Traducido del inglés al español - www.onlinedoctranslator.

com

termo científico
Productos de microbiología

Haciendo los alimentos más seguros

según métodos ISO

Medios de cultivo y productos asociados para la detección y enumeración
de patógenos
Introducción

La Organización Internacional de Normalización (ISO) ha publicado más de

19.000 normas internacionales que cubren muchos aspectos diferentes de las
pruebas de alimentos.

Muchas empresas optan por analizar alimentos para humanos, alimentos para animales y
muestras ambientales de acuerdo con los métodos ISO. Al salvaguardar la salud pública a través
del control de los niveles de organismos infecciosos, aplicando métodos que se ajustan a los
estándares establecidos por los organismos de acreditación y las autoridades reguladoras, las
empresas pueden satisfacer las crecientes demandas de sus clientes y mantener su reputación
de suministro de productos que son seguros para los consumidores. consumir.

Esta guía describe el Thermo Scientific™Productos de microbiología que se

ajustan a las formulaciones descritas en las 16 normas ISO más utilizadas para
alimentos humanos, alimentos para animales y muestras ambientales.
Contenido

ISO 6888 Métodos horizontales para la enumeración

de estafilococos coagulasa positivos (estafilococo aureusy otra especies)

1.1ISO 6888-1:1999 A1:2003 Técnica con medio Baird-Parker

1.2ISO 6888-2:1999 A1:2003 Técnica que utiliza medio de fibrinógeno de plasma de conejo

1.3ISO 6888-3:2003 Técnica de detección y MPN para números bajos

1.4ISO 16140 Alternativa validada–Brillantez™Agar estafilococo 24

ISO 6579: 2002 A1: 2007 Método horizontal para la detección de especies de Salmonella

2.1ISO 16140 Método alternativo validado: método Salmonella Precis

ISO 11290 Métodos horizontales para la detección y enumeración de

Listeria monocytogenes

3.1ISO 11290-1:1996 A1:2004 Método de detección

3.2ISO 11290-2:1998 A1:2004 Método de enumeración

3.3ISO 16140 Método alternativo validado: método Listeria Precis

ISO 16649 Métodos horizontales para la enumeración

deb-glucuronidasa positivoEscherichia coli

4.1ISO 16649-1:2001 Técnica de recuento de colonias a 44 °C utilizando membranas y

5-bromo-4-cloro-3-indolil-b-D-glucurónido

4.2ISO 16649-2:2001 Técnica de recuento de colonias a 44 °C utilizando 5-bromo-4-cloro-3-indolil-b-D-glucurónido

4.3ISO 16649-3:2005 Técnica MPN usando 5-bromo-4-cloro-3-indolil-b-D-glucurónido

ISO 7251:2005 Método horizontal para la detección y enumeración de

presuntosEscherichia coli–Técnica NMP

ISO 16654:2001 Método horizontal para la detección deEscherichia coli0157

ISO 21528 Métodos horizontales para la detección y enumeración de

Enterobacteriaceae

7.1ISO 21528-1:2004 Detección y enumeración mediante técnica MPN con preenriquecimiento

7.2ISO 21528-2:2004 Método de recuento de colonias

Contenido

ISO 4831:2006 Método horizontal para la detección y enumeración de

coliformes – técnica MPN

ISO 4832:2006 con corrección de errores de 2009

Método horizontal para la enumeración de Coliformes – técnica de conteo de colonias

ISO 7937:2004 Método horizontal para la enumeración de

Clostridium perfringens–técnica de conteo de colonias

ISO 10272 Métodos horizontales para la detección y enumeración de

especies de Campylobacter

11.1ISO 10272-1:2006 Método de detección

11.2ISO 10272-2:2006 Técnica de recuento de colonias

11.3ISO 16140 Alternativa validada–Brillantez™Agar CampyCount

ISO 21871:2006 Método horizontal para la determinación de números bajos

de presuntosBacillus cereus–Técnica NMP y métodos de detección

ISO 7932:2004 Método horizontal para la enumeración de

presuntosBacillus cereus–técnica de recuento de colonias a 30°C

ISO 15214:1998 Método horizontal para el recuento de bacterias

mesófilas del ácido láctico: técnica de recuento de colonias a 30 °C

ISO 21567:2004 Método horizontal para la detección de especies de Shigella

ISO 21527 Métodos horizontales para la enumeración de levaduras y mohos

16.1ISO 21527-1:2008 Técnica de recuento de colonias en productos con actividad de agua superior a 0,95

16.2ISO 21527-2:2008 Técnica de recuento de colonias en productos con actividad de agua inferior o igual a 0,95

Todas las normas ISO están vigentes en el momento de la impresión.

1.1 ISO 6888-1:1999 + A1: 2003

Parte 1: Técnica utilizando el medio de Baird-Parker

Estafilococos coagulasa positivos

estafilococo aureustiene implicaciones en el control de la higiene, y además, al producir enterotoxina,
es una causa clave de intoxicación alimentaria. Se encuentra más comúnmente en el queso, la leche y
los alimentos preparados a mano, su prevalencia está muy extendida y es de vital importancia para
los fabricantes de alimentos, ya que es una bacteria común que se encuentra en la nariz humana y en
la piel.

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

Como se indica

AISLAMIENTO

Superficie inocular 0,1 ml de muestra de prueba

o dilución en
Baird Parker mediano
(CM1127 + SR0054)
O 1,0 ml en
placa 1x140mm
placas de 3x90mm

Incubar durante 24 h ± 2 h a 35 °C o 37 °C

EXAMINAR PLACAS

Marcar la posición de las colonias típicas

Incubar durante 24 h ± 2 h a 35 °C o 37 °C

CONFIRMACIÓN

Caldo de infusión de cerebro y corazón

(CM1135)
Plasma de conejo
(R21050)

1
1.2 ISO 6888-2:1999 + A1:2003

Parte 2: Técnica que utiliza medio de fibrinógeno de plasma de conejo

Estafilococos coagulasa positivos

estafilococo aureustiene implicaciones en el control de la higiene, y además, al producir enterotoxina,
es una causa clave de intoxicación alimentaria. Se encuentra más comúnmente en el queso, la leche y
los alimentos preparados a mano, su prevalencia está muy extendida y es de vital importancia para
los fabricantes de alimentos, ya que es una bacteria común que se encuentra en la nariz humana y en
la piel.

AISLAMIENTO

Duplique la placa de vertido usando 1 ml de prueba

muestra o dilución en Fibrinógeno
plasmático de conejo (RPF)
(CM0961 + SR0122)
Incube durante 18–24 h a 35 °C o 37 °C
Incube durante 24 h más si es necesario

INFORME DE RESULTADOS

Contar colonias típicas

2
 1.3ISO 6888-3:2003

Parte 3: Técnica de detección y MPN para números bajos

Estafilococos coagulasa positivos

estafilococo aureustiene implicaciones en el control de la higiene, y además, al producir enterotoxina,
es una causa clave de intoxicación alimentaria. Se encuentra más comúnmente en el queso, la leche y
los alimentos preparados a mano, su prevalencia está muy extendida y es de vital importancia para
los fabricantes de alimentos, ya que es una bacteria común que se encuentra en la nariz humana y en
la piel.

MÉTODO DE DETECCIÓN MÉTODO DE ENUMERACIÓN

ENRIQUECIMIENTO

AgregarXg de porción de prueba a 9Xml de

Preparar diluciones en d/s y s/s
s/sCaldo Giolitti y Cantoni Caldo Giolitti y Cantoni
(CM0523) (CM0523 + SR0030)
como se indica
O Incubar durante 24 h ± 2 h a 37 °C

Agregue 10 g de la porción de prueba a 10 ml de

Reincubar los tubos negativos hasta 48 h ± 2 h

d/sCaldo Giolitti y Cantoni

(CM0523)

Selle el tubo con agar o parafina

Incubar durante 24 h ± 2 h a 37 °C
Reincubar los tubos negativos hasta 48 h ± 2 h

AISLAMIENTO

subcultura en subcultura en

O
Agar de Baird-Parker Agar de fibrinógeno de plasma de conejo (RPF)
(CM1127 + SR0054) (CM0961 + SR0122)
Incubar durante 24 h ± 2 h a 37 °C Incubar durante 24 h ± 2 h a 37 °C

EXAMINAR PLACAS INFORME DE RESULTADOS

Marcar la posición de las colonias típicas Contar colonias típicas

CONFIRMACIÓN

Caldo de infusión de cerebro y corazón

(CM1135)
Plasma de conejo
(R21050)

s/s = fuerza simple d/s =

fuerza doble XmL =
tamaño de muestra Xg = 3
tamaño de muestra
Productos que cumplen con la ISO indicada para

Estafilococos coagulasa positivos

1.1 ISO 6888-1:1999
Descripción del Producto formato de producto Código de producto

CM1127B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM)
Baird-Parker (ISO) Medio CM1127T – 5Kg

Placa de Petri PO1195A

Emulsión de telurito de yema de huevo Botella SR0054C – 100mL

Emulsión de yema de huevo Botella SR0047C – 100mL
Telurito de potasio 3,5% Tubo SR0030J – 10x2mL
CM1135B-500g
Caldo de infusión de cerebro y corazón Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1135R – 2,5Kg

CM1135T – 5Kg

R21050 – 5mL
R21051 – 15mL
Plasma de conejo con EDTA Frasco

R21052 – 25mL
R21060 – 6x5mL

1.2ISO 6888-2:1999
Descripción del Producto formato de producto Código de producto

BO0290Y – 10x360mL
Botella
Base de agar Baird Parker (RPF) BO0290J – 10x90mL
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0961B-500g
Suplemento RPF Frasco SR0122A – 10x100mL

1.3ISO 6888-3:2003
Descripción del Producto formato de producto Código de producto

CM1127B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM)
Baird-Parker (ISO) Medio CM1127T – 5Kg

Placa de Petri PO1195A

Emulsión de telurito de yema de huevo Botella SR0054C – 100mL

Emulsión de yema de huevo Botella SR0047C – 100mL

Telurito de potasio 3,5% Tubo SR0030J – 10x2mL

BO0290Y – 10x360mL
Botella
Base de agar Baird Parker (RPF) BO0290J – 10x90mL

Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0961B-500g

Suplemento RPF Frasco SR0122A – 10x100mL

CM1135B-500g
Caldo de infusión de cerebro y corazón Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1135R – 2,5Kg

CM1135T – 5Kg

R21050

R21051
Plasma de conejo con EDTA Kit/Reactivo
R21052

R21060

CM0523B-500g
Caldo Giolitti y Cantoni Medios de cultivo deshidratados (CM)
CM0523R – 2.5Kg

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
4
termo científicoBrillantezestafilococo 24

termo científico™Brillantez™Staph 24 Agar: un medio cromogénico selectivo y de diagnóstico para

el aislamiento y la enumeración de estafilococos coagulasa positivos en alimentos, dentro de las
24 horas.

