Fosfatasa Alcalina FS*

DGKC
Reactivo para la determinación cuantitativa In Vitro de la fosfatasa alcalina (ALP) en suero o plasma en
equipos fotométricos

Información de Pedido Advertencias y Precauciones

Nº de pedido Tamaño del envase 1. Reactivo 1: Peligro. H315 Provoca irritación cutánea. H318
1 0401 99 10 021 R1 5x 20 mL + R2 1x 25 mL Provoca lesiones oculares graves. H373 Puede provocar
1 0401 99 10 026 R1 5x 80 mL + R2 1x 100 mL daños en los órganos tras exposiciones prolongadas o
1 0401 99 10 023 R1 1x 800 mL + R2 1x 200 mL
1 0401 99 10 704 R1 8x 50 mL + R2 8x 12,5 mL
repetidas. P260 No respirar los vapores. P264 Lavarse
1 0401 99 10 930 R1 4x 20 mL + R2 2x 10 mL concienzudamente tras la manipulación. P280 Llevar
1 0401 99 90 314 R1 10 x 20 mL + R2 2x 30 mL guantes/prendas/gafas/máscara de protección. P302+P352
En caso de contacto con la piel: Lavar con agua y jabón
Resumen [1,2] abundantes. P337+P313 Si persiste la irritación ocular:
La fosfatasa alcalina (ALP), una enzima hidrolítica que actúa Consultar a un médico. P312 Llamar a un centro de
óptimamente en pH alcalino, existe en la sangre en numerosas información toxicológica o a un médico en caso de malestar.
formas distintas las cuales se originan principalmente del hueso y 2. El reactivo 2 contiene ácida sódica (0,95 g/L) como
el hígado, pero también de otros tejidos como el riñón, placenta, conservante. ¡No ingerir! Evitar el contacto con la piel y las
testículos, timo, pulmones y tumores. Se encuentran incrementos membranas mucosas.
fisiológicos durante el crecimiento óseo en la niñez y el embarazo, 3. Durante la reacción es producido p-nitrofenol el cual es
mientras los incrementos patológicos están altamente asociados venenoso cuando se inhala, ingiere o absorbe a través de
con las enfermedades óseas y hepatobiliares. En la enfermedad la piel. Si la mezcla de reacción entre en contacto con la piel
hepatobiliar ellos indican la obstrucción de los conductos biliares o membranas mucosas se debe lavar copiosamente con agua.
como en la colestasia causada por cálculos biliares, tumores o 4. Excepcionalmente pueden obtenerse valores erróneos en
inflamación. También se observan elevadas actividades en la muestras de pacientes con gammapatías [7].
hepatitis infecciosa. En las enfermedades óseas las elevadas 5. Consultar las fichas de seguridad de los reactivos y observar
actividades de ALP son originadas por una actividad osteoblástica las precauciones necesarias para el uso de reactivos de
incrementada como en la enfermedad de Paget, osteomalacia laboratorio. Para un correcto diagnóstico, se recomienda
(raquitismo), metástasis ósea e hiperparatiroidismo. evaluar los resultados según la historia médica del paciente,
los exámenes clínicos así como los resultados obtenidos con
Método otros parámetros.
Test cinético fotométrico, método estándar optimizado de acuerdo 6. ¡Únicamente para el empleo profesional!
a la Sociedad Alemana de Química Clínica (DGKC)
Preparación del Reactivo
Principio Inicio con sustrato
p-Nitrofenilfosfato + H2O ALP > Fosfato + p–Nitrofenol Los reactivos son listos para usar.
Inicio con muestra
Reactivos
Mezclar 4 partes de R1 + 1 parte de R2
Componentes y Concentraciones (p. ej. 20 mL R1 + 5 mL R2) = mono reactivo
R1: Dietanolamina pH 9,8 1,2 mol/L Estabilidad: 4 semanas de 2 a 8 °C
Cloruro de Magnesio 0,6 mmol/L 5 días de 15 a 25 °C
R2: p-Nitrofenilfosfato 50 mmol/L ¡El mono reactivo debe ser protegido de la luz!

Instrucciones de Almacenamiento y Estabilidad del Reactivo Tipo de muestra

Los reactivos son estables hasta el final del mes indicado como Suero o plasma heparinizado
fecha de expiración, si es almacenado entre 2 y 8 °C, y si se evita Estabilidad [4]: 7 días de 20 a 25 °C
la contaminación. ¡No congelar los reactivos! ¡Proteger los 7 días de 4 a 8 °C
reactivos de la luz! 2 meses a –20 °C
Manipulación de Desechos ¡Congelar sólo una vez!
¡Desechar las muestras contaminadas!
Por favor remítase a los requerimientos legales locales.
Material requerido y no suministrado Procedimiento del Ensayo
Solución de NaCl 9 g/L Hay disponibles a petición aplicaciones para sistemas
Equipo general de laboratorio automáticos.
Longitud de onda Hg 405 nm, (400 – 420 nm)
Paso óptico 1 cm
Temperatura 25 °C/30 °C/37 °C
Medición Contra el aire

