UD2 Material y Reactivos Del Laboratorio

Laboratorio de cultivos
celulares
Unidades didácticas del módulo
UD1.- Estructura del laboratorio

UD2.- Material y reactivos del laboratorio: caracterización,
preparación, almacenaje y conservación (40 horas)
2
Material y reactivos del laboratorio
Resultados de aprendizaje:
1.- Caracteriza el material y los reactivos del laboratorio de cultivos,

relacionándolos con su utilidad.
2.- Prepara los materiales y reactivos siguiendo los procedimientos

establecidos.
3.- Almacena y conserva materiales, reactivos y productos,

cumpliendo las normas de prevención de riesgos biológicos y
ambientales.
3
Criterios de evaluación, ponderación en la UD y

procedimientos/instrumentos de evaluación (Prueba escrita (PE),
Tarea clase (TC)/lista de cotejo (LC), Tarea distancia (TD)/rúbrica (R))
1 Se ha caracterizado el material de uso habitual en un laboratorio de

cultivos (5%TD/R)
2 Se ha descrito la peligrosidad de los reactivos del laboratorio (5%PE)
3 Se ha explicado el formato y contenido de una ficha de seguridad
(5%TC/LC)
4 Se han reconocido los pictogramas de las etiquetas de reactivos
(2%TC/LC)
5 Se ha explicado la función de las frases H y P (3%TC/LC)
4
Criterios de evaluación, mínimos exigibles (ME), ponderación en la UD y

procedimientos/instrumentos (Prueba práctica (PP)/tabla de observación (TO),
Tarea clase (TC)/ tabla de observación (TO), Tarea distancia (TD)/rúbrica (R))
6 Se ha realizado la limpieza y lavado del material (2%PP/TO)
7 Se ha desinfectado el área de trabajo (2%PP/TO)
8 Se han manipulado los reactivos siguiendo normas de prevención de riesgos y
ambientales (2%PP/TO)
9 Se han pesado los reactivos considerando la precisión requerida (5%PP/TO)
10 Se han medido los volúmenes de reactivos teniendo en cuenta la precisión
requerida (5%PP/TO)
11 Se han preparado distintos tipos de disoluciones y se han realizado diluciones y
alícuotas de las mismas (20%PP/TO)
12 Se han etiquetado los recipientes con los reactivos y medios preparados
(3%PP/TO)
13 Se han caracterizado los diferentes procedimientos de esterilización (5%TD/R)
14 Se ha realizado la esterilización del material (4%TC/TO)
15 Se ha realizado la esterilización de los medios de cultivo (4%TC/TO)
16 Se ha valorado el orden y limpieza en el trabajo (2%TC/TO)
5
Material y reactivos de laboratorio

procedimientos/instrumentos de evaluación (Prueba escrita (PE),
Tarea distancia (TD)/rúbrica (R))
17 Se han descrito las características generales de un almacén para

cultivos (2%PE).
18 Se han identificado los diferentes tipos de salas de almacenamiento
(2%PE)
19 Se han identificado las normas básicas que hay que aplicar en la
organización del almacén (2%PE)
20 Se han descrito las medidas de seguridad que se deben cumplir en el
almacenamiento de los materiales, reactivos y productos de acuerdo
con las normativas (2%PE)
21 Se han identificado los elementos de seguridad básicos en un
almacén (3%TD/R)
622 Se han caracterizado los diferentes tipos de armarios (3%TD/R)

procedimientos/instrumentos de evaluación (Prueba escrita
(PE), Tarea clase (TC)/Rúbrica (R)
23 Se han seguido las condiciones de conservación de reactivos y

productos (2%TC/R)
24 Se han detectado los reactivos y productos caducados o que presenten
alguna alteración para su retirada (2%TC/R)
25 Se han gestionado los residuos siguiendo los procedimientos
establecidos (2%TC/R)
26 Se ha realizado la gestión de inventarios de los materiales, reactivos y
productos del almacén (2%TC/R)
27 Se han utilizado sistemas informáticos de control de almacén (2%TC/R)
28 Se han aplicado las medidas de prevención y protección ambiental que
se deben seguir durante el almacenamiento (2%TC/R)
7
Contenidos:
Caracterización del material y los reactivos:
Material de uso habitual en un laboratorio de cultivos:
• Material de vidrio o plástico: placas de Petri, placas de varios pocillos,

frascos de Roux, frascos y botellas de cultivo (roller), tubos estériles,
vasos de precipitados, matraces Erlenmeyer, matraces aforados,
probetas, pipetas y pipetas Pasteur, entre otros.
• Otro material: gradillas, espátulas, soportes, mecheros Bunsen,

termómetros, morteros y asas de siembra, entre otros.
Reactivos habituales. Precauciones en su manejo. Fichas de seguridad.

8Pictogramas y frases H y P.
Contenidos:
Preparación de materiales y reactivos:

• Limpieza y lavado de superficies, equipos y material.
Desinfectantes.
• Pesaje y medida de volúmenes en el laboratorio.
• Disolución y diluciones. Etiquetado.
• Esterilización. Tipos: métodos físicos (calor húmedo y seco,
filtración y radiación) y químicos. Control de esterilidad. Manejo
del material estéril.
9
Contenidos:
Almacenamiento y conservación de materiales y reactivos:

• Normativa de almacenamiento.
• Características generales de un almacén.
• Modelos de organización del almacén.
• Criterios de almacenamiento.
• Condiciones de almacenamiento y conservación.
• Normas básicas de organización.
• Tipos de armarios.
• Elementos de seguridad en un almacén de laboratorio.
• Gestión de residuos.
• Inventario.
• Aplicaciones informáticas (hoja de cálculo y programas
específicos de gestión de almacenes).
10• Gestión de inventarios.
Temporalización prevista:
●
40 horas
●
26 octubre-26 noviembre
●
Horas presenciales: 24
●
Horas distancia: 10
●
Horas prueba práctica: 4
●
Horas prueba escrita: 2
11
Temporalización prevista:
Horas
UD Título semanales Inicio Fin Peso
P/D
Material y reactivos del

laboratorio: caracterización,
2 19/10 26 Oct 26 Nov 60%
preparación, almacenaje y
conservación
Prueba práctica UD2 4 22-23 Nov
Prueba escrita UD2 2 24 Nov
Pruebas finales 4 28-31 Mar
12
Tareas distancia
Tarea LCC7.- Caracterización del material más usado en el laboratorio de

cultivos celulares
Tarea LCC10.- Caracterización de los métodos de esterilización
Tarea LCC12.- Seguridad almacén productos químicos
Tareas clase
Tarea LCC8.- Pictogramas y frases H y P

Tarea LCC9.- Ficha de datos de seguridad
Tarea LCC11.- Práctica de esterilización de medios de cultivo (filtración) y
material (autoclave)
Tarea LCC13.- Inventario y control de los productos almacenados
13
Reactivos del laboratorio de cultivos celulares
• Según la RAE, y a aplicado Química, un reactivo es “una sustancia que

se emplea para provocar una reacción química”.
•A nivel del laboratorio de cultivos celulares podemos denominar

reactivos químicos a todas aquellas sustancias de naturaleza química o
mezclas que se utilizan en el desarrollo del trabajo del laboratorio.
14
Peligrosidad de las sustancias químicas o mezclas
• Existen unas normas generales para la comercialización de sustancias químicas

o mezclas en la UE cuyo fin es la protección de la salud de las personas y el medio
ambiente:
• Reglamento REACH (“Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of

Chemicals”) para el registro, la evaluación, la autorización y la restricción de
sustancias químicas y por el que se crea la Agencia Europea de sustancias y
mezclas químicas.
• Reglamento CLP (“Classification, Labelling and Packaging”) sobre la
clasificación, etiquetado y envasado de productos químicos o mezclas. Este
reglamento introdujo en la UE el Sistema Globalmente Armonizado (SGA) de
clasificación y etiquetado de productos químicos de la Organización de Naciones
Unidas.
• Reglamento BPR (“Biocidal Products Regulation”) que regula la comercialización
y el uso de productos biocidas, utilizados para proteger a los seres humanos, los
animales, los materiales o los artículos contra organismos nocivos, como plagas
o bacterias, gracias a la acción de las sustancias activas que contienen.
15
•Según el Reglamento REACH:

– Se denomina sustancia química a “un elemento químico y sus compuestos
naturales o los obtenidos por algún proceso industrial, incluidos los aditivos
necesarios para conservar su estabilidad y las impurezas que inevitablemente
produzca el proceso, con exclusión de todos los disolventes que puedan
separarse sin afectar a la estabilidad de la sustancia ni modificar su
composición”
– Se denomina preparado a “cualquier mezcla o solución compuesta por dos o
más sustancias”.
16
• Con la aplicación del reglamento CLP se pretende:

