CÁTEDRA DE BIOTECNOLOGÍA

Crecimiento de microorganismos en un
2013 cultivo batch
PRINCIPIOS DE El crecimiento de microorganismos puede
Se puede dividir en varias fases distintas:

CRECIMIENTO verse como el incremento en el material

MICROBIANO celular, expresado en términos de masa o
número de células.
El incremento en biomasa puede
Ing. Omar Brizuela determinarse gravimétricamente o
numéricamente para sistemas
unicelulares.
1 2 3

La fase de latencia o “lag”, es un tiempo de

aparente no crecimiento, pero estudios bioquímicos
La naturaleza compleja del demuestran actividad metabólica, indicando que
crecimiento de microorganismos por las células están en proceso de adaptación a las
lotes, se muestra tal como sigue: condiciones ambientales y que un nuevo
crecimiento comenzará, eventualmente.
Se pueden observar múltiples fases lag cuando el
medio contiene múltiples fuentes de carbono
(crecimiento diáuxico).
4 5
Existe, luego, una fase de aceleración transitoria
cuando el inóculo comienza a crecer que es
seguida, rápidamente, por una fase de
crecimiento exponencial.
En la fase exponencial, el crecimiento
microbiano ocurre a la máxima velocidad posible
para ese microorganismo, con nutrientes en
exceso, parámetros de crecimiento ideales y
ausencia de inhibidores.

Algunos medios para prolongar la vida de

un cultivo por lotes:
Sin embargo, en cultivos por lote, el crecimiento La fase final del ciclo es la fase de - Adición gradual de componentes
exponencial es de duración limitada y, a medida que las muerte, cuando la velocidad de nutritivos concentrados (carbohidratos),
condiciones nutricionales cambian, la velocidad de crecimiento ha cesado. aumentando el volumen del cultivo
crecimiento disminuye y se entra en la fase de La mayoría de los procesos (utilizado para producción industrial de
desaceleración, seguida de la fase estacionaria biotecnológicos por lotes se detiene levadura).
(respiración endógena), donde el crecimiento global no antes de esta fase, debido a la - Adición de medio al cultivo (perfusión) y
se obtiene, por falta de nutrientes. disminución en el metabolismo y a la lisis extracción de un volumen igual de medio
Respiración Endógena: autoxidación producida por organismos en los celular. usado, libre de células (utilizado para
procesos biológicos después del agotamiento de las reservas de
alimento; los microorganismos metabolizan su propio material celular sin
reposición, ocurriendo una destrucción de sus células y una sucesión de 7 8
cultivos de células animales). 9

nuevas especies.
Crecimiento de Bacterias Tiempo de Generación: Crecimiento Bacteriano
Tiempo requerido para que una célula se duplique
Muchas células bacterianas se reproducen asexualmente por fisión
El tiempo que toma que una población microbiana se duplique
ADN
binaria. Esto involucra varias etapas: se llama tiempo de duplicación. El tiempo para que una célula
Una simple se divida es el llamado tiempo de generación.
generación ADN Replicación
2N
Elongación de la célula 1N
12 N DT
9 3
time
6
Formación del Septum
El tiempo medio de generación de una población es igual al
Tiempo de tiempo de duplicación.
generación
El tiempo de duplicación es una medida de la velocidad de
(i) Incremento del tamaño de la célula crecimiento.

Un tiempo corto de duplicación implica una velocidad de
(ii) Replicación del DNA, y
Separación de crecimiento rápida.
(iii) División (formación del septum). 10
las células
11 12

Uso del tiempo de generación para comparar el Curva de Crecimiento

Typical típica
Growth Curve for para
a Bacterial
Para un proceso batch, la velocidad de crecimiento de las células en
crecimiento de diferentes bacterias la fase exponencial está dada por: dX
una PoblaciónPopulation
de Bacterias rx = = µ. X (1)
100 dt
X = la concentración de células (g/L)