OBSERVACIÓN SIMPLE
• Colonias de color azul oscuro sobre un fondo claro Protocolo para la enumeración de
estafilococos coagulasa positivos
RESULTADOS RÁPIDOS
usandoBrillantezestafilococo 24
• Enumeración en solo 24 horas

RESPUESTAS DEFINITIVAS Enchapado

• Detecta estafilococos coagulasa positivos, incluidos los Diluir la muestra en

estafilococos no aureus coagulasa positivos patogénicos, diluyente apropiado

comoS. intermedio
Más
• Previene el crecimiento de organismos no objetivo, por lo tanto, elimina extensas pruebas
Por duplicado, esparcido
de confirmación y errores de cálculo de recuentos de células.
0,1 ml de aprox.
dilución en 2
CONCLUSIONES CONFIABLES
Agar estafilococo 24
• ISO 16140 validado
Incubar durante 24 h

a 37°C ± 1°C
Validación ISO 16140

El termo científicoBrillantezEl método Staph 24 Agar ha sido validado y aprobado por

MicroVal de acuerdo con la norma ISO 16140 frente al método de referencia ISO
6888:1999: método horizontal para la enumeración de estafilococos coagulasa
positivos (estafilococo aureusy otras especies) – Parte 1: Técnica que utiliza el agar Resultados

de Baird-Parker para todos los productos de alimentación humana. Los certificados Si está presente, seleccione

de MicroVal están disponibles en formato PDF en www.microval.org. bien aislado oscuro

colonias azules para usar en

la confirmación

Confirmar

Confirmar usando tubo

coagulasa

5
2.1 ISO 6579:2002 + A1:2007

Método horizontal para la detección de

Especies de salmonella
El género Salmonella pertenece a la familia Enterobacteriaceae. Las bacterias Salmonella son
bacilos gramnegativos que no forman esporas. Existen aproximadamente 2.500 serovares de
Salmonella, que se caracterizan según antígenos somáticos y flagelos. La salmonella es una de
las causas más frecuentes de intoxicación alimentaria y un importante problema de salud
pública a nivel mundial. La detección de Salmonella en los alimentos antes de que se
consuman es vital para salvaguardar la salud pública y esencial para preservar la salud
financiera y la reputación de las empresas alimentarias.

PRE-ENRIQUECIMIENTO

Preparar dilución 1:10 enAgua peptonada

tamponada (ISO) (CM1049)a temperatura ambiente

Incubar durante 18 h ± 2 h a 37 °C ± 1 °C

ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO

0.1mL de cultivo en 10mL de 1mL de cultivo en 10mL de

Caldo RVS (CM0866) Caldo MKTTn (CM1048 + SR0181)
Incubar durante 24 h ± 3 h a 41,5 °C ± 1 °C Incubar durante 24 h ± 3 h a 37 °C ± 1 °C

AISLAMIENTO

Agar XLD (CM0469)más

segundo agar de elección
p.ejBrillantezAgar Salmonella (CM1092 + SR0194) Agar
Verde Brillante (mod) (CM0329)
Incubar durante 24 h ± 3 h a 37 °C ± 1 °C

PLACA DE PUREZA

Agar nutriente

Incubar durante 24 h ± 3 h a 37 °C ± 1 °C

CONFIRMACIÓN BIOQUÍMICA CONFIRMACIÓN SEROLÓGICA

Agar TSI (CM0277)

Agar urea (CM0053 + SR0020) Medio Antígenos O (R308528201)
de descarboxilación de L-lisina Antígenos Vi (R30957401)
Detección deb-galactosidasa Antígenos H (R30858501)
Reacción de Voges-Proskauer–
VMR (CM0043)
Reacción de indol–Agua Triptona (CM0087)
+ Reactivo de Kovac(MB0209A)
Salina psicológica 6
Productos que cumplen con la ISO indicada para

Especies de salmonella
2.1 Norma ISO 6579:2002

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

BO1067S – 10x225mL
Botella
BO1067Z – 10x950mL

CM1049B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1049R – 2,5Kg

CM1049T – 5Kg
Agua peptonada tamponada (ISO)
DB1049W
bolsa seca™
DB1049M

ReadyBag BM1104T

Tubo TV5013D

Universal BO1067E

CM0866B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0866R – 2,5Kg

CM0866K – 25Kg
Caldo RVS
Tubo TV5036E

EB0499E
Universal
EB0499M

Botella BO1224K – 10x50mL

Caldo MKTTn Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1048B-500g

Tubo TV5065E

Suplemento de novobiocina Frasco SR0181E

CM0469B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0469R – 2.5Kg

Agar XLD CM0469T – 5Kg

PO0164A
Placa de Petri
PO5057A

Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0277B-500g

Agar hierro azúcar triple (TSI)
Tubo TV5074D

Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0053B-500g

Agar urea BO0337B – 24x3mL
Pendiente

EB0337B – 200x3mL

Solución de urea al 40% Frasco SR0020K

MRVP Medio Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0043B-500g

BO0383B

Bibelot BO0383C
agua de triptona
EB0383B

Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0087B-500g

Reactivo de Kovac Botella MB0209A

Salmonella O sueros aglutinantes Kit/Reactivo R30858201

Sueros aglutinantes de Salmonella Vi Kit/Reactivo R30957401

Sueros aglutinantes de Salmonella H Kit/Reactivo R30858501

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
7
Productos que cumplen con la ISO indicada para

Especies de salmonella
Segundo medio de elección: ISO 6579:2002

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

CM0329B-500g
CM0329R – 2.5Kg
Medios de cultivo deshidratados (CM)
CM0329T – 5Kg
Agar verde brillante (modificado)
CM0329K – 25Kg

PO0171A
Placa de Petri
PO5033A

CM1092B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM)
BrillantezBase de agar para salmonela CM1092T – 5Kg

Placa de Petri PO5098A

BrillantezBiplaca Salmonella/XLD Placa de Petri PO5248E

BrillantezSuplemento Selectivo Salmonella Frasco SR0194E

Salmonella Precis – ISO 16140 Método alternativo validado contra ISO 6579:2002

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

CM1092B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM)
BrillantezBase de agar para salmonela CM1092T – 5Kg

Placa de Petri PO5098A

BrillantezSuplemento Selectivo Salmonella Frasco SR0194E

Botella BO1096S – 10x225mL

CM1091B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM)
CM1091T – 5Kg
ONE Caldo-Base Salmonella
FR60481
ReadyBag
FR60101

bolsa seca DB1091W

SR0242E – 225 ml
Suplemento selectivo de caldo ONE-Salmonella Frasco

SR0242B-2.25L
Prueba de látex de salmonela Kit/Reactivo FT0203A

Kit Oxoid Salmonella Látex Kit/Reactivo DR1108A

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
8
Salmonella Precis Método

Un método rápido y sencillo para el enriquecimiento, la detección y la confirmación de

especies de Salmonella a partir de alimentos, piensos y muestras ambientales.

• Validado por la Certificación AFNOR según la norma ISO 16140

• Procedimiento simple: no se requiere equipo especializado

Protocolo para

• Enriquecimiento único de 18 horas Salmonella Precis Método

• Transferencia de muestra única

Ddía 0: Enriquecimiento
• Incubación en placa única de 24 horas
25g o 25mL de muestra +
• Confirmación rápida y conveniente: Thermo Scientific™Oxoide™Prueba de látex de Salmonella 225mL Caldo ONE-Salmonella
o pruebas estándar ISO 6579:2002

• Tiempo reducido para obtener resultados: 2 días en comparación con hasta 5 días En
cubar durante 16 – 20 horas a 42°C

para los métodos de cultivo estándar

• termo científico™Brillantez™Salmonella Agar contiene un novedoso Thermo Scientific™

inhibidor™tecnología, dando especificidad específica y flora de fondo reducida
Día 1: Emplatado
Usando un asa microbiológica
Validación AFNOR de 10 μL, inocule una sola
BrillantezSalmonela
La Salmonella Precis™El método ha sido validado y aprobado por AFNOR
placa de agar
Certificación según la Norma ISO 16140 frente al método de referencia
Norma ISO 6579:2002 para la detección de Salmonella en alimentos, piensos
yo
Incube durante 20 – 26 horas a 37°C
y muestras ambientales, excluidas las muestras de cría.

