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Leishmanias. Aspectos
diagnósticos de las leishmaniosis

 Leishmaniosis cutáneo, cutáneo-

mucosa, cutáneo-difusa y visceral.

 Taxonomía, Morfología y Ciclo

Evolutivo.

 Mecanismos Patogénicos, Patología

Universidad de Carabobo y Sintomatología.

Facultad de Ciencias de la Salud  Diagnóstico clínico y de laboratorio.

Escuela de Bioanálisis  Epidemiología, Tratamiento y

Profilaxis.
Asignatura Parasitología FACULTAD DE CIENCIAS
DE LA SALUD
ESCUELA DE
BIOANÁLISIS

 Caracteres morfológicos de

Noviembre 2021
flebótomos.
MSc. Diana Graterol

Leishmaniosis Clasificación Taxonómica

Enfermedades Reino: Protista

producidas por 1. Endémica en 88 países a nivel
protozoos del género mundial. Sub-reino: Protozoa
Leishmania que 2. Población en riesgo: 350
parasitan al sistema Phylum: Euglenozoa (motilidad por flagelos)
millones de personas.
fagocítico
mononuclear 3. Prevalencia mundial: 12-14 Clase: Kinetoplastea
(macrófago). millones de personas. Sub-clase: Metakinetoplastina
Orden: Trypanosomatida
Familia: Trypanosomatidae
 Parásitos Eurixenos Antropozoonosis Psychodidae

Género: Leishmania sp.

 Ciclo Heteroxeno Vector Biológico
(Hospedador intermediario) Leishmania sp.
Orden Diptera
3 4

Clasificación Taxonómica Subgénero Viannia

Género: Leishmania Complejo Leishmania braziliensis

Subgénero Viannia (V) L. braziliensis Leishmaniosis cutáneo mucosa

Complejo Leishmania braziliensis
L. guyanensis
L. panamensis Leishmaniosis cutánea
Subgénero Leishmania (L) L. peruviana
Complejo Leishmania mexicana
Complejo Leishmania donovani 1. Amastigotes (2 – 4 μm) y escasos en
lesiones.
Características:
2. Difícil crecimiento medios cultivo.
Clasificación en géneros, subgéneros, especies por hallazgos 3. Colonizan intestino anterior, medio y
clínicos, serológicos, epidemiológicos, geográficos, cultivos, posterior (hospedador invertebrado).
estudios ADN
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Subgénero Leishmania Subgénero Leishmania

Complejo Leishmania mexicana Complejo Leishmania donovani

L. mexicana L. donovani
Leishmaniosis cutáneo L. infantum Leishmaniosis visceral
L. pifanoi
difusa L. chagasi (Kala-azar)
L. amazonensis

1. Amastigotes (menor 2 μm).

L. gharnani Características: 2. Temperatura óptima 37º C.
Leishmaniosis cutánea
L. venezuelensis 3. Tropismo vísceras (hígado, bazo, médula
ósea).
1. Amastigotes (3-6 μm) y abundantes.
Características:  Bordes bien delimitados
2. Fácil crecimiento medios cultivo.
Característica  Hiperémicos
3. Colonizan intestino anterior y medio
de las Úlceras  Fondo granuloso
(hospedador invertebrado).
 Material necrótico de aspecto limpio
 NO DOLOROSA
7 8

Clasificación Taxonómica Morfología Leishmania

Extremidad
Leishmaniosis cutáneas Viejo Mundo anterior

- Aspecto fusiforme
Flagelo Kinetoplasto

Predominan en Asia, África y Europa. - Localización extracelular (Vector)

- 14 - 20 x 1.4 - 4 μm
Leishmania tropica
Núcleo - Kinetoplasto en barra (tercio
Leishmania major anterior)
Leishmania aethiopica - Flagelo libre (extremo anterior)
Extremidad
posterior - Multiplicación asexual (división
binaria).
Promastigote
9 10

Morfología Leishmania Morfología Leishmania

- Forma ovoide o fusiforme

Promastigote
- Localización intracelular
Kinetoplasto
(Hospedador vertebrado)

- 2 - 6 x 1.5 - 3 μm

- Ausencia flagelo libre

Núcleo - Kinetoplasto en barra

(porción central) Amastigote

Amastigote - Multiplicación asexual

(división binaria).

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2
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Morfología Leishmania Ciclo Evolutivo Leishmania sp.

