GUÍA DE PROCEDIMIENTO: PRUEBA RÁPIDA PARA DETECCIÓN DE ANTÍGENO DEL SARS-CoV-2

GUÍA DE PROCEDIMIENTO: PRUEBA RÁPIDA PARA

DETECCIÓN DE ANTÍGENO DEL SARS-CoV-2

UNIDAD DE SOPORTE AL DIAGNÓSTICO Y TRATAMIENTO

SUBUNIDAD DE SOPORTE AL DIAGNÓSTICO – PATOLOGÍA CLÍNICA

Firmado digitalmente por UGAS

Firmado digitalmente por MENDEZ CHARCAPE Carlos Federico FAU
CHACON RODRIGUEZ Carla 20552196725 soft
Elizabeth FAU 20552196725 soft Motivo: Soy el autor del documento
Motivo: Soy el autor del documento Fecha: 01.09.2023 08:14:58 -05:00
Fecha: 29.08.2023 13:28:32 -05:00

Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

Sub-Unidad de Soporte al ● Unidad de Soporte al Dra. Elizabeth Zulema Tomas

Diagnóstico - Patología Diagnóstico y Gonzales de Palomino
Clínica Tratamiento
● Unidad de Gestión de la Directora General del Instituto
Calidad Nacional de Salud del Niño - San
Borja

Firmado digitalmente por GOMEZ

PONCE Victor Alfredo FAU
20552196725 soft
Motivo: Soy el autor del documento
Fecha: 01.09.2023 15:27:29 -05:00
Firmado digitalmente por VELIZ
SILVA Emma Victoria FAU
20552196725 soft
Motivo: Doy V° B°
Fecha: 07.09.2023 18:07:50 -05:00

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GUÍA DE PROCEDIMIENTO: PRUEBA RÁPIDA PARA DETECCIÓN DE

ANTÍGENO DEL SARS-CoV-2

II. Finalidad.................................................................................................................................................................3
III. Objetivos ................................................................................................................................................................3
a. Objetivo General ........................................................................................................................ 3
b. Objetivos específicos .................................................................................................................. 3
IV. Ámbito de aplicación.........................................................................................................................................4
V. Nombre del proceso o procedimiento para estandarizar y código CPMS...................................4
VI. Consideraciones Generales.............................................................................................................................4
a. Definiciones operativas .............................................................................................................. 4
1 Definición del procedimiento ............................................................................................. 4
2. Aspectos epidemiológicos importantes……………………………………..……..…………….……....5
3. Consentimiento Informado ……………………………………………………………………….…..……....5
b. Conceptos básicos…………………………………………………………………………………………………………………5
c. Requerimientos básicos……………………………………………………………………………………………………….6
VII. Consideraciones Específicas ..........................................................................................................................7
a. Descripción detallada del Proceso o Procedimiento………………………………………………..…….7
b. Indicaciones……………………………………………………………………………………………………………...11
c. Riesgos o Complicaciones Frecuentes………………………………………………………………………...11
d. Riesgos o Complicaciones poco Frecuente………………………………………….………………………11
e. Contraindicaciones…………………………………………………………………………………………..………11
VIII. Recomendaciones............................................................................................................................................ 11
IX. Autores, fecha y lugar .................................................................................................................................... 11
X. Anexos .................................................................................................................................................................. 11
XI. Bibliografía ......................................................................................................................................................... 16

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GUÍA DE PROCEDIMIENTO: PRUEBA RÁPIDA PARA DETECCIÓN DE

ANTÍGENO DEL SARS-CoV-2

I. Título
Guía de procedimiento: Prueba rápida para detección de antígeno del SARS-CoV-2

II. Finalidad
Contribuir con un documento técnico que permita definir procedimientos diagnósticos
estandarizados para detección de antígeno del SARS-CoV-2, en el Instituto Nacional de
Salud del Niño de San Borja; logrando con ello el cumplimiento de los estándares de
calidad institucional.

III. Objetivos

a. Objetivo General
● Estandarizar los procedimientos preanalíticos, analíticos y postanalíticos de
laboratorio para la detección de antígeno del SARS-CoV-2, en el Instituto Nacional
de Salud del Niño de San Borja.
b. Objetivos específicos
● Establecer las consideraciones preanalíticas que permitan obtener muestras
adecuadas para la detección de antígeno del SARS-CoV-2.
● Establecer los procedimientos analíticos mediante la metodología de
Inmunocromatografia para la detección de antígeno del SARS-CoV-2.
● Establecer los procedimientos postanalíticos para la validación y emisión de
resultados, permitiendo brindar al clínico información confiable y oportuna que
permita decidir alguna acción terapéutica en beneficio del paciente.