Para mayor flexibilidad, la confirmación se validó mediante la prueba de látex de

Salmonella y las pruebas descritas en la norma ISO 6579:2002. Alternativamente, paneles Día 2: Resultados
bioquímicos como Thermo Scientific™Microbacteria™GNB 24E o Thermo Scientific™ Si está presente, seleccione
RÁPIDO UNO™Panel, se puede utilizar. una colonia de color púrpura
bien aislada y analice con
Certificado de validación de la Certificación AFNOR (disponible en formato PDF en el Oxoid Salmonella
sitio web de AFNOR www.afnor-validation.com). Prueba de látex

Alternativamente, confirme

colonias moradas usando

Reacciones enBrillantez™Agar Salmonella
métodos estándar ISO

Color/apariencia de la colonia Seleccione colonias moradas

Violeta Azul Incoloro para confirmar

Enzima Salmonela Klebsiella,

citrobacter, otro
apuntado por (incluida la lactosa enterobacter,
bacterias y levaduras
cromógeno Salmonella positivo) Serratia
Esterasa + - /+ -
b-glucosidasa - + -
E. coliy otras bacterias y levaduras son inhibidas por la combinación de Inhibigen y otros
agentes selectivos en el medio.

9
 3.1 ISO 11290-1:1996 + A1:2004
BS 5763-18:1997

Parte 1: Método de detección

Listeria monocytogenes
Las Listeria son bacilos grampositivos, catalasa positivos, no formadores de esporas con flagelos.
Listeria monocytogenesyListeria ivanoviise asocian consistentemente con enfermedades humanas
aisladas del suelo, la vegetación y el agua. Con una temperatura de crecimiento de 0 °C a 45 °C, es
un patógeno alimentario clave en alimentos enfriados, refrigerados y listos para el consumo.

ENRIQUECIMIENTO PRIMARIO

AgregarXg oXmL de muestra/dilución a 9Xml de

Medio caldo Fraser (CM0895 + SR0166)
Incubar durante 24 h ± 2 h a 30 °C

ENRIQUECIMIENTO SECUNDARIO

Transferir 0,1 ml de cultivo de enriquecimiento

primario a 10 ml deCaldo Fraser (CM0895 + SR0156) Incubar durante 24 h ± 2 h a 30 °C

Incubar durante 48 h ± 2 h a 35 °C o 37 °C

AISLAMIENTO SELECTIVO

Inocular en ALOA™OCLA (ISO) (CM1084 + SR0244,

SR0226)y otro medio de elección Segundo medio
de elección:PALCAM (CM0877 + SR0150),
Oxford (CM0856 + SR0140 o SR0206)
Incubar durante 24 h ± 3 h a 37 °C y, si es necesario, durante un período adicional

24 h ± 3 h

PLACA DE PUREZA

TSYEA–Caldo de extracto de levadura de triptona y soja

(CM0862 + 9–18 g de agar)

Incubar durante 18 a 24 horas a 35 °C–37°C

CONFIRMACIÓN DELISTERIASPP.

Prueba de catalasa

Tinción de Gram

Prueba de motilidad:Caldo de extracto de levadura de triptona y soja (CM0862)

s/s = fuerza simple d/s =

fuerza doble XmL =
CONFIRMACIÓN DELISTERIA MONOCYTOGENES
tamaño de muestra Xg =
tamaño de muestra Prueba de hemólisis:
Agar sangre de carnero (BO0965)
OCLA (ISO) es el agar cromogénico para listeria Oxoid de Thermo Scientific, tal como Utilización de carbohidratos
se establece en la norma ISO 11290. Es equivalente en formulación a ALOA, pero

debido a la restricción de la marca registrada, OCLA (ISO) no puede denominarse

Prueba CAMPAMENTO 10
ALOA.
 3.2 ISO 11290-2:1998 + A1:2004

Parte 2: método de enumeración

Listeria monocytogenes
Las Listeria son bacilos grampositivos, catalasa positivos, no formadores de esporas con flagelos.
Listeria monocytogenesyListeria ivanoviise asocian consistentemente con enfermedades humanas
aisladas del suelo, la vegetación y el agua. Con una temperatura de crecimiento de 0 °C a 45 °C, es
un patógeno alimentario clave en alimentos enfriados, refrigerados y listos para el consumo.

ENRIQUECIMIENTO PRIMARIO

AgregarXg oXmL de muestra a 9Xml de Agua

peptonada tamponada (ISO) (CM1049) oMedio
caldo Fraser (CM0895 + SR0166)

Deje reposar la suspensión durante 1 h ± 5 min a 20 °C ± 2 °C

AISLAMIENTO SELECTIVO

Inocular en ALOA™
Agar OCLA (ISO) (CM1084 + SR0244, SR0226)
Incubar durante 24 h ± 3 h a 37 °C

PLACA DE PUREZA

TSYEA–Caldo de extracto de levadura de triptona y soja

(CM0862 + 9–18 g de agar)

Incubar durante 18 a 24 horas a 37 °C

CONFIRMACIÓN DELISTERIASPP.

Prueba de catalasa

Tinción de Gram

Prueba de motilidad:Caldo de extracto de levadura de triptona y soja (CM0862)

CONFIRMACIÓN DELISTERIA MONOCYTOGENES

Prueba de hemólisis:Agar sangre de carnero (BO0965)

Utilización de carbohidratos
Prueba CAMPAMENTO

s/s = fuerza simple d/s =

fuerza doble XmL =
tamaño de muestra Xg = 11
tamaño de muestra
Productos que cumplen con la ISO indicada para

Listeria monocytogenes
3.1ISO 11290-1:1996

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

Botella BO0407E – 24x10mL

CM0895B-500g
Base de caldo Fraser Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0895R – 2.5Kg

CM0895T – 5Kg

Tubo TV5020E

Suplemento Fraser Frasco SR0156E

BO1034E – 24x10mL
Caldo Fraser + Suplemento Botella
EB1034E – 100x10mL

SR0166E – 225mL
Suplemento de medio Fraser Frasco

SR0166G-2.25L
BO0350S – 10x225mL

BO0350V – 10x500mL

Botella BO0350Z – 10x450mL

BO0793S – 10x225mL
Medio Fraser + Suplemento
BO0350J – 10x90mL
DB0895V
bolsa seca
DB0895L

ReadyBag FR59562

CM1084B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM)
Agar cromogénico para listeria oxoid (OCLA) (ISO) CM1084R – 2,5Kg

Placa de Petri PO1196A

Suplemento selectivo OCLA (ISO) Frasco SR0226E

Suplemento diferencial OCLA (ISO) Frasco SR0244E

CM0862B-500g
Base de caldo de enriquecimiento para Listeria Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0862R – 2,5Kg

CM0862T – 5Kg

Sangre de carnero desfibrinada Frasco SR0051B

BO0965Z – 10x450mL
Botella
Agar Sangre No. 2 + Sangre de Carnero BO0965M – 10x100mL

Placa de Petri PB0115A

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
12
Productos que cumplen con la ISO indicada para

Listeria monocytogenes
3.2 Segundo medio de elección: ISO 11290-1:1996

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

CM0877B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0877R – 2.5Kg
Agar PALCAM
CM0877T – 5Kg

Placa de Petri PO5104A

SR0150E – 500ml
Suplemento Selectivo PALCAM Frasco

SR0150B-2.5L
CM0856B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0856R – 2.5Kg
Agar selectivo para Listeria (formulación de Oxford)
CM0856T – 5Kg

Placa de Petri PO5026A

Suplemento selectivo de Oxford Frasco SR0140E

Suplemento de Oxford modificado Frasco SR0206E

Listeria Precis – ISO 16140 Método alternativo validado contra ISO 11290-1:1996

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

CM1080B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1080T – 5Kg

BrillantezBase de agar Listeria CM1080E – Paquete de 2L

PO1102A
Placa de Petri
PO5165A

BrillantezSuplemento Selectivo de Listeria Frasco SR0227E

BrillantezSuplemento diferencial de Listeria Frasco SR0228E

Botella BO1066S – 10x225mL

CM1066B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1066R – 2,5Kg
Caldo ONE-Base Listeria
CM1066T – 5Kg

ReadyBag FR60031

bolsa seca DB1066V

SR0234E – 500ml
Suplemento ONE Broth-Listeria Frasco SR0234H – 2L
SR0234B-2.25L
OBIS Listeria Kit/Reactivo ID0600M

Microbact 12L Kit/Reactivo MB1128A

Reactivo de hemolisina Microbact 12L Kit/Reactivo MB1249A

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
13
Productos que cumplen con la ISO indicada para

Listeria monocytogenes
Norma ISO 11290-2: 1998

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

BO1067S – 10x225mL
Botella
BO1067Z – 10x950mL

CM1049B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1049R – 2,5Kg

CM1049T – 5Kg

Agua peptonada tamponada (ISO) DB1049W

bolsa seca
DB1049M

ReadyBag BM1104T

Tubo TV5013D

BO1067E
Universal
BO1071E

Base Oxoid Chromogenic Listeria Agar CM1084B-500g

Medios de cultivo deshidratados (CM)
(OCLA) (ISO) CM1084R – 2,5Kg

Suplemento selectivo OCLA (ISO) Frasco SR0226E

Suplemento diferencial OCLA (ISO) Frasco SR0244E

PO1196A
Agar Oxoid Chromogenic Listeria (OCLA) (ISO) Placa de Petri
PO5183A

CM0862B-500g
Base de caldo de enriquecimiento para Listeria
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0862R – 2,5Kg
(formulación TSYEB)
CM0862T – 5Kg

Sangre de carnero desfibrinada Frasco SR0051B

Agar Sangre No. 2 + Sangre de Carnero Placa de Petri PB0115A

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
14
Producto conforme a la ISO indicada para

Listeria monocytogenes
Listeria Precis – ISO 16140 Método alternativo validado contra ISO 11290 parte 1:1996 y parte 2:1998

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

CM1080B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1080T – 5Kg

BrillantezBase de agar Listeria CM1080E – Paquete de 2L

PO1102A
Placa de Petri
PO5165A

BrillantezSuplemento Selectivo de Listeria Frasco SR0227E

BrillantezSuplemento diferencial de Listeria Frasco SR0228E

Botella BO1066S – 10x225mL

CM1066B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1066R – 2,5Kg
Caldo ONE-Base Listeria
CM1066T – 5Kg

ReadyBag FR60031

bolsa seca DB1066V

SR0234E – 500ml
Suplemento ONE Broth-Listeria Frasco SR0234H – 2L
SR0234B-2.25L
OBIS Listeria Kit/Reactivo ID0600M

Microbact 12L Kit/Reactivo MB1128A

Reactivo de hemolisina Microbact 12L Kit/Reactivo MB1249A

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
15
Método Listeria Precis

Un método rápido y fácil para el enriquecimiento, detección, enumeración y confirmación de

Listeria monocytogenesa partir de alimentos, piensos y muestras ambientales.