Log No. of Viable cells

Fase Estacionaria
80
Microorganismo Temp oC Tiempo de Generación Fase de Muerte
µ = la velocidad específica de crecimiento de las células (h-1)
60 t = tiempo (h)
B. stearothermophilus 40 11 min
Esta ecuación es válida bajo condiciones de crecimiento balanceado,
Escherichia coli 40 20 min 40 Biomass (g/L)
Fase Exponencial
lo que ocurre cuando la composición de células permanece constante.
S. aureus 37 28 min Durante la fase de crecimiento exponencial, el crecimiento de las
20
P. aeroginosa 37 36 min células no es limitado por las concentraciones de nutrientes y µ es
Lactobacillus acidophilus 37 75 min 0
Fase de Latencia igual a µmax. Sin embargo, durante la fase de desaceleración la
M. tuberculosis 37 720 min velocidad específica de crecimiento depende de la concentración de
0 2 4 6 8 10 12 14
sustrato limitante. En este caso, µ puede calcularse usando la
Time in (hrs)
ecuación de Monod.
13 14 15

CRECIMIENTO BALANCEADO Crecimiento Bacteriano

Se define como el crecimiento durante el cual una duplicación Integrando la ecuación (1):
Si consideramos una bacteria creciendo bajo condiciones ideales
de la biomasa es acompañada por una duplicación de todas las en las cuales el número el número de células se duplica
otras propiedades medibles de la población (contenido de: xt = x0e µt exactamente en cada generación, la población después de un
proteínas, ADN, ARN, agua intracelular, etc.). O sea que un número dado de generaciones pude calcularse.
cultivo en crecimiento balanceado mantiene una composición x0 = concentración inicial biomasa La población inicial es N0
química constante.
xt = concentración de biomasa al cabo del tiempo t
después de una generación N1 = 2 x N0
e = base de logaritmos naturales

Para un constituyente celular cualquiera Z que está presente en después de dos generaciones N2 = 2 x 2 N0 = 22N0
una concentración z:
rz = µ . z Tomando logaritmos naturales:
después de tres generaciones N3 = 2 x 22N0 = 23N0 etc…

.: después de n-generaciones: N n = 2n N 0
En muchos cultivos el crecimiento balanceado ocurre al
ln xt = ln x0 + µt (es una recta solo si µ = cte)
mismo tiempo que el crecimiento exponencial. Hay una relación directa entre el número de células originalmente
16 17 presentes en el cultivo y el número presente luego del crecimiento 18

exponencial.
 Progresión Geométrica
Crecimiento iniciado a partir de una célula
23 24
22
21

Nt = N0 x 2n
Tiempo Número de 2n Población Nt log10 Nt
Expresada como n
[min] generación (No x 2n)
log Nt − log N 0
0 0 20 = 1 1 0.000 n=
log 2
1 20 1 21 = 2 2 0.301 Luego:
40 2 22 = 4 4 0.602
60 3 23 = 8 8 0.903
n = 3.3 (logNt – logN0 )
80 4 24 = 16 16 1.204
2 100 5 25 = 32 32 1.505
Si se conoce el número inicial (No) y el final
120 6 26 = 64 64 1.806
4 (Nt) de células se puede calcular el número
8
19 20
de generaciones. 21

16

Estimación del tiempo de duplicación a

partir de la curva de crecimiento bacteriana
n = 3.3 (log Nt - log N0) 1 x 108

El tiempo de duplicación (td) se calcula como: Población Duplicada en 2 hr
8 x 107 t=2
t
Ejemplo: Nt = 107, N0 = 103 td = 5 x 107 n=1
n Pend = 0.15
t = número de horas de crecimiento exponencial

Cells /ml
4 x 107
n = 3.3 (7-3) td = t/n = 2hrs
n = 13.2 generaciones n= número de generaciones
Si se conoce n, el número de generaciones, y t,
2 horas
el tiempo de crecimiento, se puede calcular el
Si: n = 15.5 y t = 31 entonces: td = 2 horas 2 x 107 Tiempo de
Duplicación
tiempo de duplicación td.
1 x 107

22 23 24
1 2 3 4 5

Factores que Afectan a la Velocidad

Constante de Velocidad de Crecimiento K
Calculo
Semilog Plot de µlogarithms
using natural Específica de Crecimiento (µ)
100

La velocidad de crecimiento es a menudo
Natural log Cell biomass

expresada como un valor (k), equivalente al número
Concentración de Sustrato

de duplicaciones por unidad de tiempo.
Concentración de Producto
10
Natural
pH del medio

k es usualmente expresada como generaciones por Pendiente = µ Log (ln)

hora
Temperatura

1
Suministro de Oxígeno

Si td = 2 horas luego k = 0.5 generaciones por hr
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Time (Hrs)
25 26 27
 Relación entre concentración de sustrato y
SUSTRATO LIMITANTE Ecuación de Monod velocidad específica de crecimiento