Multiplicación Inoculación promastigotes Fagocitosis

promastigotes y por el insecto vector promastigotes
migración a la
probóscide

Transformación
intracelular de promastigote
en amastigote

Amastigotes en el interior de una célula fagocítica Diferenciación promastigotes

Multiplicación intracelular
amastigotes
Promastigotes en cultivo Lisis macrófagos y
liberación amastigotes
Ingestión macrófagos
axénico infectados con
amastigotes

13 14

Cuadros clínicos Leishmanias Inmunidad en la Leishmaniosis

Las células dendríticas probablemente juegan un papel fundamental en la
 Leishmaniosis cutánea presentación de antígenos de Leishmania y el inicio de una respuesta inmunológica
específica que determinará las consecuencias de la infección cutánea inicial

 Leishmaniosis cutáneo mucosa

Producción de
Interferón Activación de
Tipo Th1 Linfocitos CD4+ Macrófagos
Gamma
 Leishmaniosis cutáneo difusa

 Leishmaniosis visceral Inhibición del

desarrollo de
Síntesis de Producción de una respuesta
Tipo Th2 Anticuerpos Interleuquina 10 eficaz de
activación
macrofágica
Especie involucrada – Condiciones del
paciente – Constitución genética Si no hay respuesta inmunológica Th1 vigorosa, los macrófagos infectados son
15
diseminados por todo el cuerpo. 16

Mecanismos Patogénicos Patogenia Leishmaniosis cutánea

 Invasión de células del S.F.M. 1. Ingestión promastigotes células macrofágicas piel

(histiocitos).
2. Evasión digestión lisosomal Diferenciación
 Destrucción celular
amastigotes.
3. Multiplicación intracelular amastigotes.
 Alteración funcionalismo del tejido 4. Lisis del macrófago y liberación amastigotes al
espacio extracelular.
5. Hiperplasia histiocitaria.
6. Lesiones mecánicas (obstrucción, compresión).
7. Zonas afectadas: brazos, piernas, cabeza.
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3
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Patología Leishmaniosis cutánea Formas clínicas Leishmaniosis cutánea

Período incubación: 2 – 3 meses. 1. Leishmaniosis cutánea no ulcerada:

Síntomas: úlceras (indoloras, bordes definidos, salientes,
hiperémicos, fondo granuloso y limpio, sin formación de
costras.
Lesiones: únicas, persistentes.
- Papular: inicial, sitio picada insecto.
- Impetiginosa: lesiones vesículo-pustulosas generalmente recubiertas
de costras.
- Nodular o subcutánea.
- Tuberosa o lupoide: como respuesta exagerada a los antígenos
parasitarios.
- Vegetante: aspecto verrugoso o frambuesoide.

Tuberosa o Impetiginosa
lupoide Vegetante
19 20

Formas clínicas Leishmaniosis cutánea Patogenia Leishmaniosis cutáneo mucosa

2. Leishmaniosis cutáneas ulceradas:

1. Se inicia similar a la leishmaniosis cutánea.
- Ectimoide: superficiales, abarcan epidermis y dermis.
- Ulcerosas francas: profundas, bordes salientes. 2. Diseminación por vía linfática o hematógena hacia la
- Ulcero vegetantes. nariz, boca, faringe.
3. Ingestión amastigotes por células fagocíticas
(principalmente reticulocitos).
4. Se produce destrucción tabique o septo nasal.
5. Alteración procesos fonación y deglución.

Ectimoide Ulcerosa franca

21 22

Patogenia Leishmaniosis cutáneo mucosa Patogenia Leishmaniosis visceral

1.- Destrucción tabique o septo nasal 1. Lesión inicial constituida por una pápula
eritematosa.
Caída punta nariz
2. Diseminación vía hematógena hacia órganos ricos
Endurecimiento y deterioro en células del sistema mononuclear fagocitario.
piel alrededor nariz
3. No suele producir lesiones cutáneas.
Aspecto “nariz de tapir”

2.- Extensión lesiones a los labios (superior, La condición de inmunosupresión del paciente lo hace
inferior), paladar y paredes del esófago. susceptible a complicaciones por infecciones secundarias
23 24

4
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Patología Leishmaniosis visceral Formas clínicas Leishmaniosis visceral

