PROCESOS BIOENERGETICOS A NIVEL MITOCONDRIAL

Temario
Cadena Respiratoria
Fosforilación Oxidativa
Características bioquímicas
Inhibidores
© Jorge Plasencia Alvarez
 CADENA RESPIRATORIA - Características
Definición Importancia

Conjunto de complejos proteicos localizados en

la membrana mitocondrial interna
por los que pasan electrones.
 CADENA RESPIRATORIA - Características
Ordenamiento Componentes
Los componentes de la cadena incluyen
proteínas ferrosulfuradas o centros
ferrosulfurados, coenzima Q y una serie
de citocromos: b, c, c1, a, a3 .

Ordenamiento secuencial de electrones o H+, desde los La respiración es un proceso mediante el cual las células obtienen energía
en forma de ATP, de la reacción controlada de H+ con el O2, para formar
componentes de mayor potencial REDOX negativo hacia los
agua.
componentes de mayor potencial REDOX positivo, conformado por
un conjunto de enzimas y sustratos.
 CADENA RESPIRATORIA - Complejos
Clasificación Complejo I

Complejo I= NADH deshidrogenasa

Complejo II= succinato deshidrogenasa
Complejo III= ubiquinona: citocromo c oxidorreductasa
Citocromo c
Complejo IV= citocromo oxidasa
Dos tipos de proteínas REDOX:
❑ Flavinmononucleótido (FMN), reducido por NADH.
❑ Proteínas hierro sulfuro (FeS), reducidas por NADH.
❑ Cataliza la oxidación de NADH por CoQ.
❑ Área de bombeo de protones.
 CADENA RESPIRATORIA - Complejos

Complejo II

▪ Enzima del ciclo del

ATC succinato
deshidrogenasa.
▪ FAD
▪ Proteínas FeS.
▪ Cataliza la oxidación de
FADH2 por CoQ
 CADENA RESPIRATORIA - Complejos

Complejo III Complejo IV

▪ Citocromo a y a3.
▪ Citocromos b, citocromo c1
▪ Dos átomos de cobre
▪ Proteínas FeS.
▪ Cataliza la reducción de 4
▪ Cataliza la oxidación de CoQ por el citocromo C. electrones de oxígeno a agua.
▪ Área de bombeo de protones. ▪ Área de bombeo de protones.
 CADENA RESPIRATORIA - Complejos
Sustratos que transfieren electrones
 CADENA RESPIRATORIA - Complejos
Sustratos que transfieren electrones
 CADENA RESPIRATORIA - Inhibidores

Definición Clasificación
Sustancias que se unen a un componente
de la cadena y bloquean la transferencia de
Inhibidores de la propia cadena
electrones en lugares específicos.

Inhibidores de la Fosforilación Oxidativa

Transportadores BLOQUEO Transportadores
Reducidos Oxidados

O2 no es consumido y no se genera ATP Desacopladores

 CADENA RESPIRATORIA - Inhibidores
Inhibidores de la Propia Cadena Complejo I
Son agentes que actúan en los componentes de la
cadena transportadora de electrones Evitan la oxidación de los sustratos que se
comunican con la cadena respiratoria e
impiden la transferencia de FeS a la
coenzima Q.

❑ Barbitúricos: Amobarbital, Tiopental,

fenobarbital.

❑ Piericidina A: antibiótico.

❑ Rotenona: producto vegetal, que se utiliza como

insecticida y veneno para peces.
 CADENA RESPIRATORIA - Inhibidores
Complejo III Complejo IV

Bloquean el pasaje de electrones a través Se combinan con la citocromo-oxidasa y ❑ Bloquean la

transferencia de
del complejo citocromo b y c. bloquean la transferencia de electrones al equivalentes
oxígeno reducidos de la
❑ Actimicina A: antibiótico. succinato
deshidrogenasa a la
Detienen por completo la respiración. coenzima Q.
❑ Dimercaprol: utilizado en caso de intoxicaciones con Carboxina
metales (arsénico, mercurio, oro, plomo) que forman Sulfuro de Hidrógeno
mercáptidos. ❑ Inhibe
competitivamente a
la succinato
deshidrogenasa.
Malonato
Monóxido de
Carbono