– Determinar si una sustancia o mezcla tiene propiedades que deban
ser clasificadas como peligrosas.
– Identificar los peligros de dicha sustancia o mezcla
– Clasificar la sustancia o mezcla en función de los peligros detectados
y la gravedad del peligro
– Comunicar claramente los peligros detectados a través del
etiquetado del producto
– Recoger disposiciones relativas al envasado
• Algunas sustancias o mezclas excluidas de la aplicación del reglamento

CLP son: sustancias y mezclas radiactivas, medicamentos de uso
humano o veterinario, productos cosméticos, productos sanitarios,
17 alimentos o piensos.
• La evaluación e identificación de la peligrosidad de una sustancia química o

mezcla se basa en la determinación de las propiedades:
• Fisicoquímicas.
• Toxicológicas (efectos sobre la salud)
• Ecotoxicológicas (efectos sobre el medio ambiente)
• Se considerarán peligrosas todas las sustancias o mezclas que cumplan los

criterios de una o más clases de peligro contempladas en el Reglamento CLP
(peligros físicos, para la salud humana o para el medio ambiente) y que se
detallan en las siguientes diapositivas.
18
• Según el reglamento CLP existen peligros de distinta naturaleza (físicos, para la salud y
para el medio ambiente), diferentes tipos dentro de cada uno y diferentes gravedades
identificadas por distintas categorías dentro de cada tipo:
1.- Peligros físicos
– Explosivos
– Gases inflamables
– Aerosoles inflamables
– Gases comburentes
– Gases a presión
– Líquidos inflamables
– Sólidos inflamables
– Sustancias y mezclas que reaccionan espontáneamente
19
• Según el reglamento CLP existen peligros de distinta naturaleza (físicos, para la salud y
para el medio ambiente), diferentes tipos dentro de cada uno y diferentes gravedades
identificadas por distintas categorías dentro de cada tipo:
1.- Peligros físicos
– Líquidos pirofóricos
– Sólidos pirofóricos
– Sustancias o mezclas que se calientan espontáneamente
– Sustancias o mezclas que en contacto con el agua desprenden gases inflamables
– Líquidos comburentes
– Sólidos comburentes
– Peróxidos orgánicos
– Sustancias y mezclas corrosivas para los metales
20
• Según el reglamento CLP existen peligros de distinta naturaleza (físicos, para la

salud y para el medio ambiente), diferentes tipos dentro de cada uno y
diferentes gravedades identificadas por distintas categorías dentro de cada tipo:
2.- Peligros para la salud
– Toxicidad aguda oral, cutánea o por inhalación
– Corrosión/irritación cutánea
– Lesiones oculares graves/irritación ocular
– Sensibilización respiratoria o cutánea
– Mutagenicidad
– Carcinogenicidad
– Toxicidad para la reproducción
– Toxicidad específica en determinados órganos (exposición única)
– Toxicidad específica en determinados órganos (exposiciones repetidas)
– Peligro por aspiración
21
• Según el reglamento CLP existen diferentes tipos de peligros y diferentes categorías

dentro de cada uno:
3.- Peligros para el medio ambiente
– Peligros para el medio ambiente acuático
– Peligros para la capa de ozono
22
Etiquetado de las sustancias químicas o mezclas
• En el etiquetado de las sustancias químicas o mezclas ha de aparecer:

– Nombre comercial (para mezclas)
– Identificadores de las sustancias (nombre y número CAS (Chemical
Abstract service o número del reglamento CLP, u otro número de
identificación que recoja el reglamento CLP)
– Nombre, dirección y número de teléfono del proveedor
– Cuando proceda las palabras de advertencia: “Peligro”o “Atención”
– Cuando proceda los pictogramas de peligro
– Frases de peligro: se asignan a una clase y categoría determinada
– Consejos de prudencia: permiten reducir o prevenir los efectos adversos
causados por la exposición
– Cantidad de la sustancia o mezcla en el envase que se comercializa al
público, salvo que la cantidad ya esté especificada en otro lugar del envase
23
Palabras de advertencia del etiquetado de sustancias

químicas o mezclas
• Sirve para alertar de un peligro de mayor o menor gravedad:

– Peligro: se utiliza para las categorías más graves de peligro
– Atención: se utiliza para las categorías menos graves de peligro
• El reglamento CLP establece la palabra de advertencia que corresponde a

cada categoría de peligro
24
Pictogramas del etiquetado de sustancias químicas o mezclas
• Los pictogramas de las etiquetas de las sustancias químicas o mezclas son

representaciones gráficas de un peligro concreto.
• Tanto el color como la presentación de las etiquetas deben permitir que el

pictograma de peligro y su fondo sean claramente visibles.
• Los forma de los pictogramas es de cuadrado apoyado en un vértice, de fondo

blanco y borde rojo y en el centro está la representación pictórica
25
Pictogramas de las etiquetas de sustancias químicas o mezclas
26
Indicaciones de peligro de sustancias químicas o mezclas
Las etiquetas de las sustancias químicas o mezclas y sus fichas de datos de

seguridad deben incluir las indicaciones de peligro pertinentes que describan la
naturaleza y el grado de peligro de una sustancia o mezcla clasificadas como
peligrosas y que se formulan en forma de frases, denominadas frases H (“Hazard”)
Los códigos para las frases que contienen las indicaciones de peligro siguen un
código alfanumérico formado por una letra y tres números, de la forma siguiente
(HXYY):
• Letra H. En algunas indicaciones de peligro pueden aparecer las siglas EUH
(indicaciones de peligro no recogidas en el SGA)
• Un dígito que designa la naturaleza del peligro (2 para peligros físicos, 3 para
peligros para la salud humana y 4 para peligros para el medio ambiente)
• Dos dígitos que corresponden a una numeración secuencial de los peligros.
• Los códigos no tienen que aparecer obligatoriamente en la etiqueta, solo las
frases que reflejen las indicaciones de peligro
27
Códigos de las indicaciones de peligro de sustancias químicas o mezclas
28
29
30
31
Consejos de prudencia de las sustancias químicas o mezclas (frases P)
Las etiquetas de las sustancias químicas o mezclas y sus fichas de datos de

seguridad deben incluir los consejos de prudencia pertinentes que recomienden
medidas destinadas a evitar o minimizar los efectos nocivos para la salud
humana o para el medio ambiente derivados de la exposición una sustancia
química o mezcla clasificadas como peligrosas y que se formulan en forma de
frases, denominadas frases P (“Precautionary”).
Los códigos para las indicaciones de peligro siguen un código alfanumérico

formado por una letra y tres números, de la forma siguiente (PXYY):
• Letra P
• Un dígito que designa el tipo de consejo (1 generales, 2 de prevención, 3 de
respuesta, 4 de almacenamiento y 5 de eliminación)
• Dos dígitos que corresponden a una numeración secuencial de los consejos
• Los códigos no tienen que aparecer obligatoriamente en la etiqueta, solo las
32
frases que reflejan los consejos de prudencia
Códigos de los de prudencia de las sustancias químicas o mezclas (frases P)
33
34
35
36
Pictogramas y frases H y P de las sustancias químicas o mezclas
Tarea clase LCC8: pictogramas y frases H y P
• Elije un reactivo del laboratorio de cultivos celulares que tenga algún

pictograma y alguna frase H y P
• Elabora un documento en formato pdf en el que incluyas los siguientes
apartados:
• Nombre del reactivo elegido
• Laboratorio fabricante
• Pictograma o pictogramas de la etiqueta que buscarás en internet e
incluirás en el documento e interpretación del o de los pictogramas.
• Texto de las frases H
• Texto de las frases P
37
Fichas de datos de seguridad de las sustancias químicas o

mezclas
• La ficha de datos de seguridad (FDS o SDS de “safety data sheet”) es un

documento informativo compuesto por distintas secciones, que proporciona el
proveedor al laboratorio y que acompaña a una sustancia química o mezcla
clasificadas como peligrosas según la normativa vigente.
• Los trabajadores deben leer la ficha de datos de seguridad antes de empezar

a usar cualquier sustancia química o mezcla con el fin de que minimizar los
daños físicos, de proteger su salud y proteger al medio ambiente.
38
Fichas de datos de seguridad de las sustancias químicas o

mezclas
Tarea clase LCC9: ficha de datos de seguridad
• Lee la ficha de datos de seguridad de la sustancia química Azul de tripán

proporcionada
• Elabora un documento en formato pdf que subirás al aula virtual en el que
expliques:
 Formato de la ficha
 Contenido: enumeración de las secciones que contiene e información
que aparece en cada sección
39
Limpieza y lavado de material:
• La apropiada limpieza y lavado de material son puntos fundamentales para

contribuir a que las operaciones realizadas en el laboratorio de cultivos se realicen
en condiciones adecuadas y no produzcan resultados erróneos.
• La limpieza y lavado de material debe realizarse siempre lo antes posible después

