Resumen Microbiologia Gral

Microbiología FINAL 2016
Unidad 2: CELULA BACTERIANA

Reino monera
 Protistas inferiores: Division
I. Bacterias y formas afines
II. Algas verde azuladas
III. Virus
 Protistas superiores: Division
II. Hongos o mohos y levaduras
III. Musgos
IV. Helechos
V. Plantas de semillas
1. Reino
2. Protista
3. Division
4. Clase
5. Orden
6. Familia
7. Tribu
8. Genero
9. Especie
10. Tipo serológico
11. N° ATCC
La microbiología abarca el estudio de un gran número de seres vivos de muy diversa índole que pueden vivir como células
independientes o formando grupos con la capacidad de llevar a cabo todos los procesos vitales independientemente una
célula de la otra.
La célula constituye la unidad estructural y funcional de todos los organismos. Posee tres características básicas:
 Poseen membrana plasmática que separa la célula del medio y a través de la cual se realizan intercambios con este.
 Poseen citoplasma
 Llevan toda la información de la actividad celular en los cromosomas.
Hay dos tipos de organismos
 Eucariontes: tienen células eucariotas (con núcleo verdadero), tienen membrana, citoplasma y todas sus organelas.
Algunos poseen pared especial como hongos y plantas.
 Procariotas: poseen membrana y citoplasma. Sin vacuolas. Tienen mesosomas y ribosomas. No poseen membrana
nuclear (bacterias)
La bacteria es un organismo procariota unicelular.
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 FLAGELO: estructura tubular cilíndrica hueca que está formada en su mayor parte por proteínas como la
flagelina. El largo es el diámetro de la bacteria. Nace en la membrana citoplasmática en un punto llamado
bleferoplasto de donde obtiene energía para el movimiento. Único apéndice biológico con movimiento de
rotación. El movimiento se denomina aleatorio sesgado. Según cantidad y ubicación se clasifican en:
I. Atricas: no poseen flagelo.
II. Monotricas un flagelo en uno de los polos
III. Anfitricas: un flagelo en cada polo
IV. Lofotricas: más de un flagelo en un polo
V. Peritricas: muchos flagelos a su alrededor.
Los flagelos dan movilidad y especificidad inmunológica (posee antígenos específicos F) y crecen a partir de las
puntas.
 FIMBRIAS: estructura hueca (también llamadas cilias) que nacen en la pared celular. Sirven de puente para la
conjugación bacteriana, además permite unirse a la mucosa de los tejidos.
 CAPSULA: formada por una capa de material de acúmulos de polímeros de polisacáridos o poli péptidos según el
espesor y la viscosidad se dividen en:
I. Sustancia laxa: menos densa con espesor pequeño y su borde definido. Muy soluble.
II. Capsula muy viscosa y poco soluble.
Muchas bacterias generan microcapsulas. Si se necesita el ingreso de agua se usa un medio hipotónico(sacarosa
12%). Se tiñe con tinción negativa (tinta china). Se relaciona con la virulencia de la bacteria. Si se pierde la capsula
se pierde la virulencia. Le confiere a la bacteria especificidad inmunológica (antígeno K)
 ESPORA: cuando las condiciones del medio son adecuadas, hay bacterias que tienen la propiedad de esporular
por una doble invaginación de la membrana y pared celular, captando parte del citoplasma y cromosoma. La célula
que dio origen a la espora se llama esporangio (se lisa después de esporular por que no tiene material genético) el
estado latente es el estado esporulado y el vegetativo es el estado de cultivo. Pueden durar miles de años
esperando el medio adecuado. Solo los bacilos Gram (+) forman esporas. Las esporas bacterianas son
endoesporas (brotan hacia adentro). Taxonómicamente según su forma y ubicación se clasifican en:
I. Redonda , cuadrada o cilíndrica
II. Central subterminal o terminal.
 PARED CELULAR: su función es proteger a la bacteria de lisis osmótica, dar forma y rigidez, contiene antígenos
O (en los Gram (+) son ácidos teicoicos en los Gram (-) polisacárido O). todas las bacterias tienen pared celular
menos la mycoplasma.
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Composición: el elemento común en las gram es el peptidoglucado (polisacárido formado por dos derivados de
azucares, G N-acetil glucosamina y M acido N-acetil muramico y un pequeño grupo de aminoácidos que incluye la
D y L alanina, acido glutámico y lisina o acido di amino pirrolico).
Componentes accesorio de la pared celular Gram (+)
El espesor de la capa de péptido glucano es de 0.02 -0.06 micrones, las gram (+) forman varias
capas. El peptidoglucano representa el 90% del material de la pared célula, el otro 10 % está
compuesto por ácido teicoico (que actúan como antígenos) el ácido lipoteicoico son ácidos
teicoicos unidos a la membrana plasmática.
Componentes accesorios de la pared celular Gram (-)

El peptidoglucano representa solo el 10 % del total. El espesor es de 0.01 micrones, solo
forman 1 o 2 capas. El otro 90 % está formado por la membrana externa (bicapa lipídica
formada por fosfolípidos, lipoproteínas; anclaje entre membrana externa y el
peptidoglucano; lípido A; elemento toxico de la pared celular endotoxina; y
Polisacárido O; actúa como antígeno)
Tinción de GRAM
 Colorante: cristal violeta

 Mordiente: lugol; solución ioduro yodato.
 Decolorante : alcohol – acetona
 Contracolor: saponina
El colorante y el mordiente forman un complejo: cristal violeta iodo que tiñe todas las células. Al decolorar solo las gram+
retienen el complejo y las gram – quedan transparentes. El contracolor sirve para teñir las gram -. Las gram + poseen
pared celular gruesa (varias capas entrecruzadas) con poros pequeños. La acción del decolorante es cerrar aún más los
poros del péptido glucano. Los poros de la gram – son más grandes (menos capas, menos entrecruzamiento) por eso se
pierde el color del complejo.
GRAM (+) GRAM (-)

