PRACTICA Nro.

Contenido:
Preparación de láminas según técnica citológica - Observación de células
aisladas - Demostración de inclusión - Observación de Artefactos

Objetivos:
Al finalizar la Tutoría, el alumno será capaz de:
- Preparar láminas citológicas siguiendo los pasos explicados durante la
práctica
- Reconocer las diferentes partes de la célula a la observación microscópica
- Explicar la técnica de inclusión
- Reconocer los artefactos mas comunes en la Técnica de Cito e Histología.

PREPARACIÓN DE UN EXTENDIDO DE CÉLULAS.

1) Obtención de muestra: Introduzca el borde pequeño de una lámina

porta objetos y suavemente obtenga un raspado de la cara interna de la
mejilla. Luego en otra lámina porta objetos extienda la muestra
deslizando la lámina que la contiene en ángulo de 45 más o menos,
finalmente deje secar por algunos segundos.
2) Fijación: Coloque la lámina en una solución de alcohol-éter en partes
iguales durante cisno minutos y retirar
3) Hidratación gradual: Colocar la lamina en frascos de alcohol, durante un
minuto, uno a uno ordenados gradualmente según el contenido de
alcohol en forma decreciente hasta llegar a un frasco de agua destilada,
retirar
4) Coloración de núcleos: Colocar la lamina en un frasco con hematoxilina
de Harris (colorante básico) durante un minuto y luego de retirar la
lamina pasarla por agua corriente lo que provocará el viraje

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 5) Coloración de citoplasma: Colocar al lamina en eosina (colorante acido)
durante un minuto, enjuagar con agua destilada
6) Deshidratación gradual: Colocar la lamina en frascos de alcohol, durante
un minuto, uno a uno ordenados gradualmente según el contenido de
alcohol en forma creciente hasta llegar a un frasco de alcohol de 100º,
retirar
7) Aclaramiento con xilol
8) Montaje con bálsamo de Canadá

DIBUJE LA BATERIA DE COLORACION

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OBSERVACION DE LA LAMINA Nº 2

Muestra: Descamación de mucosa oral

Coloración:
Observación: Células libres

Con el objetivo panorámico, enfoque el preparado y haga una inspección del

mismo con ayuda de los mandos coaxiales, seleccione el sector donde las
células se encuentren libres, no aglutinadas. Ponga a mayor aumento e
identifique las partes de la célula.

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¿De que color se ha coloreado el núcleo? ¿Por que?

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¿De que color se ha coloreado el citoplasma? ¿Por qué?
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TÉCNICA DE INCLUSIÓN.

Al prepara la lamina de descamación de mucosa oral, hemos seguido la técnica

correspondiente a material fresco. Si queremos procesar una muestra compacta
o hueca previamente fijada debemos seguir la técnica de inclusión:

1) Obtención de una muestra fresca

2) Fijación de la muestra: En formol al 10% durante dos o más horas

3) Lavado: En agua destilada durante 10 minutos mas o menos

4) Deshidratación gradual:
Alcohol de 70…..……………………………………………………. 1 hora
Alcohol de 95 I….…………………………………………………… 1 hora
Alcohol de 95 II……………………………………………………… 1 hora
Alcohol de 95 III………………………………………………………1 hora
Alcohol de 100 I……………………………………………………....1 hora
Alcohol de 100 II……………………………………………………...1 hora
Alcohol de 100 III……………………………………………………..1 hora

5) Aclaramiento
Xilol I…………………………………….……………………………. 1 hora
Xilol II…………………………………………………………………. 1 hora

6) Inclusión en parafina
Xilol - Parafina……… ……………………………………………....1 hora
Parafina……………………………………………………………….. 1 hora

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7) Elaboración del bloque

8) Corte al micrótomo

9) Extensión de los cortes en baño María y colocación de la muestra en la

lamina porta objetos con Albumina de Mayer

10) Coloración
Desparafinar en xilol I…………………………………………………..3 min
Desparafinar en xilol II .………………………………………………..3 min

11) Hidratación gradual

12) Coloración de núcleos y de citoplasma, aclarado y montaje de la misma

manera que se hizo en la preparación anterior

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OBSERVACIÓN DE ARTEFACTOS. LAMINA Nº 1

Muestra: Hígado, páncreas, otros órganos

Coloración: Hematoxilina – Eosina (H. E.)
Observación: Artefactos

Enfoque el preparado con el objetivo de menor aumento y recorra el mismo con

ayuda de los mandos coaxiales y observará las células que conforman los
tejidos. Además deberá identificar los siguientes artificios: Desgarros,
melladuras pliegues, dobleces, superposición de tejidos, grumos, zonas mal
coloreadas, burbujas de aire, pelos (de humano), pelos de rata, fibras, polvo,
precipitados de colorante, laminillas rotas, etc.

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