La disminución de la velocidad de crecimiento y la µ

Es aquél que ejerce una influencia dominante 0,4 max
cesación de crecimiento se puede describir como la

S p ecific g ro w th rate / h
sobre la velocidad de crecimiento. relación entre µ y el sustrato limitante residual:
0,3

Puede ser la fuente de carbono, la de nitrógeno, µ max .S
µ=
el oxígeno u otro oxidante como el nitrato. Ks + S 0,2 1/2 µmax
Specific Growth
rate

Durante el crecimiento balanceado, la velocidad
S = concentración de sustrato residual (g/L)
0,1
específica de crecimiento se relaciona con la KS = constante de utilización de sustrato cuando µ es S>>Ks entonces µ = µ max
concentración de sustrato limitante mediante la la mitad de µmax (g/L) Ks = 1.0 g/L
0
Ecuación de Monod. µmax = velocidad específica de crecimiento máxima (h-1)
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20

28 29
Substrate concentration (g/L) 30

Ks Coeficiente de Rendimiento ECUACIÓN DE MONOD

Las Bacterias con alta afinidad por el sustrato tienen
Muy importante en la optimización de
Para otros autores la Ecuación de Monod es:
un bajo Ks y viceversa fermentaciones batch. rX = µ . X
Se define como: µ max S

Cuanto más alta es la afinidad menos es afectado el Como: µ =
X = Yx/ s(S- Sr) Ks + S
crecimiento cuando los niveles de sustrato son muy
bajos.
X = concentración de biomasa (g/L)
Yx/ s = coeficiente de rendimiento (g biomasa/g sustrato utilizado) Para generación de células quedará:

µ max S.X

Valores típicos de Ks: 1,1 x 10-3 hasta 25,0 [mg/L] S = concentración de sustrato inicial (g/L)

según el tipo de sustrato y de microorganismo. Sr = concentración de sustrato residual (g/L)

rX =
31 32
Ks + S 33

CONCENTRACIÓN DE PRODUCTO
ECUACIÓN DE MONOD ECUACIÓN DE MONOD
(INHIBICIÓN POR PRODUCTO)

La Ecuación de Monod considera muy pocos
Si varias sustancias pueden limitar el
Ocurre cuando los productos metabólicos de las
parámetros del metabolismo celular y es muy propensa células inhiben su propio crecimiento.
a fallar debido a cambios metabólicos según la etapa crecimiento de un microorganismo, se puede
emplear el siguiente modelo:
En esos casos se pueden usar ecuaciones que
en que se encuentre el cultivo.
contemplen esa dificultad:

Puede fallar:
- Al comienzo o al final de una fermentación batch.
S1 S2 Para varios S Cp n
- Cuando la composición cambia en una fermentación µ = µ max.( ).( ).... sustratos µ = µ max( )(1 − )
continua. K1 + S1 K2 + S2 limitantes
K+S Cp *

- Después de la adición de sustrato en un cultivo

discontinuo alimentado. Siendo Cp* la concentración de producto a la cual
Debido a esto suelen usarse otras ecuaciones que cesa el metabolismo (valor máximo o crítico).
concuerdan mejor con los datos experimentales.
34 35 36
 CONCENTRACIÓN DE PRODUCTO
FASE ESTACIONARIA Y FASE DE MUERTE
(INHIBICIÓN POR PRODUCTO)

Otra ecuación que es una modificación empírica de
La transición entre la fase exponencial y la estacionaria
la Ec. de Monod es la Ecuación de Levenspiel: involucra un período de “crecimiento no balanceado”
µ max S.X
− rs = kobs durante el cual varios de los componentes celulares son
Inestabilidad Genética
Yx / s(Ks + S ) sintetizados a diferentes velocidades.
Siendo: Cp n
En consecuencia las células en fase estacionaria tienen
kobs = (1 − ) * una composición química diferente de las células en
Cp
n: cte. empírica que puede calcularse tomando fase exponencial.
logaritmos: Ln kobs
Pend = n
Algunas células se dividen y generan nuevas células y
Cp
ln kobs = n.ln(1 − ) *
otras mueren.
Cp
Se asume que la muerte de la población sigue un
Cp 37 decaimiento exponencial. 38 39
ln( 1 − *
)
Cp

Inestabilidad Genética Tipos de inestabilidad genética en

¿Porqué usar un Plásmido? plásmidos en células de E. coli

Ocurre en los sistemas Vector/Hospedador.

