Instituto Tecnológico Nacional de México.

Instituto Tecnológico de Oaxaca.

Departamento de Ingeniería Química y Bioquímica.

Revista Oaxaqueña de Microbiología de Alimentos.

“Microbiología de los alimentos”.
Reporte de práctica.

Preparación y esterilización de medios de cultivo.

Orozco García J., Puerto Muñoz A., Gervasio Díaz A., Mata Peralta J.A.

Martes, 21 de febrero de 2023.

Oaxaca de Juárez, Oax.

Resumen. Con el objetivo de realizar el estudio acerca de la metodología de
preparación de medios de cultivos, así como la esterilización de dichos medios y
materiales para la eliminación de microorganismos patógenos que puedan estar
presentes en el recipiente que contenga los medios. El cual se llevo a cabo en las
instalaciones del laboratorio de Microbiología de los Alimentos del Instituto
Tecnológico Nacional de México Campus Oaxaca, por medio del uso de los
diversos materiales, medios de cultivo y equipos presentes en dichas
instalaciones, los cuales servirán para el desarrollo de los microorganismos que se
buscan cuantificar y analizar. Con la cual se concluyo dentro que para el desarrollo
de ciertos microorganismos es necesario administrarle un espacio que presente
abundantes alimentos que necesita para su crecimiento, así como las correctas
prácticas de esterilización del material con la cual se logra eliminar cualquier otro
microorganismo de mínimo interés que pueda llegar a afectar el desarrollo del que
si nos interesa analizar.
Abstrac. With the objective of carrying out the study about the methodology of
preparation of culture media, as well as the sterilization of said media and
materials for the elimination of pathogenic microorganisms that may be present in
the container that contains the media. Which was carried out in the facilities of the
Food Microbiology laboratory of the National Technological Institute of Mexico
Campus Oaxaca, through the use of various materials, culture media and
equipment present in said facilities, which will serve for the development of the
microorganisms that are sought to be quantified and analyzed. With which it was
concluded that for the development of certain microorganisms it is necessary to
administer a space that presents abundant food that it needs for its growth, as well
as the correct practices of sterilization of the material with which it is possible to
eliminate any other microorganism of minimal interest that It may affect the
development of what we are interested in analyzing.
Introducción. en el cual se va a desarrollar cierto
tipo de microorganismo que se
La esterilización del material de
requiera cuantificar y/o analizar
laboratorio es un proceso que permite
dentro del Laboratorio de
eliminar la carga de microorganismos
Microbiología de Alimentos, de igual
patógenos y no patógenos, de
forma es indispensable conocer
productos e instrumentos que lo
acerca de las formas de esterilización
requieran como el instrumental
del material y de los medios de cultivo
médico o los medios de cultivo.
respectivamente. Primeramente,
La preparación de un buen medio de necesitamos conocer ¿Qué es un
cultivo siempre es indispensable para medio de cultivo? ¿Cuáles conoces?
poder generar el ambiente necesario ¿Qué es la esterilización del material
de laboratorio? ¿Como se lleva a inhibiendo el desarrollo de los
cabo?, esto con el fin de poseer una demás.
idea de los conocimientos que se  Medios diferenciales: Son
busca generar dentro del estudiante, aquellos en los que se pone de
así como de generar el interés acerca manifiesto propiedades que un
de cómo realizar el análisis del determinado tipo de
proceso de esterilización y microorganismos posee.
elaboración de medios. (Universidad de Granada,
2015)
Un medio de cultivo es un conjunto
de nutrientes, factores de crecimiento A continuación, se da una idea
y otros componentes que crean las general sobre algunos de los
condiciones necesarias para el constituyentes habituales de los
desarrollo de los microorganismos. La medios de cultivo.
diversidad metabólica de estos es tan
grande que la variedad de medios de  Agar: Se utiliza como agente
cultivo es enorme, no existiendo un gelificante para dar solidez a
medio de cultivo universal adecuado los medios de cultivo. En el
para todos ellos, ni siquiera agar bacteriológico el
refiriéndonos a las bacterias con componente dominante es un
exclusividad. (Universidad de polisacárido que se obtiene de
Granada, 2015) ciertas algas marinas y que
presenta la indudable ventaja
Existen diversos tipos de medios de de que, a excepción de
cultivo y se pueden clasificar de la algunos microorganismos
siguiente forma: marinos, no es utilizado como
nutriente. Un gel de agar al 1-
 Medios generales: Son
2% se licua alrededor de los
aquellos que permiten el
100ºC y se gelifica alrededor
crecimiento de una gran
de los 40ºC, dependiendo de
variedad de microorganismos.
su grado de pureza.
 Medios de enriquecimiento:
 Extractor: Su preparación
Son aquellos que favorecen el
consiste en que ciertos
crecimiento de u determinado
órganos o tejidos animales o
tipo de microorganismo sin
vegetales (p.e. carne, hígado,
llegar a inhibir totalmente el
cerebro, semillas, etc.) son
crecimiento de los demás.
extraídos con agua y calor y
 Medios selectivos: Son
posteriormente concentrados