Coloración Retienen CUI (violeta) No retienen CUI , se tiñen con
saponina (rosa)
Capa de peptidoglucano 90% (hasta 25 capas) 10% (1-2 capas)
Poros Pequeños Grandes
Toxinas Exotoxinas Exo / Endotoxinas
Membrana externa No Si
Ac. teicoicos Si No
Contenido de lípidos Baja Alta
Dureza de pared Dura Blanda
 PROTOPLASTO /ESFEROPLASTO: el péptido glucano puede ser destruido por acción enzimática. La lisozima
rompe los enlaces entre M y G y en consecuencia se produce ruptura de pared celular
I. Lisozima + sc. Hipotónica: la célula estalla
II. Lisozima + sc. Hipertónica: la célula se deshidrata.
III. Lisozima + sc. Isotónica: la célula se estabiliza pero pierde la pared, si es gram + se llama protoplasto si es
gram – esferoplasto.
 Genero mycobacterium (micobacterias)
Posee péptido glucano y otros. Existen dos especies: M. tuberculosis (bacilo de Koch) y M. leprae (bacilo de
Hansen). Tienen en su pared celular unos lípidos característicos llamados ácidos micolicos. Estos están unidos
covalentemente al peptidoglucano de la pared. Estos ácidos hacen muy difícil la tinción por gram. Se utiliza la
coloración de BAAR (bacilo acido alcohol resistente) con el método de Ziehl Neelsen.
 Colorante: fucsina eosina ácido fenolada (rosa)
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 Mordiente : calor
 Decolorante: acido alcohol ( ácido clorhídrico en ácido nítrico enol)
 Contracolor: azul de metileno.
Las micobacterias resisten la decoloración con ácidos fuertes después de teñirlos con fucsina caliente. La
mycobacteria se ve rosa y el resto azul. Esta coloración tiene como fundamento una reacción química.
 MEMBRANA CITOPLASMATICA: muy fina pero muy importante. Representa el 10 -20 % del peso seco de la
célula. Formada por una bicapa lipídica con cabezas polares y cadenas no polares con un espesor de 8
nanómetros. Sus funciones son: barrera osmótica de separación con el medio, posee mecanismos reguladores de
intercambio de electrolitos. Base estructural donde están los sustratos, sistemas de transporte electrónico (cadena
respiratoria) asociada a la fosforilacion oxidativa (forman ATP). Sus características son: formadas por 60% de
proteínas (intrínsecas que son estructurales y extrínsecas que son periféricas) y 40 % de lípidos polares donde
predominan los fosfolípidos. Posee como accesorio el colesterol libre y estratificado, gran cantidad de ácidos
grasos. Detección: se hierve en solución diluida alcalina, el citoplasma se contrae y la membrana queda visible.
Para aislarla se usa centrifugación diferenciada. No hay núcleo, solo una zona nuclear donde está el cuerpo
cromosómico (un solo cromosoma). Tiene una molécula de ADN en forma de barra o gránulos en una red.
DIVISION CELULAR
Se realiza por fisión binaria (amitótica), comienza con el alargamiento del cuerpo de la bacteria, luego los mesosomas
forman el tabique y hay una estrangulación (crecimiento subterminal). De cada célula surgen dos idénticas.
Criterio de crecimiento bacteriano: aumenta el número de células pero no agranda el tamaño. Se calcula como 2n que es la
cantidad de divisiones celulares. El tiempo de división depende de cada género y especie.
Tiempo de generación (G): es el tiempo necesario para que la población se duplique.
Tinción: colorante básico ya que el medio (zona nuclear) es acido.
PROPIEDADES ESTRUCTURALES DE LAS BACTERIAS

 Tamaño: se mide por MO colocando el objetivo micrométrico. Se mide en micrones. La mayoría tiene un ancho
entre 0.5 y 1 micrones, los bacilos tienen un largo de 2 a 5 micrones, las sulfobacterias 100 micrones.
 Formas: pueden ser:
o Esféricas: las más comunes son los cocos ej.: estreptococo (gram +) y neisserias (gram -)
o basilares (cilíndricas): pueden ser como un bastón recto como el bacilo de koch o el bacilo megaterium
ambos gram + o como un bastón arriñonado como la pseudomona y la salmonella ambos gram –
o espirales (helicoidales): llamadas spirioquetas son las únicas con movimiento sin flagelo, para pertenecer a
esta familia deben ser retorcidas una vuelta entera al menos (los que no llegan se llaman commas o vibrios
como el cólera). Los generos de esta familia son: espiroqueta (punta fina) criptispira (punta gruesa),
borrelia (espátula) leptospira (gancho) y treponema (mechón); todas son muy patógenas. Tinción:
inmunofluorescencia.
o Formas especiales: cocobacilo (escherichia coli) caña de bambú ( bacillus anthrasis) hoja con tallo
(caulobacter) filamentoso (estreptomices)
 Agrupaciones: depende de la morfología bacteriana, género y especie. Se deben a peculiaridades que presentan en
el momento de la división:
Si son cocos:
o Aislados
o Diplococos (en la unión están aplastados)
o Cadenas o estreptococos (depende del medio varían en longitud)
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o Tetrados o tetracoccos (dos diplococos unidos)

o Racimos o estafilococos
o Culoide o sorcimos
Si son bacilos:
o Aislados
o Diplobacilos
o Estreptobacilos
División de los bacilos (no agrupaciones)
o Ramificada (bacilo de koch)

o Empalizada (unidos por el lateral)
Unidad 3: METABOLISMO BACTERIANO

Metabolismo: designa a un conjunto organizado de las actividades que desarrolla una célula que incluye un sistema
implicado de reacciones químicas activadas por enzimas o catalizadores orgánicos.
Componen dos tipos de fenómenos
o Catabolismo: degradación o desasimilación del sustrato. Son exoergonicas.

o Anabolismo: síntesis o asimilación de materiales o sustancias. Son endoergonicas.
Metabolismo energético
o Energía radiante: fotosíntesis
2 H2O + CO2 → (CH2O)n + O2↑ + H2O (plantas superiores)
2 H2X + CO2 → (CH2O)n + 2X + H2O (Bacterias fotosintéticas)
o Energía química: oxidación biológica, toman energía de las oxidaciones de sustancias orgánicas e inorgánicas –
Respiración: es la oxidación que utiliza oxigeno molecular como aceptor de protones (aeróbico) y fermentación:
tiene lugar en ausencia de oxigeno molecular, a veces el mismo sustrato se reduce y se oxida (anaeróbico)-.
Metabolismo aeróbico y anaeróbico

 Aerobias estrictas: necesitan si o si oxígeno. Tienen respiración aeróbica y metabolismo oxidativo (bacilo de Koch,
neumococo)
 Anaerobias estrictas: crecen solo en ausencia total de oxígeno. Tienen respiración anaeróbica y metabolismo
fermentativo (clostridium)
 Organismos facultativos: pueden crecer tanto en ausencia como en presencia de oxígeno. Tienen respiración
aeróbica o anaeróbica y metabolismo adaptativo (oxidan o fermentan)
 Aerobios Aero tolerantes: necesitan una pequeña cantidad de oxigeno (siempre de metabolismo fermentativo)
(bacterias lácticas)
Cofactores redox (metabolismo intermediario) ayudan a que estén libres compuestos intermediarios fosforilados con una
energía de hidrolisis. Los principales son: ácido lipoico, NAD, NADP, Flavinas, Hemos, Ferredoxina y Tirredoxina.
Necesidades metabólicas de las bacterias:

 Orgánicas: varían según género y especie.
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 Inorgánicas: CO2, lo necesitan para la síntesis de lípidos celulares. Iones tales como fosfato, potasio y magnesio.
En ausencia de N y S usan amoniaco o amonio y sulfatos. Necesitan hierro para sintetizar citocromos en bacterias
aeróbicas y ferrodoxinas en anaeróbicos. Necesitan concentraciones mínimas de zinc, manganeso, cobre (enzimas,
molbideno (fijación nitrógeno) y cobalto (vitamina B12). El calcio lo usan para generar esporas.
 Físicas e iónicas: la mayoría de las bacterias sobreviven en amplios márgenes de temperatura pH , salinidad y
presión osmótica.
 Temperatura: si aumenta, aumenta la velocidad de división hasta la temperatura optima, luego desciende
bruscamente. Debajo de la temperatura mínima el transporte de nutrientes y el gradiente de protones
disminuye hasta detenerse y se inicia el proceso de gelificacion de la membrana hasta congelación. Por
encima de la temperatura máxima se producen reacciones de inactivación, desnaturalización de proteínas,
colapso de membrana y lisis. Según la temperatura optima las bacterias se dividen en: mesofilas
(temperatura ambiente) Psicofilicas (crecen a bajas temperaturas, pseudomonas), termofilas (temperaturas
altas) Hipertermofilas( no existe una sola temperatura optima generalmente son muy altas + 100° son las
thermus)
 pH
 presión osmótica: provoca cambios en la composición celular, aun asi la mayoría de las bacterias pueden
crecer en un amplio rango debido a sus pares. Las osmofilicas son las que toleran medios con alta presión
osmótica y las xerofilicas son las que crecen en ambientes muy secos.
 Salinidad: las bacterias no suelen necesitar sodio o NaCl, aunque toleran concentraciones moderadas.
Según la concentración que toleren son halofilicas (hasta 3.5% de sal) , halofilicas moderadas (20% sal)
halofilicas extremas (más 30% sal)
Unidad 4: CULTIVOS Y CRECIMIENTO

