P1 - MartinezCebollada MataRios XXX

Código: IT001
INSTRUCCIÓN TÉCNICA PARA EL ANÁLISIS Y Versión: 1.0

TARTAMIENTO DE MUESTRAS DE PACIENTES
SOSPECHOSOS DE SARS-CoV-2 Fecha: Septiembre 2023
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Instrucción técnica para el análisis y tratamiento de muestras de

pacientes sospechosos de SARS-CoV-2
Índice
1. OBJETO........................................................................................................................2
2. ALCANCE......................................................................................................................2
3. RESPONSABLES............................................................................................................2
4. DESCRIPCIÓN DEL PROCEDIMIENTO............................................................................2
5. DEFINICIONES..............................................................................................................4
6. ARCHIVO Y REGISTRO..................................................................................................5
7. ANEXO.........................................................................................................................5
8. BIBLIOGRAFÍA..............................................................................................................5
Histórico de cambios
Nº de revisión Fecha Modificación
v1.0 Septiembre 2023 Edición inicial
ELABORADO POR: REVISADO POR: APROBADO POR:

Unidad Responsable Unidad Responsable Unidad Responsable
Unidad de Calidad Unidad de Prevención y Promoción Dirección General de Salud Pública
de la Salud
[Firmado electrónicamente y con autenticidad contrastable según al artículo 27.3.c) de la Ley 39/2015]
CSV: ed2c0713b1be5a4852cebf91d0bb7931 Organismo: Departamento de Sanidad. Gobierno de Aragón Página: 1 / 5

Firmado electrónicamente por Cargo o Rol Fecha
FRANCISCO JOSE TOMAS PÉREZ BARBERO Jefe de Unidad de Calidad 25/09/2023 12:54
NURIA GAYÁN MARGELÍ Directora General de Salud Pública 25/09/2023 14:29
MARIA BEGOÑA ADIEGO SANCHO Jefa del Servicio de Prevención y Promoción de la Salud 25/09/2023 11:11
Código: IT001
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1. OBJETO
El objeto del presente documento es establecer el procedimiento para la realización de la

prueba ELISA en la detección de anticuerpos específicos contra el virus SARS-Cov-2 e
informar al paciente de los resultados en su correspondiente centro de salud.
2. ALCANCE
Esta instrucción será de aplicación al proceso de realización de la prueba, la distribución de

materiales necesarios, la extracción, transporte, conservación de la muestra y difusión de
los resultados al paciente.
3. RESPONSABLES
Este PNT es implementado por la Dirección General de Salud Pública y serán puesto en
práctica por el personal sanitario que toma la muestra, Técnico de laboratorio y empresa
CITOGEN.
4. DESCRIPCIÓN DEL PROCEDIMIENTO
1- Toma de muestra del paciente: El correspondiente personal sanitario del centro médico
realizará la toma de muestra de la mucosa del paciente sospechoso de infección por
SARS-CoV-2. Para la obtención del frotis nasofaríngeo, se introducirá un hisopo en
ambas fosas nasales del mismo llegando a las áreas amigdalares. Se realizan dos o tres
rotaciones de 180º y se mantiene 5 segundos en contacto con la mucosa. Para más
información sobre la correcta obtención de la muestra de exudado nasofaríngeo, visita
el siguiente enlace:
https://www.sanidad.gob.es/profesionales/saludPublica/ccayes/alertasActual/nCov/
documentos/202005018_Toma_muestras.pdf
2- Preparación de la muestra para su transporte al laboratorio : La muestra se deposita en
un tubo de administración de muestras apropiado con el medio de mantenimiento. Las
muestras biológicas de pacientes infectados o con sospecha de infección por el SARS-
CoV-2 son clasificadas como sustancias infecciosas de categoría B. Según la norma UN
3373, este tipo de muestras deben ser transportadas en un triple envase y deben estar
correctamente etiquetados. Las empresas de mensajería o las personas que
transporten sustancias biológicas de categoría B (UN 3373) están obligadas a cumplir
con las normas de transporte de la ADR. Para más información sobre el correcto
transporte de muestras para diagnóstico de SARS-CoV-2 visita el siguiente enlace:
https://www.sanidad.gob.es/profesionales/saludPublica/ccayes/alertasActual/nCov/
documentos/202005018_Toma_muestras.pdf
CSV: ed2c0713b1be5a4852cebf91d0bb7931 Organismo: Universidad de Zaragoza Página: 2 / 5

