Todos los organismos tienen un nombre que consta de dos partes: el género seguido de la

especie (es decir, Homo sapiens). Las bacterias se han agrupado y nombrado principalmente en
función de sus diferencias morfológicas y metabólicas bioquímicas. Sin embargo, en la actualidad
las bacterias también se clasifican en función de sus características inmunológicas y genéticas. Este
capítulo se centra en la tinción de Gram, la morfología bacteriana y las características metabólicas,
que permiten al clínico determinar rápidamente el organismo causante de la infección de un
paciente.

MANCHA EN GRAMO

Dado que las bacterias son incoloras y, por lo general microscopía óptica, se han desarrollado
tinciones de color para visualizarlas. La más útil es la tinción de Gram que separa los organismos
en 2 grupos: bichos grampositivos y gramnegativos. Esta tinción también permite al clínico
determinar si el organismo es redondo o tiene forma de bastón. Para cualquier tinción, primero
hay que frotar la sustancia a (esputo, pus, etc.) en un portaobjetos y luego calentarla para para
fijar las bacterias en el portaobjetos.

La tinción de Gram consta de 4 pasos:

1) Verter la tinción de violeta cristal (un colorante azul) y esperar 60 segundos.

2) Lavar con agua e inundar con solución yodada. Esperar 60 segundos.

3) Lavar con agua y después "decolorar" con alcohol al 95%.

4) Por último, contramanchar con safranina (un colorante rojo). Esperar 30 segundos y lavar con
agua.

Cuando el portaobjetos se estudia al microscopio, las células que absorben el cristal violeta y se
aferran a él aparecerán de color azul. Se trata de organismos grampositivos. Sin embargo, si el
alcohol elimina el violeta cristalino, estas células absorberán la safranina y aparecerán de color
rojo. Se trata de organismos gramnegativos.

Gram-positivo = AZUL ¡¡¡Estoy positivamente AZUL sobre ti!!!

Gram-negativos = ROJO ¡¡No (negativos) rojos!!

Las diferentes tinciones son el resultado de las diferencias en las paredes celulares de las bacterias
gram-positivas y gram-negativas.

Tanto los organismos grampositivos como los gramnegativos tienen más de una capa que protege
su citoplasma y núcleo del entorno extracelular, a diferencia de las células animales, que sólo
tienen una única membrana citoplasmática compuesta por una bicapa de fosfolípidos. La capa
situada justo fuera de la membrana citoplasmática bacteriana es la capa de peptidoglicano o pared
celular. Está presente tanto en los organismos grampositivos como en los gramnegativos.
Fig. 1-3. La pared celular de las grampositivas es muy gruesa y presenta una extensa reticulación
de las cadenas laterales de aminoácidos. Por el contrario, la pared celular de las gramnegativas es
muy fina y presenta un patrón de entrecruzamiento bastante simple.

Fig. 1-4. La envoltura celular de las grampositivas tiene una pared celular externa compuesta de
peptidoglicano reticulado complejo, ácido teicoico, polisacáridos y otras proteínas. La superficie
interna de la pared celular está en contacto con la membrana citoplasmática. La membrana
citoplasmática contiene proteínas que abarcan la bicapa lipídica. La membrana citoplasmática
bacteriana (a diferencia de la de los animales) no contiene colesterol ni otros esteroles.

Un polisacárido importante presente en la pared celular grampositiva es el ácido teicoico.

Actúa como determinante antigénico, por lo que es importante para la identificación serológica de
muchas especies grampositivas.

Fig. 1-5. La envoltura de las células gramnegativas tiene 3 capas, sin incluir el espacio periplásmico.
Al igual que las bacterias grampositivas, tiene 1) una membrana citoplasmática rodeada por 2) una
capa de peptidoglicano. 3) Además, una célula gramnegativa tiene una membrana celular externa
única.

