UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SAN LUIS POTOSÍ

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

LABORATORIO DE AGENTES MICROSCÓPICOS
Y EL SER HUMANO

Fecha de práctica: 14, 19, 20 y 21 de octubre del 2021

Fecha de entrega: 26 de octubre del 2021

Alumna: López Villagrán Daniela Montserrat

Clave única: 293781

Profesora: M.E. Juana Tovar Oviedo

Horario: martes, miércoles y jueves de 11:00 a 12:00
 Morfología general de los hongos

Sesión 1: Técnicas de cultivo

A) Inoculación por punto B) Exposición de placa

1. Con un asa doblada en 1. Colocar una caja de Petri con

ángulo recto y estéril raspar Agar Dextrosa Sabouraud (ASD)
un fragmento de hongo y otra con Agar Papa-dextrosa
presente en un alimento (PDA) en un mismo lugar

2. Inocular por picadura un 2. Destapar y exponer la caja al

tubo con Agar Dextrosa medio ambiente por 5-10 min
Sabouraud con pico de flauta

3. Tapar nuevamente la caja

3. Tapar el tubo con un trozo
de algodón cubierto con gasa 4. Registrar: Fecha, lugar
para permitir la entrada de O2 y hora del muestreo

4. Incubar a 28°C por 7 días 5. Incubar a 28°C por 2 días

Sesión 2: Observación de la morfología 1. Observar y describir la

micro y macroscópica
1. Transcurridos 5 días describir
las colonias de hongos obtenidas
en el tubo y cajas de petri
Tinción con azul de algodón
morfología macroscópica de la
colección de hongos
proporcionada por el profesor
2. Observar y describir la morfología
microscópica a partir de las laminillas
proporcionadas por el profesor

2. Colocar una gota de azul de

algodón en un portaobjetos

3. Colocar un segmento de cinta

adhesiva transparente en el
extremo de un aplicador de madera.

4. Tocar con la cinta una de

las colonias y colocarla
sobre la gota de colorante

5. Colocar sobre la
preparación un portaobjetos

6. Observar en el
microscopio a 40x
Nombre: Penicillium sp.

Descripción macroscópica:

Tipo de hongo: Filamentoso

Aspecto: Aterciopelado y polvoso

Relieve: Plano

Pigmentación: La zona aérea es de color verde olivo y

el reverso amarillo

Consistencia: Suave y membranosa

Descripción microscópica:

Tinción: Azul de algodón

Aumento: 40X

Tipo de micelio: Filamentoso, verdadero, macrosi-

fonado (2-4 μm), septado y hialino

Partes:
A Microconidios: redondos de 1-3 μm
B Fiálides: según la especie varían entre 3-6 μm
C Métula
D Conidióforo: de 5-10 μm de largo
Nombre: Aspergillus niger

Descripción macroscópica:

Tipo de hongo: Filamentoso

Aspecto: Granuloso

Relieve: Elevado sobre el medio de cultivo

Pigmentación: Entre el día 1 y 2 el micelio aéreo es

blanco-amarillento y conforme madura se observa un
efecto de sal y pimienta, con la superficie cubierta
por esporas negras y el reverso es tostado claro.

Consistencia: Suave

Descripción microscópica:

A Tinción: Azul de algodón

Aumento: 40X
D

Tipo de micelio: Filamentoso, verdadero

B
a) El nutritivo es macrosifonado (2-4 μm), septado y
hialino
b) El reproductivo es macrosifonado (4-8 μm), pocas
veces septado y hialino

Partes:
A Microconidios: redondos o elípticos, de 2-5 μm de
diámetro
B Fiálides: la primera serie es de gran tamaño y la
segunda suele ser pequeña
C Vesícula: redonda de 50-100 μm
D Conidióforo: largos de entre 100-250 μm
Nombre: Fusarium solani
Descripción macroscópica:

Tipo de hongo: Filamentoso

Aspecto: Velloso/atercipoelado

Relieve: Plano

Pigmentación: Colonia blanca con un esporodoquio

café al centro.