C N Cianuro
 CADENA RESPIRATORIA – Importancia Clínica
Síndrome MELAS

Miopatía mitocondrial mortal infantil, con disfunción renal:

- Encefalomiopatía mitocondrial.
- Acidosis láctica.
- Infarto cerebral.
 SINTESIS DE ATP - Fosforilación
Características Tipos Fosf. a Nivel Sustrato

Formación de ATP
mediante la

fosforilación directa del ADP

reacciones
que tienen suficiente energía libre como para

Ocurre en
producir ATP directamente de la vía metabólica.

No requiere oxígeno, por lo que es importante

para generar ATP en tejidos con poco aporte de
sintetiza a partir de ADP oxígeno.
2 procesos

Fosforilación a nivel Fosforilación

de sustrato Oxidativa
 SINTESIS DE ATP - Fosforilación

Fosf. a Nivel Sustrato Reacción química en la que una molécula fosforilada, transfiere su
grupo fosforil al ADP, produciendo de esa forma ATP. Esta energía será
aprovechada en los diversos procesos metabólicos.

1 Enzimas solubles

Cinasas
Intermediarios
2 químicos
(metabolitos)
La síntesis de ATP se acopla a la hidrólisis de un compuesto con
energía libre de hidrólisis mayor que la del propio ATP
 SINTESIS DE ATP - Fosforilación

Fosforilación Oxidativa Proceso que forma ATP al transferir electrones del NADH y FADH2 al
oxígeno molecular, a través de una serie de transportadores de
electrones.

desde productos
oxidado donan
Piruvato por Glucólisis. intermedios
electrones
Ac. Grasos por B-oxidación. Acetil CoA Ciclo ATC metabólicos
Algunos aa (transaminación) estos a
proporciona procesos
CO2 H2 O coenzimas NAD+ y
FAD
Formas reducidas, NADH y FADH2
para producir
 SINTESIS DE ATP – Fosforilación Oxidativa
Origen de los Productos Intermedios Reducidos

NADH se forma en glicólisis, Ciclo ATC y B-oxidación

Parte de esta energía es capturada y utilizada para ATP

donan
Al transmitirse por la cadena, cada e-
pierde su energía libre
FADH2 se forma
en Ciclo ATC y B-
oxidación
 SINTESIS DE ATP – Fosforilación Oxidativa
Mecanismo

Transporte de e- esta acoplado a transporte de

1 protones a través de MMI hasta el espacio MI.

Se crea un gradiente electroquímico a través de la

2 MM, por el “bombeo de protones” en 3 lugares.

Protones sólo pueden retornar a la matriz

3 mitocondrial a través de ATP sintasa en la MMI.

El movimiento de protones activa la ATP sintasa

4 para catalizar la síntesis de ATP.

Cualquier energía no atrapada como ATP se libera

5 en forma de calor.
 FOSFORILACION OXIDATIVA – Teoría Quimiosmótica
La energía derivada de la transferencia de electrones a través de la cadena transportadora de electrones es utilizada
para bombear protones a través de la membrana mitocondrial interna, desde la matriz mitocondrial hacia el lado
citosólico. Se genera así un gradiente electroquímico que consiste en un gradiente de protones y un potencial de
membrana.

Flujo de e- no produce
directamente la síntesis
de ATP

Los complejos I, III y IV actúan

como bombas de protones creando El retorno de los protones a través de las
un gradiente transmembrana que enzimas ATPasas permite la actividad de
deja negativo el lado de la matriz. fosforilación de ADP + Pi
FOSFORILACION OXIDATIVA – Teoría Quimiosmótica

4H+ 4H+ 2H+

½ O2 H2O
Succinato Fumarato
NADH
NAD+

El ATP es generado como resultado de la energía producida cuando los electrones de NADH
y FADH2 son trasladados al O2 molecular por una serie de transportadores de electrones,
conocidos la CADENA TRANSPORTADORA DE ELECTRONES.
FOSFORILACION OXIDATIVA – Estructura de ATP sintasa

Subcomplejo F1:
▪ 9 subunidades α3, β3,
Subcomplejo F0: γ, δ, ε.
Proteína Integral, ▪ 3 sitios catalíticos.
Canal ▪ subunidad γ fija en
transmembrana forma de un “eje
para protones con 3 doblado”.
subunidades: a, b2 y
C12 Los protones que pasan por
el disco de unidades “c”
hacen rotar el disco y la
subunidad γ fija.