Los Plásmidos (vectores) son más fáciles de
La formación de grandes cantidades de una proteína

Pérdida por segregación

manipular que los cromosomas.

Hay muchas más copias del gen de interés en los
plásmidos que en el cromosoma – más producción.
40
(como producto) siempre es negativo para las células.

Las células que pierden la capacidad de hacer una
proteína determinada por lo general crecen mucho más
rápido que las que sí la producen y pueden desplazar a
las células productoras en un reactor.

Gran problema cuando en la industria tenemos reactores
de 10.000 litros con muchas más generaciones que un
frasco de 50 mL. 41

Inestabilidad Estructural del Plásmido

Mutaciones de la célula hospedadora

Inestabilidad por la velocidd de crecimiento

Combinación de algunas de las causas
anteriores
42

Pérdida Segregacional Pérdida Segregacional
Factores que influencian la Inestabilidad Segregacional

Temperatura

La célula se divide y
Oxígeno disuelto
la célula hija no

Composición del medio
recibe el/los
plásmidos.
Velocidad de dilución en un reactor continuo
Probabilidad de Pérdida
del Plásmido, p
Número de copias del plásmido

Tamaño del plásmido

Pérdida Total del Plásmido

Célula hospedadora

43 44 45
 Inestabilidad Estructural del Plásmido Mutaciones de la Célula Hospedadora Inestabilidad dominada por la
Velocidad de Crecimiento

Las mutaciones ocurren en el cromosoma de las

El plásmido se mantiene pero no produce el producto de
células hospedadoras y la hacen menos productiva.
Todas las causas de inestabilidad genética
interés. previas resultan en una ventaja de las células
Ejemplo

Ejemplo
el promotor lac controla la síntesis del producto no productoras que ganarán el reactor.

el plásmido contiene genes para resistencia a
la mutación en el gen de la permeasa del lac hace
menos eficiente el trabajo del inductor
Ejemplos
antibióticos y para el producto

Mutación en el represor – puede no reconocer al
la probabilidad de segregación es alta

sufre una mutación en el gen del producto por lo tanto inductor y por lo tanto no hay producción
el plásmido sigue en la célula, la célula crece y se
entonces la velocidad de crecimiento

La célula mutante crece más rápido que la original y
multiplica pero no produce la proteína por lo que su gana el reactor prevalece
crecimiento es más rápido que el de las células
gran diferencia entre una baja probabilidad
El operón lac es un operón requerido para el transporte y
productoras segregacional y un alto crecimiento
metabolismo de la lactosa en Escherichia coli, así como en algunas
46
otras bacterias. 47 48

EL SISTEMA
Combatiendo la Pérdida de Plásmidos HOK/SOK
El sistema involucra 3
- Si el plásmido codifica resistencia a un Antibiótico agregar el
genes:
antibiótico al medio (puede aumentar los costos para algunos HOK, host killing
¿Cómo combatir la productos). (mata al hospedador)
- Usar cepas dependientes de la temperatura pues se puede regular la Codifica una toxina
de larga vida (vida
velocidad de crecimiento.
Inestabilidad Genética? - Mediante genes especiales en el plásmido:
media: 20 minutos)
SOK, suppression of
* Usar expresión de genes regulada por la temperatura. Los killing (supresión del
veneno) Es un ARN
plásmidos se mantienen sin cambios cuando la expresión de genes es
de corta vida (vida
reprimida. Cuanto mayor es la expresión, más posibilidades de pérdida media: 30 segundos)
hay. que codifica una
* Sistema HOK/SOK. antitoxina.
MOK, modulation of
- Usar plásmidos “no ligantes”. Los plásmidos ligantes se pueden killing – requerido
acoplar en varios sitios del genoma y causar mutación. para el copiado del
49 50 HOK. 51

