GLUCÓLISIS

Nelson & Cox, 2013

GLUCOSA
En animales y
plantas vasculares  ¿Tipo de biomolécula?
¿Función? ¿Composición?
 Ocupa una posición central
en el metabolismo de
plantas, animales y muchos
microorganismos.
 Combustible principal
utilizado por la mayoría de
tipos celulares, molécula
muy versátil, múltiples
destinos metabólicos (tanto
catabólicos como
anabólicos)
GLUCÓLISIS
Nelson & Cox, 2013

 Degradación oxidativa, mediada por enzimas, de glucosa a

dos moléculas de piruvato, conservación parcial de
energía en forma de ATP y acarreadores electrónicos
reducidos, NADH + H.
 Primera ruta metabólica descrita: E. Buchner (1897,
fermentación por levaduras), descripción de la ruta en
década de 1930 por O. Warburg y H. von Euler-Chelpin
(levaduras) y G. Embden y O. Meyerhof (músculo).
 Ruta «casi» universal del metabolismo de la glucosa, se
lleva a cabo en citosol. Ferrier, 2018
 ETAPA 1: FASE
DE
PREPARACIÓN
 Cinco reacciones, cinco
enzimas diferentes.
 Inversión de dos
moléculas de ATP.
 Sustrato: glucosa;
producto: 2 moléculas de
gliceraldehído 3 fosfato

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Esta reacción aun
pertenece a fase de
preparación. ETAPA 2: FASE
DE BENEFICIOS
 Cinco reacciones, cinco
enzimas diferentes.
Reacciones de conservación
de energía.
 Un paso de oxidación
(producción de 2 moléculas
de NADH + H)
 Producción de cuatro
moléculas de ATP.
 Sustrato: 2 moléculas de
gliceraldehido 3 fosfato,
producto: 2 moléculas de
piruvato
Nelson & Cox, 2013
 Intermediarios de
las reacciones,
compuestos
fosforilados.

Nelson & Cox, 2013

  Tres principales transformaciones químicas: a) degradación
oxidativa de esqueleto carbonado de glucosa a piruvato, b)
fosforilación de ADP a ATP, c) transferencia de electrones a NAD+
para formar NADH.
 Dos procesos acoplados: oxidación exergónica de glucosa y síntesis
endergónica de ATP.
 Molécula de piruvato aún conserva energía, puede ser oxidado
completamente a CO2 (requiere oxígeno, mayor producción de
GLUCÓLISIS energía), o reducido por fermentación (diferentes productos finales,
como lactato, etanol, etc).

Nelson & Cox, 2013

INTERMEDIARIOS FOSFORILADOS
 Experimentos de Harden y Young (1906) demostraron que la glucólisis implica la participación de
intermediarios fosforilados.
 Carga negativa de ATP se equilibra por presencia de iones Mg2+ en el entorno, las enzimas
glucolíticas requieren este catión para llevar a cabo su función catalítica.
 Funciones de intermediarios fosforilados
 La molécula permanece en el citosol, por ausencia de transportadores de membrana que movilicen
carbohidratos fosorilados
 Grupo fosforilo permite conservar energía metabólica, parte de la energía liberada por hidrólisis de
ATP se conserva por formación de ésteres fosfato (como glucosa 6 fosfato).
 Unión de moléculas fosforiladas a sitio activo de enzima, disminuye energía de activación para
realizar catálisis enzimática e incrementa especificidad de interacción enzima – sustrato.
 Análisis de reacciones
REACCIONES DE LA individuales,
mecanismos y enzimas
GLUCÓLISIS involucradas.

Enzimas reguladoras
Papel regulador de
Enzimas enzimas específicas
Metabolitos activadores
Metabolitos inhibidores Bloquea
1. FOSFORILACIÓN, hexoquinasa
 Fosforilación en C6 de la glucosa, utiliza una molécula de
ATP en la reacción.
 Sustrato: glucosa; producto: glucosa 6 fosfato + ATP
 Reacción irreversible, catalizada por hexoquinasa (enzima
reguladora), existe en 4 isoformas diferentes (I – IV): I
(ubicua, eritrocitos), II (tejidos sensibles a insulina), III
(pulmones, riñón, hígado), IV (hígado y páncreas). Glucoquinasa
 Regulador alostérico: glucosa 6 fosfato (solo actúa en
isoformas I – III).
 Mecanismo de acción: unión de ATP a enzima, unión de
glucosa, cambio conformacional que acerca los sustratos
en el sitio activo y promueve la reacción de fosforilación.
Nelson & Cox, 2013
  Sustrato: glucosa 6 fosfato; producto: fructosa 6 fosfato.
 Reacción reversible. La enzima también es llamada
fosfoglucosa isomerasa.
2.
 Mecanismo de acción: apertura de estructura cíclica, formación
ISOMERIZACIÓN de intermediario enendiol, redistribución de electrones para
formación de grupo carbonilo en posición ceto, formación de
POR fosfohexosa estructura cíclica.
isomerasa
Nelson & Cox, 2013 Nelson & Cox, 2013
  Fosforilación en C1 de fructosa 6 fosfato, utiliza una molécula
de ATP.
 Sustrato: fructosa 6 fosfato; producto: fructosa 1,6 bifosfato
 Reacción irreversible catalizada por fosfofructoquinasa 1 o
PFK-1 (enzima reguladora). Esta reacción compromete a la
célula a completar la ruta glucolítica, es el principal punto de
regulación de la ruta metabólica.
3. FOSFORILACIÓN
 Reguladores alostéricos: ATP, citrato, ADP, AMP, fructosa 2,6
POR bifosfato (este último producido en estado de alimentación,
fosfofructoquinasa 1 asociado a niveles elevados de insulina).