de su uso porque así se conoce el tipo de residuo que contiene el material y, al no
dar tiempo a que se seque el material, es mucho más fácil de llevar a cabo el
proceso.
• Si el material no contiene restos biológicos, el primer paso es el de la limpieza del

material que consiste en eliminar los residuos adheridos a él. La limpieza y lavado
se realizan con el objetivo de arrastrar todos los residuos que se pueda y muchas
veces puede ser suficiente con la utilización de un sistema de lavado por arrastre o
por inmersión con agua y jabón o soluciones de lavado que contengan distintos
tipos de productos (ácidos, bases, disolventes orgánicos), según la naturaleza del
residuo. Si se necesita una esponja o cualquier otro dispositivo para realizar el
lavado deben ser de un material que no dañe mecánicamente la superficie del
40 material de laboratorio
• Si el material ha estado en contacto con materiales biológicos y puede

quedar algún resto, antes de realizar el lavado es necesario tratar el
material con un desinfectante para eliminar cualquier resto biológico
que pudiese existir (suele utilizarse hipoclorito sódico al 10%).
• Después de que todo el material esté limpio y bien lavado, se enjuaga

con agua destilada y se deja secar en posición vertical e inclinado o
se seca en una estufa.
• Si el secado del material se realiza en una estufa es importante tener

en cuenta el tipo de material de que se trata. El proceso de secado a
altas temperaturas no es apto para el material volumétrico porque
podría dejar de garantizarse el calibrado del material (la mayoría está
41
calibrado a 20ºC).
• Durante los procedimientos de limpieza, lavado y desinfección hay

que garantizar la protección del operador, del laboratorio y del medio
ambiente, utilizando los EPIs y los procedimientos adecuados, tanto
por los residuos que pudiesen estar presentes en el material como por
los productos químicos utilizados en el proceso de limpieza, lavado y
desinfección
42
Desinfección
● El proceso de desinfección es un proceso que pretende conseguir la destrucción de

formas de vida microbiana presentes en el material (las formas más resistentes son
los priones, algunos virus y las esporas bacterianas que pueden resistir al
tratamiento con algunos desinfectantes). En algunos casos, pues, el proceso de
desinfección puede no ser suficiente y puede requerirse un proceso de
esterilización.
● En el laboratorio de cultivos celulares se puede necesitar utilizar un proceso de

desinfección de la superficie de trabajo (antes y después de cualquier trabajo), de
los equipamientos o de algún material de laboratorio. El objetivo de dicha
desinfección es minimizar el riesgo de exposición a los agentes contaminantes y los
daños asociados a dicha exposición y para ello se suelen utilizar desinfectantes
químicos.
● Siempre que se realice un proceso de desinfección con productos químicos es

importante llevar los EPIs apropiados, como con otro cualquier producto químico
que se manipule, y conocer las características del desinfectante utilizado y seguir los
43 procedimientos de trabajo adecuados para su realización.
Desinfección
● Algunos factores que pueden afectar al proceso de desinfección son:

- Tipo de microorganismos que se pretende eliminar
- Posible resistencia de los microorganismos al desinfectante
- Cantidad y ubicación de los microorganismos
- Presencia o ausencia de materia orgánica
- Concentración del desinfectante
- pH y temperatura a la que se realiza el proceso
- Tiempo de exposición al desinfectante
44
Desinfección
● Algunos factores a tener en cuenta para la elección de un desinfectante son:

- Espectro antimicrobiano del desinfectante
- Velocidad de acción del desinfectante
- Facilidad en la aplicación del desinfectante
- Compatibilidad con las superficies y materiales
- Posible toxicidad e irritación provocadas
- Posible impacto medioambiental
45
Desinfección
46
Desinfección
● Según la NTP 429 “Desinfectantes: características y usos más corrientes”, los

desinfectantes químicos más habitualmente utilizados son:
- Ácido peracético
- Peróxido de hidrógeno
- Alcoholes (alcohol etílico, alcohol isopropílico)
- Aldehídos (formaldehído, glutaraldehído)
- Compuestos clorados (hipoclorito sódico)
- Compuestos de amonio cuaternario
- Compuestos fenólicos
- Compuestos de yodo y yodóforos (povidona yodada)
47
Desinfectantes
48
Manipulación de reactivos siguiendo normas de prevención

de riesgos y ambientales
La manipulación de reactivos, entre los que están los desinfectantes,

nunca puede poner en riesgo al trabajador, a la colectividad, ni al medio
ambiente. Se puede conseguir minimizar estos riesgos poniendo en
marcha las siguientes actuaciones:
• Consultar, interpretar y actuar en función de los datos de la etiqueta y

la ficha de datos de seguridad del producto, poniendo especial
atención a los pictogramas de peligro y a las frases H y P del
producto.
• Utilizar los EPIs adecuados para minimizar el riesgo a la exposición
de cada reactivo.
• Procesar los residuos de forma que no supongan un riesgo para los
49
trabajadores, la colectividad, ni el medio ambiente.
Exactitud, precisión y sensibilidad:
Los conceptos de exactitud, precisión y sensibilidad son conceptos íntimamente

relacionados pero totalmente diferentes entre sí, por lo que es conveniente no
confundirlos.
La exactitud de una medida o de un instrumento de medida está relacionada con la

proximidad existente entre el valor real de la magnitud y el valor medido. Por tanto, una
medida o un instrumento serán tanto más exactos cuanto más próximos estén el valor
real y valor medido y cuanto menor sea el error de medida debido al instrumento o al
procedimiento de medida.
La precisión de una medida o un instrumento está relacionada con la proximidad

existente entre los valores medidos obtenidos en mediciones repetidas bajo condiciones
específicas. La precisión está íntimamente relacionada con la reproducibilidad y la
repetibilidad de las medidas y la dispersión de los datos obtenidos en las medidas.
La sensibilidad de un instrumento de medida es el valor mínimo de la cantidad de una

magnitud que es capaz de medir. Está relacionada, pues, con el valor de la división más
50
pequeña de la escala de medición.
Exactitud, precisión y sensibilidad:
De modo general, la exactitud implica precisión, pero la precisión no

necesariamente implica exactitud, puesto que pueden existir errores
sistemáticos (debidos al propio instrumento, al operador o al
procedimiento o método de medida) y la sensibilidad está relacionada
únicamente con el instrumento de medida
51
Actividad
Los dibujos que están a continuación corresponden a los resultados

obtenidos en cuatro medidas diferentes. Indica qué dibujo corresponde a
medidas de alta exactitud y precisión, medidas de alta precisión y baja
exactitud, medidas de baja precisión y baja exactitud y medidas de alta
exactitud y bala precisión. Razona la respuesta.
52
Pesada de reactivos:
En el laboratorio de cultivos celulares es necesario realizar con mucha frecuencia

procedimientos de pesada de los reactivos utilizados (tanto sólidos como
líquidos). La exactitud y precisión requeridas para las diferentes pesadas
dependen del resultado que se quiera obtener y están relacionadas tanto con la
instrumentación utilizada para la pesada (tipo de balanza, error determinado por
el fabricante para la pesada de cada rango de masa) como con el procedimiento
de pesada y el operador que la realice.
La pesada de los reactivos en el laboratorio de cultivos puede llevarse a cabo con

balanzas mecánicas o electrónicas de diferente sensibilidad y la elección de un
instrumento u otro depende del resultado que se quiera obtener y de los equipos
disponibles en el laboratorio.
53
Balanzas de precisión (balanzas granatarias o granatario):
Son balanzas mecánicas con una exactitud, precisión y sensibilidad moderadas
Importante conocer la sensibilidad concreta del instrumento que exista en el

laboratorio, leyendo detenidamente los datos proporcionados por el fabricante y el
error de medida del propio aparato determinado por el fabricante para cada valor
de masa.
Suelen emplearse para la preparación de disoluciones de concentración

aproximada, para la pesada de sustancias que pudieran dañar la balanza
analítica y para pesar cantidades grandes de reactivos.
54
Balanzas analíticas
Pueden ser mecánicas o electrónicas y tienen una exactitud, precisión y

sensibilidad que depende del tipo de balanza concreto de que se trate
Importante conocer sensibilidad concreta del instrumento que exista en el

laboratorio, consultando detenidamente los datos proporcionados por el fabricante
y el error de medida del propio aparato determinado por el fabricante para cada
valor de masa.
Se utilizan para realizar una pesada con alta exactitud y cuando se quiere pesar
una cantidad pequeña de reactivo
55
Uso correcto de las balanzas
• Tener en cuenta la carga máxima de la balanza y no sobrepasarla nunca y

seguir las instrucciones de uso y mantenimiento concretos proporcionados por
el fabricante y seguir los procedimientos estándar establecidos en el
laboratorio.
• Instalar sobre una mesa que evite y absorba vibraciones, fuera de corrientes
de aire y con T y humedad constantes.
• En las balanzas analíticas puede colocarse gel de sílice en un envase en una

esquina para minimizar la absorción de agua por el reactivo que se vaya a
pesar.
56
El procedimiento general incluye:

