activa también el
quimotripsinogeno, las
procarboxipetidasas y las
proelastasa
3. Calcule la concentración de los tubos la curva patrón de triptófano en cada tubo en mg/dL y
complete el siguiente cuadro:

Datos:
1𝑔 1𝑚𝑔 100𝑚𝐿
[Std triptófano]= 1%g/m= 𝑥 𝑥 = 1000mg triptófano/dL
100𝑚𝐿 0.001𝑔 1𝑑𝐿

1𝑑𝐿
Vol. Std1 = 0.025 mL 𝑥 = 2.5x10-4 dL
100𝑚𝐿

1𝑑𝐿
Vol. Std2 = 0.05 mL 𝑥 100𝑚𝐿 = 5x10-4 dL
1𝑑𝐿
Vol. Std3 = 0.075 mL 𝑥 100𝑚𝐿 = 7.5x10-4 dL
1𝑑𝐿
Vol. Std4 = 0.1mL 𝑥 100𝑚𝐿 = 1x10-3 dL
1𝑑𝐿
Vol. Patrón = 5 mL 𝑥 100𝑚𝐿 = 0.05 dL

[Patrón] =

Fórmula:

(Cstd)(Vstd)=(Cpatrón)(Vpatrón)

Despeje:
(𝐶𝑠𝑡𝑑)(𝑉𝑠𝑡𝑑)
𝐶𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛 =
𝑉𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛

Sustitución:
𝑚𝑔𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡ó𝑓𝑎𝑛𝑜
(1000 )(2.5𝑥10−4 𝑑𝐿 𝑠𝑡𝑑)
𝑑𝐿 𝑠𝑡𝑑
𝐶𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛 1 = = 5 mg triptófano/dL
0.05 𝑑𝐿 𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛

𝑚𝑔𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡ó𝑓𝑎𝑛𝑜
(1000 )(5𝑥10−4 𝑑𝐿 𝑠𝑡𝑑)
𝑑𝐿 𝑠𝑡𝑑
𝐶𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛 2 = 0.05 𝑑𝐿 𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛
= 10 mg triptófano/dL
𝑚𝑔𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡ó𝑓𝑎𝑛𝑜
(1000 )(7.5𝑥10−4 𝑑𝐿 𝑠𝑡𝑑)
𝑑𝐿 𝑠𝑡𝑑
𝐶𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛 3 = = 15 mg triptófano/dL
0.05 𝑑𝐿 𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛

𝑚𝑔𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡ó𝑓𝑎𝑛𝑜
(1000 )(1𝑥10−3 𝑑𝐿 𝑠𝑡𝑑)
𝑑𝐿 𝑠𝑡𝑑
𝐶𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛 1 = 0.05 𝑑𝐿 𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛
= 20 mg triptófano/dL

Std Triptófano 1% (tubos) Absorbancia Concentración mg/dL

1 0.543 5
2 0.725 10
3 0.889 15
4 0.911 20

4. Elabore la curva patrón de triptófano, graficando absorbancia vs concentración (mg/dl).

Ecuación de la recta: y=mx+b

Donde: y = Abs m = 0.02536 Abs*dL/mg x = [Triptófano] mg/dL b = 0.45 Abs

Entonces: Abs= (0.02536 Abs*dL/mg)( [Triptófano] mg/dL) + 0.45 Abs

5. Obtenga la concentración de aminoácidos libres por acción de la tripsina y pepsina a los diferentes
tiempos (interpolando o por regresión lineal) utilizando la curva patrón del triptófano. Complete el
siguiente cuadro:

Tiempo de incubación Pepsina Tripsina

(min) Abs Conc. mg/dl Abs Conc. mg/dl
10 0.836 15.221 0.387 -2.484 ->
l2.484l
20 1.239 31.112 0.503 2.090
30 ----------- --------- 0.629 7.058
40 1.371 36.317 0.820 14.590
50 1.594 45.110 1.352 35.567
 Concentración pepsina 10 minutos