BACTERIANO
Crecimiento: es el aumento en el número de células que tengo en el inoculo. Cuando se incorpora un inoculo en un medio
adecuado y se incuba a condiciones óptimas, se verifica un enorme crecimiento en un corto lapso de tiempo. Durante este
lapso todos los constituyentes de la célula aumentan en gran cantidad para que las dos células hijas reciban un cromosoma
completo y todos los componentes macromoleculares en una concentración mínima para que actúen como células
independientes.
Criterio de muerte: es la pérdida irreversible de la capacidad de dividirse o reproducirse.
DIVISION BACTERIANA
 Fisión binaria / transversal (asexual) Fases:
1. Asimilación de nutrientes: entran los nutrientes en la celula por un proceso selectivo
2. Acción enzimática: todo el proceso enzimático convierte nutrientes en material protoplasmático
especifico
3. Alargamiento celular: aumento de la sustancia nuclear del citoplasma de los componentes
macromoleculares
4. Reorganización : el contenido total se distribuye para las dos células
5. Tabicación
6. Separación
 Fusión / conjugación (sexual) : intervienen las fimbrias
 Formación de filamentos : solo la realizan los actinomycetales (características de hongos filamentosos)
 Gemación (asexual): la realizan los hipnomicrobiotes.
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Velocidad de crecimiento: 2n
Tiempo de generación G: tiempo necesario para que una población bacteriana se duplique.
Curva de crecimiento
Si partimos de la hipótesis de una célula bacteriana y graficamos número de células en función del tiempo se obtiene una
curva, pero para estudiarla se aplica logaritmo y se obtiene el siguiente gráfico:
Log (N° cel) / T

14
3
12
10
2 4
8
4
1
2
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
1. Etapa de latencia (tiempo de adaptación: si están en esporas, necesita un tiempo para pasar a la etapa vegetativa o
son cultivos viejos, o las células están dañadas.
2. Crecimiento exponencial. Posee velocidad máxima
3. Fase estacionario (estado de cultivo): se dividen células como la cantidad que muere. Hay falta de nutrientes,
variación de pH, turbidez, la concentración de biomasa permanece estable. Empieza el metabolismo secundario.
Las células deciden sintetizar ciertos compuestos y liberarlos. Hay síntesis de enzimas, proteínas etc.
4. Muerte celular: algunas supervivientes alimentan de las muertas. Hay una propiedad en las materia llamada auto
lisinas (lisan las bacterias) produciendo colonias fantasmas.
Rendimiento
El rendimiento de células obtenido o biomasa producida depende de las condiciones del hábitat y la composición del
medio. Esta directamente relacionado a la cantidad de ATP
Métodos para medición de crecimientos bacterianos

El crecimiento de una población se sique midiendo en diferencia de número de células equivalentes a la diferencia de peso
de biomasa
1. Contaje directo de células: se cuentan cuantas células vivas o muertas se encuentran en una cuadricula de 1 mm x
1 mm. Se usa la placa de Petroff- Hauser. Los inconvenientes de este método son: se cuentan células vivas como
muertas. Las células pequeñas no se pueden contar. Se requiere tiempo y habilidad, la muestra debe estar muy bien
homogeinizada. La muestra puede flotar o irse al fondo. Se necesita microscopio de fase. No es bueno para una
muestra diluida.
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2. Contable de viables: se informa como numero de colonias UFC / ml o h (unidad formadora de colonias) se
trabaja en medio solido y se cuentan las superficiales.
3. Peso de la biomasa: se dice que es proporcional al numero de células. Por centrifgacion a una velocidad
determinada se pesa el precipitado. O se mide la turbidez con un fotocolorímetro o espectrofotómetro.
Unidad 5: AGENTES MICROBIANOS

1. Bacteriostatico: tiene la capacidad de inhibir la multiplicación microbiano en forma reversible. Esta acción
microbiana se anula cuando se retira el agente (temperatura)
2. Bacterizida: posee la capacidad de matar a las bacterias inhibiendo su multiplicación de forma irreversible. El
agente puede causar lisis bacteriana o dejar las células intactas pero muertas.
3. Desinfectante: es una sustancia química usada para matar microorganismos sobre superficies, aire, etc. pero
demasiado toxicas para aplicarla sobre tejidos.
4. Septico: esta caracterizado por presencia de microorganismos patógenos generalmente en el tejido vivo.
5. Aseptico: caracterizado por ausencia de microorganismos patógenos.
Método de acción de antimicrobianos

 Daño al ADN: destruye las células por interferir en la duplicación del ADN. Puede ser por alguna unión
covalente, rotura, entrecruzamiento de pirimidas (rayos UV, radiación ionizante, compuestos que reaccionan con
el ADN como agentes alquilantes)
 Desnaturalizacion de las proteínas: destruyen estructuras terciarias de las proteínas y los fragmenta
 Rotura de membrana / pared celular: ciertas sustancias tienen la capacidad de concentrarse entre la superficie
bacteriana y el medio circundante alternando las propiedades físicas y químicas de la pared y la membrana
impidiendo su función normal (lizosima)
 Eliminacion de grupos sulfhidrilos los agentes oxidantes generalmente ligan los grupos –SH vecinos para dar
disulfuros. Al bloquear el –SH las proteínas pierden su correcto funcionamiento. Hay muchos metales pesados
como el mercurio que producen daño tisular.
 Antagonismo químico: es la interferencia de un agente quimico en la relación normal entre enzima y sustrato. El
agente análogo desplaza a este e impide la reacción ES. Por ejemplo la parafluor fenilalanina compite con la
fenilalanina; el s metil triptófano con el triptófano. Algunas enzimas contienen un ion que actua como puente en
el complejo ES como el monóxido de carbono CN, ets se unen al Fe e inhiben la cadena respiratoria.
Mecanismos de reversión de los agentes antimicrobianos:

 Eliminación del agente: se lava, centrifuga y un porcentaje de células quedan vivas se resuspende en un nuevo
medio.
 Reversibilidad por sustrato: cuando un antagonista quimico del tipo análogo forma un compuesto enzima-analogo
, se aumenta la concentración de sustrato natural lo que desplazara al análogo (inhibición competitiva) o se
aumenta la concentración de inhibidos sobre la concentración de sustrato que revierte la inhibición, se llama índice
microbiano.
 Inactivación del agente: puede ser inhibido por el agregado de una sustancia química que se una con el agente
microbinao (para inhibir el mercurio se agrega compuestos con –SH libres)
 Protección de lisis: lisis osmótica se impide haciendo el medio isotónico con concentración de sacarosa con un
soluto no permeable.
Agentes microbianos químicos: deben ser inocuos para el organismo huésped en las condiciones y concentraciones que se
usen, por eso hay muchos agentes microbianos pero solo muy pocos tienen utilidad practica.
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 Alcoholes: son toxicos para las células en concentraciones elevadas, por eso el alcohol isopropilico y metílico son
de uso común al 70% en agua. Actúan desnaturalizando las proteínas.
 Fenoles: muy fuertes. Se usan al 1 o 2 % en solución. Desnaturalizan proteínas. Todo desinfectante se compara
con el fenol (índice fenol)
 Metales pesados: todas las sales de mercurio, plata y cobre desnaturalizan las proteínas pero son muy perjudiciales
para los tejidos. Se usan a concentraciones muy bajas. El mercurio en bajas concentraciones y de forma tópica
combinado con compuestos organicos se usa como desinfectante: mercucromo y merthiolate.
 Agentes oxidantes: oxidan grupos –SH libres (peróxido de hidrogeno, iodo, cloro , hipocloito y compuestos que
liberan cloro lentamente.
 Agentes alquilantes: sustituyen hidrógenos por radicales alquilo (formalina/formaldehido, oxido de etileno)
 Detergentes: los compuestos que tienen la propiedad de concentrarse en la superficie se llaman tensioactivos. Hay
dos tipos : anionicos (tienen carga negativa como los jabones, sales biliares, desoxicolato de sodio que disuelven
los neumococos) y catiónicos (con carga positiva como el cloruro de alquil dimetil bencil amonio.
Agentes quimioterapéuticos y antibióticos

Existen muchos productos químicos capaces de unirse a determinados microorganismo pero no a la celula del hospedador;
esta selectividad y no la potencia antimicrobiana, es la característica principal y fundamental de la quimioterapia.
La selectividad en términos cuantitativos, es la capacidad para inhibir los microorganismo y por extencion a las células
tumorales a concentraciones tales que el huésped es capaz de tolerar. Se sabe que la parte activa es el metabolito que el
huésped sintetiza.
 Sulfoamida: agente quimioterapéutico que inhibe específicamente el recimiento bacteriano; químicamente son
análogos a los factores de crecimiento bacteriano. La sulfamida actua como un inhibidor competitivo del factor de
crecimiento. También se sintetizan como sulfas análogas de purinas y pirimidas, que actuarían como inhibidores
de la replicación viral. También se han sintetizado vitamias, aminoácidos con el agregado de un pequeño atomo
que altera la estructura pero cambia la propiedad química.
 Antibioticos: son inhibidores bacterianos específicos. Son sustancias químicas naturales producidas por el mismo
microorganismo pero que son activas para otros microorganismos. Estructura general: la mayoría son moléculas
grandes, complejas. Tienen grandes regiones hidrófobas y facilidad para penetrar en las bacterias. Son por lo
general estructuras poliédricas y con conformación espacial. Se clasifican en:
 Beta lactamicos: el blanco es la síntesis de peptidoglucano, impide generar la pared y estalla. Contienen un
anillo heterocíclico beta lactamico. Alta especificidad y baja toxicidad. (penicilina, cefalosporina,
cefamidas) los estephaloaurius liberan beta lactamasa (se inhiben con penicilina mas acido clavulanico)
 Aminoglucosidos: se los considera antibióticos de reserva. Contienen aminoazucares enlazados por unión
glicosidica (streptomisina, konamicina, gentamicina, neomicina)
 Macrolidos: contienen grandes anillos de lactona conectados a fragmetnos de azucares. Se usan como
remplazo de la penicilina en caso de alergia (eritromicina, espirocina)
 Tetraciclinas: contienen anillos de naftaleno (tetraciclina, clortetraciclina, todos de amplio espectro)
Sensibilidad de microorganismos a los antibióticos: generalmente los gram + son mas sensibles que los gram –
Clasificación según blanco:

 Pared celular: penicilina, cefalosporina
 Membrana celular: polimixina, polienos (nistatina, anfotermina)
 Procesos biosinteticos de proteínas: cloronfenicol, estreptomicina. Como antialérgico cicloheximida.
 Inhibidores de síntesis de RNA: rinfamicina
 Funcion en el ADN: quinolonas (acido enolidixico, norfloxacina), metronidazol, griseofulina.
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 Análogos a factores de crecimiento: sulfas

 Accion desconocida: izoniocina.
Los microorganismos que generan antibióticos lo hacen en el metabolismo secundario con gran actividad terapéutica y alto
valor económico. Dentro de los eucariontes (hongos genero penicilium) son los que mas producen y dentro de las
bacterias los actinomicetals y bacillus; todos los microorganismos aerobios productores de esporas.
Los antibióticos semisinteticos o sintéticos son por modificaion de los naturales.
Ausencia de autoinhibicion: hay muchos mecanismos naturales que impiden que los antibióticos maten o inactiven a los
microorganismos que lo producen: el penicilium tiene pared pero no peptidoglucano. Los fungis tienen ergosterol en la
pares; para destruir al hongo hay que inhibirlo o destruir este compuesto.
Actividad microbiana invitro: sirve para medir la potencia de los agentes antimicrobianos o la sensibilidad de un
microorganismo frente a una concentración conocida de fármaco. El CIM es la concentración inhibidora minima , que
impide el crecimiento de un inoculo de un microorganismo estandarizado. Un microorganismo se considera sensible
cuando el valor de su CIM es la cuarta parte de la concentración sérica máxima del fármaco que puede alcanzar con
facilidad. Se mide por método de dilusiono por difusión (kirly- Bover, antibiograma)
Unidad 6: GENETICA MICROBIANA