1. Bazo: esplenomegalia, aumento espesor capa Malpighi, 1. Forma asintomática o latente: ausencia síntomas, reacción
hiperesplenismo. Montenegro positiva.
2. Hígado: hepatomegalia, aumento volumen células Von Kuppfer, 2. Forma aguda: evolución rápida y fatal (20-45 días). Inversión
fibrosis, hipertensión portal, disminución protombina, disminución
albúmina, aumento gamma globulinas. relación albúmina/globulina, trombocitopenia, reacción
Montenegro (-). Muerte causada por septicemia y hemorragias.
3. Riñón: síndrome nefrótico.
3. Forma subaguda: 5 meses – 1 año.
4. Médula ósea: anemia, trombocitopenia, neutropenia.
4. Forma crónica: dura varios años. Más frecuente.
Período incubación: 2 – 4 meses.
5. Leishmaniosis dérmica post kala-azar: aparición lesiones
Síntomas: fiebre (40 – 42 ºC), esplenomegalia,
hepatomegalia, lesiones renales, hemorragias, edema. cutáneas semanas o años posterior al tratamiento. Producida por
L. donovani.
25 26

Diagnóstico Leishmaniosis cutánea,

Características clínicas de las Leishmaniosis
cutáneo-mucosa y cutáneo-difusa

Zona de
 Clínico-epidemiológico:
Leishmaniosis Forma Manifestaciones clínicas
Afección Residencia o procedencia área endémica
 Lesiones generalmente individuales circunscritas al sitio
Localizada de inoculación Picada flebótomos
Piel  La lesión cutánea típica es la úlcera
Actividad laboral
Difusa  Lesiones nodulares diseminadas por todo el cuerpo
Cutánea Lesiones cutáneas
 Lesiones muco-cutáneas que afectan la región
nasofaríngea Lesiones deformantes mucosa
Muco-cutánea Mucosa
 Dificulta para respirar y deglutir
 Puede presentar disfonía, afonía e incluso asfixia
Diagnóstico diferencial: blastomicosis, sífilis, lepra.
Hígado
Bazo


Fiebre irregular prolongada
Esplenomegalia
 Laboratorio:
Ganglios  Anemia
 Pérdida de peso
- Métodos parasitológicos
Visceral Aguda
Afecta con menor  Nódulos subcutáneos - Métodos inmunológicos
Crónica
frecuencia:  Ulceraciones de la piel
Aparato Digestivo  Cambios de color de la piel
SNC  Cabello quebradizo
 Piel seca y escamosa de aspecto gris ceniciento

27 28

Diagnóstico Leishmaniosis cutánea, Diagnóstico Leishmaniosis cutánea,

cutáneo-mucosa y cutáneo-difusa cutáneo-mucosa y cutáneo-difusa

1. Métodos parasitológicos:  Biopsia cutánea

Biopsia cutánea
Frotis aposición
Cultivos axénicos

2. Métodos inmunológicos:
Reacción Intradérmica Montenegro
Inmunofluorescencia
ELISA
Biopsia de lesión no ulcerosa Corte de piel con macrófagos
con sacabocados parasitados

29 30

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Diagnóstico Leishmaniosis cutánea, Diagnóstico Leishmaniosis cutánea,

cutáneo-mucosa y cutáneo-difusa cutáneo-mucosa y cutáneo-difusa

 Biopsia cutánea  Biopsia cutánea

Puede estar contaminada con otros patógenos.
Puede estar contaminada con otros patógenos.
Pasos a realizar:
1. Limpieza de la zona (agua oxigenada, Furacin,
Pasos a realizar:
yodo, alcohol isopropílico).
1. Limpieza de la zona (agua oxigenada, Furacin,
2. Remover material costroso, tejidos necrotizados
yodo, alcohol isopropílico).
y pus.
2. Anestesiar la zona (Xylocaína 10%).
3. Tomar la muestra de los bordes de la lesión,
3. Obtener la muestra con bisturí.
debido a que allí existe mayor posibilidad de
4. Fijar las muestras.
encontrar los parásitos.
4. Fijar las muestras obtenidas. Leishmaniosis cutáneo-mucosa
Lesión ulcerosa

31 32

Diagnóstico Leishmaniosis cutánea, Diagnóstico Leishmaniosis cutánea,

cutáneo-mucosa y cutáneo-difusa cutáneo-mucosa y cutáneo-difusa

 Cultivos axénicos
1. Monofásicos: simulan el estómago del flebótomo
Eagle
Medio Esencial Mínimo + 20% SFB
RPMI 1640
Medio Schneider
Medio LITB
Crecimiento de
promastigotes
2. Bifásicos (contiene agar):
Presencia de amastigotes en el interior de Medio de Novy, NcNeall y Nicolle (NNN)
células macrofágicas en un frotis por aposición Agar Sangre USAMRU
Medio de Senekjie
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Diagnóstico Leishmaniosis cutánea,

cutáneo-mucosa y cutáneo-difusa
Leishmaniosis cutánea

 Reacción Intradérmica Montenegro (Prueba de la Leishmanina)