• Validado por la Certificación AFNOR según la norma ISO 16140

• Procedimiento simple: no se requiere equipo especializado Protocolo para

• Enriquecimiento único de 24 horas esteria Método preciso

• Transferencia de muestra única

Ddía 0: Enriquecimiento
• Incubación en placa única de 24 horas
25g o 25mL de muestra +
225mL Caldo ONE-Listeria
• Confirmación rápida y cómoda: prueba mono OBIS o pruebas estándar
ISO 11290
yocubar durante 24 h ± 2 h a 30 °C
norte

• Tiempo reducido para obtener resultados: 2 días en comparación con hasta 7 días para el cultivo

estándar y la confirmación

Día 1: Emplatado
Validación AFNOR
Usando un asa microbiológica de

La listeria precisa™ha sido validado y aprobado por AFNOR de acuerdo con la 10 μL, inocule una sola Brillantez

Norma ISO 16140 frente a los métodos de referencia ISO 11290 Parte 1:1997 Placa de agar Listeria

y Parte 2:1997 que incorpora la Enmienda 1:2004 para la detección y Incubar de 22 a 26 horas a 37°C

enumeración deL. monocytogenesen alimentos y muestras ambientales. Los Seleccione colonias verdes/azules con
halos para confirmar
certificados de validación de la Certificación AFNOR están disponibles en
(para muestras de carne, vuelva a incubar
formato PDF en el sitio web de la Certificación AFNOR www.afnor-
placas que no muestren colonias azules/
validation.com. verdes con halos durante un

más lejos22 – 26 horas a 37°C)

Para mayor flexibilidad, la confirmación se validó utilizando la prueba OBIS mono

o las pruebas descritas en ISO 11290. Alternativamente, paneles bioquímicos,
como Microbact™12L o Thermo Scientific™Rápido™Se puede utilizar el Panel CB
Plus. Día 2: Resultados
Si están presentes, confirme las
Color/apariencia de la colonia
colonias azules/verdes con halos
incoloro o
Azul Azul + halo comoL. monocytogenesutilizando
inhibido
la prueba mono OBIS
L. monocytogenes
Enzima
Listeria spp. y patógeno no Listeria Alternativamente, confirme
dirigido
L. ivanovii usando métodos ISO estándar**
b-glucosidasa + + -
lecitinasa - + -

ParaListeria monocytogenesenumeración:
La prueba OBIS mono permite una rápida diferenciación deL. monocytogenes de Resucite cualquier organismo presente en la muestra agregando 25 g o
otras especies de Listeria. Todas las especies de Listeria, con la excepción de 25 ml a 225 ml de agua de peptona tamponada e incube durante 1 hora
L. monocytogenes, poseen la enzima D-alanil aminopeptidasa. Su presencia se a 20 °C. inocular una solaBrillantezListeria en placa con 100μL e incubar

puede detectar utilizando el sustrato, D-alanil-7-amido-4-metilcumarina (DALA),
y el revelador de color, dimetilamino-cinamaldehído.
OBIS mono produce una reacción de color púrpura intenso si esta enzima está presente.
de 45 a 51 horas a 37°C. Inspeccione la placa en busca de colonias
características de color azul/verde con halos y cuente. Confirme usando
OBIS mono o, alternativamente, confirme usando métodos ISO
estándar.** Calcule CFU/g o CFU/mL de muestra.

* * Si no hay suficiente material para realizar una prueba mono OBIS, o si un cultivo mixto de
L. monocytogenesy se sospecha de otras especies de Listeria, primero purifique las colonias
sospechosas mediante un subcultivo en un segundoBrillantezPlaca de listeria.

dieciséis
4.1ISO 16649-1:2001

Parte 1: Técnica de recuento de colonias a 44°C utilizando

membranas y 5-bromo-4-cloro-3-indolil-b-D-glucurónido
b-glucuronidasa-positivo
Escherichia coli
Escherichia colison un miembro de la familia Enterobacteriaceae, y se dividen en muchos
subgrupos.E. colise utiliza como organismo indicador en las pruebas de agua para detectar la
presencia de coliformes fecales. Una causa persistente de patogenicidad diarreica a partir de
alimentos crudos, el grupo más importante según la gravedad de la enfermedad es
E. coliEHEC, que incluye la cepa 0157:H7.

RESUCITACIÓN

1mL de muestra/dilución sobre membrana en

Agar glutamato modificado con minerales

Incubar durante 4 h ± 1 h a 37 °C

AISLAMIENTO

Transfiera la membrana al agar triptona-bilis-glucurónico

Medio TBX (CM0945)
Incubar durante 18 a 24 horas a 44 °C

No más de 4 platos de altura

INFORME DE RESULTADOS

Contar colonias típicas

17
4.2ISO 16649-2:2001

Parte 2: Técnica de recuento de colonias a 44°C utilizando

5-bromo-4-cloro-3-indolil-b-D-glucurónido
b-glucuronidasa-positivo
Escherichia coli
Escherichia colison un miembro de la familia Enterobacteriaceae, y se dividen en muchos
subgrupos.E. colise utiliza como organismo indicador en las pruebas de agua para detectar la
presencia de coliformes fecales. Una causa persistente de patogenicidad diarreica a partir de
alimentos crudos, el grupo más importante según la gravedad de la enfermedad es
E. coliEHEC, que incluye la cepa 0157:H7.

AISLAMIENTO

Vierta las placas por duplicado utilizando 1 ml de prueba

muestra/dilución y
Agar triptona-bilis-glucurónico
TBX Medio (CM0945) CM0945
Incubar durante 18 a 24 horas a 44 °C

O
Incubar durante 4 h a 37 °C seguido de 18 a 24 h a 44 °C
(si se sospechan células estresadas)

INFORME DE RESULTADOS

Contar colonias típicas

18
4.3ISO 16649-3:2005

Parte 3: Técnica MPN utilizando

5-bromo-4-cloro-3-indolil-b-D-glucurónido
b-glucuronidasa-positivo
Escherichia coli
Escherichia colison un miembro de la familia Enterobacteriaceae, y se dividen en muchos
subgrupos.E. colise utiliza como organismo indicador en las pruebas de agua para detectar la
presencia de coliformes fecales. Una causa persistente de patogenicidad diarreica a partir de
alimentos crudos, el grupo más importante según la gravedad de la enfermedad es
E. coliEHEC, que incluye la cepa 0157:H7.

NMP

Agregar 10mL de muestra líquida o suspensión Añadir 1mL de muestra líquida o suspensión inicial

inicial a cada uno de 3 o 5 tubos de 10mL de a cada uno de 3 o 5 tubos de 10mL de Caldo de

Doble fuerzaMinerales Modificados Y glutamato modificado con minerales (CM0607)

Caldo glutamato (CM0607) Proceder de la misma manera con otras diluciones

Incubar durante 24 h ± 2 h a 37 °C Incubar durante 24 h ± 2 h a 37 °C

CONFIRMACIÓN

Inocular tubos que muestren producción de ácido en

agar triptona-bilis-glucurónicoMedio TBX (CM0945)

Incubar durante 22 h ± 2 h a 44 °C
No más de 3 platos de altura

CALCULAR NMP

Busque colonias azules típicas

19
Productos que cumplen con la ISO indicada para

b-glucuronidasa-positivo
Escherichia coli
4.1ISO 16649-1:2001
4.2ISO 16649-2:2001
4.3ISO 16649-3:2005

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

Botella BO0194M – 10x100mL

CM0945B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0945R – 2.5Kg
TBX medio
CM0945T – 5Kg

PO0727A
Placa de Petri
PO5109A

4.3ISO 16649-3:2005

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

Caldo de glutamato modificado con minerales Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0607B-500g
glutamato de sodio Medios de cultivo deshidratados (CM) LP0124

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
20
 5ISO 7251:2005

Método horizontal para la detección y enumeración de

presuntoEscherichia coli
Técnica del número más probable

Escherichia colison un miembro de la familia Enterobacteriaceae, y se dividen en muchos

subgrupos.E. colise utiliza como organismo indicador en las pruebas de agua para detectar la
presencia de coliformes fecales. Una causa persistente de patogenicidad diarreica a partir de
alimentos crudos, el grupo más importante según la gravedad de la enfermedad es
E. coliEHEC, que incluye la cepa 0157:H7.

ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO PRE-ENRIQUECIMIENTO

Agregar 1mL de suspensión inicial a 9mL s/s

Caldo de sulfato de laurilo (CM0451) Preparar diluciones en

O d/s y s/s
Caldo de sulfato de laurilo (CM0451)
Añadir 10mL de suspensión inicial a 10mL d/s
Caldo de sulfato de laurilo (CM0451) Incube durante 24 h ± 2 h a 37 °C Incube
los tubos negativos hasta 48 h ± 2 h
Se aplican modificaciones para muestras más grandes.
†

Incube durante 24 h ± 2 h a 37 °C Incube

los tubos negativos hasta 48 h ± 2 h

ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO DE
CULTURAS POSITIVAS

Inocule un asa llena de cultivo en Inocule un asa llena de cultivo en

Caldo EC (CM0853) Caldo EC (CM0853)
Incube durante 24 h ± 2 h a 44 °C Incube Incube durante 24 h ± 2 h a 44 °C Incube
los tubos negativos hasta 48 h ± 2 h los tubos negativos hasta 48 h ± 2 h

CONFIRMACIÓN DE CULTIVOS POSITIVOS

Inocule una asa llena de cultivo de caldo EC en Inocule una asa llena de cultivo de caldo EC en
Agua Triptona (CM0087) Agua Triptona (CM0087)
Incubar durante 48 h ± 2 h a 44 °C Incubar durante 48 h ± 2 h a 44 °C

PRUEBA PARA LA PRODUCCIÓN DE INDOL

AgregarReactivo de indol (MB0209A) AgregarReactivo de indol (MB0209A)

y examinar el color rojo y examinar el color rojo

s/s = fuerza simple d/s =

fuerza doble XmL = Calcular MPN
tamaño de muestra Xg = 21
tamaño de muestra
Productos que cumplen con la ISO indicada para

presuntoEscherichia coli
Técnica del número más probable
5 Norma ISO 7251:1005

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

CM0451B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0451R – 2.5Kg
Caldo Lauril Sulfato Triptosa
CM0451T – 5Kg

Tubo TV5201G

Caldo EC Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0853B-500g

BO0383B

Bibelot BO0383C
agua de triptona
EB0383B

Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0087B-500g

reactivo de indol Kit/Reactivo MB0209A

Indol de punto rápido Kit/Reactivo R8309002

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
22
 6ISO 16654:2001

Método horizontal para la detección de

Escherichia coli0157
Escherichia colison un miembro de la familia Enterobacteriaceae, y se dividen en muchos
subgrupos.E. colise utiliza como organismo indicador en las pruebas de agua para detectar la
presencia de coliformes fecales. Una causa persistente de patogenicidad diarreica a partir de
alimentos crudos, el grupo más importante según la gravedad de la enfermedad es
E. coliEHEC, que incluye la cepa 0157:H7.

ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO

AgregarXg oXmL de muestra/dilución a 9Xml de

Caldo Triptona Soja Modificado con Novobiocina
(CM0989 + SR0181)
Incubar durante 6 horas a 41,5 °C y durante otras 12 a 18 horas.

INMUNOCAPTURA

Uso de la separación inmunomagnética

AISLAMIENTO SELECTIVO

inocular enCT-SMAC (CM0813 + SR0172)

y otro medio de elección, por ejemplo
CR-SMAC (CM1005 + SR0191)
Incubar durante 18 a 24 horas a 37 °C

PLACA DE PUREZA

Agar nutriente

Incubar durante 18 a 24 horas a 37 °C

CONFIRMACIÓN

Formación de indol:Agua Triptona (CM0087 + MB0209A)

Serología:E. coliO157 antisuero
E. coli0157 Látex: (DR0620M)
s/s = fuerza simple d/s =
fuerza doble XmL =
tamaño de muestra Xg = 23
tamaño de muestra
Productos que cumplen con la ISO indicada para

Escherichia coli0157
6 Norma ISO 16654:2001

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

Botella BO1078S – 10x225mL

TSB modificado CM0989B-500g

Medios de cultivo deshidratados (CM)
CM0989R – 2.5Kg

Suplemento de novobiocina Frasco SR0181E

Cefixima Telurito Sorbitol MacConkey Agar CM0813B-500g

Medios de cultivo deshidratados (CM)
(CT SMAC) Base CM0813R – 2.5Kg

SR0172E
Suplemento selectivo de telurito de cefixima Frasco

SR0172H

PO0702A
Agar CT SMAC Placa de Petri
PO5069A

BO0383B

Bibelot BO0383C
agua de triptona
EB0383B

Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0087B-500g

punto secoE. coli0157 Kit/Reactivo DR0120M

E. coli0157 Prueba de látex Kit/Reactivo DR0620M

reactivo de indol Kit/Reactivo MB0209A

Indol de punto rápido Kit/Reactivo R8309002

Segundo medio de elección: 16654:2001

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

Agar SMAC C-ramnosa Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1005B-500g

CM0956A-100g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0956B-500g
Brillo E. coli/agar coliforme
CM0956R – 2.5Kg

Placa de Petri PO0745A

Suplemento de cefixima Frasco SR0191E

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
24
 7.1ISO 21528-1:2004

Parte 1: Detección y enumeración por MPN con preenriquecimiento

enterobacterias
La familia Enterobacteriaceae de bacterias Gram-negativas incluyeSalmonella, Escherichia, Klebsiella,
Shigella, Proteus, Enterobacter, Serratia,ycitrobacter. Estas familias de bacterias son importantes para
los fabricantes de alimentos, ya que muchos miembros de esta familia forman parte normal de la flora
intestinal humana y de otros animales. Las enterobacterias también se encuentran en el agua o el suelo
y, como tales, se utilizan como organismos indicadores clave para determinar la presencia de bacterias
más virulentas y patógenas, así como un indicador de mala higiene en la fabricación, procesos
interrumpidos o entornos contaminados.

MÉTODO DE DETECCIÓN MÉTODO NMP

PRE-ENRIQUECIMIENTO

AgregarXg oXmL de muestra a 9Xml de Agua Preparar diluciones usando Agua

peptonada tamponada (ISO) (CM1049) peptonada tamponada (ISO) (CM1049)

Incubar durante 18 h ± 2 h a 37 °C Incubar durante 18 h ± 2 h a 37 °C

ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO

Agregar 1 mL de cultivo a 10 mL de Agregar 1 mL de cultivo a 10 mL de

Caldo EE (CM0317) Caldo EE (CM0317)
Incubar durante 24 h ± 2 h a 37 °C Incubar durante 24 h ± 2 h a 37 °C

AISLAMIENTO

Inóculo de superficie Inóculo de superficie

VRBGA (ISO) (CM1082) VRBGA (ISO) (CM1082)
Incubar durante 24 h ± 2 h a 37 °C Incubar durante 24 h ± 2 h a 37 °C

PLACA DE PUREZA

Agar nutriente Agar nutriente

Incubar durante 24 h ± 2 h a 37 °C Incubar durante 24 h ± 2 h a 37 °C

CONFIRMACIÓN

Prueba de oxidasa (R21540) Prueba de oxidasa (R21540)

fermentación de la glucosa fermentación de la glucosa

s/s = fuerza simple d/s =

fuerza doble XmL =
tamaño de muestra Xg = 25
tamaño de muestra
7.2ISO 21528-2:2004

Parte 2: método de recuento de colonias

enterobacterias
La familia Enterobacteriaceae de bacterias Gram-negativas incluyeSalmonella, Escherichia, Klebsiella,
Shigella, Proteus, Enterobacter, Serratia,ycitrobacter. Estas familias de bacterias son importantes para
los fabricantes de alimentos, ya que muchos miembros de esta familia forman parte normal de la flora
intestinal humana y de otros animales. Las enterobacterias también se encuentran en el agua o el suelo
y, como tales, se utilizan como organismos indicadores clave para determinar la presencia de bacterias
más virulentas y patógenas, así como un indicador de mala higiene en la fabricación, procesos
interrumpidos o entornos contaminados.

AISLAMIENTO

Vierta la placa por duplicado de 1mL de

muestra de prueba/dilución
en VRBGA (ISO) (CM1082)
con superposición

Incubar durante 24 h ± 2 h a 37 °C

CONTAR

Contar colonias típicas

PLACA DE PUREZA

Agar nutriente

Incubar durante 24 h ± 2 h a 37 °C

CONFIRMACIÓN BIOQUÍMICA

Prueba de oxidasa (R21540)

fermentación de la glucosa

26
Productos que cumplen con la ISO indicada para

enterobacterias
7.1ISO 21528-1:2004

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

BO1067S – 10x225mL
Botella
BO1067Z – 10x950mL

CM1049B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1049R – 2,5Kg

CM1049T – 5Kg
Agua peptonada tamponada (ISO)
DB1049W
bolsa seca
DB1049M

ReadyBag BM1104T

Tubo TV5013D

BO1067E
Universal
BO1071E

BO0443Z – 10x90mL

Botella BO0598M – 10x100mL

BO0076M – 10x100mL

CM0317B-500g
Caldo EE
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0317R – 2.5Kg

CM0317T – 5Kg

Tubo TV5041E

Universal BO0598E

VRBGA (ISO) Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1082B-500g

Prueba de oxidasa Kit/Reactivo R21540

7.2ISO 21528-2:2004

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

VRBGA (ISO) Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1082B-500g

Prueba de oxidasa Kit/Reactivo R21540

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
27
8ISO 4831:2006

Método horizontal para la detección y enumeración de

coliformes
Técnica del número más probable

Las bacterias coliformes se utilizan comúnmente como indicadores bacterianos de la calidad sanitaria
de los alimentos y el agua. Son bacilos Gram-negativos, que pueden fermentar lactosa con la
producción de ácido y gas cuando se incuban a 35°C a 37°C. Los coliformes se pueden encontrar en
las heces de los animales de sangre caliente y, aunque en sí mismos no son causa de enfermedades
graves, son fáciles de cultivar y su presencia se utiliza para indicar que otros organismos patógenos
de origen fecal pueden estar presentes.

