UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA

MÓDULO DE MICROBIOLOGÍA GENERAL I LABORATORIO
Mendoza Vélez Ulises
Puntos Previos: Practica 16 ANÁLISIIS MICROBIOLÓGICO DEL AGUA

a) ¿Qué es el agua potable?

El agua potable es aquella que ha sido tratada y purificada para consumo humano,
y que cumple con los estándares de calidad establecidos por las autoridades
sanitarias. El agua potable debe estar libre de bacterias, virus, parásitos, productos
químicos y otros contaminantes que puedan afectar la salud de las personas que la
consumen. En resumen, es agua que se considera segura y apta para el consumo
humano.
b) ¿Como se lleva a cabo el muestreo de agua para análisis
microbiológico?
El muestreo de agua para análisis microbiológico debe realizarse de manera
cuidadosa y siguiendo ciertas normas para evitar la contaminación y garantizar la
representatividad de la muestra. A continuación, te presento un resumen de los
pasos generales para llevar a cabo el muestreo de agua para análisis
microbiológico:
• Seleccionar el lugar de muestreo: se debe elegir el lugar donde se recoge el
agua teniendo en cuenta el uso que se le va a dar y la posible fuente de
contaminación. Por ejemplo, si se trata de agua potable, se debe tomar la
muestra en el punto de consumo o en el punto de entrada a la red de
distribución.
• Preparar el material: se deben preparar los frascos de muestra, los utensilios
de muestreo y los materiales de protección personal. Los frascos de muestra
deben ser estériles y estar libres de contaminación.
• Tomar la muestra: se debe abrir el grifo y dejar correr el agua durante al
menos 2 minutos para eliminar la posible contaminación que se acumula en
las tuberías. Luego, se debe cerrar el grifo y desinfectar la llave con alcohol
al 70%. Se abre el frasco de muestra y se toma el agua directamente del grifo
o mediante un dispositivo de muestreo.
• Conservar la muestra: una vez que se ha tomado la muestra, se debe cerrar
el frasco de muestra y etiquetarlo con la información necesaria, como la fecha
y hora de muestreo, la fuente de agua, entre otros. La muestra debe ser
transportada a una temperatura adecuada para su conservación.
Es importante tener en cuenta que los pasos específicos para el muestreo de agua
pueden variar según la normativa y el método de análisis utilizado.

c) Características de los microorganismos indicadores de contaminación

fecal (coliformes)
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Los coliformes son un grupo de bacterias utilizadas como indicadores de

contaminación fecal en el agua y en los alimentos. A continuación, te presento
algunas de las características de los microorganismos indicadores de
contaminación fecal (coliformes):
• Son bacterias gramnegativas: las bacterias indicadoras de contaminación
fecal pertenecen a la familia Enterobacteriaceae y son bacterias
gramnegativas.
• Se encuentran en el intestino de animales de sangre caliente: los coliformes
se encuentran de forma natural en los intestinos de los animales de sangre
caliente, incluyendo a los seres humanos, y pueden ser liberados en el medio
ambiente a través de las heces.
• Son anaerobios facultativos: los coliformes pueden crecer en ambientes con
o sin oxígeno.
• Fermentan la lactosa: los coliformes tienen la capacidad de fermentar la
lactosa y producir ácido láctico y gas. Este proceso se utiliza como una
prueba para identificar la presencia de coliformes en agua y alimentos.
• Son indicadores de contaminación fecal: la presencia de coliformes en el
agua o en los alimentos indica que hay contaminación fecal y, por lo tanto,
puede haber una presencia de patógenos transmitidos por vía fecal que
pueden causar enfermedades.
Es importante tener en cuenta que la presencia de coliformes en el agua o en los
alimentos no garantiza la presencia de patógenos específicos, pero su presencia
indica un mayor riesgo de contaminación fecal y, por lo tanto, un mayor riesgo de
enfermedades transmitidas por vía fecal.
d) Definición del grupo coliforme de acuerdo a la OMS y cuáles son las
especies de coliformes
La Organización Mundial de la Salud (OMS) define el grupo coliforme como un
conjunto de bacterias gramnegativas, no esporuladas, aerobias o anaerobias
facultativas, que fermentan la lactosa con producción de gas a 35°C en 48 horas.
Estas bacterias se encuentran en el medio ambiente y son utilizadas como
indicadores de contaminación fecal en el agua y en los alimentos, ya que su
presencia indica que puede haber una posible contaminación fecal y, por lo tanto,
una mayor probabilidad de presencia de patógenos transmitidos por vía fecal.
Entre las especies de coliformes se encuentran:
• Escherichia coli (E. coli): Es la especie más común dentro del grupo coliforme
y es utilizada como indicador de contaminación fecal en el agua y en los
alimentos. Es una bacteria comensal del intestino humano, pero algunas
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cepas pueden causar enfermedades, incluyendo infecciones urinarias y