• Nivelar la balanza en la mesa (burbuja de aire existente en algunas balanzas y
patas para regular en altura)
• Conectar la balanza 30 minutos antes de usarla
• Calibrar la balanza según las instrucciones del fabricante y con la periodicidad
establecida (pesas de calibración internas o externas)
• Depositar el recipiente de pesada (papel de aluminio, bandejas para pesar
sustancias, vidrio de reloj, otros recipientes...) en el centro del platillo de la
balanza.
• Tarar la balanza (si se realiza un método directo de pesada)
57

• Colocar el reactivo a pesar sobre el recipiente de pesada, poco a poco, hasta
alcanzar la medida deseada y sin superarla (si se supera no se debe
recuperar el reactivo que sobre y hay que retirarlo y desecharlo). No introducir
ningún instrumento en el recipiente comercial en el que está el reactivo para
evitar su contaminación. Debe extraerse una parte del reactivo a un
contenedor y de esa parte del reactivo es de la que se realiza la pesada.
• Procurar no tocar ninguna parte del platillo de la balanza durante el
procedimiento.
• Si se trata de una balanza con protección cortavientos es importante tarar la
balanza y realizar la pesada con la puerta cerrada.
58

• Una vez usada la balanza debe dejarse toda la zona perfectamente limpia. Si
no hubo ningún vertido, solo es necesario pasar delicadamente un pincel
suave (pelo de camello, de ardilla...) por si hubiese algún resto no visible.
• De forma periódica, o si se ha vertido producto, es conveniente limpiarla
apagada y desconectada de la red eléctrica, arrastrando con un pincel suave
los restos de reactivo del platillo o alrededores (extraer el platillo con cuidado y
limpiarlo con un paño humedecido en una solución detergente, aclarar con
otro paño y secar y limpiar de igual manera las superficies externas y colocar
de nuevo el platillo en su posición correcta)
59
Medida de volúmenes de reactivos:
En el laboratorio de cultivos celulares es necesario realizar con mucha

frecuencia procedimientos de medida de volúmenes de reactivos. La exactitud
requerida para las diferentes medidas depende del resultado que se quiera
obtener y están relacionadas tanto con la instrumentación utilizada para la
medida como con el procedimiento de medida y el operador que la realice.
Los tipos de materiales volumétricos que más frecuentemente se utilizan en el

laboratorio para la medida de volúmenes son: las buretas, las probetas, los
matraces y los distintos tipos de pipetas y micropipetas. La elección de un tipo
u otro de material depende del volumen que se quiera medir y de la exactitud
que requiera dicha medida.
Es importante señalar que los materiales volumétricos que se pueden utilizar

en un rango de medida son tanto más exactos cuánto mayor sea el volumen
medido dentro del rango y para cada material está determinado por el
60fabricante el error de medida del material para cada volumen de medida.
Uso correcto del material volumétrico

• Elección del material en función del volumen que se quiera medir y la exactitud
requerida en la medición (micropipetas, pipetas serológicas, matraces
aforados...)
• Seguir el procedimiento de medida específico de cada material.
• Lavar o desechar o reutilizar el material, en función del material de que se
trate.
61
Uso correcto de las micropipetas y material graduado o aforado
62
Preparación de disoluciones
La preparación de disoluciones es un procedimiento utilizado muy frecuentemente

en el laboratorio de cultivos.
Una disolución es una mezcla homogénea de dos o más sustancias donde el

componente que está en mayor proporción se llama disolvente y a los demás
componentes se les denomina solutos.
Para la preparación de disoluciones es importante primero realizar los cálculos de

la cantidad de soluto y disolvente necesarios, después elegir el material adecuado
para preparar la disolución y llevar a cabo el procedimiento de preparación y, por
último, realizar la limpieza y el lavado del equipamiento utilizado.
63
Las formas de expresión de la concentración de una disolución más habituales

son las siguientes:
• Tanto por ciento o porcentaje en peso (% p/p): peso de soluto en 100 unidades
de peso de la disolución
• Tanto por ciento o porcentaje en volumen (% v/v): volumen de soluto en 100
unidades de volumen de la disolución
• Tanto por ciento o porcentaje peso-volumen (% p/v): peso de soluto en gramos
en 100 ml de la disolución
• Gramos por kilogramo (g/kg): gramos de soluto en 1 kg de disolución
• Gramos por litro (g/l): gramos de soluto en 1 litro de disolución.
• Molaridad (M): moles de soluto en 1 litro de disolución
• Molalidad (m): moles de soluto en 1 kg de disolvente.
64
•
Las disoluciones más frecuentes son las de un sólido en un líquido y para

prepararlas es necesario pesar una cantidad determinada de sustancia sólida,
medir un determinado volumen de líquido y posteriormente mezclar hasta obtener
una mezcla homogénea. Para la medida de masas se utiliza una balanza con la
exactitud requerida y para la medida de volúmenes de líquidos pipetas, buretas,
probetas y/o matraces, en función de la exactitud requerida; para realizar la
mezcla se puede utilizar con un barrita imantada sobre un agitador o con una
varilla de vidrio.
En laboratorio de cultivos puede ser necesario preparar disoluciones de un líquido

en un líquido. En muchas casos estas disoluciones se realizan a partir de
disoluciones más concentradas preparadas anteriormente en el propio laboratorio
o comerciales, proceso que se denomina dilución. El material volumétrico que se
requiere depende de los volúmenes que se quieran medir y la exactitud que se
precise y la mezcla puede realizarse con un barrita imantada sobre un agitador o
con una varilla de vidrio.
65
Preparación de diluciones
Diluir una disolución consiste en disminuir su concentración por adición de

disolvente.
Para realizar los cálculos para la preparación de una dilución a partir de una
disolución ya existente puede ser útil la utilización de la siguiente fórmula, siendo
C1 y V1 la concentración y el volumen de la disolución concentrada de partida y C2
y V2 la concentración y el volumen de las disolución a preparar más diluida
Una vez realizados los cálculos solo hay que hacer la mezcla del volumen
calculado de la disolución de partida y añadir el volumen de disolvente necesario
66
Preparación de alícuotas
Una alícuota es una parte que se toma de un volumen (alícuota líquida) o de una
masa (alícuota sólida) iniciales, para ser usada en una prueba de laboratorio,
cuyas propiedades físicas y químicas, así como su composición, representan las
de la sustancia original.
La preparación de alícuotas en el laboratorio de cultivos es un procedimiento

habitual (tanto de los reactivos y medios de cultivo utilizados como de
suspensiones celulares) y consiste únicamente en partir de una disolución
concreta o una masa y dividirla en distintas partes que pueden ser utilizadas
inmediatamente o conservadas para una posterior utilización.
Es importante conocer las condiciones de conservación que permiten mantener

las propiedades de la sustancia original (temperatura, tiempo, humedad...)
67
Etiquetado de reactivos y medios preparados
Todos los reactivos y medios que se preparan en el laboratorio de cultivos han de estar
convenientemente identificados para que no haya ninguna confusión y para que en el
momento de su uso se tengan los datos necesarios. Los datos del etiquetado de los
productos preparados dependen del reactivo o medio preparado y los que más
frecuentemente se reflejan son:
• Nombre del reactivo/medio
• Concentración del reactivo/medio y volumen (si procede)
• Día de preparación
• Cualquier otro dato de interés para el laboratorio (operador, disolvente...)
Es importante conocer las condiciones de estabilidad, conservación y/o tratamiento

(congelación, criopreservación, tratamiento con disolventes, tinción, esterilización en
autoclave…) de los reactivos y medios preparados y garantizar que el etiquetado no se
vea modificado en el proceso de conservación o tratamiento.
En el laboratorio de cultivos celulares el etiquetado suele realizarse mediante etiquetas

68autoadhesivas o directamente sobre el envase con un rotulador de tinta indeleble.
Tarea clase: Preparación de disoluciones, diluciones y

alícuotas (no evaluable, se evaluará en la prueba práctica)
Objetivos:
1.- Preparar 100ml de una disolución 25mM de permanganato potásico
en agua
2.- Calcular en %p/v la concentración de la disolución anterior
3.- Preparar 5 ml de DMEM completo suplementado con 10% de suero
fetal bovino (FBS) y un 1% de P/S (penicilina 10000U/ml/estreptomicina
10000U/ml) a partir de los reactivos comerciales.
4.- Preparar 0,5 ml de una dilución 1/10 de la solución anterior
5.- Preparar 1 ml de una dilución 1/5 de la dilución anterior
6.- Preparar 5 alícuotas de 100 ml de la última dilución preparada
69
Tarea clase LCC11: Realización de la esterilización de medios

de cultivo y material
Objetivos:
1.- Realizar la esterilización del medio del DMEM por filtración
2.- Realizar la esterilización de material de laboratorio en autoclave
70
Almacenamiento y conservación. Introducción
En el laboratorio de cultivos celulares se trabaja con productos químicos que

serán diferentes en función del tipo de laboratorio del que se trate, de las
actividades que se realicen y de los procedimientos que se lleven a cabo en él.
Es importante conocer las condiciones adecuadas para el almacenamiento y la

conservación, específicas de cada producto químico, para garantizar que los
reactivos se encuentran en las mejores condiciones para ser usados y minimizar
los riesgos asociados a la peligrosidad de cada producto químico.
71
Riesgos en el almacenamiento
El riesgo en el almacenamiento de productos químicos depende

fundamentalmente de:
• La peligrosidad intrínseca de las sustancias almacenadas.