IV. Ámbito de aplicación

La presente Guía de Procedimiento, tiene como ámbito de aplicación el Área de
Inmunología- Servicio de Patología Clínica – Sub-Unidad de Soporte al Diagnóstico del
Instituto Nacional de Salud del Niño San Borja, categoría III-2 del MINSA. Adicionalmente,

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puede ser aplicado en otros laboratorios de entidades de salud que cuenten con el
equipamiento y personal para el procesamiento. La Guía de Procedimiento está dirigida a
los profesionales de laboratorio del Área de Inmunología del Servicio de Patología Clínica.

V. Nombre del Proceso o Procedimiento Para Estandarizar y Código CPMS

Nombre del Procedimiento Código CPMS

Prueba rápida para detección de antígeno SARS-CoV-2 87426.01

(COVID-19)

VI. Consideraciones Generales

a. Definiciones operativas

1. Definición del procedimiento

La prueba rápida para detección de antígeno de SARS-CoV-2 está basada en la detección del
antígeno de la nucleocápside viral presente en las células epiteliales de las vías respiratorias
humanas infectadas. La detección se realiza en muestras de hisopado nasofaríngeo (HNF).
El ensayo se basa en el análisis inmunocromatográfico de flujo lateral (prueba rápida). El
casete de ensayo emplea anticuerpos monoclonales anti-SARS-CoV-2, en la línea test (T); y
anticuerpos monoclonales de ratón anti IgY de pollo, en la línea control (C) los cuales se
inmovilizan sobre una membrana de nitrocelulosa. Sobre una almohadilla (pocillo de
ensayo) se encuentra el conjugado oro coloidal con el anticuerpo monoclonal anti-SARS-
CoV-2 y el conjugado oro coloidal con IgG de pollo purificada.

Cuando se agrega la muestra y una solución tampón al pocillo de ensayo, el antígeno SARS-
CoV-2 (si estuviera presente), se unirá al conjugado oro coloidal con el anticuerpo
monoclonal anti-SARS-CoV-2 y se formará el complejo antígeno-anticuerpo; este complejo
migra a través de la membrana de nitrocelulosa hacia la línea T, donde es capturado por el
anticuerpo inmovilizado (anti SARS-CoV-2) este complejo quedará atrapado formando una
línea de color purpura el cual evidencia un resultado reactivo de la prueba.

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Independientemente de la presencia del antígeno SARS-CoV-2 en la muestra, se deberá

formar una línea púrpura en el área de control de calidad (C), lo cual permite validar la
prueba realizada 1 (Anexo N° 1).
2. Aspectos epidemiológicos importantes
La enfermedad del coronavirus 2019 (COVID-19), cuyo agente causal es el Coronavirus
tipo 2 del Síndrome respiratorio agudo severo (SARS-CoV-2), fue declarada pandemia en
marzo del 2020 registrándose hasta abril del 2023 más de 650 millones de infectados, 6.6
millones de fallecidos y una letalidad del 1.02 % 2. Tras tres años de pandemia se han
identificado distintas variantes del coronavirus con diferentes características tanto
virológicas, epidemiológicas y clínicas, siendo actualmente Ómicron la última variante
detectada con más de 200 sublinajes 3.

El SARS-CoV-2 se propaga a través del contacto cercano entre personas (por gotitas
respiratorias que se producen cuando una persona infectada tose, estornuda o habla); la
sintomatología puede aparecer entre 2-14 días después de la exposición viral y varía
desde un resfriado hasta un síndrome respiratorio grave. Los principales grupos de riesgo
son considerados las personas mayores de 65 años, personal sanitario y quienes
presenten comorbilidades.