diarrea.
• Klebsiella pneumoniae: Es una bacteria que se encuentra en el medio
ambiente y en la flora normal del tracto respiratorio y digestivo de los seres
humanos. Algunas cepas pueden causar infecciones respiratorias y urinarias.
• Enterobacter aerogenes: Es una bacteria que se encuentra en el medio
ambiente y en el tracto gastrointestinal de los seres humanos. Algunas cepas
pueden causar infecciones urinarias y respiratorias.
• Citrobacter freundii: Es una bacteria que se encuentra en el medio ambiente
y en el tracto gastrointestinal de los seres humanos. Algunas cepas pueden
causar infecciones urinarias y respiratorias.
e) Explique los métodos de determinación de microorganismos de
contaminación: método microorganismos que pertenecen al grupo de
coliformes y porque de los tubos múltiples (NMP) y filtración por membrana
El método de los tubos múltiples (NMP) es un método de cultivo en el que se utilizan
tubos con diferentes diluciones de una muestra, y se incuban a una temperatura
específica durante un período determinado de tiempo. Se observa la presencia o
ausencia de coliformes en cada dilución y se utiliza una tabla de estadísticas para
determinar la concentración de microorganismos presentes en la muestra original.
Este método es utilizado comúnmente para el análisis de agua potable y de
alimentos, y es un método económico y confiable.
La filtración por membrana es un método que se utiliza para concentrar las
bacterias presentes en una muestra líquida, como agua o bebidas. Se filtra la
muestra a través de una membrana con un tamaño de poro específico, que retiene
las bacterias presentes en la muestra. Luego, la membrana se coloca en un medio
de cultivo y se incuba para que los microorganismos crezcan. Este método se utiliza
comúnmente para el análisis de agua potable y de bebidas, y tiene la ventaja de ser
rápido y preciso, ya que se puede contar directamente el número de colonias en la
membrana.
Tanto el método de los tubos múltiples como la filtración por membrana son
comúnmente utilizados para la determinación de microorganismos indicadores de
contaminación fecal, como los coliformes. Estos métodos son importantes para la
monitorización de la calidad del agua potable y de los alimentos, ya que la presencia
de coliformes indica la posible presencia de patógenos transmitidos por vía fecal y
un mayor riesgo de enfermedades. Es importante mencionar que existen otros
métodos de determinación de microorganismos de contaminación, como la técnica
de cultivo en placa y la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR), que
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pueden ser utilizados dependiendo de la necesidad y la especificidad del análisis

requerido.
f) Explique las tres etapas del número más probable
El método de los tubos múltiples, también conocido como método de número más
probable (NMP), se utiliza para estimar el número de microorganismos presentes
en una muestra líquida, como agua o alimentos. Este método se basa en la
observación de la presencia o ausencia de crecimiento microbiano en diferentes
diluciones de una muestra, y se utiliza una tabla estadística para determinar la
concentración probable de microorganismos en la muestra original.
El método de NMP se divide en tres etapas:
• Preparación de diluciones seriadas: se preparan diluciones seriadas de la
muestra para obtener concentraciones decrecientes de microorganismos.
Por ejemplo, se pueden diluir 1 ml de la muestra original en 9 ml de agua
estéril para obtener una dilución de 1:10, y luego tomar 1 ml de esta dilución
y diluirlo en 9 ml de agua estéril para obtener una dilución de 1:100, y así
sucesivamente.
• Inoculación de los tubos: se inoculan tubos con diferentes diluciones de la
muestra, y se incuban a una temperatura específica durante un período
determinado de tiempo. Se observa la presencia o ausencia de crecimiento
microbiano en cada tubo.
• Interpretación de resultados: se utiliza una tabla estadística para interpretar
los resultados. La tabla tiene en cuenta el número de tubos positivos para
cada dilución, y se utiliza para estimar el número más probable de
microorganismos presentes en la muestra original.

g) Qué medios de cultivo alternos se pueden emplear

• Agar de coliformes totales: es un medio selectivo y diferencial que permite la

detección de coliformes totales, incluyendo Escherichia coli. Este medio
contiene lactosa y sales biliares que inhiben el crecimiento de
microorganismos no coliformes.
• Agar de coliformes fecales: es un medio selectivo y diferencial que permite la
detección de coliformes fecales, incluyendo Escherichia coli. Este medio
contiene lactosa, sales biliares y el sustrato cromogénico ONPG (orto-
nitrofenil-b-D-galactopiranosido) que permite la diferenciación entre
coliformes fecales y no fecales.
• Agar Salmonella-Shigella: es un medio selectivo utilizado para la detección
de Salmonella y Shigella en muestras de agua.
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• Agar TCBS (tiosulfato-citrato-bilis-sacarosa): es un medio selectivo utilizado

para la detección de bacterias del género Vibrio, incluyendo Vibrio cholerae.

h) Ventajas y desventajas entre ambos métodos.

Método Ventajas Desventajas
Número • Permite la detección y recuento • Requiere más tiempo para
más de microorganismos en muestras obtener resultados.
probable de baja concentración. • Puede haber interferencia
(NMP) • Requiere menos equipo y con la presencia de
materiales. compuestos químicos y
• Es menos propenso a la otros microorganismos en
contaminación externa. la muestra.
• Puede ser más costoso y
laborioso.

