GESTIÓN DE

MUESTRAS BIOLÓGICAS
U NIDAD D IDÁCTICA 9
P UNCIONES Y E NDOSCOPIAS
Daniel Brell Martín
Ldo. Biología y Bioquímica
Ciclo Formativo de Grado Superior en Anatomía Patológica y Citodiagnóstico
 PUNCIONES
❖ Líquido cefalorraquídeo
❖ Líquido cefalorraquídeo (LCR) → líquido seroso de color transparente que envuelve el encéfalo y la
médula espinal.
❖ Desde un punto de vista anatómico, el SNC se encuentra formado por:
❖ Encéfalo → localizado en el interior del cráneo y dividido, a su vez,
en cerebelo y bulbo raquídeo.
❖ Médula espinal → localizada a lo largo de la columna vertebral,
atravesando cada vértebra.
❖ Ambas estructuras se encuentran recubiertas por las membranas meníngeas, que
ofrecen protección al SNC y de las que se distinguen tres tipos:
❖ Duramadre: es la capa más externa, con consistencia dura y
fibrosa.
❖ Aracnoides: constituye la membrana media, de menor consistencia y
aspecto reticular.
❖ Espacio subaracnoideo: contiene el LCR, a volúmenes normales de 90
a 150 ml en una persona sana adulta.
❖ Piamadre: es la membrana más interna y fina, adherida al tejido
nervioso.
 PUNCIONES
❖ Líquido cefalorraquídeo
❖ Las principales funciones del LCR son:
❖ Protección → ofrece amortiguación al SNC frente a golpes, movimientos bruscos, etc.
❖ Medio para la transferencia de sustancias → facilita el intercambio de sustancias entre la sangre y los
tejidos nerviosos.
❖ Obtención de LCR por punción lumbar → la obtención de LCR puede ayudar al diagnóstico de determinadas
enfermedades y a la elección del tratamiento correcto.
❖ El paciente debe encontrarse en ayunas en el momento de la obtención de la muestra, debe haber recibido
información suficiente al respecto y haber mostrado su consentimiento para la intervención.
❖ La punción suele realizarse entre la 3ª y 4ª vértebras lumbares (L3-L4), aunque puede llevarse a cabo en L4-
L5 y entre la última lumbar y la primera sacra (L5-S1).
❖ Las muestras de LCR se recogen en tres tubos estériles y sin añadir conservantes, siendo el 1er tubo
para bioquímica, el segundo para microbiología y el tercero para citología.
❖ En caso de patología tumoral deberá obtenerse tanto LCR como sea posible.
❖ Las muestras deben enviarse lo más pronto posible al laboratorio, debiendo ser centrifugadas
rápidamente para evitar la xantocromía de la sangre.
 PUNCIONES
❖ Líquido cefalorraquídeo
❖ Análisis del LCR → permite el diagnóstico de neoplasias del sistema nervioso, hemorragias cerebrales,
meningitis, encefalitis, enfermedades degenerativas y autoinmunes del cerebro,
trastornos desmielinizantes, etc.
❖ Cada muestra de LCR debe recibir un examen macroscópico previo en el que se registren ciertas características
físicas de la misma: aspecto, color, consistencia o densidad, volumen, pH, etc.
❖ Las muestras deben centrifugarse rápidamente tras su obtención con el fin de evitar la xantocromía (coloración
amarillenta, de la piel u otro tejido).
❖ Examen bioquímico → recuento celular, estudios de ciertos analitos (glucosa, proteínas, etc.)
❖ Examen microbiológico → la presencia de cualquier microorganismo en el LCR revelará una
situación patológica.
- En caso de solicitar un estudio de presencia de microorganismos anaerobios,
la muestra deberá congelarse a -70 ºC cuando su transporte al laboratorio
se demore por más de 24h.
❖ Examen citológico → permitirá realizar estudios sobre presencia de infecciones y neoplasias en el
SNC, así como interpretar la sintomatología y evolución de dichas patologías y
su influencia celular en los tejidos nerviosos (la muestra debe concentrarse
previamente por filtración o centrifugación).
 PUNCIONES
❖ Líquidos pleural, peritoneal y pericárdico
❖ Líquidos pleural, peritoneal y pericárdico → líquidos serosos ubicados entre membranas (mesotelios)
que ejercen una función de protección de los órganos
frente a la fricción.