Cada bacteria se divide en 2 hijas con todas las características típicas de la especie., esta es dada por el ADN. Molecula muy
pequeña con gran potencia y compleja común a todo ser vivo. Es una cadena helicoideal con gran cantidad de información
dada por los escalones según un código que utiliza 4 sustancias (adenina, timina, guanina y citosina) que forman un
alfabeto biológico de 4 letras. Este código determina todos los procesos dentro de la celula. Cada peldaño de esa escalera
esta formado por dos bases . el gen es un trozo de ADN que determina un carácter; el conjunto de genes constituye el
cromosoma. El ADN bacteriano tiene solo 1 cromosona. El ADN es lineal, sin ramificaciones. Los costados de la escalera
están formados por sulfato y azúcar las cuales sirven como enlace entre cada escalon.
Gracias a la genética se puede saber: estudio de las mitocondrias, expresión génica y variabilidad geno/ fenotípica.
Ventajas: poco tiempo para producirse la alteración, enorme cantidad de individuos que se pueden estudair en poco
espacio, amplia distribución, poco gasto económico, ciclo de desarrollo simple de modo que todo los principios básicos de
la genética se pueden estudiar individual o colectivamente.
Desventajas: no puede ser estudiado un solo individuo y generalmente la reproducción es asexual (sin intercambio
genético)
Genotipo: conjunto de cromosomas de cada bacteria, todo un patrimonio sea o no manifiesto
Fenotipo: conjunto de expresiones visibles.
Alteraciones genotípicas
 De celula a celula
 Conjugacion: en bacterias análogas puede haber un intercambio de material genético por congujacion
sexual. Pasa a través de un factor que puede ser transferido de una celula a otra las cuales deben tener
cilias. Se llama plasmido al elemento gentico que se trasmite de una bacteria a otra y que no integra el
cromosoma. Este puede llevar multiples informaciones ( factor de resistencia determinado antibiótico,
producción de X enz). No es escencial para el cecimiento solo aporta una ventaja selectiva. El plasmido
codifica su propia replica, intetiza sus propias enzimas y produce bacterioximas, si se une al genoma
bacteriano se forma el episoma.
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 Recombinacion: dos mutantes de la misma especie que han perdido genes diferentes pueden asociarse y
formar entre los dos un nuevo individuo no mutado. Estudiando las frecuencias de las recombinaciones
se puede saber donde esta el gen dañado. La proporción de recuperar un individuo completo es baja.
 De ambiente a celula:
 Transformacion
 Mutacion: cualquier cambio en la organización del ADN o en la secuencia de ucleotidos produce
variación de características. Se comprobó que no siempre es heredable. Es génica si solo afecta un gen,
cromosómica si afecta varios cromosomas, genómica si afecta un genoma. Pueden ser espontaneas o
inducidas. Pueden ser producidas por agentes químicos (análogos del ADN, agentes alquilantes o
intercalantes) o biológicas (transposones capaces de integrar el genoma). Las mutaciones pueden ser
puntuales (cambian la expresión de una base) o deleccion (eliminan una porción de ADN)
 De celula a celula por virus o fago
 Transducción: proceso por el cual las células pueden transmitirse material genético a través de un fago el
cual puede arrastrar ocacionalmente en el momento de la multiplicación del mismo, algún carácter o gen
del huésped.
 Miogenia: se produce cuando un bacteriófago infecta una celula bacteriala, el material genético del virus
de une al cromosoma bacteriao y entra en estado de provirus.
Unidad 7: VIRUS
Agente infeccioso, parasito obligado intracelular. Pueden entrar miles en un coco. No están formados por células y no son
procariotas. No realizan actividad metabolica propia, no tienen movilidad independiente. Se reproducen dentro de la celula
huésped. Entran en vida cuando infectan a una celula.
 Huesped animal: celula eucariota virus animal

 Huesped hongo: dicofagos micovirus
 Huésped alga: cianofagos cianovirus
 Huésped bacteria: bacteriófago
Según el tejido que atacan:
 Nurotropicos: células nerviosas (rabia, encefalitis, poleo)

 Dermatotropicos: células epiteliales (rubeola, sarampión, viruela, herpes simple, verruga)
 Viscerotropicos: órganos internos (hepatitis, fiebre amarilla)
 Neumotropicos: afectan vías respiratorias (influenza, catarro)
 Pantotropicas: células de todo tipo ( dengue)
 Oncogenesis: promueven el desarrollo de tumores (fibroma de shope, sarcomas, leucemias)
Se compone por:
 Material genético: solo ADN o ARN, no los dos juntos, simple o de doble cadena.
 Capside: es muy importante transporta el material genético. Formado por proteínas cuya unidad es capsomeros.
Su función es transportar material genético, protegido, le da la morfología al virus, son simétricas y tienen
receptores específicos para cara huésped. Según su morfología puede ser poliédricas ( forma mas común
icosahedro, 20 caras triangulares, isocaedro desnudo – polimielitis – envuelto – herpes ) helicoideales (tubos largos
cuya capside es un cilindro hueco) y complejas ( tipo bacteriófago, tienen distintas estructuras dormadas por partes
separadas y cubiertas especiales)
 Envoltura: formada por lipoproteínas polipeptidicas, sirve de protección y para el transporte. Es amorfa pero
tiende a la esfericidad.
 Otras estructuras
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BACTERIOFAGO
Es un fago virus cuya celula huésped especifica es una bacteria o celula procariota, al ser un parasito de una organismo
unicelular, la relación huésped-parasito es la mas simple conocida.
Estructura
 Cabeza: formada por capside o microcapside. Generalmente micosaedrica que varia de forma y tamaño y contiene
el acido nucleico.
 Collar: une la cabeza con la vaina
 Vaina: tiene diferentes longuitudes pero es contráctil
 Placa basal: donde se encuentran las espiculas, las fibras caudales (patipas) y el nucloide (aguja)
Replicacion
Las dos partes fundamentales que forman el virus (capside y acido nucleico) se copian dentro del huésped. Cuando un
bacteriófago infecta al huésped se sintetizan vibriones completos. Se conocen segul la replicación dos tipos de
bacteriófagos: lisogenico (avirulento o temperado) y lítico (virulento)
Lisogenia
1. Absorcion
2. Penetracion: la lisozima rompe la pared e ingresa solo el material genético
3. Formacion: llega la replicación y entra en estado latente
Litica: termina en lisis, el profago se separa del genoma bacteriano, toma el mando de la síntesis proteica en ribosomas.
Cuando se replican los bacteriófagos la bacteria muere y libera los nuevos fagos. Solo el virus animal