Filtración • Permite el recuento de • Puede haber pérdida de

por microorganismos en muestras de microorganismos durante
membrana mayor volumen. la filtración.
• Permite la observación directa de • Requiere equipos y
microorganismos. materiales adicionales,
• Permite la detección de como filtros y membranas.
microorganismos viables y no • Puede haber interferencia
viables. Obtiene resultados más con la presencia de
rápidos. compuestos químicos y
otros microorganismos en
la muestra.
• Es más propenso a la
contaminación externa.

i) Mencione 10 enfermedades ocasionadas por consumir agua contaminada

El consumo de agua contaminada puede ocasionar diversas enfermedades, entre
las que se pueden mencionar:
• Cólera: una enfermedad infecciosa aguda que causa diarrea acuosa, vómitos
y calambres abdominales severos.
• Hepatitis A: una infección viral que causa inflamación del hígado, dolor
abdominal, fiebre y fatiga.
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• Fiebre tifoidea: una infección bacteriana que causa fiebre alta, dolor de
cabeza, dolor abdominal y diarrea.
• Disentería: una enfermedad infecciosa que causa diarrea sanguinolenta,
dolor abdominal y fiebre.
• Giardiasis: una infección parasitaria que causa diarrea, náuseas, vómitos,
dolor abdominal y pérdida de peso.
• Leptospirosis: una enfermedad bacteriana que causa fiebre, dolor muscular,
dolor de cabeza y vómitos.
• Amibiasis: una infección parasitaria que causa diarrea, dolor abdominal,
fiebre y pérdida de peso.
• Esquistosomiasis: una infección parasitaria que causa fiebre, dolor
abdominal, diarrea y sangre en la orina.
• Cisticercosis: una infección parasitaria que causa dolor de cabeza,
convulsiones y problemas de visión.
• Poliomielitis: una enfermedad viral que puede causar parálisis, debilidad
muscular y problemas respiratorios.

j) Qué son las tablas de Mc-Crady y cómo se utilizan.

Las tablas de Mc-Crady, también conocidas como tablas de tiempo de retención
hidráulica, son una herramienta utilizada en el tratamiento de aguas residuales para
determinar el tiempo de retención hidráulica (TRH) de un sistema de tratamiento.
El TRH es el tiempo que el agua residual pasa en un sistema de tratamiento antes
de ser descargada. Este tiempo es importante ya que afecta la eficacia del
tratamiento y puede determinar si el agua es segura para su liberación al medio
ambiente. Las tablas de Mc-Crady se utilizan para determinar el TRH de los
sistemas de tratamiento de aguas residuales que utilizan procesos biológicos como
la digestión anaerobia o la oxidación aerobia.
Estas tablas proporcionan una relación entre la temperatura del agua y el tiempo de
retención hidráulica necesario para lograr una eliminación efectiva de los
contaminantes. Para utilizar las tablas de Mc-Crady, se debe conocer la temperatura
del agua residual y el tipo de tratamiento que se está utilizando. Con esta
información, se puede buscar en la tabla correspondiente el tiempo de retención
hidráulica necesario para lograr la eliminación efectiva de los contaminantes a esa
temperatura.
Es importante señalar que las tablas de Mc-Crady son solo una herramienta para
ayudar a determinar el TRH adecuado y no deben ser utilizadas como la única
fuente de información para el diseño y operación de un sistema de tratamiento de
aguas residuales. Otros factores, como la carga de contaminantes y el tipo de
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microorganismos presentes, también deben ser considerados al determinar el TRH

óptimo.
REFERENCIAS

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fourth edition. [consultado el 4 de mayo 2023]. Disponible en:
https://www.who.int/publications/i/item/9789241548151
• EPA. (2016). National Field Manual for the Collection of Water-Quality Data:
Chapter A1. Introduction to Water Sampling. U.S. Environmental Protection
Agency. [consultado el 4 de mayo 2023]. Disponible en:
https://www.epa.gov/sites/default/files/2019-01/documents/chapter_01.pdf
• U.S. Environmental Protection Agency. (2012). Total Coliform Rule.
[consultado el 4 de mayo 2023]. Disponible en:
https://www.epa.gov/dwreginfo/total-coliform-rule-overview
• World Health Organization. (2011). Guidelines for Drinking-water Quality.
Fourth Edition. [consultado el 4 de mayo 2023]. Disponible en:
https://www.who.int/water_sanitation_health/publications/2011/dwq_guidelin
es/en/
• Centers for Disease Control and Prevention. Waterborne Diseases [Internet].
Atlanta, GA: Centers for Disease Control and Prevention; 2022 [consultado
el 4 de mayo 2023]. Disponible en:
https://www.cdc.gov/healthywater/emergency/waterborne-disease.html
• World Health Organization. Guidelines for drinking-water quality [Internet]. 4th
ed. Geneva: World Health Organization; 2011 [consultado el 4 de mayo
2023]. Disponible en:
https://www.who.int/water_sanitation_health/publications/2011/dwq_guidelin
es/en/