ENRIQUECIMIENTO NMP

Añadir 1mL de muestra líquida o suspensión inicial

Agregue 10 mL de muestra líquida o suspensión
a cada uno de 3 tubos de 10mL de
inicial a cada uno de los 3 tubos de 10 mL de
Caldo de laurilsulfato triptosa (CM0451)
Caldo Lauril Sulfato Triptosa
(CM0451)
Y Proceder de la misma manera con otras diluciones

Incubar durante 24 h ± 2 h a 30 °C o 37 °C Incubar durante 24 h ± 2 h a 30 °C o 37 °C

Si es negativo, incubar durante 24 horas más.

CONFIRMACIÓN

Use un asa llena de cada tubo para
inocular 10 mL de Caldo de bilis de lactosa
verde brillante (CM0031)
Incubar durante 24 h ± 2 h a 30 °C o 37 °C
Si es negativo, incubar durante 24 horas más.
Use un asa llena de cada tubo positivo (gas
y/o turbidez) para inocular 10 mL de Caldo de
Y bilis de lactosa verde brillante (CM0031)
Incubar durante 24 h ± 2 h a 30 °C o 37 °C
Si es negativo, incubar durante 24 horas más.

INFORME DE RESULTADOS

Calcular MPN

28
Productos que cumplen con la ISO indicada para

coliformes
Técnica del número más probable
8 Norma ISO 4831:2006

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

CM0451B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0451R – 2.5Kg
Caldo Lauril Sulfato Triptosa
CM0451T – 5Kg

Tubo TV5201G

CM0031B-500g
CM0031R – 2.5Kg
Medios de cultivo deshidratados (CM)
CM0031T – 5Kg

Caldo de bilis verde brillante CM0031K – 25Kg

Tubo TV5009E

BO0345E
Universal
EB0345E

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
29
9 ISO 4832:2006 con corrección de errores de 2009

Método horizontal para la enumeración de

coliformes
Técnica de recuento de colonias

Las bacterias coliformes se utilizan comúnmente como indicadores bacterianos de la calidad sanitaria
de los alimentos y el agua. Son bacilos Gram-negativos, que pueden fermentar lactosa con la
producción de ácido y gas cuando se incuban a 35°C a 37°C. Los coliformes se pueden encontrar en
las heces de los animales de sangre caliente y, aunque en sí mismos no son causa de enfermedades
graves, son fáciles de cultivar y su presencia se utiliza para indicar que otros organismos patógenos
de origen fecal pueden estar presentes.

AISLAMIENTO

1 ml en una placa de Petri estéril (duplicado) + superposición

Agar VRBLA (ISO) (CM0968)
Incubar durante 24 h ± 2 h a 30–37 °C (según lo acordado)

CONFIRMACIÓN

Caldo de bilis verde brillante (CM0031)

Incubar durante 24 h a 30 °C o 37 °C + tubo Durhams

Busque la producción de gas

30
Productos que cumplen con la ISO indicada para

coliformes
Técnica de recuento de colonias

9 Norma ISO 4832:2006

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

CM0031B-500g
CM0031R – 2.5Kg
Medios de cultivo deshidratados (CM)
CM0031T – 5Kg

Caldo de bilis verde brillante CM0031K – 25Kg

Tubo TV5009E

BO0345E
Universal
EB0345E

VRBLA (ISO) Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0968B-500g

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
31
10ISO 7937:2004

Método horizontal para la enumeración de

Clostridium perfringens
Técnica de recuento de colonias

De la familia ClostridiaClostridium perfringenses el más comúnmente aislado de los alimentos.

C.perfringenses un bacilo esporulante anaerobio grampositivo inusual entre los clostridios por no
ser móvil. Categorizado en subcategorías dependiendo de la toxina producida, es un patógeno de
intoxicación alimentaria clave en los platos de carne.

AISLAMIENTO

1 ml en una placa de Petri

Agregar agar SC a (44–47 °C)
Mezclar con superposición de rotación 10 ml de agar Perfringens

Incubar durante 20 h ± 2 h a 37 °C en una atmósfera anaeróbica

Inocular colonias en Medio Si no está bien aislado,

fluido de tioglicolato (CM0173) sembrar en SC Agar
Incubar durante 18 a 24 horas a 37 °C en una atmósfera anaeróbica InoculateFTM CM0173

CONFIRMACIÓN

Inoculación de
Inoculación de
Medio de motilidad de nitrato
Medio de sulfito de lactosa
Medio de gelatina de lactosa
Incubar durante 18 a 24 horas en una atmósfera aeróbica de 46 °C en un baño de agua
Incubar durante 24 h a 37 °C en una atmósfera anaeróbica

INFORME DE RESULTADOS

Positivo
Examinar las reacciones típicas
(C.perfringens)

32
Productos que cumplen con la ISO indicada para

Clostridium perfringens
Técnica de recuento de colonias

10ISO 7937:2004

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

BO0211Z – 80x39mL

BO1045M – 10x100mL

BO0157M – 10x100mL

BO0157Z – 10x450mL

BO0211M – 10x100mL

BO0368F – 24x15mL
Botella
BO0368M – 10x100mL

BO0368Y – 24x30mL

BO0510M – 10x100mL
Medio fluido de tioglicolato
B00510V – 10x500mL

BO0876O – 10x80mL

BO0990R – 10x200mL

CM0173B-500g
CM0173R – 2.5Kg
Medios de cultivo deshidratados (CM)
CM0173T – 5Kg

CM0173K – 25Kg

Tubo TV5001D

Universal BO0211G

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
33
 11.1 ISO 10272-1: 2006

Parte 1: Método de detección

especies de Campylobacter
El género Campylobacter forma parte de la familia Campylobacteraceae y es un organismo
microaerófilo, Gram negativo, oxidasa positivo, bacilos en forma de espiral con flagelos. Dos especies
clave dentro del género sonC. jejuniyC coli, ambos causantes de la mayoría de las enfermedades
diarreicas de las aves de corral.

ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO

AgregarXg a 9mL deCaldo Bolton

(CM0983 + SR0203/SR0183 + SR0048)

ENRIQUECIMIENTO

Incubar en una atmósfera microaeróbica

durante 4 a 6 horas a 37 °C y luego durante 44 horas ± 4 horas a 41,5 °C

AISLAMIENTO

Agar mCCD (CM0739 + SR0155)

+ 2º medio, si se prefiere:
Karmali (CM0935 + SR0167)
Skirrow (CM0331 + SR0069)
Mayordomo (CM0331 + SR0214)

Incubar en una atmósfera microaeróbica durante 44 h ± 4 h a 41,5 °C

Colonias características

CONFIRMACIÓN

Agar sangre Columbia (CM0331 + SR0051)

Incubar durante 24 a 48 horas a 41,5 °C

IDENTIFICACIÓN

Caldo Brucella Crecimiento a 25 °C, 41,5 °C (aeróbico)

s/s = fuerza simple d/s = (CM0337 MHA + SR0051)
Oxidasa (MB0266A)
fuerza doble XmL =
tamaño de muestra Xg = 34
tamaño de muestra
11.2ISO 10272-2:2006

Parte 2: técnica de recuento de colonias

especies de Campylobacter
El género Campylobacter forma parte de la familia Campylobacteraceae y es un organismo
microaerófilo, Gram negativo, oxidasa positivo, bacilos en forma de espiral con flagelos. Dos especies
clave dentro del género sonC. jejuniyC coli, ambos causantes de la mayoría de las enfermedades
diarreicas de las aves de corral.

AISLAMIENTO

mCCDA (CM0739 + SR0155)

Incubar en una atmósfera microaeróbica durante 40 a 48 horas a 41,5 °C

CONFIRMACIÓN
Subcultura a
Agar sangre Columbia (CM0331 + SR0051)

Incubar durante 24 a 48 horas a 41,5 °C

IDENTIFICACIÓN

Caldo Brucella Crecimiento a 25 °C, 41,5 °C (aeróbico)

Oxidasa (MB0266A)

35
Productos que cumplen con la ISO indicada para

especies de Campylobacter
11.1ISO 10272-1:2006
Descripción del Producto formato de producto Código de producto

Botella BO1070S – 10x225mL

Caldo Bolton CM0983B-500g

Medios de cultivo deshidratados (CM)
CM0983R-2,5g
Suplemento selectivo de caldo Bolton Frasco SR0183E

Suplemento selectivo de caldo Bolton modificado Frasco SR0203E

Sangre de caballo lisada Frasco SR0048C

CM0739B-500g
Base de agar mCCD Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0739R – 2.5Kg

CM0739T – 5Kg

SR0155E – 500ml
Suplemento selectivo mCCDA Frasco

SR0155H – 2L
PO0966E – Bi-placa

Agar mCCD Placa de Petri PO5091A

PO0119A

CM0337B-500g
CM0337R – 2.5Kg
Base de agar Muller Hinton Medios de cultivo deshidratados (CM)
CM0337T – 5Kg

CM0337K – 25Kg

Sangre de carnero desfibrinada Frasco SR0051C

PB0431A
Agar Muller Hinton + Sangre de carnero Placa de Petri
PB5007A

Botella BO0966M – 10x100mL

CM0331B-500g
Base de agar sangre Columbia CM0331R – 2.5Kg
Medios de cultivo deshidratados (CM)
CM0331T – 5Kg