• La cantidad almacenada de cada producto
• El tipo y tamaño de los envases de los productos
• El tiempo de almacenamiento
• La ubicación del almacén
• La organización y distribución de los productos en el almacén.
• El mantenimiento de las condiciones de seguridad del almacén y los productos
químicos que se almacenen
• Nivel de formación e información de los trabajadores.
72
Riesgos en el almacenamiento
El almacenamiento prolongado de los productos químicos representa por sí

mismo un peligro debido a la reactividad intrínseca de los productos
químicos que puede conducir a:
• Formación de peróxidos inestables con el consiguiente peligro de explosión al

destilar la sustancia o por contacto.
• Polimerización de la sustancia (reacción lenta pero que en algunos casos
podría ser rápida y explosiva)
• El recipiente que contiene el producto puede atacarse y romperse por sí solo.
• Descomposición lenta de la sustancia produciendo un gas cuya acumulación
puede hacer estallar el recipiente.
73
Normativa de almacenamiento
Real Decreto 656/2017, de 23 de junio, por el que se aprueba el Reglamento de

Almacenamiento de Productos Químicos y sus Instrucciones Técnicas
Complementarias MIE APQ 0 a 10.
R.D. 374/2001 Protección de la salud y seguridad de los trabajadores contra los

riesgos relacionados con los Agentes Químicos durante el trabajo.
R.D. 665/1997 Protección de los trabajadores contra los riesgos relacionados con
la exposición a Agentes Cancerígenos durante el trabajo y sus modificaciones.
Reglamento (CE) Nº 1272/2008 del parlamento europeo, de 16 de diciembre de

2008, sobre clasificación, etiquetado y envasado de sustancias y mezclas
NTP 725: Seguridad en el laboratorio: almacenamiento de productos químicos
NTP 1112: Seguridad en el almacenamiento de materiales mediante paletizado y

74apilado sobre el suelo
Según la RAE, almacenar se define como “reunir, guardar o registrar en cantidad algo”
Según el RD 656/2017 por el que se aprueba el Reglamento de Almacenamiento de Productos

Químicos y sus Instrucciones Técnicas Complementarias, se define almacenamiento como el
edificio, área o recinto en edificios o al aire libre que cumple con los requerimientos especiales
para la protección de empleados, terceras personas y el medio ambiente y cuyo propósito es
almacenar productos químicos peligrosos. Incluyendo:
• Los recipientes fijos y móviles
• Sus cubetos de retención
• Las calles intermedias de circulación y separación
• Las tuberías de carga y descarga e interconexión entre recipientes
• Las tuberías de alimentación a proceso hasta la válvula de corte a partir de la cual solo existen
elementos del proceso
• Las tuberías de transporte a los recipientes de almacenamiento desde la última válvula de corte
del proceso
• Las zonas e instalaciones de carga, descarga y trasiego anejas
• Otras instalaciones necesarias para el almacenamiento siempre que sean exclusivas del mismo.
• Los contenedores de almacenamiento y los armarios de seguridad
75
El RD 656/2017 por el que se aprueba el Reglamento de Almacenamiento de Productos

Químicos y sus Instrucciones Técnicas Complementarias tiene por objeto establecer
las condiciones de seguridad de las instalaciones de almacenamiento, carga,
descarga y trasiego de productos químicos peligrosos e incluye además las
instrucciones técnicas específicas para los siguientes tipos almacenamientos:
• Almacenamiento de líquidos inflamables y combustibles en recipientes fijos
• Almacenamiento de óxido de etileno en recipientes fijos
• Almacenamiento de cloro
• Almacenamiento de amoníaco anhidro
• Almacenamiento de gases en recipientes a presión móviles
• Almacenamiento de líquidos corrosivos en recipientes fijos
• Almacenamiento de líquidos tóxicos en recipientes fijos
• Almacenamiento de fertilizantes a base de nitrato amónico con alto contenido en
nitrógeno
• Almacenamiento de peróxidos orgánicos y de materias autorreactivas
76
• Almacenamiento en recipientes móviles (bidones, botellas...)
El RD 656/2017 por el que se aprueba el Reglamento de Almacenamiento de

Productos Químicos y sus Instrucciones Técnicas Complementarias se aplicará a
las instalaciones de nueva construcción, ampliaciones o modificaciones de
las existentes
Quedan excluidos del ámbito de aplicación del Reglamento:

• Productos y actividades para los que existen reglamentaciones de seguridad
industrial específicas
• Almacenamiento de productos con reglamentaciones específicas si en ellas se
recogen las condiciones de seguridad de los almacenamientos
• El almacenamiento durante transporte de productos químicos peligrosos por
carretera, ferrocarril, vía marítima o aérea
• El almacenamiento en tránsito (inferior a 72 h)
• Los almacenamientos de productos químicos de capacidad inferior a las que
77 se indican en el texto del reglamento
Dependiendo del tipo de almacenamiento que tenga el laboratorio de cultivos

deberá cumplir el reglamento aprobado en el RD 656/2017 o no, en función de la
cantidad almacenada que varía dependiendo del tipo de producto químico del que
se trate. Así, por ejemplo, para productos químicos que producen sensibilización
respiratoria solo es obligatorio el cumplimiento del reglamento en almacenes con
más de 1000kg de este tipo de productos químicos, mientras que para líquidos
comburentes el reglamento será de obligado cumplimiento para almacenes con
más de 500-1000 litros, en función del tipo de indicación de peligro (frase H)
78
Muchos de los almacenes de productos químicos de los laboratorios de cultivos

celulares de docencia e investigación no están obligados al cumplimiento del
reglamento anterior en la mayoría de los productos almacenados, puesto que no
superan las cantidades de productos químicos establecidas en dicho reglamento,
aunque sí que pueden superarse los límites para gases y productos inflamables,
por lo que en este caso han de seguirse las instrucciones publicadas en el
reglamento.
Independiente de la obligación de seguimiento del RD, los almacenamientos de

productos químicos peligrosos deben incluirse dentro de la evaluación de riesgos
y de la planificación preventiva de la organización y ser lo más seguros posible
para minimizar los riesgos, separando siempre los productos que puedan
presentar incompatibilidades en el almacenamiento.
79
80
81
Normativa de almacenamiento de gases (CO2)
82
83
• Dependiendo de la cantidad de gases almacenados el reglamento aprobado

en el RD 656/2017 clasifica los almacenes en diferentes categorías.
• La mayoría de los almacenes de los laboratorios de cultivos celulares

pertenecerán a la categoría I.
84
85
Características del almacenamiento:
• No almacenar los recipientes en locales subterráneos o con comunicación

directa con sótanos
• No almacenar los recipientes en lugares sin ventilación adecuada.
• Identificar correctamente las botellas de gases (pictograma correspondiente)
• En el laboratorio, fuera del almacén, solo podrán tenerse botellas de gases a
presión en operaciones esporádicas y solo durante el tiempo de utilización.
• Separar los recipientes de gases llenos de los vacíos.
• El usuario es responsable del manejo de las botellas y del buen estado y
mantenimiento de los accesorios necesarios para su utilización y del correcto
empleo del gas que contienen.
86
Características del almacenamiento en casetas de gases:
Son recintos destinados a la ubicación de botellas, separados del edificio del

laboratorio, que deben reunir las siguientes condiciones:
• Señalización del área con los pictogramas de sus riesgos.
• Alejada de los lugares de paso de los vehículos o zonas con riesgo de caídas
de objetos
• Construida con hormigón, muros de ladrillo y armaduras metálicas cubiertas
por mallas metálicas que mantengan su estabilidad mecánica y sean estancas
al paso de las llamas en caso de incendio
• En sus proximidades no habrá sótanos ni recintos subterráneos
• Dotada de huecos para ventilación
• Debe tenerse en cuenta la incompatibilidad entre gases para su
almacenamiento: los gases combustibles deben separarse de los comburentes
por un tabique de hormigón o ladrillo
87
Características del almacenamiento en casetas de gases:
• Instalación eléctrica protegida frente al riesgo de incendio o de explosión, con