Inicialmente las pruebas para la detección del COVID-19 estuvieron basadas en el método
molecular con la detección del material genético del SARS-CoV-2; también el método
serológico basado en la detección de anticuerpos contra el SARS-CoV-2 sin embargo la
detección de anticuerpos puede tardar entre 1-3 semanas después del inicio de los
síntomas. Posteriormente se incluyó la técnica de inmunocromatografía para la detección
del antígeno del SARS-CoV-2. Las pruebas de detección viral son las más adecuadas para
detectar la infección activa, su sensibilidad diagnostica está condicionada al tiempo
transcurrido desde la infección, durante los primeros 5-7 días desde el inicio de síntomas
la sensibilidad es mayor al 95% disminuyendo en los días posteriores. La prueba rápida de
antígeno es una prueba de tamizaje, económica y de rápida ejecución.

3. Consentimiento Informado
No requiere

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b. Conceptos básicos
⮚ SARS-CoV-2: Coronavirus tipo 2 del Síndrome respiratorio agudo severo, es un nuevo
virus ARN de la familia Coronaviridae del género beta coronavirus. La vía de
transmisión es respiratoria a través de partículas transportadas que los individuos
infectados expulsan a al toser o estornudar. La infección viral puede provocar una
enfermedad respiratoria aguda y neumonía grave.

⮚ Antígeno: Es una molécula o agente que el organismo reconoce como no propio (por
ejemplo, virus, bacteria o sus toxinas), y que al ser reconocida por el sistema
inmunitario desencadena la formación de anticuerpos y una respuesta inmunitaria.

⮚ Inmunocromatografia de flujo lateral: técnica de inmunodiagnóstico, se basa en la

migración de una muestra (molécula, antígeno o anticuerpo) a través una membrana de
nitrocelulosa. La muestra fluye hasta donde se encuentra un conjugado de partículas de
oro coloidal unida a un antígeno o anticuerpo 4.

⮚ Equipo de protección personal (EPP): son dispositivos, materiales e indumentaria

destinados al personal de trabajo para protegerlos de uno o varios riesgos presentes en
el trabajo que puedan amenazar su seguridad y salud. Entre los componentes de uso
hospitalario según el riesgo ocupacional tenemos: mandilón, mameluco, respirador
N95 o su equivalente, mascarilla quirúrgica, protectores oculares, protector facial,
guantes, protector de calzado y gorro 5.

c. Requerimientos Básicos
⮚ Equipos Biomédicos:
● Cabina de bioseguridad A2

⮚ Material médico no Fungible

● Gafas protectoras
● Gradillas de metal para tubos
● Contenedor de desechos biológicos

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⮚ Material médico Fungible

Kit de ensayo:
 Casete de prueba rápida “SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test”
 Tubo de extracción
 Solución buffer
 Hisopo estéril flocado para muestras nasofaríngeas pediatricas

Insumos médicos
● EPP para personal de toma de muestra: mandilón, protector de calzado, gorro,
respirador N95 y guantes descartables.
● EPP para personal de procesamiento: mandilón, gorro, respirador N95 o mascarilla
quirúrgica y guantes descartables.
● Alcohol etílico 70%
● Toallas de papel.

⮚ Recursos Humanos
● 1 Técnico de laboratorio.
● 1 Tecnólogo Medico.
● 1 Médico Patólogo Clínico.

 Otros
 Equipo de cómputo: CPU, monitor, teclado, mouse e impresora
 Materiales de escritorio: Lapiceros, hojas bond, engrapador, grapas, perforador y
archivador A4.

VII. Consideraciones Específicas

a. Descripción detallada del Proceso o Procedimiento

El procedimiento de prueba rápida para la detección de antígeno del SARS-CoV-2 se lleva

a cabo siguiendo 3 fases, preanalítica, analítica y post analítica, las cuales se describen a
continuación:

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1. Fase preanalítica
1.1. Emisión de la orden médica:
El médico tratante o medico de Salud ocupacional emite una orden médica de
prueba rápida para la detección de antígeno del SARS-CoV-2 a través del Sistema
electrónico Sis Galen plus para:
- Pacientes del INSN SB (consultorio externo, hospitalización o emergencia) y sus
familiares acompañantes.
- Personal de salud del INSN-SB.
La orden médica debe contener como mínimo lo siguiente (Anexo N° 2):
- Datos de filiación del paciente: nombres, apellidos, número de historia clínica.
- Datos administrativos: nombre del médico, servicio de procedencia, grupo
ocupacional y servicio de labor (si es personal de salud).
- Datos demográficos y clínicos del paciente: edad, sexo, motivo de la solicitud.
- Fecha y hora para la toma muestra programada.
- Sello y firma del médico solicitante.