MARIA CARMEN PEREZ-LLANTADA AURIA Directora de Secretariado de Calidad e Innovación Docente 10/04/2019 14:29
GERARDO SANZ SAIZ Vicerrector de Política Académica 12/04/2019 11:11
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3- A las 10:00 se recogen las muestras del centro médico y se trasladan a través de una
empresa de transporte de muestras biológicas al correspondiente laboratorio, en este
caso, la empresa CITOGEN, donde son recogidas con un plazo máximo de dos horas tras
su envío habiendo presentado la documentación necesaria. En caso de que dichas
muestras no sean recogidas en el plazo establecido, serán descartadas como residuos
biológicos peligrosos en el centro de salud y deberán repetirse los procedimientos
anteriores incluyendo la obtención de otra muestra del paciente con sospecha de
infección.
4- La administración de la empresa CITOGEN distribuye las muestras al técnico de
laboratorio responsable de su análisis. El departamento de calidad y seguridad debe
garantizar que el proceso de análisis de muestras biológicas cumple con la normativa
ISO 15189:2022 tras haberse realizado su acreditación.
5- La empresa distribuidora INSTRULAB cede los reactivos necesarios para la elaboración
de la prueba. Entre los cuales se encuentran los pocillos con el anticuerpo fijado al
fondo, el anticuerpo secundario conjugado con la enzima peroxidasa y el sustrato de
ésta, en este caso el peróxido de hidrógeno. Para ello previamente la empresa ha
debido realizar un inventario con los productos necesarios para llevar a cabo la
realización de la prueba.
6- El técnico de laboratorio realiza la prueba ELISA tipo sándwich. En el pocillo con
anticuerpo primario proporcionado por la empresa distribuidora INSTRULAB, se añade
la muestra, a la que posteriormente se adherirán los anticuerpos secundarios marcados
con una enzima, y nos aseguramos de que en todos los pocillos se añade la misma
cantidad de muestra. Al añadir el sustrato de esta se formará un compuesto coloreado
cuya absorbancia obtenida en el espectrofotómetro es directamente proporcional a la
concentración de antígeno en la muestra. En el siguiente archivo se encuentra más
información sobre la realización de la prueba ELISA en pacientes sospechosos de SARS-
CoV-2:
https://www.vircell.com/media/filer_public/c3/4e/c34e8ea7-83d0-4177-a8bf-
602725cac9ff/covid-19_elisa_igg_g1032_es.pdf
7- El técnico de laboratorio introduce los resultados de la espectrofotometría en una base

de datos donde son analizados. Estos resultados son revisados para comprobar su
coherencia y si se detectan incongruencias son enviados al laboratorio CEyDES donde
se vuelve a realizar el procedimiento. En el caso de que los resultados sigan sin ser
coherentes se vuelve a pedir la realización la toma de muestra al centro de salud
correspondiente.
8- Los resultados son enviados al personal médico el cual los interpreta. Si el paciente
resulta estar infectado, recibirá una llamada de su centro de salud en un período
máximo de tres días hábiles indicando el protocolo de salud y seguridad pública a
cumplir. Si el paciente es negativo en SARS-CoV-2 podrá acceder a sus análisis a través
de la aplicación Salud Informa con su contraseña personal.

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5. DEFINICIONES
 ADR: El acuerdo ADR es un acuerdo europeo firmado por varios países en

