PCR

(REACCION EN
CADENA DE LA
POLIMERASA)
Es una tecnica molecular in vitro cuyo
proposito es obtener un gran numero de
copias de una secuencia de ADN .
 REQUERIMIENTOS PARA ESTE PROCESO SON:

ADN molde.Molecula de ADN de la cual se requiere obtener un

gran numero de copias .
Taq polimerasa. ADN polimerasa, procedente de thermus
aquaticus, bacteria q habita agua termales.
Cebadores. Las polimerasas necesitan de estos para iniciar con
la insercion de nucleotidos complementario. Se necesitan 2
diferentes Forward y reverse.
Desoxinucleótidos trifosfatos :Son los nucleotidos con los que
se llevara a cabo la sintesis de la cadena nuevas de adn
(ATP,TTP,CTP,GTP)
 PROCESOS EN ETAPAS:

Desnaturalizacion: En esta etapa se eleva la temperatura hsta los

90° o 94° para romper los enlaces de hidrogeno y separar cadenas
de doble helice.

Alinamiento: La tempertura es disminuida a 55° °c esto favorece la

union de los cebadores a los extremos 3 ° de las cadenas ADN
separadas
Elongacion: Es necesario aumentar la temperatura hasta los 75°C
aprox, debido a que esta epoca es la optima para q la taq
polimerasa comience a agregar nucleotidos complementarios a la
cadena molde y extender las secuencias de oligonucleotido de los
primers.