CM0331K – 25Kg

PB5008A

Agar sangre Columbia + Sangre de carnero Placa de Petri PB5039A

PB0123A

Segundo medio de elección: ISO 10272-1:2006

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

Base mediana selectiva Karmali Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0935B-500g

Suplemento Selectivo Karmali Frasco SR0167E

Suplemento Selectivo Karmali (Modificado) Frasco SR0205E

PO5041A
Agar selectivo Karmali Placa de Petri
PO5219E – Biplaca

Botella BO0966M – 10x100mL

CM0331B-500g
Base de agar sangre Columbia CM0331R – 2.5Kg
Medios de cultivo deshidratados (CM)
CM0331T – 5Kg

CM0331K – 25Kg

Suplemento Selectivo Skirrow Frasco SR0069E

Agar Columbia - Skirrow Placa de Petri PB0118A

Suplemento Selectivo Butzler Frasco SR0214E

36
Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
Productos que cumplen con la ISO indicada para

especies de Campylobacter
11.2-3 ISO 10272-2:2006 (IncluyeBrillantezCampyCount como alternativa validada ISO 16140 a mCCDA)

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

CM0739B-500g
Base de agar mCCD Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0739R – 2.5Kg

CM0739T – 5Kg

SR0155E – 500ml
Suplemento selectivo mCCDA Frasco

SR0155H – 2L
PO0966E – Bi-placa

Agar mCCD Placa de Petri PO5091A

PO0119A

Sangre de carnero desfibrinada Frasco SR0051C

Botella BO0966M – 10x100mL

CM0331B-500g
Base de agar sangre Columbia CM0331R – 2.5Kg
Medios de cultivo deshidratados (CM)
CM0331T – 5Kg

CM0331K – 25Kg

PB5008A

Agar sangre Columbia + Sangre de carnero Placa de Petri PB5039A

PB0123A

11 Método alternativo

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

BrillantezAgar CampyCount Placa de Petri PO1185A

OBIS Campy Equipo ID0600M

11 Generación de gas—Todos los métodos anteriores

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

CN0025A – Jarra 2.5L

CampyGen Para condiciones de gas microaerofílico CN0035A – Jarra 3.5L

CN0020C – 1– 4 platos

AnaeroJar Tarro de capacidad de 2,5 l. AG0025A

Jarra anaeróbica Tarro de capacidad de 3,5 l. HP0011A

Hay disponible una amplia gama de estaciones de trabajo de generación de atmósfera que tienen incubación precisa, humedad y generación de gas para cultivos microaerófilos y anaeróbicos. Hable con su representante local sobre nuestra
gama de estaciones de trabajo Ruskinn para obtener más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
37
Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
BrillantezCampyCount

termo científico TMBrillantez CampyCount Agar—un medio selectivo cromogénico para

TM

la enumeración deC. jejuniyC colide aves de corral y muestras relacionadas.

OBSERVACIÓN SIMPLE
• Colonias de color rojo oscuro sobre un fondo claro
Protocolo para la enumeración de
CUANTITATIVO C. jejuniyC coliusando
• La selectividad novedosa permite la recuperación cuantitativa y BrillantezAgar CampyCount
precisa de los organismos objetivo

CÁLCULO PRECISO Día 0: Emplatado

• El medio transparente permite la enumeración en lectores de placas Diluir la muestra en

diluyente apropiado
FÁCIL IDENTIFICACIÓN

• Enjambre reducido de Campylobacter para mejorar el Más

aislamiento de colonias individuales Por duplicado, esparcido

0.1mL de apropiado
VALIDADO
dilución en 2xBrillantez
• ISO 16140 validado por MicroVal Placas de agar CampyCount

Incubar durante 48 h ± 1 h a 41,5 °C

Validación ISO 16140 en una atmósfera microaeróbica

BrillantezCampyCount Agar ha sido validado y aprobado por MicroVal según la

norma ISO 16140:2003 frente al método de referencia ISO 10272-2:2006 para
la enumeración selectiva de termotolerantes Campylobacterspp., en particular
C. jejuniyC coli, en productos avícolas. Para mayor flexibilidad, este estudio
Día 2: Resultados
incluyó tanto el kit OBIS Campy como las pruebas de látex DrySpot
Si está presente, seleccione al
Campylobacter como métodos de confirmación alternativos a los descritos en
menos 5 colonias de color rojo
el método de referencia ISO 10272-2: 2006. El certificado MicroVal está oscuro bien aisladas.
disponible en formato PDF en www.microval.org.

La sensibilidad se probó con un total de 81 cepas de Campylobacter

aisladas de aves de corral y entornos asociados, y la especificidad se probó
con 139 cepas no diana.

Medios de comunicación Especificidad (n=139) Sensibilidad (n=81)

mCCDA 91% 100%

BrillantezAgar CampyCount 99% 100% Confirmar

Confirmar usando OBIS

cursi

Alternativamente, confirme

colonias utilizando
métodos ISO estándar

38
 12ISO 21871:2006

Método horizontal para la enumeración de

presuntoBacillus cereus
Técnica del número más probable y métodos de detección

Organismo grampositivo esporulante que crece aeróbicamente. Aislada más comúnmente del arroz, los

cereales y la pasta, es bien conocida su capacidad para causar intoxicación alimentaria y estropear los

alimentos. la habilidad deBacillus cereusproducir dos toxinas separadas que causan vómitos o diarrea en

tiempos de incubación relativamente cortos es un descubrimiento más reciente y ha llevado a controles más

estrictos en torno a la detección en ciertos alimentos.

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

Xg en 9 mL de diluyente apropiado

1 ml de suspensión inicial en 3 tubos de TSPB de

10mL de suspensión inicial en 3 tubos
concentración simple o 1 ml de cada uno más
de doble fuerza
dilución en 3 tubos de una sola concentración
Caldo TSP (CM0129 + SR0099)
Caldo TSP (CM0129 + SR0099)
Incubar durante 48 h ± 4 h a 30 °C
Incubar durante 48 h ± 4 h a 30 °C

AISLAMIENTO

Agar PEMBAdurante 18–24 horas a 37° y

24 horas adicionales si es necesario
(CM0617 + SR0099 + SR0047)

O
Agar MYPa 30 °C durante 18–24 horas y
24 horas adicionales si es necesario
(CM0929 + SR0099 + SR0047)

Selección de 3 colonias sospechosas

CONFIRMACIÓN

Colonias aisladas dePEMBA:

• Prueba de hemólisis o examen microscópico

Colonias aisladas deMI P:

• Prueba de hemólisis
• Agar triptona soja

s/s = fuerza simple d/s =

fuerza doble XmL =
tamaño de muestra Xg = Calcular MPN 39
tamaño de muestra
Productos que cumplen con la ISO indicada para

presuntoBacillus cereus
Técnica del número más probable y métodos de detección
12ISO 21871:2006
Descripción del Producto formato de producto Código de producto

CM0129B-500g
CM0129R – 2.5Kg
Base de caldo TSP Medios de cultivo deshidratados (CM)
CM0129T – 5Kg

CM0129K – 25Kg

Botella BO1032J – 10x90mL

Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0929B-500g
Base de agar MYP
PO5133A
Placa de Petri
PO0711A

Suplemento de polimixina B Frasco SR0099E

Suplemento de yema de huevo Botella SR0047C – 100mL

CM0617B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0617R – 2.5Kg
Bacillus cereusAgar selectivo (PEMBA)
CM0617T – 5Kg

Placa de Petri PO5048A

Sangre de carnero desfibrinada Frasco SR0051C

BO0965Z – 10x450mL
Botella
Agar Sangre No. 2 + Sangre de Carnero BO0965M – 10x100mL

Placa de Petri PB0115A

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
40
 13ISO 7932:2004

Método horizontal para la enumeración de

presuntoBacillus cereus
Técnica de recuento de colonias a 30°C

Organismo grampositivo esporulante que crece aeróbicamente. Aislada más comúnmente del arroz, los

cereales y la pasta, es bien conocida su capacidad para causar intoxicación alimentaria y estropear los

alimentos. la habilidad deBacillus cereusproducir dos toxinas separadas que causan vómitos o diarrea en

tiempos de incubación relativamente cortos es un descubrimiento más reciente y ha llevado a controles más

estrictos en torno a la detección en ciertos alimentos.

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

Xg en 9mL de diluyente
según tipo de muestra

AISLAMIENTO

Inoculación superficial sobre Agar

MYP (CM0929 + SR0099 + SR0047)
(0,10 ml) a 2 placas o 1,0 ml a
3 placas (por duplicado)
Incubar durante 18 a 24 horas a 30 °C

(y 24 horas adicionales si las colonias no son claramente visibles) Vierta o

apuñale las colonias seleccionadas en agar sangre de carnero

CONFIRMACIÓN

Reacción de hemólisis usando

Agar sangre de carnero

Incubar durante 24 h ± 2 h a 30 °C

Positivo es presuntivo paraBacillus cereus

s/s = fuerza simple d/s =

fuerza doble XmL =
tamaño de muestra Xg =
tamaño de muestra 41
Productos que cumplen con la ISO indicada para

presuntoBacillus cereus
Técnica de recuento de colonias a 30°C

13ISO 7932:2004
Descripción del Producto formato de producto Código de producto

Base de agar MYP Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0929B-500g

Suplemento de polimixina B Frasco SR099E
Suplemento de yema de huevo Botella SR0047C – 100mL
Sangre de carnero desfibrinada Frasco SR0051C

BO0965Z – 10x450mL
Botella
Agar Sangre Base No. 2 + Sangre de Carnero BO0965M – 10x100mL

Placa de Petri PB0115A

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
42
14ISO 15214:1998

Método horizontal para la enumeración de

bacterias ácido lácticas mesófilas

Técnica de recuento de colonias a 30°C

Las bacterias del ácido láctico son Gram-positivas, tolerantes al ácido, bacilos o cocos que normalmente
producen ácido láctico como el principal producto metabólico final de la fermentación de carbohidratos.
La importancia industrial deLactobacillus, Leuconostoc, Pediococcus, Lactococcus, yEstreptococoLa
especie en la elaboración de cerveza, horneado y preparación de alimentos es bien conocida, pero su
presencia en otros alimentos puede causar deterioro, características o apariencia no deseadas y, en
algunos casos, intoxicación alimentaria leve.