La subunidad γ se adapta
dentro del subcomplejo F1
que no rotan

Las subunidades β captan

de manera secuencial ADP
Se forman 3 moléculas de ATP por cada giro completo del complejo y Pi para formar ATP
FOSF. OXIDATIVA – Sistema de Transporte Mitocondrial

MEMBRANA
EXTERNA

MEMBRANA
INTERNA

MATRIZ

SUSTRATOS
INTERMEDIARIOS
NUCLEOTIDOS

MEMBRANA LIMITA el
INTERNA TRANSPORTE

SISTEMAS DE
TRANSPORTE
 FOSF. OXIDATIVA – Sistema de Transporte Mitocondrial
Definición Translocador de Nucleotidos: Adenina
Facilitan el movimiento selectivo de
varios sustratos e intermediarios a un
lado y otro de la membrana y de
sustratos contra gradiente de
concentración.

La animación ilustra este proceso, en este caso

introduciendo ADP a la matriz mitocondrial y
sacando ATP. Ésta es la dirección de transporte
habitual, pues la ATP sintasa genera un exceso de
ATP en la matriz mediante la fosforilación
oxidativa, impulsada por el gradiente de protones
generado por el transporte electrónico mitocondrial.
Ese ATP puede utilizarse en el citosol para los
procesos de biosíntesis.
FOSFATO TRANSLOCASA
 FOSF. OXIDATIVA – Sistema de Transporte Mitocondrial
Los nucleótidos implicados en las reacciones de
oxidación-reducción celulares (NAD+, NADH, NADPH,
FAD y FADH2) y la coenzima A y derivados no son
LANZADERA DEL GLICEROL
permeables a la MMI
FOSFATO
se utilizan
Mecanismos de LANZADERAS DE SUSTRATO

LANZADERA DEL GLICEROL LANZADERA DE MALATO

FOSFATO ASPARTATO

HIGADO
MUSCULO ESQUELETICO

CORAZÓN Transportador de ácidos di

CEREBRO
RIÑON

LANZADERA DE MALATO
ASPARTATO
 FOSF. OXIDATIVA – Sistema de Transporte Mitocondrial
Lanzadera de ATP
El ATP es transportado desde la matriz mitocondrial al citosol en un intercambio con ADP (sistema antitransporte ATP-ADP)

Balance Final
La oxidación de NAD+ genera aproximadamente 3 ATP.
La oxidación de FADH2 genera aproximadamente 2 ATP.
 FOSFORILACION OXIDATIVA – Conclusiones

El proceso total es conocido como FOSFORILACIÓN OXIDATIVA, debido a que la energía generada por la
1
transferencia de electrones, a través de la cadena respiratoria, al O2 es utilizada en la síntesis de ATP.

2 El transporte de electrones y la síntesis de ATP ocurren simultáneamente y están estrechamente acoplados

3 NADH y FADH2 son oxidados solamente si el ADP está disponible para su conversión en ATP; es decir, cuando el
ATP está siendo utilizado y convertido en ADP

4 El ATP está constantemente consumiéndose y regenerándose.

5 Se consume en procesos como la contracción muscular, el transporte activo y las reacciones biosintéticas.

6 Es regenerado por la oxidación de los alimentos.

7 La energía liberada cuando el ATP es hidrolizado es utilizada para conducir reacciones que requieren energía.

8 El ATP transfiere energía de los procesos que la producen a los procesos que la utilizan.
 FOSFORILACION OXIDATIVA - Inhibidores
Clasificación
antibiótico, se une al complejo ATP
Inhibidores de la propia cadena Oligomicina: sintasa (segmento Fo) e impide la
conversión de ADP en ATP.