dL mg 𝑚𝑔 𝐴𝑏𝑠 − 0.45 𝑎𝑏𝑠

Abs = (0.02536 Abs ∗ ) (triptofano ) + 0.45 Abs [𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]=
mg dl 𝑑𝑙 𝑑𝑙
0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗
𝑚𝑔
10 minutos
𝑚𝑔 0.387 − 0.45 𝑎𝑏𝑠
𝑚𝑔 𝐴𝑏𝑠 − 0.45 𝑎𝑏𝑠 [𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]=
𝑑𝑙 𝑑𝑙
[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]= 0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗ 𝑚𝑔
𝑑𝑙 𝑑𝑙
0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗
𝑚𝑔
𝑚𝑔 𝑚𝑔 𝑚𝑔
[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ] = −2.484 → |2.484 |
𝑚𝑔 0.836 − 0.45 𝑎𝑏𝑠 𝑑𝑙 𝑑𝑙 𝑑𝑙
[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]=
𝑑𝑙 𝑑𝑙
0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗ 20 minutos
𝑚𝑔
𝑚𝑔 𝑚𝑔 𝑚𝑔 𝐴𝑏𝑠 − 0.45 𝑎𝑏𝑠
[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ] = 15.221 [𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]=
𝑑𝑙 𝑑𝑙 𝑑𝑙 𝑑𝑙
0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗ 𝑚𝑔
20 minutos
𝑚𝑔 0.503 − 0.45 𝑎𝑏𝑠
𝑚𝑔 𝐴𝑏𝑠 − 0.45 𝑎𝑏𝑠 [𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]=
𝑑𝑙 𝑑𝑙
[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]= 0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗ 𝑚𝑔
𝑑𝑙 𝑑𝑙
0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗ 𝑚𝑔
𝑚𝑔 𝑚𝑔
[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ] = 2.090
𝑚𝑔 1.239 − 0.45 𝑎𝑏𝑠 𝑑𝑙 𝑑𝑙
[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]=
𝑑𝑙 𝑑𝑙
0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗ 𝑚𝑔 30 minutos

𝑚𝑔 𝑚𝑔 𝑚𝑔 𝐴𝑏𝑠 − 0.45 𝑎𝑏𝑠

[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ] = 31.112 [𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]=
𝑑𝑙 𝑑𝑙 𝑑𝑙 𝑑𝑙
0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗ 𝑚𝑔
40 minutos
𝑚𝑔 0.629 − 0.45 𝑎𝑏𝑠
𝑚𝑔 𝐴𝑏𝑠 − 0.45 𝑎𝑏𝑠 [𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]=
𝑑𝑙 𝑑𝑙
[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]= 0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗
𝑑𝑙 𝑑𝑙 𝑚𝑔
0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗ 𝑚𝑔
𝑚𝑔 𝑚𝑔
[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ] = 7.058
𝑚𝑔 1.371 − 0.45 𝑎𝑏𝑠 𝑑𝑙 𝑑𝑙
[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]=
𝑑𝑙 𝑑𝑙
0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗ 𝑚𝑔 40 minutos

𝑚𝑔 𝑚𝑔 𝑚𝑔 𝐴𝑏𝑠 − 0.45 𝑎𝑏𝑠

[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ] = 36.317 [𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]=
𝑑𝑙 𝑑𝑙 𝑑𝑙 𝑑𝑙
0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗ 𝑚𝑔
50 minutos
𝑚𝑔 0.820 − 0.45 𝑎𝑏𝑠
𝑚𝑔 𝐴𝑏𝑠 − 0.45 𝑎𝑏𝑠 [𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]=
𝑑𝑙 𝑑𝑙
[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]= 0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗ 𝑚𝑔
𝑑𝑙 𝑑𝑙
0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗ 𝑚𝑔
𝑚𝑔 𝑚𝑔
[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ] = 14.590
𝑚𝑔 1.594 − 0.45 𝑎𝑏𝑠 𝑑𝑙 𝑑𝑙
[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]=
𝑑𝑙 𝑑𝑙
0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗ 𝑚𝑔 50 minutos

𝑚𝑔 𝑚𝑔 𝑚𝑔 𝐴𝑏𝑠 − 0.45 𝑎𝑏𝑠

[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ] = 45.110 [𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]=
𝑑𝑙 𝑑𝑙 𝑑𝑙 𝑑𝑙
0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗
𝑚𝑔

𝑚𝑔 1.352 − 0.45 𝑎𝑏𝑠

[𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ]=
Concentración tripsina 𝑑𝑙 𝑑𝑙
0.02536 𝐴𝑏𝑠 ∗ 𝑚𝑔
dL mg
Abs = (0.02536 Abs ∗ ) (triptofano ) + 0.45 Abs 𝑚𝑔 𝑚𝑔
mg dl [𝑡𝑟𝑖𝑝𝑡𝑜𝑓𝑎𝑛𝑜 ] = 35.567
𝑑𝑙 𝑑𝑙
8. Bibliografía

[1]L.Nelson, D. (2009). Lehninger. Principios de bioquímica. En D. L. ox, Lehninger. Principios de

bioquímica (págs. 674-676). omega.

[2] Mathews, C. K., Van Holde, K. E., & Ahern, K. G. (2002). BIOQUÍMICA. P. 452. Pearson education.

[3] García de la Cruz, R. F., Santos Díaz, M. d., Ceballos Huerta, F. d., & Barrón Cruz, M. d. (2021).
Digestión de proteínas por acción de pepsina y tripsina. Pp.26-30 Universidad Autónoma de San Luis
Potosí. S.L.P.

[4]GIBA (2018). TECNICA ANALITICA PARA LA DETERMINACION DETERMINACIÓN DE PROTEINAS

SEGUN LOWRY. Obtenido el 11/10 del 2021 de tecnica-analitica-para-determinacion-de-proteinas-
segun-lowry.doc (live.com)