Resumen:Las pruebas de ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, por sus siglas en

inglés) se utilizan para analizar los niveles de TSH (hormona estimulante de la tiroides) y
para evaluar el perfil tiroideo en pacientes. Estas pruebas son ampliamente utilizadas en el
diagnóstico y monitoreo de enfermedades tiroideas.

El ELISA se basa en la detección de la interacción entre anticuerpos y antígenos específicos

presentes en la muestra de sangre del paciente. En el caso de las pruebas de TSH, se utilizan
anticuerpos que se unen a esta hormona. Cuando la muestra de sangre del paciente se agrega
a la placa de ELISA, los anticuerpos se unen a la TSH presente en la muestra. Luego, se
agrega una enzima que genera una reacción química para producir un cambio de color
detectable. La intensidad del cambio de color está relacionada con la cantidad de TSH
presente en la muestra, lo que permite determinar su nivel en el organismo.

Las pruebas de ELISA para el análisis de TSH y el perfil tiroideo son rápidas, precisas y
ampliamente utilizadas en entornos clínicos. Estas pruebas proporcionan información valiosa
sobre el funcionamiento de la tiroides, lo que ayuda en el diagnóstico de enfermedades
tiroideas, como el hipotiroidismo o el hipertiroidismo. Además, el monitoreo regular de los
niveles de TSH y otros parámetros tiroideos mediante estas pruebas permite evaluar la
eficacia de los tratamientos y realizar ajustes necesarios en la medicación.

Palabras Clave: ELISA, TSH, anticuerpos, antígenos.

Introducción: unirse específicamente a un antígeno.
La medición de la Hormona En este caso, se utilizan anticuerpos
Estimulante de Tiroides (TSH) es una específicos para TSH. El ensayo se
herramienta importante en el lleva a cabo en una placa de
diagnóstico y seguimiento de microtitulación, donde se recubren las
enfermedades tiroideas. El perfil cavidades con un anticuerpo anti-TSH.
tiroideo, que incluye la medición de Luego, se agrega la muestra de suero o
TSH, T4 y T3, proporciona información plasma del paciente, que contiene TSH,
crucial sobre el funcionamiento de la y la TSH presente se une a los
glándula tiroides. El método utilizado anticuerpos recubiertos en la placa.
comúnmente para medir TSH es el A continuación, se añade un segundo
ensayo inmunoenzimático (ELISA) de anticuerpo específico para TSH, al cual
tipo sándwich, que se basa en los se le ha unido una enzima. Este
principios de detección de segundo anticuerpo reconoce y se une a
antígeno-anticuerpo.(Ana, Isabel, & otra región del antígeno TSH, formando
Cristina, 2020) así un "sándwich" de
El fundamento del ensayo ELISA de anticuerpo-antígeno-anticuerpo en la
tipo sándwich se basa en la capacidad placa. Después de un tiempo de
de los anticuerpos para reconocer y
 incubación, se realiza un lavado para
eliminar cualquier material no unido
La enzima unida al segundo anticuerpo
es una enzima de detección, que
produce una señal medible cuando se
agrega el sustrato adecuado. Esto puede
ser un cambio de color, una emisión de
luz u otra forma de detección,
dependiendo de la enzima utilizada. La
intensidad de la señal generada es
proporcional a la cantidad de TSH
presente en la muestra original. Resultados:
Finalmente, se mide la señal generada
en un lector de microplacas y se
compara con una curva de calibración
que se ha construido utilizando
muestras de referencia con
concentraciones conocidas de TSH.
Esto permite determinar con precisión
la concentración de TSH en la muestra
del paciente.(Garcia et al., 2014)

Material y Métodos:
Tabla 1. Resultados de absorbancia de todos los controles incluyendo las dos muestras
problema
De acuerdo a la ecuación de Lambert Beer podemos calcular la concentración de cada
muestra problema, tan solo con despejar x de la ecuación, dándonos como resultado:
Muestra 1: 2.4586 ug/dl
Muestra 2: 3.9883 ug/dl
Discusión:
Los resultados obtenidos por nuestro
equipo fueron satisfactorios, ya que al
agregar la solución de frenado (HCl)
notamos un cambio en la coloración
(imagen 1), pasando de color azul a
amarillo intenso, una señal cualitativa de la
presencia de T4, resultado positivo al
tratarse del estandard 6, el cual al ser
comparado con las muestras de otros
compañeros concordaba en escala con la
intensidad del color (imagen 2).
Sin embargo, al medir la absorbancia de
todas las muestras incluyendo las
problemas, la prueba nos arroja algunos
datos extraños, que al ser graficados nos
da un R muy bajo (Gráfica 1) indicando
una mala fiabilidad de los resultados, pero
se pudo solucionar (Gráfica 2) al quitar los
estándares 2 y 6, mejorando consigo al
valor de R a casi 1. Con la fórmula de la
gráfica 2 nos basamos para hacer el
cálculo de la concentración de T4, en cada
una de las muestras problema, dándonos
resultados menores al rango normal que se
encuentra entre 5.0-13.0 ug/dl.
Conclusión
Se logró el objetivo principal que era la
determinación y cuantificación de T4, al
haber un cambio de coloración se
estableció que estaba correcto. Más
adelante se midió su absorbancia se
destacaron datos extraños y aunque nuestra
muestra estaba muy cerca de la principal
se vio afectada por dichos datos y por lo
tanto modificando la gráfica, así que se
decidió retirar los estándares 2 y 6,
mejorando consigo al valor de R a casi 1.
Bibliografía
● PI-E1030-ARIA Rev H - CTK
Biotech. (n.d.).
https://ctkbiotech.com/wp/wp-cont
ent/uploads/2017/01/PI-E1030-AR
IA-Rev-H.pdf
● Human diagnostics worldwide.
HUMAN Diagnostics Worldwide.
(n.d.).
https://www.human.de/es/producto
s/elisa/reactivos
● Ensayo de inmunoadsorción ligado
a enzima (ELISA). (2022).
Retrieved May 19, 2023,disponible
en:https://es.moleculardevices.com
/applications/enzyme-linked-immu
nosorbent-assay-elisa
● Mar, M., María, A., Borja Aso
Morán, Jacques Delbecque Peña,
Fernández, A., & Paloma Pascual
Pérez. (2014). La biotecnología en
sanidad animal. 190(768),
a154–a154. disponible en:
https://doi.org/10.3989/arbor.2014.
768n4008