❖ Según la cavidad que delimiten distinguimos los siguientes mesotelios:
❖ Pleura → ubicada en la región torácica, recubriendo los pulmones.
❖ Peritoneo → ubicado en la región abdominal.
❖ Pericardio → ubicado en torno al corazón, envolviendo a éste y a las raíces de los grandes vasos
sanguíneos.
❖ Derrames (efusión serosa) → aumento anormal de la cantidad de líquido presente en el mesotelio.
❖ Trasudados: constituyen fluidos de origen no inflamatorio producidos por una alteración de la presión
osmótica en el plasma sanguíneo o de la presión hidrostática capilar, sin alterar el mesotelio.
❖ Exudados: constituyen fluidos de origen inflamatorio derivados de un proceso patológico, cuya excreción se
promueve por un aumento de la permeabilidad de la membrana capilar.
❖ Derrame quiloso: salida de quilo [fluido corporal lechoso formado por bilis, jugos pancreáticos y lípidos
emulsionados, producido en el intestino delgado y transportado por ciertos vasos linfáticos (lactíferos)] del
conducto torácico como consecuencia de una lesión u obstrucción linfática.
 PUNCIONES
❖ Líquidos pleural, peritoneal y pericárdico
❖ Derrames (efusión serosa) → aumento anormal de la cantidad de líquido presente en el mesotelio.
❖ Las muestras de derrames
❖ Los derrames suelen ser abundantes, lo que facilita la obtención de una cantidad útil de muestra para la
realización de los análisis necesarios.
❖ En general, un volumen muestral de 50 ml es suficiente para un análisis completo de laboratorio (salvo
en el caso de pruebas bioquímicas o microbiológicas especiales).
❖ El líquido obtenido debe transportarse rápidamente al laboratorio en la hora subsiguiente a su
obtención, debiendo conservarse a 4 ºC cuando el retraso sea inevitable.
❖ Análisis de los derrames
❖ Color → proporciona una orientación del proceso patológico presente:
- Bilirrubina (color amarillento anaranjado).
- Hematíes (color rojizo o pardo).
- Leucocitos (color amarillento).
- Líquido quiloso (color blanco o verde lechoso).
❖ Turbidez → mide principalmente el n.º de células presentes en el líquido.
❖ Coagulabilidad → el contenido en fibrinas (favorecen la formación del coágulo) variará de un líquido a
otro: frecuente en exudados y ausente en trasudados.
 PUNCIONES
❖ Líquidos pleural, peritoneal y pericárdico
❖ Las muestras de derrames
❖ Estudios bioquímicos → se depositan entre 8 y 10 ml en un recipiente estéril, eliminando los posibles
coágulos que puedan formarse.
❖ Las pruebas más habituales son las siguientes:
Líquido pleural (toracocentesis)
Determinación de proteínas (< 3g/dl = trasudado / > 3g/dl = exudado) y glucosa.
Determinación de adenosindesamina (ADA) → diagnóstico pleuritis tuberculosa.
Determinación de amilasa (aumento en pancreatitis)
(pH < 6 = posible rotura esofágica / < 7 = posible empiema)
Líquido ascítico o peritoneal (paracentesis)→ determinación de proteínas, glucosa, FA y NH3+.
Líquido pericárdico (pericardiocentesis) → determinación de glucosa.
❖ Estudios citológicos → se procede de la misma forma que en los estudios bioquímicos, pero se utiliza
EDTA (1 mg/ ml) como anticoagulante, evitando el uso de citrato sódico y
oxalato.
❖ Estudios microbiológicos → se depositan entre 1 y 10 ml en recipientes estériles, requiriéndose
estudios diferenciales de aerobios y anaerobios cuando la muestra se
obtenga purulenta (2 frascos de hemocultivo conservados a tª ambiente)
La presencia de cualquier microorganismo en estos líquidos se traduce en una
situación patológica.
 PUNCIONES
❖ Líquido sinovial
❖ Líquido sinovial → fluido viscoso y claro, derivado del plasma sanguíneo, rico en proteínas y ácido hialurónico
que se localiza en las cavidades articulares, contenido dentro de la membrana
sinovial.
❖ Su principal función es proporcionar amortiguación y lubricación a las articulaciones durante el movimiento
musculoesquelético.
❖ Según la movilidad que puedan exhibir, distinguimos tres tipos de articulaciones:
❖ Articulaciones fijas (sinartrosis) → ej: huesos del cráneo.