envolvente antideflagrante para interruptores y enchufes.
• En el exterior de las casetas habrá dos extintores de 2,5 Kg de polvo seco.
• Las botellas estarán situadas de manera que puedan ser inspeccionadas con facilidad y
evacuadas rápidamente en caso de emergencia.
• Encima de cada botella deberá colocarse un cartel con el nombre del gas.
• En el local no se podrán tener reactivos, grasas, aceites o materiales.
• En el local estarán las fichas de seguridad de cada uno de los gases.
88
Normativa de almacenamiento conjunto en recipientes móviles
• Los productos químicos peligrosos solo pueden ser almacenados

conjuntamente sin restricción si se justifica que esto no supone ningún
incremento del riesgo. En caso contrario, se debe separar o sectorizar
• Los productos químicos se podrán almacenar bajo los siguientes tipos de

almacenamiento en función de sus peligrosidades (RD 656/2017):
• Almacenamiento sin restricción.
• Almacenamiento separado.
• Almacenamiento independiente
89
90
Evaluación de la posibilidad de almacenamiento conjunto de los recipientes móviles:
• Para cada clase de peligro del producto (frase H o combinación de frases H) se

consultarán sus incompatibilidades para determinar si el almacenamiento puede ser sin
restricción o debe ser separado o independiente.
• Productos corrosivos podrán almacenarse conjuntamente sin restricciones
siempre que no se produzcan reacciones entre sí. Si hay incompatibilidad se
dispondrá, al menos, de cubetos de retención separados.
• Líquidos inflamables o combustibles no se almacenarán conjuntamente con
productos químicos comburentes ni con productos químicos tóxicos, a no ser que
se sectoricen mediante la colocación de armarios protegidos.
• Los productos químicos corrosivos contenidos en recipientes frágiles y los
bifenilos policlorados, no podrán almacenarse en un área que contenga líquidos
inflamables o combustibles a menos que se adopten las medidas necesarias
para que no provoquen reacciones peligrosas en caso de siniestro (por ejemplo,
separación mediante obra, grandes distancias, armarios protegidos ...)
91
Evaluación de la posibilidad de almacenamiento conjunto de los recipientes

móviles:
• Además, para la evaluación de almacenamiento conjunto se consultarán las

fichas de datos de seguridad de los productos. Si en ellas hay información que
implique la incompatibilidad entre productos, se almacenarán de forma
separada o independiente. Se tendrán en cuenta, entre otros puntos, si:
• Se necesitan diferentes agentes de extinción
• Se requieren diferentes condiciones de temperatura
• Reaccionan entre sí de forma peligrosa
• Se almacenan en recipientes frágiles
92
Normativa de almacenamiento conjunto en recipientes móviles: inflamables
Se consideran productos inflamables los productos químicos con indicaciones de peligro:
• H220: gas extremadamente inflamable

• H221: gas inflamable
• H222: aerosol extremadamente inflamable
• H223: aerosol inflamable
• H224: líquido y vapores extremadamente inflamables
• H225: líquido y vapores muy inflamables
• H226: líquido y vapores inflamables
• H230: puede explotar incluso en la ausencia de aire
Deberán almacenarse en un sector o área independiente a cualquier otra actividad.
Los almacenamientos de recipientes móviles se podrán almacenar en almacenamientos

cerrados, abiertos, armarios de seguridad para inflamables o contenedores modulares.
93
Normativa de almacenamiento conjunto en recipientes móviles:

inflamables
Armarios de seguridad para inflamables:
Certificados como tipo 90 (90 minutos de resistencia al fuego)

Deberán llevar un letrero bien visible con la indicación de inflamable.
Si se guardan productos H220 o H221 es obligatoria la existencia de una
ventilación exterior.
La cantidad máxima de líquidos que puede almacenarse es de 500 l y de
sólidos 500kg
Colocar un extintor de eficacia 34 A 144 B en las inmediaciones del armario de
seguridad. (A: fuegos de materiales sólidos, generalmente de naturaleza
orgánica, cuya combustión se realiza normalmente con la formación de brasas.
B: fuegos de líquidos, de sólidos que por acción del calor pasan a líquidos, y de
94sólidos grasos)

pirofóricos
Se consideran productos pirofóricos productos químicos con la indicación de peligro H250

(se inflama espontáneamente en contacto con el aire).
No se permitirá el almacenamiento en almacenes abiertos.
Deberán cumplir las exigencias establecidas para los productos inflamables, teniendo en
cuenta los riesgos de este tipo de productos y ajustándose a las indicaciones de la ficha de
datos de seguridad.
Deben almacenarse en una zona totalmente sectorizada de uso exclusivo y construida según
la normativa de protección contra incendios aplicable.
El almacenamiento deberá disponer de refrigeración de forma que su temperatura sea la

adecuada para asegurar la estabilidad térmica de los productos almacenados.
Cuando el almacenamiento supere los 50 l (líquidos) o los 50 kg (sólidos) deberán disponer

de un sistema de extinción fijo contra incendios, que no contenga ni use agua.
95
productos que experimentan calentamiento espontáneo
Se consideran productos que experimentan calentamiento espontáneo los productos químicos

con las indicaciones de peligro: H251 (se calienta espontáneamente; puede inflamarse) ó H252
(se calienta espontáneamente en grandes cantidades; puede inflamarse).
Deberán cumplir las exigencias establecidas para los productos inflamables, teniendo en cuenta
los riesgos de este tipo de productos y ajustándose a las prescripciones según ficha de datos de
seguridad.
Deben almacenarse en una zona totalmente sectorizada de uso exclusivo y construida según la
normativa de protección contra incendios aplicable.
El almacenamiento deberá disponer de refrigeración de forma que su temperatura sea la

adecuada para asegurar la estabilidad térmica de los productos almacenados.
Cuando el almacenamiento supere los 300 l (líquidos) o los 300 kg (sólidos) deberán disponer de
96un sistema de extinción fijo contra incendios que no contenga ni use agua
Normativa de almacenamiento conjunto en recipientes móviles: productos

que desprenden gases inflamables en contacto con el agua
Se consideran productos que desprenden gases inflamables en contacto con el agua los
productos químicos con las indicaciones de peligro H260 (en contacto con el agua
desprende gases inflamables que pueden inflamarse espontáneamente) ó H261 (en
contacto con el agua desprende gases inflamables)
Estos productos deben almacenarse en una zona totalmente sectorizada de uso exclusivo y
construida según la normativa de protección contra incendios aplicable.
97

productos tóxicos
Se consideran productos tóxicos los productos químicos con indicaciones de

peligro H300, H301, H310, H311, H330, H331, H370 (Mortal en caso de ingestión.
Tóxico en caso de ingestión. Nocivo en caso de ingestión. Puede ser mortal en
caso de ingestión y penetración en las vías respiratorias. Tóxico en contacto con
la piel. Mortal en caso de inhalación. Tóxico en caso de inhalación. Provoca
daños en los órganos)
En almacenamientos abiertos se podrán almacenar productos tóxicos con

productos combustibles cuando estén separados al menos 5 m o mediante una
pared REI 90 que sobrepase 1 m de proyección horizontal y vertical respecto al
límite de los recipientes.
En almacenamientos cerrados no pueden almacenarse en el mismo sector de

incendios otros productos combustibles
98

productos corrosivos
Se consideran productos corrosivos los productos químicos con alguna de las

siguientes indicaciones de peligro:
• H290: puede ser corrosivo para los metales
• H314: provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves
No podrán almacenarse en la misma pila o estantería productos corrosivos

diferentes que presenten posibles reacciones peligrosas.
99
Características generales del almacén del laboratorio de cultivos

celulares
• Dimensiones, ventilación, señalización, sistemas de seguridad, iluminación, sistemas de

almacenamiento... en función de la cantidad, peligrosidad y tipos de peligros que presenten
los productos almacenados.
• Espacio exclusivo y específicamente delimitado y preferentemente fuera del laboratorio.
• Colocación de productos almacenados sin invadir zonas de acceso y de forma segura,

limpia y ordenada.
• Orden que evite un riesgo para los trabajadores, la colectividad y el medio ambiente.
• Separación de los productos peligrosos de los no peligrosos
• Evitar almacenamiento de productos peligrosos en zonas de tránsito (escaleras, pasillos,

salidas de emergencia, vestíbulos de acceso general, salidas de vehículos, patios
estrechos...) y en zonas destinadas a otros usos (salas de descanso, salas de visitas,
100 baños…)
celulares
• Colocar productos químicos peligrosos en áreas específicamente acondicionadas en función del tipo
de peligro y solo podrán ser almacenados conjuntamente sin restricción si se justifica que esto no
supone ningún incremento del riesgo. En caso contrario, se deben separar
• Colocación de señalizaciones de seguridad que indiquen claramente la presencia de productos