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  Formación de dos triosas fosfato diferentes, reacción reversible,
nombre completo de la enzima fructosa1,6 bifosfato aldolasa
 Esta es la única reacción de lisis de la ruta.
 Sustrato: fructosa 1,6 bifosfato; productos: gliceraldehído 3 fosfato
(aldosa) + dihidroxiacetona fosfato (cetosa)
 Mecanismo de acción (enzimas clase I, presentes en animales):
4. ROMPIMIENTO apertura de estructura cíclica, rompimiento de enlace C – C entre
(carbonos 3 y 4), por una reacción inversa a una condensación
DE LA HEXOSA aldólica que libera el aldehído, formación de una base de Schiff
POR aldolasa protonada como intermediario, liberación de la cetona.

aldosa

Nelson & Cox, 2013

Nelson & Cox, 2013
5. ISOMERIZACIÓN POR
triosa fosfato isomerasa
 Conversión de dihidroxiacetona fosfato (DHAP) en
gliceraldehído 3 fosfato, solo este compuesto puede seguir
siendo degradado en fase de beneficios. Reacción reversible.
 Garantiza que las dos triosas fosfato formadas en la reacción
anterior sigan siendo degradadas.
 Sustrato: dihidroxiacetona fosfato; producto: gliceraldehído 3
fosfato.
 Mecanismo de acción similar al de fosfohexosa isomerasa.

 Esta reacción completa la fase de preparación de la

glucólisis. Nelson & Cox, 2013
FASE DE BENEFICIOS

Etapa de conservación de energía metabólica

En la etapa de preparación la glucosa fue transformada a dos triosas fosfato, por lo

que es importante tener presente que cada reacción de la fase de beneficios se
lleva a cabo 2 veces para completar la transformación de una molécula de glucosa.
 6. FOSFORILACIÓN Y OXIDACIÓN POR
GLICERALDEHÍDO 3 FOSFATO
DESHIDROGENASA
(X2)
 Única reacción de oxidación de la ruta
metabólica, catalizada por gliceraldehído 3
fosfato deshidrogenasa, reversible.
 Sustratos: gliceraldehído 3 fosfato + Pi + NAD+;
productos: 1,3 bifosfoglicerato + NADH + H
 La oxidación, acompañada de una fosforilación,
crea un compuesto de alta energía de hidrólisis.
 Mecanismo de acción: unión covalente del
sustrato al sitio activo de la enzima, formación
de un tioacetal por oxidación del aldehído a un
anhidrido de ácido carboxílico con ácido
fosfórico.
Nelson & Cox, 2013
  Transferencia de grupos fosforilo desde 1,3 bifosfoglicerato hacia
ADP para síntesis de ATP, enzima fosfoglicerato quinasa, se conoce
como fosforilación a nivel sustrato.
 Sustratos: 1,3 bifosfoglicerato + ADP; productos: 3 fosfoglicerato +
ATP
7.  Mecanismo de reacción: transcurre de forma acoplada con la
FOSFORILACIÓN A reacción anterior empleando a 1,3 bifosfoglicerato como metabolito
NIVEL SUSTRATO intermediario; lo que garantiza que la reacción general transcurra
dirigida hacia los productos. La energía liberada por la oxidación de
POR un aldehído a carboxilato se emplea en la síntesis de ATP.
FOSFOGLICERATO
QUINASA (X2)

Nelson & Cox, 2013

8. ISOMERIZACIÓN POR FOSFOGLICERATO
MUTASA

 Redistribución de grupo fosfato en la molécula, catalizada por

fosfoglicerato mutasa. Reacción reversible.
 Sustrato: 3 fosfoglicerato; producto: 2 fosfoglicerato.

 Mecanismo de acción: formación de un intermediario 2,3

bifosfoglicerato en sitio activo de la enzima.