❖ Articulaciones móviles (diartrosis) → ej: codo, rodilla, hombro (en este tipo encontramos líquido sinovial).
❖ Articulaciones con escasa movilidad (anfiartrosis) → ej: discos intervertebrales.

❖ Análisis del líquido sinovial → el principal indicio de alteración patológica del líquido sinovial va a ser su
acumulación en grandes cantidades en torno a las articulaciones.
❖ Las enfermedades articulares se agrupan en dos grandes categorías:
❖ Artritis → inflamación de las articulaciones que cursa en dolor, hinchazón y rigidez en el
movimiento de las mismas.
❖ Artrosis → enfermedad degenerativa articular que ocasiona una pérdida progresiva del cartílago
que forma parte de las articulaciones.
 PUNCIONES
❖ Líquido sinovial
❖ Análisis del líquido sinovial → las muestras deben conservarse entre 2 – 8 ºC si la entrega al
laboratorio no es inmediata a la obtención (salvo la destinada a cultivo)
❖ La toma de muestras de líquido sinovial (artrocentesis) requerirá la obtención de tres tubos muestrales
para llevar a cabo los siguientes análisis:
❖ Estudios bioquímicos → consistentes en determinar la concentración de ciertos analitos en el
líquido (ej: glucosa, lactato, proteínas del complemento, etc.). Requiere
centrifugación inmediata a la artrocentesis.
❖ Estudios citológicos → comprende la realización de recuentos celulares (determinación de la
densidad de células sinoviales) y diferenciales (a través de frotis,
tinciones y estudios de morfología celular), así como la detección de
cristales producidos por microcalcificaciones (especialmente, los no
birrefringentes como la hidroxiapatita de calcio - debe hacerse inmediata/
después de la artrocentesis y sin uso de anticoagulantes). Requiere
centrifugación inmediata a la artrocentesis.
❖ Estudios microbiológicos → implica la realización de cultivos y observación al microscopio con
objeto de evaluar la posible presencia de microorganismos.
 PUNCIONES
❖ Líquido amniótico
❖ Líquido amniótico → líquido claro y amarillento, contenido dentro de una membrana interna (amnios) que
rodea al feto durante el embarazo.
❖ El líquido amniótico cumple diversas funciones en el feto:

❖ Protección mecánica (amortiguación contra golpes).

❖ Protección térmica (evita variaciones de tª en el feto).
❖ Favorece un medio óptimo para el crecimiento y desarrollo (permite el movimiento libre del feto así como el
correcto desarrollo pulmonar en éste).
❖ En función de la cantidad de líquido presente dentro del saco amniótico podemos distinguir las siguientes
alteraciones o cuadros patológicos relacionados con el líquido amniótico:
❖ Hidramnios → tiene lugar cuando existe exceso de líquido amniótico dentro del saco, lo que puede tener
diversas causas de origen (ej: diabetes gestacional, embarazos múltiples, etc.)
❖ Oligoamnios → tiene lugar cuando existe falta de líquido amniótico, lo que puede tener su causa en una ruptura de
alguna de las dos membranas que componen el saco (externa: corion / interna: amnios), una
disfunción placentaria, ciertas anomalías fetales, etc.
 PUNCIONES
❖ Líquido amniótico
❖ Líquido amniótico
❖ Análisis del líquido amniótico → tras la obtención (1 tubo, por amniocentesis), la muestra se envía
rápidamente al laboratorio y se centrifuga, derivando el sobrenadante a
pruebas bioquímicas y el sedimento a pruebas genéticas.
❖ El análisis del líquido amniótico permite la detección precoz de ciertas alteraciones o
anomalías patológicas fetales:
❖ Trastornos metabólicos y cromosómicos.
❖ Trastornos estructurales (espina bífida, anencefalia, etc.)
❖ Infecciones en el feto (la detección de cualquier microorganismo en el líquido amniótico
constituye un cuadro patológico).
❖ Anomalías durante la gestación e incompatibilidades de Rh:
[el color de la muestra puede ser un indicio: amarillo – eritroblastosis fetal
verde oscuro – hipoxia fetal (presencia de meconio)
pardo a rojizo oscuro – muerte fetal]
 ENDOSCOPIAS
❖ Técnicas endoscópicas
❖ Endoscopia → procedimiento médico-quirúrgico que permite la visualización interna del organismo a través de
un tubo visor que incorpora una cámara unida a un tubo largo y delgado.