Ginebra el 30 de septiembre de 1957 para regular el transporte de mercancías
peligrosas por carretera. En el siguiente enlace podrá consultar o descargar la
última versión actualizada del acuerdo ADR: https://www.mitma.es/transporte-
terrestre/mercancias-peligrosas-y-perecederas/adr_2023
 Norma ISO 15189:2022: esta norma contiene todos los requisitos que los
laboratorios clínicos que analizan muestras biológicas de origen humano tienen
que cumplir para demostrar que disponen de un sistema de gestión de la calidad,
son técnicamente competentes y son capaces de producir resultados
técnicamente válidos. La norma se puede consultar en el enlace de a
continuación: https://www.iso.org/obp/ui/#iso:std:iso:15189:ed-4:v1:es:fn:3
 Técnica ELISA: es una técnica bioquímica que permite cuantificar e identificar
sustancias y se basa en la detección de antígeno al reaccionar con anticuerpos
conjugados con enzimas que catalizan una reacción donde aparece un producto
normalmente coloreado. Requiere de tres componentes: el antígeno a detectar,
un anticuerpo específico para ese antígeno y un sistema que permita estimar la
cantidad de antígeno de la muestra a partir de la realización de una recta patrón
que relaciona la concentración conocida del antígeno con la absorbancia,
utilizando como aparato de medición un espectrofotómetro.
 Antígenos: Moléculas que pueden ser reconocidas por los receptores de las
células del sistema inmunitario. Pueden tener diferente carácter, ya que pueden
ser carbohidratos, lípidos, estructuras de ácidos nucleicos o proteínas.
 Anticuerpos: proteínas generadas por el sistema inmunitario del cuerpo cuando
detecta antígenos empleados por el sistema inmunitario para identificar y
neutralizar elementos extraños.
 Hisopo: Instrumento que se utiliza para la toma de muestras de origen biológico
con el objetivo de evitar que estas se contaminen.
 Frotis Nasofaríngeo: Muestra respiratoria que se recoge para investigar ciertas
infecciones respiratorias.
 Muestra: Material como orina, sangre, tejido, células, ADN, ARN o proteínas de
seres humanos, animales o plantas que se usan para pruebas de laboratorio o en
investigación.
 SARS-CoV-2: Virus que causa la enfermedad respiratoria llamada enfermedad por
coronavirus de 2019 (COVID-19)
 Espectrofotómetro: Instrumento de medición de alta precisión diseñado para
medir y analizar la luz en función de su longitud de onda. Además, permite
cuantificar y caracterizar las propiedades de la luz como la intensidad, el color y
la transmitancia.

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6. ARCHIVO Y REGISTRO
La lista con los reactivos y materiales necesarios para la realización de la prueba ELISA
deberá ser enviada desde la administración de la empresa CITOGEN tras la petición del
técnico de laboratorio responsable de su realización a la empresa distribuidora en formato
PDF.
Los archivos que se enviarán al centro médico con los resultados de espectrofotometría de
la prueba ELISA serán enviados a su correspondiente centro de salud en formato PDF.
En caso de que el paciente sea negativo en SARS-CoV-2, no se realizará la llamada
telefónica.
Sin embargo, se podrá acceder a los resultados de los análisis a través de la aplicación oficial
del Ministerio de Sanidad en Aragón: Salud Informa.
7. ANEXO
1-GUÍA SOBRE EL USO DE LA APLICACIÓN PARA USUARIOS NUEVOS:

https://www.amanixer.es/wp-content/uploads/2021/10/Guia-app-Salud-Informa-
Aragon.pdf
2-MEDIDAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
PROTECCIÓN.
Utiliza los equipos de protección cuando se requiera.
Cómo ir vestido en el laboratorio: El uso de bata es obligatorio en el laboratorio (bata blanca