EL SISTEMA Sistema “Ideal” CINÉTICA DE CRECIMIENTO CON

HOK/SOK Vector/Promotor/Host System INESTABILIDAD DE PLÁSMIDOS

que no sea genéticamente inestable
Si X+ y X- representan la concentración de células
Si después de la con plásmidos y sin plásmidos respectivamente:
división la célula no
que posea control estricto del promotor
contiene el plásmido
morirá porque el

que haga exactamente el producto requerido rX + = (1 − p) µ + X +
ARN (de larga vida)
que la célula excrete el producto
para el veneno = µ+ X + − pµ+ X +
estará en la célula
que la proteína sea correctamente plegada en la
hija pero no podrá
codificar el antídoto. forma activa rX =µ− X− + pµ+ X+
−

La muerte
que las células no produzcan proteasas o

sobreviene por
despolarización de la
endotoxinas Siendo r las velocidades de crecimiento, p la
membrana probabilidad de pérdida de plásmidos (p≤1) y µ+ y µ-
las respectivas velocidades específicas.
52 53 54
 CINÉTICA DE CRECIMIENTO CON CINÉTICA DE CRECIMIENTO CON CINÉTICA DE CRECIMIENTO CON
INESTABILIDAD DE PLÁSMIDOS INESTABILIDAD DE PLÁSMIDOS INESTABILIDAD DE PLÁSMIDOS

En cualquier instante la fracción de células del cultivo con F = Φ (α , p, n) F = Φ (α , p, n)
plásmidos es:
X +
F =
X + + X −

1−α − p Fracción de Fracción de

Después de n generaciones: F=
1 − α − 2n(α + p−1) p células que células que
F
µ− contienen contienen
Donde: α = plásmidos F plásmidos en
(casi siempre mayor que 1)
µ+ después de 25 función del
generaciones número de
µ + .t generaciones
y: n=
ln 2
F = Φ (α , p, n) n
α
F depende fuertemente del valor de α. 55 56 57

CINÉTICA DE CRECIMIENTO CON METABOLISMOS PRIMARIO Y METABOLISMOS PRIMARIO Y

INESTABILIDAD DE PLÁSMIDOS SECUNDARIO SECUNDARIO
F = Φ (α , p, n)
Metabolismo Primario (Trofofase)
Metabolismo Secundario (Idiofase)
Coincide con la fase logarítmica en la cual Coincide con la fase estacionaria.
los únicos compuestos resultantes son
Los compuestos resultantes no son esenciales
Efecto de α sobre esenciales para el crecimiento (aa,
la fracción de nucleótidos, proteínas, ácidos nucleicos, para el crecimiento, su distribución es
células que F lípidos, carbohidratos, etc.) o bien son taxonómicamente limitada. Es decir que no
contienen
plásmidos subproductos del catabolismo energético todos los m.o. tienen metabolismo secundario.
después de 20 (como etanol, acetona, etc.).
generaciones Los compuestos se denominan como
Los productos se denominan como: metabolitos secundarios y son: antibióticos
metabolitos primarios. (penicilina, tetraciclina, otros), colorantes, etc.
t [h]
58 59 60

FORMULACIÓN DEL MEDIO DE FORMULACIÓN DEL MEDIO DE FORMULACIÓN DEL MEDIO DE

CULTIVO CULTIVO CULTIVO

Ingredientes Básicos
Ingredientes Optativos
Factores a tener en cuenta para la

- Agua
- Precursores formulación:
- Fuente de Carbono
- Inductores - Costo
- Fuente de Nitrógeno
- Minerales (trazas) y Fósforo
Ingredientes No Queridos - Eficacia de utilización (rendimiento de
- Nutrientes específicos (vitaminas, aa, etc.) - Represores biomasa o producto)

- Reología
61 62 63
 FORMACIÓN DE PRODUCTOS Sistemas Asociados con el Crecimiento

a) Aquí pueden distinguirse dos casos:

Se puede diferenciar entre: 1) Cuando el producto principal aparece como resultado
del metabolismo energético primario.
- Sistemas Asociados con el Crecimiento: Ej. Etanol en la fermentación.
El producto aparece en proporciones relativamente
FORMACIÓN DE PRODUCTOS Metabolismo Primario constantes a la masa celular que se acumula y al
sustrato consumido.
- Sistemas No Asociados con el Crecimiento:
2) Cuando el producto principal surge indirectamente
Metabolismo Secundario del metabolismo energético.
Ej. Formación de ácido cítrico, formación de
nucleótidos, aminoácidos, etc.
La formación de producto no es necesariamente
proporcional a la utilización de sustrato o aumento de
64 65
masa celular. 66