1. Prueba de hipersensibilidad retardada mediada por células del
sistema inmune.
2. Se inyecta 0,1 a 0,2 ml de cultivo de promastigotes de
Leishmania braziliensis en la cara anterior del antebrazo.
3. Revisión a las 24-48 horas. Positiva Pápula > 5 mm
4. Resultados:
Negativa (-): No hay ninguna reacción.
Débilmente + (dudosa): pápula palpable (1-4 mm) pero no
visible.
Positiva (++): pápula visible (> 5 mm) y rodeada de un área
eritematosa.
Positiva fuerte (+++): pápula sobresaliente (> 10 mm) y
rodeada de un halo muy grande de área eritematosa.
Positiva intensa (++++): aparición de necrosis en el área Leishmaniosis cutánea (lesiones secas)
inoculada. Agentes: L. braziliensis, L. guyanensis, L. panamensis,
Muy útil para diagnóstico de leishmaniosis cutánea L. peruviana, L. gharnani, L. venezuelensis
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Leishmaniosis cutáneo-mucosa Leishmaniosis cutáneo-mucosa

Leishmaniosis cutánea-mucosa Leishmaniosis cutánea-mucosa

(lesiones ulcerosas) (destrucción paladar y septo nasal)
Agente: L. braziliensis Agente: L. braziliensis

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Leishmaniosis cutáneo-difusa Leishmaniosis cutáneo-difusa

Leishmaniosis cutáneo-difusa
Agentes: L. mexicana, L. pifanoi,
L. amazonensis Leishmaniosis cutáneo-difusa
El parásito se difunde a través de la linfa Agentes: L. mexicana, L. pifanoi,
L. amazonensis
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Leishmaniosis visceral (Kala-azar) Diagnóstico Leishmaniosis visceral

 Clínico-epidemiológico:
Residencia o procedencia área endémica
Picada flebótomos
Tropismo por vísceras (hígado, bazo, médula Fiebre
ósea) Hepatomegalia
Esplenomegalia
Diagnóstico diferencial: malaria, Chagas, brucelosis.
Agentes: L. donovani, L. infantum,
 Laboratorio:
L. chagasi
- Métodos parasitológicos
- Métodos inmunológicos
- Métodos auxiliares

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Diagnóstico Leishmaniosis visceral Diagnóstico Leishmaniosis visceral

1. Métodos parasitológicos:
Punción vísceras (Hígado, bazo, médula ósea)
Láminas Giemsa
Cultivos axénicos
Búsqueda Sangre periférica

2. Métodos inmunológicos:
Reacción Intradérmica Montenegro (POCO ÚTIL)
Inmunofluorescencia
ELISA
Aglutinación Punción de médula ósea

3. Métodos auxiliares: inversión relación albúmina/globulina.

Reacción formol-gel
Punción de las vísceras
Reacción Brahmachari Punción de bazo
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Diagnóstico Leishmaniosis visceral Diagnóstico Leishmaniosis visceral

Punción médula ósea Sangre periférica

Amastigotes de Leishmania donovani en el interior de macrófagos

obtenidos a partir de punción de médula ósea

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Diagnóstico Leishmaniosis visceral Diagnóstico Leishmaniosis visceral

Métodos Inmunológicos Métodos Inmunológicos

 Prueba de aglutinación directa (DAT): ampliamente utilizado  Ensayo inmunoenzimático (ELISA): ampliamente utilizado y
y con una gran sensibilidad. con una gran sensibilidad.

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Diagnóstico Leishmaniosis visceral Diagnóstico Leishmaniosis visceral

Métodos Inmunológicos Se basan en una Métodos auxiliares

inversión de la
 Técnica inmunocromatográfica (tira reactiva): se basa en la relación albúmina-  Reacción formol-gel: Opacificación y coagulación
elaboración de tiras que contiene el péptido recombinante rK39 de globulina debido a la del suero, por inversión albúmina/globulina y presencia de
gran cantidad de IgG globulinas anómalas. Se añade una gota de formol al 30%
Leishmania donovani.
producida por el
paciente infectado. en un mL de suero y se lee a los 60 minutos.