1. Absorción: se adhiere primero en forma ionica que depende del ph y después de forma irreversible.
2. Penetración: fagocitosis – la celula fagocita al virus por lo que entra con toda su estructura dentro de la celula
huésped, generalmente es realizado por virus desnudos- o fusión – la realizan los virus envueltos. Hay interaccion
entre envoltura lipoproteica del virus y membrana plasmática que resulta en el desprendimiento de la nucleo
capside viral y la entrada al citoplasma.
3. Desnudamiento: separación de la capside. Proceso intracelular citoplasmático realizado por enzimas especificas, se
libera el ADN o ARN
4. Replicacion: el ADN viral penetra el nucleo y transcribe una copia al ADNm los que son procesados y
transportados al citoplasma donde los ribosomas sintetizan las proteínas virales estructurales (que forman la
capside) y las no estructurales.
5. Ensamble: estas unidades proteicas se ensablan formando nuevos viriones.
6. Maduración: los virus envueltos necesitan envolverse mediante extrusión, que pasa en el nucleo.
7. Liberacion: se rompe la membrana de la celula huésped y se liberan los viriones.
Bacteriocinas: polipeptidos de gran especificidad bactericida sobre microorganismos internamente realcionados. Colosinas,
atacadas por las enzimas gástricas.
Micofagos: el hongo mas estudiado es el Penicillum chysogenum. Son todos ARN-2 bicatenal e icosaedricos, llamados
micorna. Se encuentra en las células mas viejas del hongo y en las esporas que contienen las partículas virales latentes.
Cianofagos: el mas estudiado es el ADN-2 bicatenario.
Herpes: son ADN-2 causan el herpes simple, varicela, herpes zooster, mononucleosis. Tienen la capacdad de permanecer
latentes mucho tiempo, se activan muchas veces por stress.
Retrovirus: virus animales, ARN, tienen una enzima llamada transcriptasa inversa o reversa a través de la cual sintetizan
ARN viral de simple y doble cadena y luego cambiar el sentido normal de la información genética. Replican de forma
inversa. Por lo tanto pueden formar ADN que se integra a la celula eucariota (SIDA)
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Viroide: son virus pequeños, solo atacan plantas superiores, no tienen envoltura ni capside, son solamente una molecula de
ARN-1 circular. Son resistentes a la acción enximatica porque tienen extremos libres no contiene genes que codifican
proteínas.
Priones: agentes proteicos autoreplicantes infectivos que carecen de acido nucleico, solo son capside. Infecta, se replica y
muta. Son patógenos para animales y el hombre, producen infecciones lentas (encefalopatías subagudas espungiformes
transmisibles ESET o KURU-en el hombre- vaca loca- ganado)
Interferones: son unas familias de proteínas pequeñas con acción antiviral que se aisla generalmente de leucocitos
infectados por virus. Son muy potentes. Su acción no es directa sino a través de la actividad de los genes que codifican para
las proteínas hay dos tipo: INT I (alfa y beta) y INT II (gama) sus desventajas son el corto tiempo de eficacio, no tienen
eficacia sobre la síntesis ya iniciada, puede producir efectos toxicos en el huésped, se necesita elevada concentración para
que actúen. La ventaja es que son específicos y se usan contra los oncovirus.
Aislamiento e identificación:
Pasos
1. Recolección adecuada y manejo cuidadoso hasta incubación. Se usa animales suceptibles (se inocula el virus en el
animal entero inyectándolo, se extrae el tejido rico en virus, se tritura se centrifuga y se filtra – las desventajas son
que se disemine el virus por todo el organismo, que el organismo pueda contaminar bacterias –para separarlo se
usa la filtración bacteriológica), embrión de pollo o huevos embrionados (se infecta el virus en el feto, en la
membrana coriclotoidea o en el saco vitelino, luego se centrifuga) y cultivos de tejidos seleccionados (se eligen
células jóvenes generalmente de riñon y se colocan en una capa pegada al recipiente o suspendidas en liquido. Para
separarlas se usa ultrasonido o acción enzimático.
2. Cuantificacion: se realiza midiendo efectos sobre las células infectadas. Generalmente se mide como UIV (unidad
infectiva vírica) para determinarla se usa el ensayo de picos de lisis (cuando una particula vírica inicia una infección
ocurre una zona de lisis o de inhibición de crecimiento, esta se llama colva, cada una de estas se origina por el
incio del proceso de replcacion de un solo virion –para bacterias – si es un virus humano – aparecen células que
incrementan su velocidad de crecimientoy en vez de colvas se obtienen focos infecciosos – se llama UFC unidad
formadora de colva o UFFI unidad formadora de foco infeccioso) o también se usa el ensayo de infección en
animales suceptibles ( se infecta una serie de animales y se cuentan los vivos y los muertos, se toma la dilución que
mata al 50% del lote)
Nuevos virus
Pandoravirus P.australia P.Chili – pueden llegar a medir como una bacteria no se sabe si son patógenos o no.
Chikungunya: artritis epidémica o fiebre chikungunya es un alfa virus que se trasmite por la picadura de un mosquito.
Produce fiebre alta, dolore articulares de miembros inferiores. No existe tratamiento.
Ebola: virus hemorrágico. El contagio es directo. Existe vacuna.
Mers.Cov: síndrome respiratorio de oriente próximo. Es un coronavirus. Provoca fiebre, tos, dificultad respiratoria,
neumonía, síndromes gastrointestinales. No hay ni medicación ni vacuna. Transmisión por contacto directo, sangre y
fluidos.
HPV: es un virus oncogénico, sintomático o asintomático.
Virus que se vuelven antivirus: A causa del abuso de antibióticos se diseñaron bacteriófagos que ataquen bacterias
patogenas
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Unidad 8: HONGOS
Protistas superiores, organismos eucariontes, uni o pluricelulares, heterótrofos, saprofitos, de vida libre o patógenos,
parasitarios.
Formados por TALOS (Talofitos), se diferencian con las plantas superiores en que no tienen raíz, tallo u hoja. La
diferencia con algas es que los hongos no poseen clorofila. La diferencia con bacterias, es su tamaño y que son eucariontes.
Su unidad estructural filamentosa y tubular se llama HIFA, el entrecruzamiento de las hifas se llama MICELIO. Las hifas
pueden formar paredes transversales llamadas TABIQUES. Existen dos tipos de micelios: aéreo o reproductor (contienen
el micelio y donde se forman las esporas reproductivas, las cuales a veces liberan pigmento) y profundo o vegetativo (seria
como la raíz del hongo, su función es asimilar nutrientes, agua y fijar al hongo, a veces puede ser superficial)
Clasificación según reproducción