FORMACIÓN DE PRODUCTOS FORMACIÓN DE PRODUCTOS Sistemas No Asociados con el Crecimiento

Biomasa
Producto excretado
Biomasa b) Puede ocurrir incluso con crecimiento
Sustrato para Sustrato para
negativo.
crecimiento CO2 + H2O crecimiento CO2 + H2O
El producto principal es un metabolito
Sustrato para
Sustrato para CO2 + H2O secundario.
CO2 + H2O mantenimiento
mantenimiento Célula Célula
CO2 + H2O microorganismos
Sustrato para
Producto excretado producción Sustrato Productos bioquímicos
Producto excretado

Sistemas Asociados con el crecimiento

(el producto surge del metabolismo energético primario)
Ejemplos: alcohol, ácido acético, acetona.
Sistemas No Asociados con el crecimiento
(el producto NO surge del metabolismo energético primario)
67
Ejemplos: antibióticos, colorantes. 68 69

Sistemas Secuenciales
Curvas de aparición de productos Sistemas Combinados

a) Asociada al Crecimiento o Metabolismo Energético (ej. etanol, ac. d) El/los producto/s surgen de una o más reacciones.
Glucónico) [caso (a)] c) El/los producto/s surgen de una o más reacciones.
microorganismos
b) Asociada al Crecimiento o Metabolismo Central (ej. aminoácidos, ác.
Sustratos (1) MO + Productos bioquímicos (1)
Láctico) [caso (b)]
c) No Asociada al Crecimiento. No depende de la velocidad de microorganismos
crecimiento del cultivo. (ej. antibióticos, vitaminas) microorganismos
Sustratos (1) MO + Productos bioquímicos (1) Sustratos (2) MO + Productos bioquímicos (2)

microorganismos En este caso sustratos (1) son diferentes de los sustratos (2).
Sustratos (2) Productos bioquímicos (2)
En los casos (b), (c) y (d) las descripciones estequiométricas adecuadas
dependen de los sustratos y productos involucrados.
La formación de productos en estos casos es típicamente desacoplada del
Puede ocurrir que los sustratos (1) sean muy similares a crecimiento celular.
los sustratos (2) o que los sustratos (2) sean los La acumulación de metabolito secundario es dirigida por la regulación
productos bioquímicos (1). cinética y la actividad de las células.
70 71 72
 CALCULO DE LA VELOCIDAD DE CALCULO DE LA VELOCIDAD DE CALCULO DE LA VELOCIDAD DE
CONSUMO DE SUSTRATO CONSUMO DE SUSTRATO CONSUMO DE SUSTRATO

Células + Sustrato Células + Producto Consumo por mantenimiento:

ó: El consumo de sustrato será:
A B
Células Velocidad Veloc. de Veloc. de
S YC/S . C + YP/S . P masa de sustrato consumido para mantenimiento Veloc. de
m= masa de células . unidad de tiempo
neta de consumo consumo consumo para
consumo de = para formar + para formar + mantenimiento
Rendimiento: sustrato células producto

masa de nuevas células formadas Valor típico de m: 0,05 h-1

- rs = YS/C rg + YS/P rP + m. Ccel
YC/S =
masa de sustrato consumido para formar nuevas células
Crezcan o no las células, la Velocidad de Consumo para
Si el producto se produce en la fase Log puede ser difícil
Mantenimiento es:
masa de producto generado separar A y B. En estos casos se usa:
YP/S = rsm = m. Ccel
masa de sustrato consumido - rs = YC/S rg y rP = YS/P rg ó rP = YP/S (-rS)
73 74 75

CALCULO DE LA VELOCIDAD DE
CONSUMO DE SUSTRATO

Si el producto no está asociado al crecimiento, la aparición de producto

no puede ligarse a la generación de células aunque sí depende de la
concentración de células.
Csn: nutriente secundario
kp.Csn.Ccel
rp = kp : cte formación producto

ksn + Csn rp= YP/sn (-rsn)

ksn : constante

El consumo de sustrato en la fase estacionaria será:

Ysn / P.kP.Csn.Ccel
− rsn = m.Ccel + Ysn / P.rP = m.Ccel +
ksn + Csn
Debido a que el producto deseado puede producirse sin crecimiento de
células es mejor relacionar la concentración de producto con el cambio de
la concentración de sustrato.
CP = YP/sn (CSo – CS) 76