Fosfatasa Alcalina FS DGKC – Página 1 *Fluid Stable = líquido estable

Inicio con sustrato Precisión (a 25 °C)
Muestra/Calibrador 20 µL En la serie Valor medio DE CV
Reactivo 1 1000 µL n = 20 [U/L] [U/L] [%]
Mezclar, incubar durante aprox. 1 min., luego añadir: Muestra 1 114 1,71 1,50
Reactivo 2 250 µL Muestra 2 222 2,05 0,92
Mezclar, leer la absorbancia después de 1 min. y empezar a Muestra 3 275 2,91 1,06
cronometrar. Leer nuevamente la absorbancia después de 1, 2
y 3 min. De un día a otro Valor medio DE CV
n = 20 [U/L] [U/L] [%]
Inicio con muestra
Muestra 1 120 1,93 1,60
Muestra/Calibrador 20 µL Muestra 2 223 1,89 0,85
Mono reactivo 1000 µL Muestra 3 279 2,36 0,85
Mezclar, leer la absorbancia después de 1 min. y empezar a
cronometrar. Leer nuevamente la absorbancia después de 1, 2 Comparación de métodos
y 3 min. Una comparación de Fosfatasa Alcalina FS (DGKC) de DiaSys (y)
con un test comercialmente disponible (x) utilizando 78 muestras
Cálculo dio los siguientes resultados:
y = 0,98 x – 2,21 U/L; r = 0,999
Con factor
De las lecturas de absorbancia calcular ∆A/min. y multiplicar por el Rango de Referencia [6]
factor correspondiente de la tabla de más abajo: 25 °C 30 °C 37 °C
Niños
∆A/min. x factor = ALP actividad [U/L]
1 – 12 años [U/L] < 480 < 596 < 727
Inicio con sustrato 405 nm 3433 [µkat/L] < 8,00 < 9,93 < 12,1
Inicio con muestra 405 nm 2757 13 - 17
femenino [U/L] < 296 < 367 < 448
años
Con calibrador
[µkat/L] < 4,93 < 6,12 < 7,47
masculino [U/L] < 617 < 767 < 935
∆A / min Muestra
ALP [U / L] = x Conc. Calibrador [U / L] [µkat/L] < 10,3 < 12,8 < 15,6
∆A / min Calibrador Adultos [U/L] < 170 < 211 < 258
[µkat/L] < 2,83 < 3,52 < 4,30
Factor de conversión
ALP [U/L] x 0,0167 = ALP [µkat/L] Cada laboratorio debe comprobar si los valores de referencia
indicados son adecuados para sus pacientes y si es necesario,
Calibradores y Controles determinar sus propios valores de referencia.
Para la calibración de sistemas fotométricos automatizados se
Bibliografía
recomienda utilizar el calibrador DiaSys TruCal U. Este método es st
trazable al coeficiente de absorbancia molar. Para el control interno 1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1 ed. Frankfurt:
de calidad deben utilizarse los controles DiaSys TruLab N y P. TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998. p. 36-46.
Cada laboratorio debería establecer medidas correctoras en caso 2. Moss DW, Henderson R. Clinical enzymology. In: Burtis CA,
rd
de obtener valores fuera del intervalo preestablecido. Ashwood ER. eds. Tietz textbook of clinical chemistry. 3 ed.
Philadelphia: W. B. Saunders Company, 1999. p. 617-721.
Nº de pedido Presentación 3. Deutsche Gesellschaft für klinische Chemie. Empfehlungen
TruCal U 5 9100 99 10 063 20 x 3 mL
5 9100 99 10 064 6 x 3 mL
der deutschen Gesellschaft für Klinische Chemie (DGKC).
TruLab N 5 9000 99 10 062 20 x 5 mL Standardisierung von Methoden zur Bestimmung von
5 9000 99 10 061 6 x 5 mL Enzymaktivitäten in biologischen Flüssigkeiten.(Recommen-
TruLab P 5 9050 99 10 062 20 x 5 mL dation of the German Society of Clinical Chemistry.
5 9050 99 10 061 6 x 5 mL Standardization of methods for measurement of enzymatic
activities in biological fluids.) Z Klin Chem Klin Biochem 1972;
Características 10: 182-92.
4. Guder WG, Zawta B et al. The Quality of Diagnostic Samples.
Rango de medida st
1 ed. Darmstadt: GIT Verlag; 2001; p. 14-5.
En equipos automatizados, el test sirve para determinar actividades 5. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 5th
de la fosfatasa alcalina hasta 4500 U/L. ed. Volume 1 and 2. Washington, DC: The American
En caso de un procedimiento manual, el test es apropiado para Association for Clinical Chemistry Press 2000.
mesurar actividades de la fosfatasa alcalina que correspondan a un 6. Fischbach F, Zawta B. Age-dependent reference limits of
máximo de ∆A/min. de 0,25. several enzymes in plasma at different measuring
Si tal valor es excedido la muestra debe ser diluida 1 + 9 con temperatures. Klin Lab 1992; 38: 555-61.
solución de NaCl (9 g/L) y los resultados multiplicados por 10. 7. Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical
Especificidad/Interferencias chemistry assays: mechanisms, detection and prevention.
No aparece ninguna interferencia con el ácido ascórbico hasta ClinChemLabMed 2007;45(9):1240-1243.
30 mg/dL, bilirrubina hasta 40 mg/dL, hemoglobina hasta Fabricante
150 mg/dL y lipemia hasta 2000 mg/dL de triglicéridos. Para más
información sobre interferencias, véase Young DS [5]. DiaSys Diagnostic Systems GmbH
IVD Alte Strasse 9 65558 Holzheim Alemania
Sensibilidad/Límite de Prueba
El límite más bajo de detección es 3 U/L.

Fosfatasa Alcalina FS DGKC – Página 2 844 0401 10 06 00 Noviembre de 2015/15