 Perfectos: Reproducción sexual y asexual
 Imperfectos: Solo reproducción asexual (son los de mayor importancia clínica)
Clasificación según tabicación

 No tabicados: Phycomycetes (H. Perfecto), la reproducción sexual la realizan por gametos y esporas y la asexual
por esporangios.
 Tabicados: Ascomycetes (H. Perfecto), la reproducción sexual la realizan por ascosporos y la asexual por conidios
y gemación. Basidiomycetes (H. Perfecto), la sexual por basidiosporos. Deutenomycetes (H. Imperfecto) la
asexual por esporas vegetativas, son muy estudiados en clínica.
Cuando cualquier espora cae en un medio adecuado, produce TUBOGERMINAL (Se genera el tallo y el miscelo, el cual
forma una colonia visible).
Para la identificación de hongos hay que tener en cuenta el tipo de espora y la forma de esporulación.
Esporulación asexuada
 Desarrollo de espora directamente a partir de la hifa, micelio vegetativo. TALOESPORO
o Blastoesporos (Cándida candidum)
o Clamidosporos (Cándida albicans)
o Artrosporo (Cándida geotridum)
 Desarrollo de la espora a partir de hifas especializadas.
o Conidios: son esporas maduras producidas aisladamente o en grupos por hifas vegetativas especializadas
llamadas conidióforos. Se separan del punto de unión por pinzamiento y compresión. Muchas veces se
dilata formando vesículas y sobre esta superficie se forman pedúnculos donde salen los conidios en
cadenas. Pueden ser de forma catenoide (Denicillium) o de estigma (Aspergillus) hay algunos que forman
macroconidios, grandes tabicados y fusiformes; y otros microconidios, que son pequeños, unicelulares,
redondos, elípticos y piriformes
o Esporangiosporo: Las hifas no tabicadas se dilatan en un extremo formando vesículas las cuales están
rodeadas por las esporas cubiertas de una membrana llamada esporangio (Rhyzopus)
Esporulación sexual
Forman estructuras de morfología complicada que facilitan la fusión nuclear, da como resultado esporas especializadas
llamadas cigotos, según sus formas hay distintos nombres:
 OCSPOROS
 ASCOSPOROS
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 BASIDIOSPOROS
 CIGOSPOROS
Identificación de hongos
1. Características macroscópicas: Observación de las características de las colonias (hay que mirar por el reverso para
identificar el miscelo vegetativo, se verifica si la colonia es de crecimiento rápido 2 a 3 días)
2. Características microscópicas: Se ve la gota de cultivo con objetivo de 10 x o 40 x, se describen características
morfológicas.
3. Características microscópicas con tinción: Desecar, fijación, a) Gram: micelos y esporas +) b) Baar o Zihel c)
Tinta china: encapsulados. Las coloraciones específicas son Lactofucsina rosa a fucsia y Cottonblue en fenol PCB
celeste a azul.
4. Cultivos de hongo en portaobjeto (gota pendiente y microcultivo). Se usa un porta con excavado. Se corta un
cuadrado de agar y se llena el centro del porta se siembra el hongo en las paredes laterales opuestas justo en el
medio. Se coloca el cubre se incuba a 25°C por 24 hs.
5. Cultivo de hongos en medios selectivos (in vitro): En placa o caldo igual que las bacterias con la diferencia que se
necesita aumentar la esporulación y disminuir la forma vegetativa. Los medios llevan antibióticos de amplio
espectro para evitar contaminación bacteriana (Cloronreicol 0.05 mg/ml y ciclohemida 0.5 mg/ml). Se incuba a
temperatura óptima de 25°C de 7 a 10 días. Los hongos son acidofilos. Medio básico es Agar sabouraud dextrosa
(SDA SOB), papadextrosa, cerveza no fermentada, infusión cerebro corazón, tomate, czapec, etc.
6. Estudios fisiológicos y nutricionales: e usa para estudiar fermentación de azúcar, asimilación de nitratos, de
utilización de nitrógeno y carbono, etc.
7. Cultivo in vivo en animales de investigación: Identificación de determinadas especies.
Dimorfismo
Los hongos pueden ser saprofitos, fase micelos t° ambiente o parasito fase tisular t° corporal. Hay hongos que son
dimorfos, cuando pasan a la fase tisular son con estructuras de levaduras. Ejemplo: Histoplasma Capsularum.
Levadura
Hongos unicelulares que forman pseudomicelos. En agar las colonias son redondas, grandes, brillantes, convexas,
cremosas y de borde liso. Se los confunde con bacterias. Ejemplo: cryptococus.
Micosis: enfermedades producidas por hongos.
Se conocen 60 mil especies de hongos solo el 0.01% es patógeno. El hombre es un huésped accidental
Clasificación de micosis:
 Superficial: Piel, pelo, uñas (cutánea o subcutánea)
 Sistémica: profundas y generales, atacan órganos internos. (Cryptococus)
Desde el punto de vista inmunológico los hongos producen alergias y una hipersensibilidad (ambas reversibles). Se
producen por inhalar esporas. Las más comunes son las neumonitis alérgicas.
Quimioterapia
Los hongos tienen gran cantidad de ergosterol en su pared celular que lo necesita para la integridad de la misma. Todo
antimicótico tiende a fijarlo (ej. anfoteriana B) o a inhibir la síntesis (ej.: azoles y griseofulina)
En tópico los más usados son: nistatina, clotrimazol, miconazol, tolnaftato.
Los hongos saprofitos con frecuencia suelen ser:
 Contaminantes: tanto de muestras clínicas o medios de cultivo de laboratorio donde infectan otros cultivos (son
flora acompañante)
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 Oportunistas invasores: atacan personas con defensas bajas, con tratamiento de medicamentos por mucho tiempo
(se producen súper infecciones micoticas muy difíciles de erradicar)
Los géneros saprofitos más comunes son: Penicillium, Aspergillus, Fasarium, Rhizopus, Mucor.
Micotoxinas. Toxinas de los hongos. Producen graves intoxicaciones agudas o crónicas. Se pueden ingerir por medio del
hongo venenoso. Provocan daño tisular, hepático y renal, pueden llevar a la neoplasia (células muertas anormales) tisular.
Las más importantes son las AFLATOXINAS, las generan las Aspergillus flavus contaminantes del cereal. Dentro de las
aflatoxinas hay metabolitos como el ácido lisérgico que producen alteraciones mentales.
Unidad 9: Taxonomía
Taxonomía o sistemática es la metodología empleada para la clasificación biológica. Contiene una descripción e
identificación de las unidades taxonómicas básicas (especie) en un segundo paso hay un ordenamiento y catalogación.
La taxonomía se ocupa de imponer un orden en el aparente caos de la naturaleza debido a su diversidad biológica
La unidad taxonómica usaba en bacteriología es clon o cepa (es una población de células genéticamente idénticas
provenientes de una sola célula)
La metodología empleada consiste en estudiar las características de los distintos organismos que separan grupos entre sí.
Cada grupo con caracteres comunes determinan una especie, las distintas especies relacionadas entre si constituyen los
géneros. Los géneros se agrupan en familias o tribus y estas pertenecen a un reino y a un orden
Aparte de los géneros se los clasifica según tipo serológico y ATCC.
Los estudios completan caracteres morfológicos, organolépticos, fisiológicos, bioquímicos, estructurales, funcionales,
inmunológicos, patológicos, energéticos, ecológico, etc.
Características de los cultivos

Colores, componentes de la pared, inclusiones citoplasmáticas, productos de reserva, metabolitos, capsulas, esporas,
flagelos, requerimientos nutricionales, capacidad para la utilización de C, N, S, productos de fermentación, tolerancia a pH,
temperatura, salinidad, sensibilidad a distintos agentes fisicoquímicos, relaciones simbióticas, caracteres serológicos,
hábitat. Todo esto es estudiado por la taxonomía tradicional.
También es utilizada la taxonomía molecular o genética (sirve para dilucidar el grado de relación genética de organismos
distintos cuyas últimas consecuencias seria la determinación de la secuencia de bases de ADN del genoma completo del
organismo; puesto que canto más se asemejen las secuencias de dos organismos más estrechamente será su semejanza
genética. Si dos organismos pueden aparearse y recombinarse pueden que estén relacionados ya que este proceso requiere
un gran análogo entre moléculas de ADN. En algunos organismos hay considerable variación en la frecuencia de los pares
AT y GC y esa variación se usa en taxonomía. El porcentaje molar de GC/AT purificado puede valorarse directamente
por un análisis químico o indirectamente por su función o la temperatura a la cual se separan los filamentos de ADN. La
composición de bases del ADN de distintos organismo varía entre un 22 – 74%. Si dos organismos difieren en el
contenido de GC en más del 10% tendrán pocas secuencias de bases en común, por lo tanto no tendrán relación entre sí.
En el ADN de doble filamento siempre la porción de A es igual a la de T y la de G es igual a la de C.
La secuencia determina la diferencia entre organismos. Los estudios demuestran que:
1. Los organismos con fenotipos semejantes tienen a menudo proporciones parecidas de ADN.
2. Si hay proporciones de bases muy distintas, se confirma que la relación no es estrecha.
3. Aun si la proporción de bases es igual no se asegura la relación.
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El método más utilizado es la hibridación del ADN y homologación de acidos nucleicos.
Hibridación
Excelente para determinar semejanzas en la secuencia de bases entre distintos organismos. Si el ADN se desnaturaliza por
calor y se deja enfriar solo lentamente, las cadenas sencillas se reforman generando nuevas cadenas dobles (híbridos). La
velocidad de unión y el rendimiento final dependen de muchos factores, longitud media de cadena, temperatura de re
asociación, fuerza iónica del medio. En este método puede ocurrir apareamiento al azar pero generalmente se aparean las
complementarias.
Se se tratan dos especies supuestamente emparentadas, se obtienen moléculas hibridas que se pueden cuantificar. El
método de hibridación se usa para estudiar proximidad genética entre dos organismos ya que revela semejanzas o no entre
ácidos nucleicos. Generalmente uno de los ácidos se marca radioactivamente.
En las bacterias, como grupo, están muy diversificados y se puede diferenciar hasta en un 95%. En cambio los superiores
como mamíferos están muy relacionados, hasta en un 20 – 30% de semejanza. Las cepas de bacterias con un alto
porcentaje de semejanza mayor a un 90% se clasifican dentro de la misma especia. En bacteriología hay un manual
(Bergay) donde están las bacterias conocidas basándose en taxonomía tradicional y genética, pero no tuvo en cuenta la
filogenia (estudio de la evolución)
Unidad 10: Familias

