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Este documento describe un método para determinar la actividad de la fosfatasa alcalina en fluidos corporales mediante una reacción enzimática. El p-nitrofenilfosfato se hidroliza en presencia de fosfatasa alcalina para formar p-nitrofenol, cuya absorbancia a 405 nm es proporcional a la actividad enzimática. El método utiliza una mezcla de reactivos que incluye un amortiguador y catalizador. Se proveen instrucciones detalladas sobre la preparación de la muestra y reactivos, y el procedimiento de
Este documento describe un método para determinar la actividad de la fosfatasa alcalina en fluidos corporales mediante una reacción enzimática. El p-nitrofenilfosfato se hidroliza en presencia de fosfatasa alcalina para formar p-nitrofenol, cuya absorbancia a 405 nm es proporcional a la actividad enzimática. El método utiliza una mezcla de reactivos que incluye un amortiguador y catalizador. Se proveen instrucciones detalladas sobre la preparación de la muestra y reactivos, y el procedimiento de
Este documento describe un método para determinar la actividad de la fosfatasa alcalina en fluidos corporales mediante una reacción enzimática. El p-nitrofenilfosfato se hidroliza en presencia de fosfatasa alcalina para formar p-nitrofenol, cuya absorbancia a 405 nm es proporcional a la actividad enzimática. El método utiliza una mezcla de reactivos que incluye un amortiguador y catalizador. Se proveen instrucciones detalladas sobre la preparación de la muestra y reactivos, y el procedimiento de
Determinación Optimizada de Fosfatasa Alcalina en fluidos corporales (Método DGKC )
Pipetear como sigue:
PRINCIPIO DE MEDICION: Mezcla Reactivo: Mezcle reactivo 1 (5 volumenes) con ALP p-Nitro-fenilfosfato + H20 p-Nitrofenolato reactivo 2 (1 volumen) incube a 37°C antes de usar. Estabilidad de la mezcla: a + 2° - + 8°C: 25 días, + Phosphate a +18° - +22°C: 5 días El p-Nitrofenol esta presente como p-Nitro-fenolato amarillo . El aumento de absorbancia por minuto leido a 405 nm es Mezcle bien: proporcional a la actividad enzimatica. CONCENTRACION EN SOLUCION DE TRABAJO: Mezcla reactivo 1000 µl Muestra 20 µl Amortiguador Y lea inmediatamente. Dietanolamina (pH=10.6) 0.6 mol/1 MgCl2 0.4 mmol/1 Catalizador Método: 43 (U/l), 44 (µkat/l) p-Nitrofenilfosfato 7 mmol/1 ALP DGKC
CONSERVACION Y ESTABILIDAD: Procedimiento en fotómetros Riele :
El reactivo sellado es estable hasta la fecha de caducidad indicada , RB: OFF almacenado en ambiente entre +2° - +8°C. Pantalla: MEDIR BLANCO → Oprima Cero Blanco reactivo: Aspire agua VALOR NORMAL: Pantalla: MEDIR MUESTRA ( en suero, Heparina plasma ) a 37 °C Aspire solucion muestra/mezcla reactiva U/l kat/1 Aplicación Niños: 180 - 1200 1.3 - 20 Programa: CP 11 (KIN/F/Rb) Adultos: Hombre 100 - 270 1.67 – 4.50 Dimensión (ver método) Mujer 100 – 240 1.67 – 4.00 F/S: 2757.0 (U/l) , MUESTRA: 45.95 (µkat/l) Suero, Heparina Plasma. El hemolizado interfiere. Filtro (2): 405 nm Estabilidad: 7 dias (4-8°C), 4 semanas (-20°C) Temp.: 37°C Actividad disminuida después de 7 dias: Volumen (15): 950 µl + 4°C: 0 % + 20°C-25°C: 10 % Retraso: 60 s Deltas: 15 LINEARIDAD: Tiempo/Delta: 6s 935 U/l (15.61 µkat/l) Muestras con concentración mayor, (37°C) repita la prueba Max: 935.0/15.61 diluida 1 + 9 con 0.9% NaCI. Multiplique el resultado por 10. LITERATURA: Thomas,L.:Labor u.Diagnostik,l.Aufl.,S.64, FACTOR DE CONVERSION: Med.Verlag,Marburg,(1978) U/l µkat/l Factor: 0.0167 Weishaar,D.,Grossrau,E. u.Faderl,B.: Mediz.Welt 26, 5.387- µkat/l U/l Factor: 60 390,(1975)
CONTROL DE CALIDAD: PRESENTACIONES TIPICAS:
Todo suero control con valores de FOSFATASA ALCALINA determinados por este método puede ser usado. TAMAÑO DEL KIT ORDENAR NO 2 x 60 ml manual AF02000060 1 x 120 ml manual AF02R05060 4 x 120 ml manual AF02000120 OTRAS manual SIN NUMERO DISPONIBLES