Consistencia: Suave

Descripción microscópica:

Tinción: Azul de algodón

Aumento: 40X
C
B
Tipo de micelio: Es filamentoso, verdadero, con hifas
delgadas, tabicadas y hialinas.

A
Partes:
A Macroconidio
B Fiálide
C Microconidio: Elípticos y con diámetro de 2-3 μm
Nombre: Rhizopus sp.

Descripción macroscópica:

Tipo de hongo: Filamentoso

Aspecto: Velloso, algodonoso y seco

Relieve: Elevado sobre el medio de cultivo

Pigmentación: Blanca

Consistencia: Suave

Descripción microscópica:

Tinción: Azul de algodón

Aumento: 10X

Tipo de micelio: Filamentoso, verdadero, macrosifo-

nado, cenocítico.

Partes:
A Rizoide (pueden estar unidos por estolones)
B Esporangio (contiene las esporangiosporas redon-
das de 6-8 μm de diámetro)
C Esporangióforo: largos, sin ramificar y con una
columnela ovoide pequeña, miden 100 a 200 μm de
diámetro
B

C
A
Nombre: Microsporum canis

Descripción macroscópica:

Tipo de hongo: Filamentoso

Tiempo de crecimiento: 6-8 días

Aspecto: Velloso, radial y plegado

Relieve: Plano

Pigmentación: Amarillo con micelio blanco y el

reverso presenta un pigmento amarillo-naranja que
difunde a través del medio

Consistencia: Suave

Descripción microscópica:

Tinción: Azul de algodón

Aumento: 40X

Tipo de micelio: Filamentoso, verdadero, con hifas

A delgadas, hialinas, tabicadas y ramificadas

Partes:
B A Macroconidios: 50 a 100 μm de largo por 10 a 20
μm de ancho, en forma hojas
B Hifas
Nombre: Trichophyton mentagrophytes

Descripción macroscópica:

Tipo de hongo: Filamentoso

Tiempo de crecimiento: 8-12 días

Aspecto: Granuloso, polvoso y seco

Relieve: Plano

Pigmentación: blanco-amarillento con pigmento

verde en el centro, el reverso es marrón-rojizo

Consistencia: Membranosa

Descripción microscópica:

Tinción: Azul de algodón

Aumento: 40X

Tipo de micelio: Filamentoso, verdadero, delgado,

tabicado y hialino.

Partes:
Solo se observan las hifas tabicadas y ramificadas.

Técnica de exposición de placa

La comparación entre el crecimiento de colonias fúngicas en Agar Dextrosa Sabouraud y Agar Papa-dextrosa no
arrojó resultados concluyentes, pues ambos medios desarrollaron colonias en diversas proporciones,
dependiendo del lugar de exposición y la especie encontrada.

Se detectó tanto crecimiento de colonias de levaduras (encerradas en rojo), como de colonias filamentosas.

Técnica de inoculación por punto

Los tubos que tenían un tapón que permitía el

paso de O2 tuvieron mayor desarrollo fúngico
tras 5 días de incubación.

Las características macroscópicas de la colección de hongos y los obtenidos por nosotros coincide con las de los
mohos, pues forman colonias filamentosas, es decir, forman una especie de costra recubierta de vello filamentoso
y son circulares en medios con agar.
Una vez que sabemos que los hongos de las muestras eran filamentosos, estos poseen características particulares
como micelios de tipo verdaderos, multicelulares (o filamentosos), macrosifonados y en su mayoría septados.
El resto de las características como si el micelio es hialino o pigmentado, así como las macroscópicas varían según
la especie e incluso por la madurez del hongo.
La identificación de levaduras en las cajas de Petri, se basó en que son colonias cremosas similares a las bacterianas.