49 50

Diagnóstico Leishmaniosis visceral Diagnóstico Leishmaniosis visceral

Métodos auxiliares Métodos auxiliares

 Reacción formol-gel:  Reacción Brahmachari: se deja caer lentamente por la pared de
un tubo que contiene 1 mL de suero 2 mL de agua destilada.
Formol (40%)
Reacción +: formación de un anillo.
- = Negativo, suero no alterado.
+ = Dudosa, coagulación sin opacificación.
++ = Positiva, coagulación y opacificación
discreta.
+++ = Positivo Fuerte, coagulación con
opacificación acentuada no total.

Son pruebas inespecíficas.

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Leishmaniosis dérmica postkala-azar Leishmaniosis dérmica postkala-azar

1. Aparición de lesiones cutáneas posterior

al tratamiento de leishmaniosis visceral.

2. Causada por Leishmania donovani.

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Diagnóstico Diagnóstico

Amastigotes de Leishmania sp.

Amastigotes de Leishmania sp.
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Diagnóstico Ecología Leishmaniosis

Leishmania braziliensis: leishmaniosis cutáneo- mucosa (Ulcera Bauru ó

espundia). Brasil, en especial Amazonas y áreas adyacentes países vecinos
(Venezuela, Colombia, Ecuador, Perú, Bolivia, Paraguay, Norte Argentina)
Venezuela: Zona montañosa (Costa, Andes, Llanos), Depresión
Yaracuy, Zonas boscosas Turén.

Leishmania guyanensis: leishmaniosis cutánea (pian-bois). Guayana.

Leishmania panamensis: leishmaniosis cutánea.

Panamá, Costa Rica, Venezuela, Colombia.

Leishmania peruviana: leishmaniosis cutánea (uta).

Cordillera Andina (Venezuela, Colombia, Ecuador, Perú, Bolivia).
Promastigotes de Leishmania sp.
500 – 3000 mts altitud.

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Ecología Leishmaniosis Epidemiología Leishmaniosis

Leishmania mexicana: leishmaniosis cutáneo difusa (úlcera de los 1. Reservorio o fuente infección: Antropozoonosis
chicleros). México, Guatemala, Belice. L. braziliensis: roedores, perro, caballos.
L. peruviana: perro.
Leishmania amazonensis: leishmaniosis cutáneo- mucosa. L. guyanensis: pereza, oso hormiguero.
Bahía amazónica Brasil. L. panamensis: pereza.
L. mexicana: roedores silvestres.
Leishmania pifanoi: leishmaniosis cutáneo-difusa.
Venezuela. L. amazonensis: roedores, rabipelados.
L. chagasi: perro, zorro, hombre. Leishmaniosis canina
Leishmania gharnani y Leishmania venezuelensis: leishmaniosis cutánea. L. infantum: perro, zorro, hombre.
Venezuela (Estado Lara).

Leishmania infantum Sur México al

Leishmania chagasi Norte Argentina

Leishmania donovani: India, Pakistán, Bangladesh, África Oriental

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Epidemiología Leishmaniosis Epidemiología Leishmaniosis

2. Mecanismo transmisión: Orden Diptera (1 par de alas membranosas)

Suborden Nematocera (Antenas largas)
Picada Vector Biológico Enfermedad Metaxénica Familia Psychodidae (Flebótomos)
Género Lutzomyia
Lutzomyia panamensis Lutzomyia longipalpis
Lutzomyia youngi Leishmaniosis cutánea, cutáneo- Flebótomos Lutzomyia panamensis
Lutzomyia gomezi mucosa, cutáneo-difusa. 1. Aspecto jorobado
Lutzomyia ovallesi 2. Antenas largas
3. Alas lanceoladas
Lutzomyia longipalpis: leishmaniosis visceral 4. Cubierto vellos

Phlebotomus (Asia, África, Europa)

3. Hospedador susceptible:
(Metamorfosis completa)
Hombre, animales silvestres y domésticos. Actividad crepuscular
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Epidemiología Leishmaniosis Tratamiento

 Antimoniales pentavalentes
Glucantime
Interfiere con el metabolismo del amastigote

Espermateca
 Antibióticos
Adulto de Lutzomyia sp.
Anfotericina B:
Alteración de la permeabilidad de la membrana
Hembra Lutzomyia sp.
Genitalia
Gonapófisis
superior
Lisis celular
Ge nitalia
(e je mplar macho)

 Vacuna (en estudio)

Gonapófisis
media

Gonapófisis
inferior Lamela
Macho Lutzomyia sp. 63 64

Profilaxis Bibliografía

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