REVISTA: ELSEVIER

APOPTOSIS E INDUCCIÓN DE
ESTRES CELULAR EN LEUCOCITOS
HUMANOS POR RAYOS X
JENNIFER ORTIZ LETECHIPIA A, CONSUELO LETECHIPÍA DE
LEÓN A, HECTOR RENE VEGA-CARRILLO A, DAVID ALEJANDRO
GARCÍA LÓPEZ B, SERGIO HUGO SÁNCHEZ RODRÍGUEZ

2023

SARA MARÍA QUINTERO

01 OBJETIVOS
02 INTRODUCCIÓN
03 METODOLOGÍA
04 RESULTADOS
05 DISCUSIÓN
06 CONCLUSIONES
07 REFERENCIAS.
OBJETIVO PRINCIPAL
Evaluar la viabilidad celular, la
expresión de la proteína Hsp70, el gen p53, la
caspasa 8 y caspasa 3, y los cambios morfológicos
relacionados con la apoptosis en leucocitos
humanos expuestos a rayos X de equipos dentales.
 INTRODUCCIÓN

Montaje experimental con equipo de rayos X para uso

Apoptosis en leucositos. Imagen tomada de:
odontológico. (usado en este estudio)
https://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-
2008/myl089-10b.pdf
MATERIALES Y MÉTODOS
 MODELO DE ESTUDIO Y OBTENCION DE MUESTRAS

Se selecciónaron 4 Se les realizó un

donantes, rago de chequeo general
edad entre 19 y 24 antes de obtener
años la muestra de
10ml de sangre
venosa preiférica.

Sin antecedentes
medicos Exposición a rayos X
45min despues...
(radioterapia,
tabaco...).
RECOLECCIÓN DE LEUCOSITOS Y EVALUACIÓN DE VIAVILIDAD

Se sometieron las muestas a Ficoll

Histopaque(centrifugación).

Tubos de Eppendorf 500 μL

promedio 100.000 celulas en
cada una (camara de Neubauer)

Conteo de celulas
Determinación porcentaje de celulas
vivas y muertas

Determinación de dosis absorbida y Cálculo de la dosis absorbida

 EVALUACIÓN MORFOLÓGICA DE LEUCOSITOS EXPUESTOS A
RAYOS X

Apoptosis en leucositos. Tomada de:https://bit.ly/3mlRY8n

Se realizó frotis de sangre en

porta objetos
Conteo de 100 células
Observación en 10 campos con
Uso de tinción Wrigth
objetivo de inmersión
 LISIS CELULAR

Productos de centrifugación. Tomada de:https://bit.ly/3kEAqnz

Cada muestra se lavó y El lisado se centrifugó 10 min a

Se añadio el inhibidor PMSF
homogenizó 10,976g para obtener las
proteinas

Cuantificación de proteinas, Western Blot e inmuno detección

RESULTADOS
CONTROL: Células no tratadas; DOSIS 1: 2.28 ± 0.05 mGy; DOSIS 2: 4.56 ± 0.09
mGy ; DOSIS 3: 9.12 ± 0.18 mGy; DOSIS 4: 13.69 ± 0.27 mGy
CONTROL: Células no tratadas; DOSIS 1: 2.28 ± 0.05 mGy; DOSIS 2: 4.56 ± 0.09
mGy ; DOSIS 3: 9.12 ± 0.18 mGy; DOSIS 4: 13.69 ± 0.27 mGy
DISCUSIÓN
 CAMBIOS
CELULARES DE UN
PROCESO
APOPTÓTICO
Condensación nuclear
Formación de vacuolas
Degradación de la membrana
celular y nuclear
Apoptosis. Tomada de:http://bit.ly/41EOe1W
Aparición de cuerpos
apoptóticos (condenzación de la
cromatina).
Imágenes morfológicas obtenidas por tinción de
Wright
Los Rayos x:
Inducen estres en las células leucocitarias
Generan daño en el ADN

Adicionalmente
El aumento de la muerte celular observado se debe
a un proceso apoptotico
Respuesta celular desde la primera dosis
Debe prestarse mas atencion al uso de rayos x en
procedimientos dentales
CONCLUSIÓN
Esta investigación demostró que dosis bajas de rayos X
procedentes de equipos dentales disminuyen la viabilidad de
las células y aumentan los indicadores de estrés y la muerte
celular por apoptosis.

Esto podría representar un riesgo en otros tipos de tejidos

que tienen una renovación más lenta y que podrían acumular
algún daño evitado por los mecanismos de reparación de las
propias células.
REFERENCIAS
Apoptosis and cellular stress induction in human leukocytes by dental X-rays. Radiation
Physics and Chemistry, 204, 110650.
https://doi.org/10.1016/j.radphyschem.2022.110650

NIH. (2011, febrero 2). Definición de gen p53—Diccionario de cáncer del NCI - NCI
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https://www.cancer.gov/espanol/publicaciones/diccionarios/diccionario-
cancer/def/gen-p53

Sosa, R. D. (2012). APOPTOSIS. https://docplayer.es/24203881-Apoptosis-autores-

sosa-ricardo-daniel-profesor-catedra-de-oncologia-facultad-de-medicina-unne-
catedra-de-bioquimica-facultad-de-medicina-unne.html