Inhibidores de la Fosforilación Oxidativa glucósido vegetal, inhibe al transportador

Atractilósido: de ADP a la mitocondria, con la salida
simultánea de ATP (translocador
Desacopladores ATP/ADP)

Inhib. de Fosforilación
No hay síntesis ATP

O2 no es consumido

Transportadores acumulan
estado reducido
El uso de inhibidores no sólo ha ayudado a deducir la secuencia de la cadena
Inhibidores de la síntesis de ATP. respiratoria, sino que ha permitido conocer mejor el mecanismo de acción de algunos
Síntesis de ATP y el transporte de electrones es fármacos y venenos
acoplado
 FOSFORILACION OXIDATIVA - Inhibidores
Desacopladores DESACOPLADOR NATURAL: TERMOGENINA (PROTEÍNA
DESACOPLADORA - UCP)
Son TÓXICOS que disocian la oxidación de la Provoca que La respiración se
torne incontrolada Son desacoplantes endógenos
fosforilación en la cadena respiratoria
(proteínas transportadoras) localizados
en la membrana mitocondrial interna del
compuestos hidrófobos tejido adiposo pardo
Los desacoplantes suelen ser
bases o ácidos débiles La energía se libera como calor y el
proceso se llama termogénesis sin
ACTÚAN Crean un “escape de protones", es decir, disipa el escalofríos.
gradiente de protones permitiendo que los iones H+ se
desplacen desde el espacio intermembrana hacia la matriz El frio activa la lipasa sensible a la
mitocondrial sin la participación de la ATP-SINTASA acción de la noradrenalina

LOS MAS • NATURAL: termogenina

UTILIZADOS (proteína desacopladora) La lipolisis favorece la producción de
SON • SINTÉTICO: 2,4-dinitrofenol grandes cantidades de ácidos grasos
libres en los tejido adiposos

Se activa el transporte de H+ mediante

la segregación de UCP-1
 FOSFORILACION OXIDATIVA - Inhibidores
Desacopladores D. SINTÉTICO: 2,4-DINITROFENOL (DNP)

Es un desacoplante exógeno que aumentan la

(pH ácido)
permeabilidad de la membrana mitocondrial interna
a los protones

A causa de su carácter hidrófobo, puede difundir

libremente a través de la membrana mitocondrial
interna.

La acidez del espacio intermembrana permite la

protonación del 2,4-dinitrofenol

Difunde libremente a través de la membrana

mitocondrial interna (pH básico)

Cuando llega a la matriz mitocondrial, encuentra

un pH mas básico y se libera el protón
 FOSFORILACION OXIDATIVA - Inhibidores
Agentes Desacoplantes
2,4 dinitrofenol,
Dinitrocresol,
Pentaclorofenol.
CCCP (clorocarbonilcianurofenilhirazona)
antibióticos de naturaleza peptídica, son
ionóforos de K+ y Ca++

Valinomicina

Se comportan como ionóforos

Se incrementa el consumo de O2 y el transporte de electrones, se estimula la
Permiten la reentrada de protones actividad del ciclo de Krebs y la producción de O2. No se produce ATP porque el
desde el citosol a la matriz, sin
gradiente de protones a través de la membrana mitocondrial interna está disipado
pasar por el canal del complejo
ATP sintasa, desacoplando así el
transporte de electrones y la La energía generada por el incremento de la respiración (transporte de electrones y
producción de ATP, por lo que consumo de O2) se pierde en forma de calor
disocian la oxidación de la
fosforilación

A: ionóforos tipo “canal”, de existencia transitoria;

B: ionóforos tipo “barqueta”, dotados de elevada
movilidad en la bicapa lipídica
 ENZIMAS

Bibliografía Empleada
Blanco A. “Química Biológica”9° edición. El Ateneo, Argentina-2014

Lectura Obligatoria
Rodwell V. “Bioquímica Ilustrada Harper”31° edición. Lange, México-2019
Baynes J. “Bioquímica Médica”4° edición. Elsevier, España-2014