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Análisis de laboratorio que se realiza en una muestra de orina para diagnosticar alguna
infección en niños y adultos, mediante la determinación de existencia de bacterias u
otros microbios, y su número de colonias existentes.
OBJETIVO
Metodología
La orina remitida al laboratorio es homogenizada y la divide en dos partes; una para el
estudio del sedimento y otra para el urocultivo. Esta siembra se debe en forma cualitativa
y cuantitativa.
Aspiramos con una pipeta 5cm de orina y lo depositamos en un tubo de ensayo de
centrifuga.
Emparejamos el peso del tubo de centrifuga con otro patrón, para poder someterlo a
centrifugación.
Centrifugamos la orina durante 10 minutos a unos 2500 rpm. Eliminamos el
sobrenadante con un asa de platino, sembramos en el agar sangre, como también el
agar Mac Conkey el sedimento.
La siembra se realiza en estrías y se incuba durante 24 horas a 37°C.
A partir del agar sangre efectuamos con las colonias un frotis teñido con el método de
Gram para la identificación de bacterias Gram (+).
En el caso de haber crecimiento bacteriano en el agar Mac Conkey indicará que las
colonias contienen bacterias Gram (-), y a partir de este efectuamos las reacciones
bioquímicas, porque como sabemos las bacterias Gram (-) no se pueden diferenciar
microscópicamente.
COPROCULTIVO
OBJETIVO:
El alumno sea capaz de realizar la siembra de microorganismos causantes
enfermedades gastrointestinales.
MATERIAL:
Mechero o lampará de alcohol Hisopo estéril
Agar
Incubadora a 37°C
PROCEDIMIENTO:
Sacar las placas del refrigerador para que se atemperen.
Tomar muestra de las heces con un hisopo o asa de Henle.
Inocular MacConkey con el hisopo y colocar sobre una
pequeña porción de la placa. Estriar la zona de descarga y luego estriar cuatro campos
más (4 en total).
Las placas se incuban a 35o-37 oC en aerobiosis.
Las placas se revisan cada 24 horas en busca de patógenos; si no detectan, se re
incuban y se revisan 24 horas más. En caso de que no se encuentren patógenos
después de 48 horas se puede reportar como negativo los cultivos para los patógenos
buscados.
Revisar al microscopio con Lugol para determinar la presencia de bacterias
Resultados de Coprocultivo y Urocultivo
Aun no hubo lectura de los medios de cultivo realizados.
COLORACIÓN BAAR
MATERIALES Y REACTIVOS
• Puentes de tinción
• Portaobjetos
• Mechero bunsen
• Fucsina
• Alcohol acido
• Azul de metileno
• Muestra de heces
PROCEDIMIENTO
1. Cubrir por completo la preparación con la fucsina fenicada
2. Calentar la preparación a la llama del mechero hasta que salgan vapores
pero evitando que hierva durante 5 a 8 minutos. Esto se consigue moviendo
el mechero con movimientos circulares. Se recomienda que el mechero sea
de alcohol o que la flama del mechero bunsen sea lo más baja posible.
3. Lavar con agua y escurrir.
4. Decolorar con alcohol-ácido hasta que no suelte colorante rojo.
5. Lavar con agua y escurrir
6. Cubrir la preparación con azul de metileno dejándolo actuar durante dos
minutos.
7. Escurrir el azul de metileno y lavar con agua.
8. Escurrir el agua y quitar el exceso con una toalla de papel con cuidado para
no llevarse la preparación.
9. Cubrir con el cubreobjetos.
10.Observación al microscopio.
RESULTADOS
Presencia de Bacterias Acido Alcohol Resistentes: Negativa (BAAR -).
Panóptico
Técnica
- Preparar la extensión de sangre en el portaobjetos y dejar secar al aire. En este caso se utilizo
muestra de heces
- Preparar 3 cubetas con cada colorante.
- Sumergir 5 veces durante 1 segundo cada una el portaobjetos en la cubeta con el reactivo 1.
Escurrir el exceso de colorante.
- Sumergir 5 veces durante 1 segundo cada una el portaobjetos en la cubeta con la solución de
reactivo 2.
- Sumergir 5 veces durante 1 segundo cada una el portaobjetos en la cubeta con la solución de
reactivo 3.
- Lavar con agua destilada y dejar secar.
- Observar al microscopio.
Posibles preguntas
LO QUE PODEMOS OBSERVAR EN ESTE EXAMEN
1. ¿En qué se diferencia este método de las otras
tinciones clásicas?
RESULTADOS PANOPTICO
Eritrocitos: No se observan
Neutrófilos: no se observan
Linfocitos: no se observan
Monocitos: no se observan
Eosinófilos: no se observan
Basófilos: No se observan
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