Para complementar y reafirmar la identificación de la colección de hongos, se encontraron las siguientes similitudes
con la bibliografía:

En ocasiones las imágenes de Aspergillus niger no muestran la vesícula, porque está cubierta con una bola gruesa
de esporas (esféricas de 2-3 μm) que surgen de toda la superficie, como en la imagen obtenida en el laboratorio.
Penicillium sp. la colonia es inicialmente blanca y vellosa, a medida que se forman esporas pigmentadas se torna
verde, verde-azulada, amarilla o tostada y a menudo forma rugosidades radiales. Sobre sus micromorfología, los
conidióforos dan lugar a fiálides ramificadas que forman un cepillo o “penicillus”.

Ya que los microconidios de Fusarium solani forman cúmulos semejantes a los de Cephalosporium, la identificación
se efectúa gracias a la observación de macroconidios multicelulares en forma de hoz.

La periferia del margen de crecimiento de Microsporum canis tiene un manto amarillo limón, además en el análisis
microscópico los macroconidios poseen un extremo curvo, están dispersos y unidos lateralmente a las hifas.
 Las especies de Rhizopus producen rizoides inmediatamente adyacentes a
los esporangióforos (derivación nodal).
Las microaleuriosporas de Trichophyton mentagrophytes son globosas y
dispuestas en cúmulos con forma de racimo, pero, así como en la imagen
obtenida en el laboratorio rara vez se observan en los aislamientos, al igual
que las hifas espiraladas T. mentagrophytes. Azul de algodón (10X)

Aunque existen condiciones óptimas para cada especie:

Para los hongos saprobios la temperatura ideal está entre 20 y 30°C.

Los hongos son acidófilos, crecen mejor entre 5.6 y 6.8 de pH.
Tienen un requerimiento de humedad relativa del 60 al 90%
Requerimientos nutricionales: carbohidratos, Nitrógeno (orgánico e inorgánico), iones inorgánicos básicos
(Zn y Mg) y en ocasiones vitaminas como tiamina y biotina.
La luz no es vital, pero para algunas especies su alternancia con la oscuridad es importante para la
esporulación.

Los hongos que son contaminantes ambientales crecen en un promedio de 48 horas y su morfología completa
se presenta entre 3 y 5 días.

Ya que los medios (ASD y PDA) utilizados cumplen con las características nutricionales y de pH y que se respetaron
la temperatura (28°C), luz, humedad y tiempo de crecimiento, fue posible observar las características coloniales
habituales de hongos filamentosos y levaduras y no hubo gran diferencia en la cantidad desarrollada.

Ya que los hongos filamentosos son casi siempre aerobios estrictos, mientras que las levaduras pueden ser
anaerobias o anaerobias facultativas si son fermentadoras, en los tubos cerrados herméticamente, el crecimiento
fue muy lento.

No es correcto basar la identificación de un hongo en su aspecto macroscópico, pues hay muchas especies
dentro de un mismo género o incluso géneros que comparten estas características, por ello es importante
hacer un análisis microscópico exhaustivo y complementarlo tomando en cuenta las condiciones en las que
se ha desarrollado.
Observar la maduración de los hongos es otra forma en la que podemos ayudarnos a diferenciarlos, pues,
aunque dos o más puedan tener las mismas características macroscópicas iniciales, en algún momento puede
cambiar su pigmentación, relieve y consistencia.
Se debe desarrollar la capacidad de seleccionar los medios de cultivo, condiciones de crecimiento y técnicas
apropiadas para aislar hongos basándonos en las condiciones del sustrato del que se está tomando, pues por
ejemplo no será lo mismo tomar una muestra de un hongo en un trozo de carne que se encontraba dentro
del refrigerador a 5°C, que de un hongo patógeno humano que crece entre 35°C-40°C
Koneman, E. W., Allen, S. D., & Dowell, V. R. (1992). Diagnóstico microbiológico. Texto y atlas color. Buenos
aires, Argentina: Editorial Medica Panamericana.
Noyola, R. E., Martínez Gutiérrez, F., Negrete González, C. S., & Tovar Oviedo, J. (2021). Manual de
prácticas de laboratorio "Agentes microscópicos y el ser humano".Pp. 47-51. San Luis Potosí: UASLP.
Bonifaz A. (2012). Micología Médica. 4ª ed. México: McGraw-Hill