químicos peligrosos.
• Instalación de elementos de seguridad como duchas, lavaojos, señalización de salida de

emergencia, equipos y sistemas de protección frente a incendios
• Uso de EPIs adecuados a los productos químicos que se vayan a manipular
• Contenido de todos los recipientes fácilmente identificable a través de las etiquetas.
• Almacenamiento de forma que no se produzcan derrames. Las posibles faltas de estanqueidad de

los recipientes han de ser identificadas fácil y rápidamente. Si algún recipiente deja de ser estanco,
deben tomarse medidas técnicas y organizativas para evitar daños.
101
• Sistemas de almacenamiento que no superen su capacidad de carga

celulares
Iluminación
• El almacenamiento estará convenientemente iluminado para el acceso y manipulación de los

productos químicos en condiciones seguras (RD 486/1997 por el que se establecen las
disposiciones mínimas de seguridad y salud en los lugares de trabajo)
• La iluminación tiene que estar instalada de manera que se evite que el calentamiento de los
productos químicos peligrosos pudiera generar una reacción peligrosa.
Ventilación
•
Los almacenamientos se diseñarán con ventilación natural o forzada, de forma que el riesgo de
exposición de los trabajadores esté adecuadamente controlado de acuerdo con el RD 374/2001, de
6 de abril, sobre la protección de la salud y seguridad de los trabajadores contra los riesgos
relacionados con los agentes químicos durante el trabajo.
•
Cuando se encuentren situados en el interior de los edificios, la ventilación se canalizará a un lugar
seguro del exterior mediante conductos exclusivos, teniendo en cuenta los niveles de emisión a la
atmósfera admisibles. Cuando se emplee ventilación forzada, ésta dispondrá de un sistema de
102 alarma en caso de avería.
Salas de almacenamiento
El almacenamiento de productos químicos puede realizarse en diferentes

tipos de salas: interior, separada y aneja.
• Sala de almacenamiento interior: totalmente cerrada al interior del edificio y
sin paredes exteriores
• Sala de almacenamiento aneja: está en el interior del edificio y tiene una o
más paredes interiores
• Sala de almacenamiento separada: no tiene paredes comunes con otro
edificio.
103
Salas de almacenamiento
El nivel de protección frente al fuego exigido, la resistencia al fuego de paredes y

techos, la densidad máxima de ocupación y el volumen máximo permitido es
diferente en los distintos tipos de salas de almacenamiento.
104
Tipos de almacenamiento
Los tipos más habituales de almacenamiento son los estantes o baldas y los
armarios. En cualquiera de ellos debe tenerse en cuenta:
• No colocar en estantes elevados recipientes más grandes de medio litro.
• Los recipientes más grandes hay que colocarlos a los niveles más bajos.
• Los productos más peligrosos, especialmente los productos inflamables y los
que entrañan un peligro para la salud es recomendable que estén en armarios.
• No se debe superar nunca la capacidad de carga del tipo de almacenamiento
que se utilice
105
Normas generales en el almacenamiento de productos químicos
• Disponer de un lugar específico de almacenamiento de productos químicos,

preferentemente separado del laboratorio, convenientemente señalizado
• No almacenar productos químicos en el área de trabajo, mantener los que no
se vayan a usar en el almacén
• Controlar el acceso de personas al almacén.
• Comprobar periódicamente que los envases son seguros y están en buen
estado, evitando su deterioro en el almacén.
• Comprobar el etiquetado correcto y legible de los productos y conocerlo
prestando especial atención a los pictogramas de peligro y las frases H y P
• Disponer y leer las fichas de datos de seguridad de los productos, en las que
se recoge información sobre la la reactividad, la estabilidad y el
almacenamiento del producto o las actuaciones en caso de fugas, derrames…
• Utilizar en la medida de lo posible los envases originales, correctamente
cerrados y sin trasvasar el producto, o utilizar un envase adecuado y
etiquetarlo correctamente con la información del envase original si es
necesario realizar un trasvase
106
• Agrupar, clasificar y separar los productos químicos por familias en función de su

peligrosidad y las incompatibilidades entre distintos tipos de productos debidas a su
naturaleza o peligrosidad, separando los incompatibles y aislando o confinando los
productos de características especiales: alta toxicidad, cancerígenos, inflamables,
explosivos…
• Almacenar los productos que reaccionan con el agua en lugares secos y ventilados,
colocando un aviso en lugar visible prohibiendo el uso de agua en caso de incendio.
• Los materiales inertes pueden utilizarse como elementos de separación entre
productos peligrosos.
• Mantener las sustancias inflamables alejadas de focos de ignición y disponer de
armarios ignífugos para su almacenamiento y para sustancias corrosivas
• Señalizar las zonas del almacén con los pictogramas correspondientes a cada peligro
o de peligro en general si se trata de un almacén de productos químicos de diferente
peligrosidad
• Optimizar el stock de de cada producto en función de las necesidades del laboratorio,
de forma que los productos necesarios permanezcan en el almacén el menor tiempo
posible, evitando riesgos innecesarios debidos a un almacenamiento prolongado.
107
• Tener un inventario actualizado con los productos químicos almacenados,

registrando la fecha de entrada en el almacén y la cantidad adquirida, la fecha de
salida del almacén y la cantidad de salida, la caducidad, el proveedor...
• Implantar procedimientos para el almacenamiento y las operaciones de carga,
descarga, trasvases, transporte, mantenimiento, limpieza…
• Tener un plan de emergencias en el que se recojan, entre otras, la actuación en
caso de salpicadura, derrame, rotura de un envase, incendio...
• Realizar controles y revisiones periódicas para asegurar que se cumplan todas y
cada una de las medidas de prevención implantadas.
• Formar e informar a los trabajadores sobre las propiedades de los productos
químicos que se almacenan, función y uso correcto de los elementos e
instalaciones de seguridad y de los equipos de protección individual, las
consecuencias de un incorrecto funcionamiento o uso de los elementos e
instalaciones de seguridad y de los equipos de protección individual y los peligro
que puedan derivarse de derrames o fugas de los productos químicos
almacenados y acciones a adoptar, los riesgos del almacenamiento de productos
108
y de las medidas de prevención, protección y actuaciones en caso de emergencia
Reactivos o productos caducados o alterados:
El almacenamiento prolongado o inadecuado de los reactivos en el almacén

del laboratorio de cultivos puede conducir a la alteración, el deterioro o que
los reactivos caduquen. Las alteraciones o deterioros más frecuentes son
que las etiquetas no sean legibles, la pérdida de integridad del envase o que
el producto esté alterado o caducado.
Los riesgos más frecuentes debidos a estos procesos son la pérdida del
contenido, la confusión en el uso y la pérdida de actividad del reactivo. Para
evitarlos o minimizarlos es imprescindible llevar un estricto control de las
condiciones de conservación, de la integridad de los envases y su
etiquetado y el control del tiempo de almacenamiento, evitando su utilización
y procediendo a su retirada siempre que se detecte alguna alteración o
deterioro o cuando el reactivo haya superado su fecha de caducidad.
Los programas informáticos de gestión del stock del almacén de cultivos
celulares pueden ser de gran utilidad para ayudar al control de las
caducidades de los reactivos almacenados
109
Sistemas informáticos de control del almacén:
La gestión del stock de los reactivos del almacén de cultivos celulares es un

punto fundamental para mantener la actividad del laboratorio. La cantidad
óptima de cada reactivo será diferente en cada laboratorio y para realizar el
control del almacén se recomienda llevar un control del stock de forma
informática que incluya todos los productos químicos que hay en el almacén,
registrando la fecha de entrada y la cantidad, la fecha de salida y la cantidad y
la caducidad, entre otros datos.
Los sistemas informáticos de gestión del almacén pueden ser programas

informáticos específicos de control de almacén, de control de almacén de
productos químicos o utilizar un programa no específico como un programa de
hoja de cálculo o de base de datos.
El inventario de los productos químicos almacenados y el control de los

productos caducados son mucho más fáciles de realizar si se tiene un sistema
110informático de gestión del almacén.
Gestión de residuos químicos:
Los residuos químicos procedentes de la actividad del laboratorio, o los

generados por caducidad o deterioro de los almacenados, han de eliminarse
siguiendo la normativa vigente que obliga al productor de los mismos a un
correcta segregación, envasado e identificación antes de ser entregados a un
gestor autorizado.
Todos los laboratorios de cultivos celulares deberán tener un plan de gestión de

los residuos que se generarán de la actividad, que incluirá la gestión de los
residuos químicos generados.
111
Recomendaciones generales para la segregación y el envasado de residuos:
• Utilizar un envase de material adecuado al residuo que se quiera almacenar

(propileno de alta densidad es adecuado para casi todos los residuos químicos)
• Utilizar los envases proporcionados por la empresa gestora
• Corroborar que el envase no presenta roturas o deformaciones.
• No mezclar reactivos peligrosos con no peligrosos
• No mezclar ni sólidos con líquidos
• No mezclar reactivos incompatibles entre sí
• No mezclar reactivos que van a tener un tratamiento posterior diferente.
• Etiquetar adecuadamente el envase
• No llenar el envase más del 80%
• Cerrar el envase herméticamente
112
Sería conveniente separar los residuos químicos en los siguientes grupos:
• Disolventes halogenados (diclorometano, tricloroetano, tetracloruro de carbono….).