aquellos que permiten el
hasta la forma final de pasta o
crecimiento de un tipo de
polvo. Estos preparados
microorganismos determinado,
deshidratados son a menudo
 empleados en la elaboración
de los medios de cultivo. Los
más utilizados son el extracto
de carne, de levadura y el de
malta. (Universidad de
Granada, 2015)
Algunos de los medios de cultivos
que fueron usados como medio de
estudio para esta investigación
fueron:
 Agar Papa Dextrosa (PDA):
Medio de cultivo para el
estudio morfológico de hongos
miceliados y levaduras.
Además, la fórmula es
adecuada para la mantención
de cultivos y la diferenciación
de ciertos dermatofitos según
la producción de pigmentos. El
extracto de papas frescas
aporta una gran variedad de
nutrientes esenciales, como
carbohidratos complejos y
sales minerales necesarios
para el desarrollo de los
hongos, permitiendo la
expresión de pigmentos y
estructuras útiles en la
identificación de especies.
(VALTEK S.A., 2018)
 Agar Cuenta Estándar (EST):
Es un medio utilizado para el
recuento de bacterias
aeróbicas a partir de agua
como las aguas residuales,
alimentos y productos lácteos.
En este medio la peptona de
caseína proporciona los
aminoácidos, el nitrógeno y
otras sustancias necesarias
para el crecimiento de los
microorganismos.
Primeramente un servicio
público, es el conjunto de
actividades y subsidios
permitidos , reservados o
exigidos a las administraciones
públicas por la legislación en
cada estado y tienen como
finalidad, responder a
diferentes imperativos acerca
del funcionamiento de la
sociedad, en el ámbito de
intercambio cultural con
personas de diferentes países
son indispensables para
responder a las necesidades
que se le presenten al turista al
momento de formar parte de
un nuevo espacio que no sea
su país de origen. (MCD LAB
S.A., 2014)
 Caldo Lactosado: Es un medio
de cultivo utilizado para la
recuperación de coliformes en
agua y alimentos con base en
la formación de gas. Es
utilizado en el pre-
enriquecimiento en la
búsqueda de Salmonella spp.
en alimentos procesados, esto
debido a que las salmonellas
pueden ser dañadas en el
proceso a los que se someten
los alimentos. Permite reparar
el daño celular y diluir las
sustancias tóxicas, además
proporciona los nutrientes
necesarios para el desarrollo
 bacteriano y no contiene
inhibidores bacterianos. (MCD
LAB S.A., 2014)
Microorganismos que son
cuantificados y analizados
mayormente con este tipo de medios
de cultivos:
1. Salmonella. varillas medianas
(1 ¥ 4 mm); generalmente
móvil; mesófilos. Hay más de
2000 serovares y todos se
consideran patógenos
humanos. Se encuentra en el
intestino contenidos
humanos, animales, pájaros e
insectos. Principal causa de
enfermedades transmitidas por
los alimentos. Especies:
Salmonella enterica ssp.
entérica. (Ray, 2003)
2. Staphylococcus. Células
esféricas (0,5 a 1 mm); ocurren
solos, en pares o grupos;
inmóvil; mesófilos; anaerobios
facultativos; crecen en NaCl al
10%. Staphylococcus aureus
están frecuentemente
involucradas en enfermedades
transmitidas por los alimentos.
Sta. carnoso se utiliza para
procesar algunos embutidos
fermentados. El hábitat
principal es la piel de
humanos, animales, y pájaros.
(Ray, 2003)
3. Escherichia. Varillas rectas (1
¥ 4 mm); móvil o inmóvil;
mesófilos. Encontrado en el
contenido intestinal
humanos, animales de sangre
caliente y aves. Muchas cepas
no patógenas, pero algunas
cepas patógenas para
humanos y animales e
involucradas en enfermedades
transmitidas por alimentos. Se
utiliza como indicador de
saneamiento (cepas
teóricamente no patógenas) en
grupos de coliformes y
coliformes fecales. Especies
importantes: Escherichia coli.
(Ray, 2003)
de
El objetivo de esta investigación fue
la de conocer acerca de la
metodología de preparación de
medios de cultivos utilizada
habitualmente en los laboratorios
para el análisis microbiológico de los
alimentos, así como la esterilización
de dichos medios y materiales para la
eliminación de microorganismos
patógenos que puedan estar
presentes en el recipiente que
contenga los medios. La peptona de
gelatina y el extracto de levadura
proporcionan la fuente de carbono y
nitrógeno. La dextrosa es el
carbohidrato fermentable y el agar es
adicionado como agente solidificante.
Conclusión.
Con base a los métodos de
elaboración de medios de cultivo y su
esterilización, así como en el
resultado final de dichos medios de
cultivo, se logran apreciar diferentes
aspectos dentro de la apariencia de
de
los mismos tomando en cuenta que
cada medio es diferente en
composición y en la fase final que
poseerá, de igual forma hacer buen
uso del equipo y material de
laboratorio garantiza un resultado
mas satisfactorio en la fase de los
resultados, para poder dar los
nutrientes y el ambiente óptimo para
el desarrollo de los microorganismos
que se deseen analizar.

Bibliografía
MCD LAB S.A. (2014). Ficha Técnica. Agar para Métodos Estándar. Oaxaca de Juárez, Oaxaca,
México.

MCD LAB S.A. (2014). Ficha Técnica. Caldo Lactosado. Oaxaca de Juárez, Oaxaca, México.

Ray, B. (2003). The Fundamental Food Microbiology. New York: CRC Press.

Universidad de Granada. (2015). Preparacion de medios de cultivo. España.

VALTEK S.A. (Enero de 2018). Ficha Técnica. Agar Papa Dextrosa (PDA). Santiago de Chile, Chile.