standard con una composición de 67 % poliéster y 33 % algodón). No es aconsejable llevar
minifalda o pantalones cortos, ni tampoco medias, ya que las fibras sintéticas en contacto
con determinados productos químicos se adhieren a la piel. Se recomienda llevar zapatos
cerrados y no sandalias. Los cabellos largos suponen un riesgo que puede evitarse
fácilmente recogiéndolos con una cola.
Cuida tus ojos: Los ojos son particularmente susceptibles de daño por agentes químicos. Es
obligatorio usar gafas de seguridad siempre que se esté en un laboratorio donde los ojos
puedan ser dañados. No lleves lentes de contacto en el laboratorio, ya que, en caso de
accidente, pueden agravar las lesiones en ojos.
Usa guantes. Es obligatorio usar guantes, sobre todo cuando se utilizan sustancias corrosivas
o tóxicas.
TRABAJAR CON SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
Normas higiénicas: No comas ni bebas en el laboratorio, ya que es posible que los alimentos
o bebidas se hayan contaminado. Lávate siempre las manos después de hacer un
experimento y antes de salir del laboratorio. Por razones higiénicas y de seguridad, está
prohibido fumar en el laboratorio. No inhales, pruebes o huelas productos químicos si no
estás debidamente informado. Nunca acerques la nariz para inhalar directamente de un
tubo de ensayo.
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Trabaja con orden y limpieza: Recuerda que el orden es fundamental para evitar accidentes.
Mantén el área de trabajo ordenada, sin libros, abrigos, bolsas, exceso de botes de
productos químicos y cosas innecesarias o inútiles. Mantén las mesas y vitrinas extractoras
siempre limpias. Se tienen que limpiar inmediatamente todos los productos químicos
derramados. Limpia siempre perfectamente el material y aparatos después de su uso.
Actúa responsablemente: Trabaja sin prisas, pensando en cada momento lo que estás
haciendo, y con el material y reactivos ordenados. No se debe gastar bromas, correr, jugar,
empujar, etc. en el laboratorio. Un comportamiento irresponsable puede ser motivo de
expulsión inmediata del laboratorio y de sanción académica.
Atención a lo desconocido: No utilices ni limpies ningún frasco de reactivos que haya

perdido su etiqueta. Entrégalo inmediatamente a tu profesor. No sustituyas nunca, sin
autorización previa del profesor, un producto químico por otro en un experimento. No
utilices nunca un equipo o aparato sin conocer perfectamente su funcionamiento.
PRECAUCIONES ESPECÍFICAS EN UN LABORATORIO QUÍMICO
Manipulación del vidrio: Nunca fuerces un tubo de vidrio, ya que, en caso de ruptura, los
cortes pueden ser graves. Para insertar tubos de vidrio en tapones humedece el tubo y el
agujero con agua o silicona y protégete las manos con trapos. El vidrio caliente debe de
dejarse apartado encima de una plancha o similar hasta que se enfríe.
Desafortunadamente, el vidrio caliente no se distingue del frío; si tienes duda, usa unas
pinzas o tenazas. No uses nunca equipo de vidrio que esté agrietado o roto. Deposita el
material de vidrio roto en un contenedor para vidrio, no en una papelera.
Manipulación de productos químicos: Los productos químicos pueden ser peligrosos por sus
propiedades tóxicas, corrosivas, inflamables o explosivas. Muchos reactivos,
particularmente los disolventes orgánicos, arden en presencia de una llama. Otros pueden
descomponer explosivamente con el calor.
No inhales los vapores de productos químicos. Trabaja en una vitrina extractora siempre
que uses sustancias volátiles. Si aún así se produjera una concentración excesiva de vapores
en el laboratorio, abre inmediatamente las ventanas. Si en alguna ocasión tienes que oler
una sustancia, la forma apropiada de hacerlo es dirigir un poco del vapor hacia la nariz. No
acerques la nariz para inhalar directamente del tubo de ensayo. Está terminantemente
prohibido pipetear reactivos directamente con la boca. Usa siempre un dispositivo especial
para pipetear líquidos.
Utilización de mecheros de gas: Si usas un mechero Bunsen, u otra fuente intensa de calor,
aleja del mechero los botes de reactivos químicos. No calientes nunca líquidos inflamables
con un mechero. Cierra la llave del mechero y la de paso de gas cuando no lo uses.
Si hueles a gas, no acciones interruptoras ni aparatos eléctricos, no enciendas cerillas o
mecheros, abre puertas y ventanas, y cierra la llave general del laboratorio. Si persiste el
olor, avisa al Servicio de Mantenimiento del Campus (tfno.: 954 557924).