La membrana citoplasmática interna (como en las bacterias grampositivas) contiene una

bicapa de fosfolípidos con proteínas incrustadas. Las bacterias gramnegativas tienen un espacio
periplásmico entre la membrana citoplasmática y una capa extremadamente fina de
peptidoglicano. Este espacio periplásmico está relleno de un gel que contiene proteínas y enzimas.
La fina capa de peptidoglicano contiene ácido teicoico, aunque sí tiene una pequeña lipoproteína
helicoidal llamada lipoproteína de mureína. Esta lipoproteína es importante porque se origina en
la capa de peptidoglicano y se extiende hacia el exterior para unirse a la singular tercera
membrana externa. Esta última membrana es similar a otras membranas celulares en que se
compone de dos capas de fosfolípidos (bicapa) con colas hidrófobas en el centro. Lo que la hace
única es que la porción más externa de la bicapa contiene lipopolisacárido (LPS).

Fig. 1-6. El lipopolisacárido (LPS) está formado por 3 componentes unidos covalentemente:

1) Cadenas externas de carbohidratos de 1-50 unidades de oligosacáridos que se extienden en el

medio circundante. Estos difieren de un organismo a otro y son determinantes antigénicos. Esta
parte se denomina cadena lateral 0-específica o antígeno 0. Piense en 0 de Exterior para recordar
esto.

2) La parte central es un núcleo polisacárido soluble en agua.

3) En el interior del polisacárido central se encuentra el tercer componente, el lípido A, que es un

disacárido con múltiples colas de ácidos grasos que llegan hasta la membrana. El lípido A es tóxico
para el ser humano y se conoce como endotoxina gramnegativa. Cuando las células bacterianas
son lisadas por nuestro eficaz sistema inmunitario, se liberan a la circulación fragmentos de la
membrana que contienen lípido A, lo que provoca fiebre, diarrea y un posible shock endotóxico
mortal (también llamado shock séptico).

En la membrana externa de los gramnegativos hay proteínas porinas que permiten el paso de
nutrientes. Estas proteínas también son exclusivas de los organismos gramnegativos.

¿Qué significa esto clínicamente?

Las diferencias entre los organismos grampositivos y gramnegativos dan lugar a diversas
interacciones con el entorno. La capa de peptidoglicano de malla gruesa de los grampositivos no
bloquea la difusión de compuestos de bajo peso mol ecular, por lo que las sustancias que dañan la
membrana citoplasmática (como antibióticos, tintes y detergentes) pueden atravesarla. Sin
embargo, la membrana celular externa gramnegativa que contiene lipopolisacáridos bloquea el
paso de estas sustancias a la capa de peptidoglicano y a la sensible membrana citoplasmática
interna. Por lo tanto, los antibióticos y las sustancias químicas que intentan atacar la pared celular
de peptidoglicano (como las penicilinas y la lisozima) son incapaces de atravesarla. 4
Curiosamente, la tinción violeta cristalina utilizada para la tinción de Gram es un gran complejo de
colorante que queda atrapado en la gruesa pared celular reticulada de las grampositivas, lo que da
lugar a la tinción azul de las grampositivas. La membrana celular externa que contiene lípidos de
los organismos gramnegativos se disuelve parcialmente con alcohol, lo que elimina el violeta de
cristal y permite que se produzca la contratinción con safranina.

Cuando el portaobjetos se estudia al microscopio, las células que que absorben el cristal violeta
y se aferran a él aparecerán azules. azul. Se trata de organismos grampositivos. Sin embargo, si
el violeta cristal se lava con alcohol, estas células absorberán la safranina y aparecerán rojas. Se
trata de organismos gramnegativos.

Las diferentes tinciones son el resultado de las diferencias en las paredes celulares de las
bacterias grampositivas y gramnegativas.

paredes celulares de las bacterias grampositivas y gramnegativas.

La membrana citoplasmática interna (como en las bacterias grampositivas) contiene una bicapa
de fosfolípidos con proteínas incrustadas. Las bacterias Gram negativas tienen un espacio
periplásmico entre la membrana citoplasmática y una capa extremadamente fina de
peptidoglicano. Este espacio periplásmico espacio periplásmico está lleno de un gel que
contiene proteínas y enzimas. El t