1.2. Recepción de la orden médica

- Si el paciente/familiar es de consultorio externo del INSN-SB o es personal de
salud, se debe dirigir a la carpa para toma de muestra COVID, llevando su orden
medica respectiva.
- Si el paciente es de hospitalización o emergencia del INSN SB, el personal
técnico de enfermería entregará la orden médica en físico a la recepción del
Servicio de Patología Clínica y el personal técnico se dirigirá hacia el servicio
donde se encuentra el paciente para la toma de muestra.

1.3. Indicaciones previas a la toma de muestra

- No se requiere

1.4. Procedimiento para la toma de muestra

Muestra: Hisopado nasofaríngeo:

- El personal técnico de laboratorio se colocará el EPP que corresponda.

- Rotular el tubo de extracción con nombre y apellidos del paciente.

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- Colocar en el tubo de extracción solución buffer (150 ul aprox)

- Introducir el hisopo estéril flocado por la fosa nasal del paciente hasta llegar a la
superficie de la nasofaringe posterior, girar el hisopo varias veces durante 10
segundos y retirar delicadamente.
- Colocar el hisopo dentro del tubo de extracción, revolver el hisopo 5 veces como
mínimo en la solución buffer, retirar el hisopo mientras aprieta los lados del
tubo para extraer el líquido del hisopo y descartarlo en el contenedor de
residuos biocontaminados.
- Presione la tapa gotero firmemente sobre el tubo de extracción y cubrir la
boquilla con parafilm.
- En la orden médica se coloca la hora de toma de muestra.

1.5. Transporte de muestras

- Las muestras serán transportadas en cooler a temperatura ambiente dentro de
la primera hora de toma de muestra y llevadas al Servicio de Patología Clínica.

1.6. Recepción de muestras

- Se realizará el registro del paciente en una base de datos (Excel) de laboratorio.
- La muestra y una copia de su orden médica será entregada al Área de
Inmunología para el procesamiento analítico.

2. Fase analítica
2.1 Antes del procesamiento
- El Tecnólogo Médico encargado del procesamiento analítico contará con el EPP.
- Se verificará que el ingreso de la muestra sea adecuado para el proceso y que su
orden médica este correcta contando con la información requerida.
- Se llevará a cabo el mantenimiento diario de la CBS según el protocolo
establecido por el fabricante.

2.2. Durante el procesamiento

- Codificar el tubo de muestra y la solicitud de acuerdo con el orden
consecutivo a seguir.

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- Abrir el empaque del casete en el momento en el que se va a realizar la

prueba, y realizar la rotulación correspondiente (código e iniciales del
nombre y apellidos) en la parte superior del casete.
- Llevar las muestras y casetes a la cabina de bioseguridad: agregar 3 gotas
de muestra al pocillo del casete, evitando la formación de burbujas de aire.
- La muestra migrará sobre la membrana de nitrocelulosa contenida en el
casete.
- Realizar la lectura del casete a los 15 minutos y no realizar la lectura
después de los 20 minutos.

2.3. Después del procesamiento

Interpretación de la lectura
 No Reactivo: se observa solo la línea púrpura en el área control (C)
 Reactivo: se observa una línea púrpura en el área de control y de prueba (T).
 Invalido: no aparece la línea púrpura en el área control (C) (Anexo N° 3).

Almacenamiento del kit de ensayo

- El kit de ensayo se almacena a temperatura ambiente.
- Los componentes del kit de ensayo deben permanecer en su empaque sellado
hasta el momento de su uso.

3. Fase post analítica

3.1. Elaboración y emisión del informe de resultados
- El Tecnólogo Médico emite el resultado en la orden medica respectiva.
- El Médico Patólogo Clínico realizará el envío de los resultados a través del
Sistema Sis Galen Plus.
3.2. Eliminación de las muestras analizadas
Una vez analizadas las muestras, estas se eliminarán al final del turno de trabajo.