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

Suspensión inicial

AISLAMIENTO

Agar MRS (ISO)

(CM1153)
Incubar durante 72 h ± 2 h a 35 °C o 37 °C

EXAMINAR PLACAS

Contar colonias típicas

43
Productos que cumplen con la ISO indicada para

bacterias ácido lácticas mesófilas

Técnica de recuento de colonias a 30°C

14ISO 15214:1998
Descripción del Producto formato de producto Código de producto

Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1153B-500g

Agar MRS (ISO)
Placa de Petri PO1228A

14 Generación de gas—Todos los métodos anteriores

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

CN0025A – Jarra 2.5L

CampyGen Para condiciones de gas microaerofílico CN0035A – Jarra 3.5L

CN0020C – 1– 4 platos

AnaeroJar Tarro de capacidad de 2,5 l. AG0025A

Jarra anaeróbica Tarro de capacidad de 3,5 l. HP0011A

Hay disponible una amplia gama de estaciones de trabajo de generación de atmósfera que tienen incubación precisa, humedad y generación de gas para cultivos microaerófilos y anaeróbicos. Hable con su representante local sobre nuestra
gama de estaciones de trabajo Ruskinn para obtener más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
44
Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
 15ISO 21567:2004

Método horizontal para la detección de

Especies de Shigela
Shigella está relacionada conE. colifenotípica y genéticamente parecen iguales. Todas las especies de
Shigella son patógenas para los humanos y causan disentería. La creciente conciencia de Shigella
como un patógeno transmitido por los alimentos ha llevado a muchos avances en la detección y una
mayor regulación en torno a la detección.

ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO

9Xg o 9XmL en caldo Shigella

+ 0,5 µg de novobiocina
Homogeneizar y ajustar a pH 7,0 ± 0,2

ENRIQUECIMIENTO

Incubar en una atmósfera anaeróbica durante 16 h ± 4 h a 41,5 °C

AISLAMIENTO

Agar MacConkey (CM0115)

Agar XLD (CM0469)
Agar entérico Hektoen (CM419)
Incubar durante 20 h ± 4 h a 37 °C ± 1 °C

Colonias características en agar nutritivo

Incubar durante 20 h ± 4 h a 37 °C ± 1 °C

CONFIRMACIÓN

Agar TSI (CM0277)

Agar UREA (CM0053)
Medio de descarboxilación de L-lisina

s/s = fuerza simple d/s =

fuerza doble XmL =
tamaño de muestra Xg = 45
tamaño de muestra
Productos que cumplen con la ISO indicada para

Especies de Shigela
15 ISO: 21567:2004
Descripción del Producto formato de producto Código de producto

CM0115B-500g
CM0115R – 2.5Kg
Medios de cultivo deshidratados (CM)
CM0115T – 5Kg
Agar MacConkey N°3
CM0115K – 25Kg

PO5002A
Placa de Petri
PO0495A

CM0469B-500g
Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0469R – 2.5Kg

Agar XLD CM0469T – 5Kg

PO0164A
Placa de Petri
PO5057A

CM0419B-500g
CM0419R – 2.5Kg
Medios de cultivo deshidratados (CM)
CM0419T – 5Kg
Agar entérico Hektoen
CM0419K – 25Kg

PO5100A
Placa de Petri
PO0142A

Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0277B-500g

Agar hierro azúcar triple (TSI)
Tubo TV5074D

Medios de cultivo deshidratados (CM) CM0053B-500g

Agar urea BO0337B – 24x3mL
Pendiente

EB0337B – 200x3mL

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
46
16ISO 21527-1:2008

Parte 1: Técnica de recuento de colonias en productos

con actividad de agua superior a 0,95

Levaduras y mohos
La levadura y el moho están muy extendidos en la naturaleza y crecen especialmente bien en ambientes

orgánicos. Las levaduras aparecen como células ovales individuales, separadas cuando maduran, mientras que los

mohos tienden a unirse para formar hifas largas y marcadas. Algunas levaduras y mohos pueden producir

metabolitos tóxicos conocidos como micotoxinas. La mayoría de las micotoxinas son resistentes a la destrucción

por el procesamiento o la cocción de los alimentos. Los tipos de alimentos particularmente propensos a la

infección por levaduras y moho incluyen granos, nueces, frijoles y frutas.

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

Preparar la dilución de la muestra

AISLAMIENTO

Agar DRBC (CM1148 + SR0078 o CM1149)

Incubar durante 5 días a 25°C ± 1°C y luego dejar
permanecer en la luz del día difusa durante 1−2 días

EXAMINAR PLACAS

Contar colonias típicas

47
16ISO 21527-2:2008

Parte 2: Técnica de recuento de colonias en productos

con actividad de agua menor o igual a 0.95
Levaduras y mohos
La levadura y el moho están muy extendidos en la naturaleza y crecen especialmente bien en ambientes

orgánicos. Las levaduras aparecen como células ovales individuales, separadas cuando maduran, mientras que los

mohos tienden a unirse para formar hifas largas y marcadas. Algunas levaduras y mohos pueden producir

metabolitos tóxicos conocidos como micotoxinas. La mayoría de las micotoxinas son resistentes a la destrucción

por el procesamiento o la cocción de los alimentos. Los tipos de alimentos particularmente propensos a la

infección por levaduras y moho incluyen granos, nueces, frijoles y frutas.

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

Preparar la dilución de la muestra

AISLAMIENTO

0,1 ml de muestra de prueba en Agar

DG18 (CM1150 + SR0078 o CM1151)
A una segunda placa transfiera 0,1 ml
de la primera dilución decimal en Agar
DG18 (CM1150 + SR0078 o CM1151)
Incubar durante 5 a 7 días a 25 °C ± 1 °C y luego dejar
permanecer en la luz del día difusa durante 1−2 días

EXAMINAR PLACAS

Contar colonias típicas

48
Productos que cumplen con la ISO indicada para

Levaduras y mohos
16.1ISO 21527-1:2008

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

Base de agar DRBC (ISO) Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1148B-500g

SR0078E
Suplemento de cloranfenicol Frasco

SR0078H

Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1149B-500g

Agar DRBC (ISO) presuplementado
Placa de Petri PO1227A

16.2ISO 21527-2:2008

Descripción del Producto formato de producto Código de producto

Base de agar DG18 (ISO) Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1150B-500g

SR0078E
Suplemento de cloranfenicol Frasco

SR0078H

Agar DG18 (ISO) presuplementado Medios de cultivo deshidratados (CM) CM1151B-500g

Hay disponible una amplia gama de incubadoras microbiológicas para proporcionar una solución de alta capacidad, flujo de aire y huella mínima para sus necesidades de pruebas ISO. Hable con su representante local acerca de las incubadoras Heratherm para obtener
más información o consulte el catálogo de microbiología de Thermo Scientific.
49
Precauciones

Conformidad de formulación estándar ISO

Los productos Thermo Scientific presentados en este folleto cumplen con la

formulación estándar ISO establecida en su sección de organismos correspondiente.

Productos No Incluidos
La gama de productos Thermo Scientific puede incluir medios de cultivo deshidratados o preparados
con el mismo nombre o un nombre similar al de los medios descritos en una norma ISO, pero estos
productos no aparecen en este folleto porque no se ajustan a la formulación establecida en la norma
ISO. estándar.

'Especiales'

Algunos productos enumerados en este folleto se clasifican como formulaciones o formatos "especiales" y no se

mantienen en stock, por lo que pueden estar sujetos a plazos de entrega prolongados para realizar pedidos.

Productos auxiliares

La gama de productos Thermo Scientific contiene muchos productos que brindan soluciones
para el cultivo, la incubación y la refrigeración anaeróbicos o microaerófilos que se pueden usar
junto con la oferta de medios de cultivo. En su caso, estos productos se han identificado debajo
de la oferta de medios de cultivo. La ISO no recomienda estos productos, pero se pueden usar
junto con los medios de cultivo para completar la metodología de prueba.

Productos alternativos

En algunas secciones de este folleto hay productos o métodos que se han agregado como
alternativas validadas al método mencionado. Estas alternativas han sido validadas por NF
Validation u otro organismo de validación utilizando la norma ISO 16140 contra el método
indicado, y han obtenido la certificación AFNOR o MicroVal.

Diagramas de flujo ISO

Los diagramas de flujo ISO utilizados en este folleto se han simplificado para facilitar la identificación de los
productos disponibles. Para seguir el protocolo de prueba ISO y ver la descripción completa del flujo, consulte
el documento estándar ISO especificado.

50
thermoscientific.com/microbiología

© 2013 Thermo Fisher Scientific Inc. Todos los derechos reservados. Todas las marcas comerciales son propiedad de Thermo Fisher Scientific Inc. y sus subsidiarias.

Información del contacto:

Internacional EE.UU

+ 44 (0) 1256 841144 + 1 800 225 6730

oxoid.info@thermofisher.com csemail@thermofisher.com

993-110
Junio del 2013