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Transporte de reactivos: No transportes innecesariamente los reactivos de un sitio a otro

del laboratorio. Las botellas se transportan siempre cogiéndolas por el fondo, nunca del
tapón.
Calentamiento de líquidos: No calientes nunca un recipiente totalmente cerrado. Dirige

siempre la boca del recipiente en dirección contraria a ti mismo y a las demás personas
cercanas.
Riesgo eléctrico: Para evitar descargas eléctricas accidentales, siga exactamente las
instrucciones de funcionamiento y manipulación de los equipos. No enchufe nunca un
equipo sin toma de tierra o con los cables o conexiones en mal estado. Al manipular en el
interior de un aparato, compruebe siempre que se encuentra desconectado de la fuente de
alimentación.
ELIMINACIÓN DE RESIDUOS.
La Facultad, conjuntamente con la Unidad de Residuos y Medio Ambiente (Servicio de

Mantenimiento), tiene un plan de recogida de los residuos que no deben ser vertidos al
alcantarillado o depositarse en las papeleras.
El material de cristal roto se tirará en los recipientes destinados especialmente a este fin.
Los papeles y otros desperdicios se tirarán en la papelera.
Los productos químicos tóxicos se tirarán en contenedores especiales para este fin. No tires
directamente al fregadero productos que reaccionen con el agua (sodio, hidruros, amiduros,
halogenuros de ácido), o que sean inflamables (disolventes), o que huelan mal (derivados de
azufre), o que sean lacrimógenos (halogenuros de bencilo, halocetonas), o productos que
sean difícilmente biodegradables (polihalogenados: cloroformo).
Las sustancias líquidas o las disoluciones que puedan verterse al fregadero se diluirán
previamente, sobre todo si se trata de ácidos y de bases. No tires al fregadero productos o
residuos sólidos que puedan atascarlas. En estos casos deposita los residuos en recipientes
adecuados.
QUÉ HAY QUE HACER EN CASO DE ACCIDENTE: PRIMEROS AUXILIOS.
En caso de accidente, avisa inmediatamente al profesor. En caso de gravedad llamar al 061,

y de ser necesario al teléfono de información toxicológica 91-5620420. En cualquier caso
comunicar por escrito los hechos al Servicio de Prevención de Riesgos Laborales de la
Universidad.
Fuego en el laboratorio. Evacuad el laboratorio, de acuerdo con las indicaciones del profesor
y la señalización existente en el laboratorio. Si el fuego es pequeño y localizado, apagadlo
utilizando un extintor adecuado, arena, o cubriendo el fuego con un recipiente de tamaño
adecuado que lo ahogue. Retirad los productos químicos inflamables que estén cerca del
fuego. No utilicéis nunca agua para extinguir un fuego provocado por la inflamación de un
disolvente.

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Fuego en el cuerpo. Si se te incendia la ropa, grita inmediatamente para pedir ayuda.

Tiéndete en el suelo y rueda sobre ti mismo para apagar las llamas. No corras ni intentes
llegar a la ducha de seguridad si no está muy cerca de ti. Es tu responsabilidad ayudar a
alguien que se esté quemando. Cúbrele con una manta antifuego, condúcele hasta la ducha
de seguridad, si está cerca, o hazle rodar por el suelo. No utilices nunca un extintor sobre
una persona. Una vez apagado el fuego, mantén a la persona tendida, procurando que no
coja frío y proporciónale asistencia médica.
Quemaduras. Las pequeñas quemaduras producidas por material caliente, baños, placas o
mantas calefactoras, etc., se trataran lavando la zona afectada con agua fría durante 10-15
minutos. Las quemaduras más graves requieren atención médica inmediata.
Cortes. Los cortes producidos por la rotura de material de cristal son un riesgo común en el
laboratorio. Estos cortes se tienen que lavar bien, con abundante agua corriente, durante 10
minutos como mínimo. Si son pequeños y dejan de sangrar en poco tiempo, lávalos con
agua y jabón, aplica un antiséptico y tápalos con una venda o apósito adecuados. Si son
grandes y no paran de sangrar, requiere asistencia médica inmediata.
Derrame de productos químicos sobre la piel. Los productos químicos que se hayan vertido
sobre la piel han de ser lavados inmediatamente con agua corriente abundante, como
mínimo durante 15 minutos. Las duchas de seguridad instaladas en los laboratorios serán
utilizadas en aquellos casos en que la zona afectada del cuerpo sea grande y no sea
suficiente el lavado en un fregadero. Es necesario sacar toda la ropa contaminada a la
persona afectada lo antes posible mientras esté bajo la ducha. Recuerda que la rapidez en el
lavado es muy importante para reducir la gravedad y la extensión de la herida. Proporciona
asistencia médica a la persona afectada.
Actuación en caso de producirse corrosiones en la piel. Por ácidos. Corta lo más