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b. Indicaciones
La prueba rápida de antígeno del SARS-CoV-2 está indicada en las siguientes situaciones:

1. Indicaciones Absolutas
Pacientes y/o personal de salud del INSN-SB con sospecha de COVID-19, con
sintomatología menor o igual a 7 días.
2. Indicaciones Relativas

- Personal de salud del INSN-SB que ha tenido contacto con caso sospechoso o
confirmado.
- Pacientes que requieran de manera urgente un procedimiento médico o quirúrgico.
- Pacientes que requieran ser hospitalizados o aquellos que necesiten ser referidos a
otro centro hospitalario.

c. Riesgos o Complicaciones Frecuentes:

No aplica

d. Riesgos o Complicaciones poco Frecuentes

No aplica

e. Contraindicaciones
No aplica

VIII. Recomendaciones
- En pacientes sintomáticos, la prueba se debe realizar durante los primeros 5-7 días de
inicio de síntomas (sensibilidad mayor a 95% debido a la alta carga viral).
- Un resultado no reactivo no descarta la infección por lo que se recomienda confirmar
con un PCR si hay alta sospecha clínica 6.

IX. Autores, fecha y lugar

Responsable de Implementar la Guía de Procedimiento

Jefe de la Sub Unidad de Soporte al Diagnóstico – Patología Clínica

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Fecha de elaboración
Agosto del 2023

Vigencia de la Guía
Tres (3) años a partir de su aprobación mediante Resolución Directoral del Instituto
Nacional de Salud del Niño San Borja.

Equipo responsable de la Elaboración de la Guía:

Lic. T.M. Chirinos Saire, Yaquelina ychirinos@insnsb.gob.pe
Lic. T.M Reyna García, Robert Máximo rreyna@insnsb.gob.pe
Lic. T.M Toribio Arias, Jessica ltoribio@insnsb.gob.pe
M.C. Aguilar Huauya, Emilio R. eaguilar@insnsb.gob.pe
M.C. Márquez Serrano, Cynthia E. cmarquez@insnsb.gob.pe

X. Anexos

1. FUNDAMENTO DE LA PRUEBA INMUNOCROMATOGRÁFICA

2. SOLICITUD DE ORDEN MÉDICA
3. INTERPRETACIÓN DE LA PRUEBA RÁPIDA ANTÍGENO COVID-19

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ANEXO N° 1: FUNDAMENTO DE LA PRUEBA INMUNOCROMATOGRÁFICA

Fuente: https://www.rafer.es/innovacion-laboratorio-clinico/test-rapidos-de-antigeno-covid-19/

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ANEXO N° 2: SOLICITUD DE ORDEN MÉDICA

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ANEXO N° 3 INTERPRETACIÓN DE LA PRUEBA RÁPIDA ANTÍGENO COVID-19

Fuente: https://fplussurgical.com/covid-19/test-rapidos-covid-19/test-rapido-covid-19- influenza-ab-antigeno-combo/

Fecha: AGOSTO 2023 GP-075/INSN-SB/USDT/SUSD-PC. V.01 Página 15 de 16

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XI. Bibliografía

1. Abbott. Instrucciones del dispositivo de prueba rápida Abbot Panbio COVID-19 Ag

[Internet]. 2020. [citado el 8 de abril del 2023]. Disponible en:
https://manuals.plus/es/abbot/abbot-panbio-covid-19-ag-rapid-test-device-
instructions#ixzz7yPkJYajw.

2. Johns Hopkins University School of Medicine. COVID-19 Map [Internet]. Johns

Hopkins Coronavirus Resource Center. 2023 [citado 8 de abril de 2023]. Disponible
en: https://coronavirus.jhu.edu/map.html.

3. Zerón A. Ómicron Variación antigénica y variantes virales. Rev ADM,

2022;79(4):190-2. doi: 10.35366/106910.

4. Sukumaran A, Thomas T, Thomas R, Thomas RE, Paul JK, Vasudevan DM.

Development and Troubleshooting in Lateral Flow Immunochromatography Assays.
Indian J Clin Biochem. 2021 Apr;36(2):208-12. DOI: 10.1007/s12291-020-00887-5

5. Ministerio de Salud. Norma técnica de salud para el uso de los equipos de protección
personal por los trabajadores de las instituciones prestadoras de servicios de salud.
Lima: Ministerio de Salud [Internet]. 2020. [citado el 20 de marzo del 2023].
Disponible en: https://www.hejcu.gob.pe/servicios/biblioteca-hejcu/covid19/288-
rm-456-2020-minsa-norma-tecnica-para-uso-de-equipos-de-proteccion/file

6. Langa LS, Sallent LV, Diez SR. Interpretación de las pruebas diagnósticas de la
COVID-19. FMC. 2021 Mar;28(3):167-173. doi: 10.1016/j.fmc.2021.01.05

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