Tóxicos, irritantes e incluso algunos cancerígenos
• Disolventes no halogenados (alcoholes, aminas, amidas, aldehídos, cetonas, esteres…)

Suelen ser inflamables y tóxicos. Se recomienda separar disolventes que sean
inmiscibles porque la presencia de más de una fase dificulta el tratamiento posterior
• Disoluciones acuosas
• Disoluciones acuosas básicas: (hidróxido sódico, hidróxido potásico…)
• Soluciones acuosas ácidas de metales pesados (fijadores, niquel, plata…)
• Soluciones acuosas ácidas sin metales pesados
• Otras soluciones acuosas inorgánicas: reveladores, fostatos, cloruros…
• Disoluciones acuosas orgánicas o de alta demanda química de oxígeno
• Disoluciones acuosas de colorantes: fenoftaleína, naranja de metilo…
• Disoluciones de fijadores orgánicos: formol, fenol, glutaraldehído
113
• Ácidos inorgánicos y sus soluciones: la mezcla de algunos de estos ácidos puede

producir alguna reacción química peligrosa con desprendimiento de gases
tóxicos e incremento de la temperatura.
• Aceites de mantenimiento y baños calefactores
• Sólidos: productos químicos en estado sólido de naturaleza orgánica e inorgánica y el

material desechable contaminado con productos químicos. No pertenecen a este grupo los
reactivos puros obsoletos en estado sólido. Los productos sólidos de diferente naturaleza
no se mezclarán entre sí. Se establecen los siguientes subgrupos:
• Sólidos orgánicos: productos químicos de naturaleza orgánica o contaminados con
productos químicos orgánicos
• Sólidos inorgánicos: productos químicos de naturaleza inorgánica.
• Material desechable contaminado: subgrupos por la naturaleza del material y la
114 naturaleza del contaminante.
• Productos químicos sólidos o líquidos con elevada toxicidad o peligrosidad,

reactivos puros obsoletos o caducados (no mezclar entre sí ni con otros grupos)
• Comburentes: peróxidos.
• Compuestos pirofóricos: magnesio metálico en polvo.
• Compuestos muy reactivos: ácidos fumantes, metales alcalinos, hidruros,
compuestos peroxidables, restos de reacción, productos no etiquetados,
compuestos con halógenos activos, compuestos polimerizables.
• Compuestos muy tóxicos: tetraóxido de osmio, mezcla crómica, cianuros,
sulfuros, …
• Citostáticos: líquidos y sólidos cancerígenos, mutagénicos o teratogénicos
115
Etiquetado de los residuos químicos peligrosos:
El etiquetado habrá de contener los siguientes datos: fecha de envasado, código

LER, descripción del residuo, código HP, pictogramas de peligro y datos del centro
productor de los residuos
116
Gestión de residuos químicos: códigos LER
• Clase IIa: residuos específicos de la actividad sanitaria. Residuos químicos no

peligrosos (180107)
• Clase IV. Residuos de citotóxicos y citostáticos (180108*)
• Clase V. Otros residuos peligrosos

• Productos químicos que consisten en, o contienen, sustancias peligrosas
(180106*)
18: Residuos de servicios médicos o veterinarios o de investigación

asociada
1801: Residuos de maternidades de diagnóstico, tratamiento o
117 prevención de enfermedades humanas
Tarea clase LCC13: Inventario y control de los productos almacenados
Elabora un documento en formato pdf respondiendo a los siguientes puntos:
• Revisa los productos químicos del laboratorio y haz un listado de cinco productos
caducados y/o alterados para retirar, indicando el motivo de la retirada
• Indica como eliminarías los productos del apartado anterior, siguiendo la normativa de
residuos
• Elige 10 productos químicos del laboratorio (sólidos, líquidos y con distintos tipos de
peligros) y propón una forma de almacenamiento para ellos en el laboratorio de cultivos
celulares
Elabora un documento de hoja de cálculo que permita:
• Llevar el control de entradas y salidas de productos químicos en el laboratorio de cultivos

celulares (día de entrada y cantidad de entrada, día de salida y cantidad de salida y
cantidad en un momento dado, caducidad, laboratorio comercializador y una casilla con
observaciones)
•
118 Cubrir el documento para al menos 10 productos químicos del laboratorio

UD2 Material y Reactivos Del Laboratorio

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Laboratorio de cultivos

UD1.- Estructura del laboratorio

1.- Caracteriza el material y los reactivos del laboratorio de cultivos,

2.- Prepara los materiales y reactivos siguiendo los procedimientos

3.- Almacena y conserva materiales, reactivos y productos,

Criterios de evaluación, ponderación en la UD y

1 Se ha caracterizado el material de uso habitual en un laboratorio de

Criterios de evaluación, mínimos exigibles (ME), ponderación en la UD y

Criterios de evaluación, ponderación en la UD y

17 Se han descrito las características generales de un almacén para

Criterios de evaluación, ponderación en la UD y

23 Se han seguido las condiciones de conservación de reactivos y

Caracterización del material y los reactivos:

Material de uso habitual en un laboratorio de cultivos:

• Material de vidrio o plástico: placas de Petri, placas de varios pocillos,

• Otro material: gradillas, espátulas, soportes, mecheros Bunsen,

Reactivos habituales. Precauciones en su manejo. Fichas de seguridad.

Preparación de materiales y reactivos:

Almacenamiento y conservación de materiales y reactivos:

Material y reactivos del

Tarea LCC7.- Caracterización del material más usado en el laboratorio de

Tarea LCC8.- Pictogramas y frases H y P

Reactivos del laboratorio de cultivos celulares

• Según la RAE, y a aplicado Química, un reactivo es “una sustancia que

•A nivel del laboratorio de cultivos celulares podemos denominar

Peligrosidad de las sustancias químicas o mezclas

• Existen unas normas generales para la comercialización de sustancias químicas

• Reglamento REACH (“Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of

Peligrosidad de las sustancias químicas o mezclas

•Según el Reglamento REACH:

Peligrosidad de las sustancias químicas o mezclas

• Con la aplicación del reglamento CLP se pretende:

• Algunas sustancias o mezclas excluidas de la aplicación del reglamento

Peligrosidad de las sustancias químicas o mezclas

• La evaluación e identificación de la peligrosidad de una sustancia química o

• Se considerarán peligrosas todas las sustancias o mezclas que cumplan los

Peligrosidad de las sustancias químicas o mezclas

Peligrosidad de las sustancias químicas o mezclas

Peligrosidad de las sustancias químicas o mezclas

• Según el reglamento CLP existen peligros de distinta naturaleza (físicos, para la

Peligrosidad de las sustancias químicas o mezclas

• Según el reglamento CLP existen diferentes tipos de peligros y diferentes categorías

Etiquetado de las sustancias químicas o mezclas

• En el etiquetado de las sustancias químicas o mezclas ha de aparecer:

Palabras de advertencia del etiquetado de sustancias

• Sirve para alertar de un peligro de mayor o menor gravedad:

• El reglamento CLP establece la palabra de advertencia que corresponde a

Pictogramas del etiquetado de sustancias químicas o mezclas

• Los pictogramas de las etiquetas de las sustancias químicas o mezclas son

• Tanto el color como la presentación de las etiquetas deben permitir que el

• Los forma de los pictogramas es de cuadrado apoyado en un vértice, de fondo

Indicaciones de peligro de sustancias químicas o mezclas

Las etiquetas de las sustancias químicas o mezclas y sus fichas de datos de

Códigos de las indicaciones de peligro de sustancias químicas o mezclas

Códigos de las indicaciones de peligro de sustancias químicas o mezclas

Consejos de prudencia de las sustancias químicas o mezclas (frases P)

Las etiquetas de las sustancias químicas o mezclas y sus fichas de datos de

Los códigos para las indicaciones de peligro siguen un código alfanumérico

Códigos de los de prudencia de las sustancias químicas o mezclas (frases P)

Códigos de los de prudencia de las sustancias químicas o mezclas (frases P)

Pictogramas y frases H y P de las sustancias químicas o mezclas

Tarea clase LCC8: pictogramas y frases H y P

• Elije un reactivo del laboratorio de cultivos celulares que tenga algún