❖ Objetivos de la endoscopia
❖ Observación directa de la zona para detección precoz de lesiones, derrames, exudados, etc.
❖ Toma de muestras (líquidos, biopsias, etc.) mediante instrumentos específicos acoplados al tubo
endoscópico.
❖ Acción terapéutica en el organismo mediante aspiración de secreciones, hemorragias, derrames o
exudados; auxilio en intervenciones quirúrgicas; eliminación de pólipos, quistes, cuerpos extraños, etc.
❖ Obtención de muestras por endoscopia
❖ Muestras de líquidos → el endoscopio permite la toma de muestras líquidas prácticamente de cualquier
región del organismo a la que pueda tener acceso.
❖ Biopsias → las técnicas endoscópicas permiten obtener muestras de tejidos sin necesidad de intervención
quirúrgica, lo que supone una ventaja respecto a la comodidad y tranquilidad del paciente.
 ENDOSCOPIAS
❖ Técnicas endoscópicas
❖ Endoscopia
❖ Obtención de muestras por endoscopia
❖ Citologías → pueden obtenerse, generalmente, a través de dos
sistemas distintos:
❖ Lavado y aspiración: consiste en la inyección de una pequeña
cantidad de suero fisiológico a través del propio tubo
endoscópico, y su posterior aspiración. A continuación, el líquido
obtenido se centrifugará y se obtendrá una fracción celular útil
para cultivo y estudio citológico.
❖ Cepillado: consiste en el uso de un cepillo adaptado al endoscopio
con el que se raspa la superficie de las mucosas internas,
quedando células adheridas ahí que posteriormente serán
resuspendidas y centrifugadas, o pasadas directamente a un
portaobjetos y fijadas, para su procesado en el laboratorio de
cultivos celulares.
Distintas endoscopias del estómago: normal (arriba), con múltiples úlceraciones (centro) y con cuerpo extraño (abajo)
 ENDOSCOPIAS
❖ Técnicas endoscópicas

Algunas denominaciones específicas de técnicas endoscópicas habituales.

 ENDOSCOPIAS
❖ Técnicas endoscópicas
❖ Endoscopia
❖ Endoscopias del árbol traqueobronquial → se lleva a cabo mediante un fibrobroncoscopio.
❖ En función del objetivo que se persiga al realizar la endoscopia en esta región se recogerá un tipo u otro
de muestras:
❖ Diagnóstico → comprende la localización de lesiones o derivados de éstas en el árbol traqueobron-
quial, a través de la obtención de secreciones (por cepillado o aspiración bronquial),
productos del lavado bronquial (por aspiración), biopsias tisulares.
❖ Terapéutico → implica la realización complementaria de otras técnicas (electrocirugía, criocirugía,
etc.) que optimicen la extracción de cuerpos o tejidos del paciente a través de las
vías nasal (de elección) u oral (secundaria), siendo destacable el uso de sedación
(local o general) durante la intervención.
❖ Procedimientos de actuación
❖ Broncoaspiración o aspirado bronquial (BAS): implica la liberación por el fibrobroncoscopio de un
volumen de 5 – 10 ml de suero fisiológico en una determinada región pulmonar, con posterior
aspirado del mismo. Seguidamente, se envía al laboratorio para estudio citológico o microbiológico.
 ENDOSCOPIAS
❖ Técnicas endoscópicas
❖ Endoscopia
❖ Endoscopias del árbol traqueobronquial → se lleva a cabo mediante un fibrobroncoscopio.
❖ Procedimientos de actuación
❖ Lavado broncoalveolar (BAL): implica la liberación por el fibrobroncoscopio de un volumen de 100 – 150
ml de suero fisiológico en una determinada región pulmonar, con posterior aspirado del mismo.
Seguidamente, se envía al laboratorio para estudio citológico (especialmente, para recuento celular y
linfocitario) o microbiológico.
❖ Cepillado bronquial: el tubo endoscópico lleva acoplado un cepillo con el que se raspa la mucosa
bronquial, cuyas células obtenidas se transfieren a un portaobjetos con posterior fijación en etanol y
estudio citológico.
❖ Cepillado bronquial protegido → el cepillo se introduce en una cubierta que permite recuperarlo
minimizando al máximo la contaminación.
❖ Biopsia pulmonar transbronquial → consiste en una pinza adherida al tubo endoscópico que raspa en la
zona donde exista lesión, extendiéndose más tarde la muestra
directamente sobre un portaobjetos que se fijará con etanol