T.C.S.

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AGAR / MEDIO PARA EL AISLAMIENTO DE BACTERIAS AEROBIAS Y ANAEROBIAS

2014/04

1- USO PREVISTO
El agar T.C.S. (Tripto-Caseína-Soja) es un medio rico especialmente idóneo para el crecimiento de bacterias exigentes
(Streptococci, Neisseria, Brucella, Corynebacteria, etc.)

2- PRINCIPIO
El crecimiento de la mayoría de las bacterias aerobias y anaerobias se promueve por la presencia de los nutrientes aportados
por el producto digerido pancreático de caseína, digerido papaico de comida de brotes de soja y glucosa (usado como fuente
de carbono).

3- CÓMO SE SUMINISTRA
 Medio listo para usar:
- 25 tubos de 8 ml código 55944
- caja de 20 placas de Petri (90 mm) (TCS) código 63884
 Medio listo para usar (para dispensar)
- 6 frascos de 200 ml (TCS) código 55947
 Medio deshidratado
- frasco de 500 g código 64554

4- COMPOSICIÓN TEÓRICA (g/l de agua destilada)

El medio T.C.S. se elabora de acuerdo con la fórmula descrita por Leavitt y cols. (1).
Producto digerido pancreático de caseína 15
Producto digerido papaico de semillas de soja 5
Cloruro sódico 5
Agar 15
pH final 7,3  0.2

Preparación del medio:

Homogeneice el polvo contenido en el frasco.
Mezcle 40 gramos de medio deshidratado en un litro de agua destilada estéril. Caliente suavemente, agitando con frecuencia y
luego caliente hasta hervir y que se consiga la disolución completa. Esterilice a 121°C durante 15 minutos antes de dispensar
en placas de Petri, tubos o frascos.
 Cuando se suplementan con suero al 5% o telurita potásica al 0,5%, el agar T.C.S. puede usarse como medio de transporte
para todos los tipos de muestras (ojo, torundas de garganta, etc.), permitiendo la demostración de Streptococci,
Corynebacterium diphtheriae y posiblemente Candida albicans (2).
 Cuando se suplementa con sangre de caballo cocida al 5%, el agar T.C.S. puede usarse como agar chocolate para el
aislamiento de Neisseria y Haemophilus.
Para agar sangre fresco:
 Añada 5% de sangre de caballo estéril a base estéril derretida enfriada a 45°C.
 Después de agitar cuidadosamente, evitando la inclusión de burbujas de aire, dispense en placas de Petri o frascos.
Para agar chocolate:
 Añada sangre de caballo estéril al agar T.C.S.
 Agite la mezcla a 80°C durante 10 minutos hasta que se obtenga el color chocolate. Dispense en placas de Petri o frascos.

5- CONSERVACIÓN
 Medio listo para usar (tubos y frasco): +2-25°C.
 Medio listo para usar (placas de Petri): +2-8°C.
 Medio deshidratado: frasco cerrado herméticamente en un lugar seco a +15-25°C.
La fecha de caducidad y el número de lote están indicados en el envasado.

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6- INSTRUCCIONES
Material:
 Material suministrado: Medio T.C.S.
 Material específico no suministrado: sangre de caballo

Inoculación:
Inocule tomando directamente de la muestra a examinar. Consúltense las recomendaciones actuales para la conservación de
muestras biológicas (3).

Incubación:
Incube durante 24 a 48 horas a 37°C.

7- RENDIMIENTO / CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA

 Aspecto del medio listo para usar: agar de color ámbar.
 Aspecto del medio deshidratado: polvo beige pálido.
 Los rendimientos de crecimiento del medio T.C.S. se verifican con las siguientes cepas:
CEPAS RESULTADO DEL CULTIVO DESPUÉS DE 24 a 48 horas a 37
°C
Candida albicans ATCC 2091 Buen crecimiento
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Buen crecimiento
Staphylococcus epidermidis ATCC 14990 Buen crecimiento

 Los rendimientos de crecimiento del medio T.C.S. + sangre de caballo al 5% (agar con sangre fresca) se verifican con las
siguientes cepas:
CEPAS RESULTADO DEL CULTIVO DESPUÉS DE 24 horas a 37 °C
Enterococcus faecalis var zymogenes ATCC 29212 ß hemólisis
Streptococcus pneumoniae ATCC 6303  hemólisis verduzca
Neisseria meningitidis ATCC 13090 (+ CO2) Hemólisis negativa

 Los rendimientos de crecimiento del medio T.C.S. + sangre de caballo al 5% (agar “Chocolate”) se verifican con las
siguientes cepas:
CEPAS RESULTADO DEL CULTIVO DESPUÉS DE 24 horas a 37 °C
Neisseria meningitidis ATCC 13090 (+ CO2) Buen crecimiento
Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424 (+ CO2) Buen crecimiento
Haemophilus influenzae CIP 52151 (+ CO2) Buen crecimiento

8- CONTROL DE CALIDAD DEL FABRICANTE

Todos los reactivos fabricados se elaboran según nuestro sistema de calidad, que va desde la recepción de las materias
primas hasta la comercialización final del producto. Cada lote se somete a valoraciones de control de calidad y sale al mercado
sólo cuando está de acuerdo con los criterios de aceptación predefinidos. Los registros relativos a la producción y al control de
cada lote se conservan en Bio-Rad.

9- LÍMITES DE USO
 Debido a los requisitos nutricionales, algunas cepas pueden no crecer en este medio.
 Deben realizarse pruebas complementarias para identificar la especie de la cepa aislada.
 Las muestras que probablemente contienen Brucella o Neisseria deben incubarse en una atmósfera enriquecida con CO2.

10- BIBLIOGRAFÍA
1. LEAVITT, J.M., I.J. NAIDORF and P. SHUGAEVSKY. 1955. The undetected anaerobe in endodonties ; a sensitive medium
for detection of both aerobes and anaerobes. The NY J. Dentist. 25 : 377-382.
2. BARON E.J., L.R. PETERSON, and S.M. FINEGOLD. 1994. Etiological agents recovered from clinical material, p. 244.
Bailey & Scott’s. Diagnostic Microbiology, 9th ed. Mosby - Year Book, Inc., St Louis, MO.
3. Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva. 1991. 1st edition.

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