Nelson & Cox, 2013

 9. DESHIDRATACIÓN
DE 2
FOSFOGLICERATO
POR ENOLASA

 Reacción reversible de deshidratación; promueve

formación de un compuesto de alta energía de
hidrólisis.
 Sustrato: 2 fosfoglicerato; productos:
fosfoenolpiruvato (PEP) + H2O
 Mecanismo de acción: formación de un
intermediario enólico estabilizado por iones Mg2+
Nelson & Cox, 2013
10. FOSFORILACIÓN POR PIRUVATO
QUINASA
 Transferencia del grupo fosforilo desde el PEP
hacia el ADP para síntesis de ATP, catalizada por
piruvato quinasa. Segunda fosforilación a nivel
sustrato observada en esta ruta metabólica.
 Reacción irreversible, regulada alostéricamente
por: ATP, acetil CoA, ácidos grasos de cadena
larga, fructosa, 1,6 bifosfato.
 Sustratos: PEP + ADP; productos: piruvato + ATP.

 Mecanismo de acción: la estabilidad del

producto, por tautomerización, ayuda a hacer
favorable la reacción y contribuye a la alta Nelson & Cox, 2013
energía de hidrólisis de PEP.
GLUCÓLISIS

Nelson & Cox, 2013

 Transformación global: ingresa una molécula de glucosa y

se generan dos moléculas de piruvato.
 Se invierten 2 moléculas de ATP y se sintetizan 4
moléculas de ATP, ganancia neta 2 moléculas de ATP.
 Se producen 2 moléculas de NADH + H.

Ferrier, 2018
  L. Pasteur observó que la tasa de consumo de glucosa es
mucho más alta en levaduras sometidas a condiciones
aerobias cuando se compara con la tasa de consumo de la
misma cepa de levadura a condiciones anaerobias, efecto
Pasteur.

REGULACIÓN  La producción neta de ATP por fermentación (ausencia de

oxígeno) es menor, por lo que se requiere oxidar más moléculas
de glucosa para mantener niveles intracelulares de ATP en rangos
DE LA normales.

GLUCÓLISIS  Las células regulan el flujo de glucosa a través de glucólisis

para mantener la concentración de ATP en niveles constantes.
 Mecanismos a corto plazo: monitoreo producción / gasto ATP;
oxidación NADH y regeneración NAD+, actividad de enzimas
reguladoras, monitoreo concentración de metabolitos de la ruta.
 Mecanismos a mediano / largo plazo: control hormonal (insulina
/ glucagón / adrenalina), control genético (modificación expresión
de genes que codifican por enzimas glucolíticas).
GLUCÓLISIS EN CÉLULAS
TUMORALES Nelson & Cox, 2013

 O. Warburg observó que en células tumorales, se observa una

tasa de glucólisis anormalmente elevada, aún en condiciones
aerobias, cuando se compara con células normales, efecto
Warburg.
 Las células cancerosas se «adaptan» modificando condiciones
de supervivencia asociadas al metabolismo energético:
 Aumenta glucólisis (no siempre hay suficiente irrigación
sanguínea en el tumor), y fermentación.
 Adaptación a supervivencia en condiciones de hipoxia (baja
disponibilidad de oxígeno) y pH ácido (resultado de
fermentación)
 Aumento en producción de factor de transcripción inducible por
hipoxia, HIF-1, lo cual favorece aumento en producción de factor
de crecimiento endotelial VEGF, y síntesis de 8 enzimas
glucolíticas. Nelson & Cox, 2013
GLUCÓLISIS EN CÉLULAS TUMORALES
 Conocimiento de modificaciones adaptativas de glucólisis en
células tumorales ha permitido desarrollar estrategias para
emplear el estudio de esta ruta metabólica como estrategia
diagnóstica.
 PET (tomografía de emisión de positrones): emplea 2 fluoro
desoxiglucosa (FdG, marcado con 18F), para evaluar la tasa
de glucólisis en tumores, permitiendo evaluar su localización
de tumores por su elevada tasa de metabolismo del
sustrato.
 Esto ha permitido desarrollar potenciales tratamientos
basados en la inhibición de enzimas glucolíticas que tendría
un impacto mayor en tumores (comparado con células
normales). Agentes inhibidores de hexoquinasa 2
desoxigloucosa, lonidamina y 3 bromopiruvato. Nelson & Cox, 2013
  Metabolismo de glucosa está
limitado por la velocidad de
TRANSPORTADORES DE GLUCOSA ingreso de glucosa a la célula
y su fosforilación por
hexoquinasa.
 Ingreso de glucosa a las
células requiere
transportadores (difusión
facilitada, a favor de gradiente
de concentración), familia de
transportadores GLUT, con
diferente localización,
propiedades cinéticas
(diferente valor de Kt o
constante de transporte) y
función.

Nelson & Cox, 2013

 DIABETES MELLITUS
 Alteraciones en biodisponibilidad de insulina
o respuesta de receptores.
 Tipo I juvenil, tipo II del adulto.
 Tipo II asociada a síndrome metabólico

 Alteración en metabolismo energético:

carbohidratos, lípidos; impacto inmediato en
tejidos dependientes de insulina, a largo
plazo impacto en todo el organismo.
 Provoca hiperglicemia, percepción de
condición de inanición por células del
organismo, uso de lípidos como fuente de
energía, producción de cuerpos cetónicos,
acidosis metabólica.
Nelson & Cox, 2013
GLUCÓLISIS