rápidamente posible la ropa. Lava con agua corriente abundante la zona afectada y avisa a
tu profesor
Actuación en caso de producirse corrosiones en los ojos. En este caso el tiempo es esencial
(menos de 10 segundos). Cuanto antes se lave el ojo, menos grave será el daño producido.
Lava los dos ojos con agua corriente abundante durante 15 minutos como mínimo en una
ducha de ojos, y, si no hay, con un frasco para lavar los ojos. Es necesario mantener los ojos
abiertos con la ayuda de los dedos para facilitar el lavado debajo de los párpados. Es
necesario recibir asistencia médica, por pequeña que parezca la lesión.
Actuación en caso de ingestión de productos químicos. Antes de cualquier actuación

concreta pide asistencia médica. Si el paciente está inconsciente, ponlo tumbado, con la
cabeza de lado. Tápalo con una manta para que no tenga frío. No le dejéis sólo. No ingerir
líquidos, ni provocar el vómito.
Actuación en caso de inhalación de productos químicos. Conduce inmediatamente a la

persona afectada a un sitio con aire fresco. Requiere asistencia médica lo antes posible.

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8. BIBLIOGRAFÍA
1. Mathieu M. ELISA: ¿Qué es? ¿En qué consiste? ¿Cuáles son los distintos tipos de este
ensayo y en qué se diferencian? [Internet]. AllScience. [citado el 26 de septiembre de
2023]. Disponible en: https://www.e-allscience.com/blogs/articulos/elisa-que-es-en-
que-consiste-cuales-son-los-distintos-tipos-de-este-ensayo-y-en-que-se-diferencian
2. Wikipedia contributors. Anticuerpo [Internet]. Wikipedia, The Free Encyclopedia.
Disponible en: https://es.wikipedia.org/w/index.php?
title=Anticuerpo&oldid=152797644
3. Frotis nasofaríngeo [Internet]. Labtestsonline.es. [citado el 26 de septiembre de
2023]. Disponible en: https://www.labtestsonline.es/glossary/frotis-nasofaringeo
4. ISO 15189, Sistemas de Gestión de la Calidad en Laboratorios Clínicos
[Internet]. Intedya.com. [citado el 24 de septiembre de 2023]. Disponible en:
https://www.intedya.com/internacional/73/consultoria-sistema-de-gestion-de-la-
calidad-en-laboratorios-clinicos-iso-151892022.html


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Instrucción técnica para el análisis y tratamiento de muestras de

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El objeto del presente documento es establecer el procedimiento para la realización de la

Esta instrucción será de aplicación al proceso de realización de la prueba, la distribución de

4. DESCRIPCIÓN DEL PROCEDIMIENTO

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7- El técnico de laboratorio introduce los resultados de la espectrofotometría en una base

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 ADR: El acuerdo ADR es un acuerdo europeo firmado por varios países en

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1-GUÍA SOBRE EL USO DE LA APLICACIÓN PARA USUARIOS NUEVOS:

2-MEDIDAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

Cómo ir vestido en el laboratorio: El uso de bata es obligatorio en el laboratorio (bata blanca

TRABAJAR CON SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

Atención a lo desconocido: No utilices ni limpies ningún frasco de reactivos que haya

PRECAUCIONES ESPECÍFICAS EN UN LABORATORIO QUÍMICO

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Transporte de reactivos: No transportes innecesariamente los reactivos de un sitio a otro

Calentamiento de líquidos: No calientes nunca un recipiente totalmente cerrado. Dirige

La Facultad, conjuntamente con la Unidad de Residuos y Medio Ambiente (Servicio de

QUÉ HAY QUE HACER EN CASO DE ACCIDENTE: PRIMEROS AUXILIOS.

En caso de accidente, avisa inmediatamente al profesor. En caso de gravedad llamar al 061,

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Fuego en el cuerpo. Si se te incendia la ropa, grita inmediatamente para pedir ayuda.

Actuación en caso de producirse corrosiones en la piel. Por ácidos. Corta lo más

Actuación en caso de ingestión de productos químicos. Antes de cualquier actuación

Actuación en caso de inhalación de productos químicos. Conduce inmediatamente a la

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