Orden: PSEUDOMONADAL
Familia: PSEUDOMONADACEAE
Géneros:
 PSEUDOMONAS
 AEROMONAS
 LOPHOMONAS
Especies de PSEUDOMONAS
o Ps aeuroginosa
o Ps pseudomallei
o Ps maltophilia
o Ps fluorecencs
o Ps cepacia
o Ps putida
Características de la familia
Bacilos Gram (-), se elongan, móviles. Pueden tener flagelos monotricos o lofotricos. Se los encuentra libre en la
naturaleza. Como parasito en agua, suelo, intestino. Sus patologías son por afecciones externas. Patógeno oportunista. La
mayoría libera pigmentos solubles en agua. Se la puede aislar de la piel y de heces humanas.
Características de PSEUDOMONA
1. Ps aeuroginosa: bastón fino gram(-), puede ser monotrica (1 flagelo) o lofotrica (hasta 3 flagelos). Son muy
móviles. En cambio las enterobacterias tienen flagelos peritricos. Es un aerobio estricto, por eso produce muchas
lesiones en la piel, a diferencia de las enterobacterias que son anaerobias facultativas. Sus colonias son aplanadas,
grandes, opacas, aspecto de vidrio esmeril, invasoras olor a frutas a diferencia de las enterobacterias que tienen
olor fétido. Libera dos pigmentos solubles en agua piocianina que es verde azulada y fluoresceína que con uv
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fluorece pero es incolora (los medios de cultivo usados para que liberen pigmento son: Pseudo P inhibe la
fluoresceína es verde azulada y Pseudo F inhibe la piocianina es incolora pero con uv fluorece) para que se liberen
dichos pigmentos se debe incubar a temperaturas mayores o menores a la mínima. Son psicofilicas, pueden crecer
a 10-20°c o temperaturas bajo cero, en cambio las enterobacterias son mesofilas. Son enzimas oxidasa (+), para
saber esto se usa la reacción de Kovac (oxalato de tetrametilfenilendiamina) da un quelato coloreado, las
enterobacterias son oxidasa (-). Para ver estas características se usa agar OF (verde oscuro, se siembra un tubo
aerogenico y uno anaerogenico) se le coloca glucosa como hidrato de carbono, si hay pseudomona en el anaerobio
muere y el tubo sigue verde, en el aerobio vive y vira al amarillo si hay enterobacteria tanto el tubo anaeróbico
como aeróbico serán amarillos por que la fermentan y oxidan. El medio diferencial para Ps aeuroginosa es agar
cetrimide (bromuro de cetil trimetilamonio) es un inhibidor, agar blanco opaco la única que puede crecer es la
fluorecens pero no tiene colonia típica; otro medio es el gluconato. Muchas cepas son hemolíticas, reduce nitrato a
nitrito, licuan la gelatina. Las infecciones son intrahospitalarias, inmunodeprimidas, por catéteres o traqueotomía,
quemaduras. Poseen una capsula de alginato (generan biofilm), muy densa, formada por hexopolisacarido muy
similar al que tienen las algas, muy pegajosa y forman grandes colonias, atacan al alveolo(producen neumonías
atípicas), liberan exotoxinas (exotoxinas A muy similares a la toxina difteria), penetran en el citoplasma liberando
un polipeptido citotoxico, también libera exoenzima S (es una ADP ribotransferasa), también producen proteasas
extracelulares (elastasas, atacan a la elastina produciendo hemorragia) y liberan fosfolipasa.
2. Ps pseudomallei: basilo gram (-) produce meliodosis en el hombre, produciendo neumonía aguda toxica seguida
de septicemia grave (infección en la sangre), se la encuentra en zonas pantanosas con humedad. La colonia es
arrugada y no tiene pigmentos con olor a tierra amoniacal.
3. Ps maltophillia: libera un pigmento amarronado, sin aroma. Se las encuentra en meningitis,
Orden: EUROBACTERIAL
Familia: ENTEROBACTERIACEAE
Géneros:
 ESCHERICHIA
 CITROBACTER
 KLEBSIELA
 SHIGELLA
 SERRATIA
 ARIZONA
 YENSINIA
 HAFNIA (L+)
 PROTEUS
 PROVIDENCIA
 SALMONELLA
 MORGONELLA
 EDWARSIELA (L-)
Características de la familia:
Gram (-), generalmente son basilos, coco-bacilos o pleomorficos, anaerobios facultativos (fermentan y oxidan), mesofilos
(22°-37°C), fermentan la glucosa con producción de ácido y algunos con producción de gas, algunos son móviles y tienen
flagelos peritricos, oxidasa (-), poseen muchas fimbrias porque colonizan la mucosa interna del intestino. Son todas
catalasa (+) y reducen el nitrato a nitrito.
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Algunas liberan pigmento como la serratia (rojo) y el proteus ( verde); algunas son muy mucosas como la klebsiela,
salmonella y shigella; algunas forman capsula muy grande como la klebsiella.
PSEUDOMONAS ENTEROBACTERIAS
Aerobias estrictas Anaerobias facultativas
Oxidan la glucosa Oxidan la glucosa con
producción de acido y algunas
gas
Lactosa (-) Generalmente son lactosa (+)
Todas son móviles Algunas son móviles
(monotricas o lofotricas) (peritricas)
Oxidasa (+) Oxidasa (-)
Olor frutal Olor fetido
Características de las colonias

Son grandes, grisáceas, convexas y de borde liso
Identificación o marcha de enterobacterias

Para todas:
 Oxidasa (tiene que dar negativa, si es positiva es pseudomona)

 Gram (-)
 Olor fétido (vs pseudomona que es frutal)
 Medios usados son: CLED, Levine o EMB y MacConkey (Lactosa + o - )
 Se incuba en TSA o TSB 24 hs
 IMVIC (indol; rojo de metilo, Voges-proskaver – citrato): orientativo del genero
Pruebas bioquímicas
1. Fenilalanina: (AFA) (+) libera enzima fenildesaminasa que desarma la fenilalanina y la lleva a ac. Fenilpiruvico. Se
siembra en superficie, el agar es blanco, si hay crecimiento se agrega reactivo de FeCl3, si da amarillo es negativo y
no hay acido si es positivo es verde y hay producción de acido (puede ser proteus o providencia)
2. Citrato Simmons: (CS) (+) el microorganismo utiliza el carbono del citrato como única fuente de carbono. Se
siembra en pico de flauta. Tiene un indicador verde oscuro, si es positivo se alcaliniza y da color azul, si es
negativo queda de color verde.
3. SIM: (sulfhídrico, indol , movilidad) se siembra en un tubo en profundidad, es ambar claro opaco. Si da color
negro es sulfhídrico (+), si hay movilidad crece hacia las paredes, si es indol positivo se genera un anillo rojo vivo(
ataca al triptófano y lo transforma a inol, se detecta con reactivo de Kovac), si es indol negativo es un anillo beige.
4. TSI
5. Urea
6. Urea (BAM)
7. V-P
8. ONPG
E.Coli
Es parte de la flora intestinal humana, interviene en los procesos gastrointestinales (absorción de vitamina K y B), es gram
(-) anaerobio facultativo, IMViC (++ --), se utiliza para replicar vectores y para ingeniería genética se usa las cepas
modificadas.
Produce infecciones urinarias, diarrea, gastroenteritis, meningitis, septicemia.
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Patogenicidad
 EPER (enteropatogenica), diarrea, no produce toxina, proteína intima como factor de adherencia, invasivas
moderadamente, respuesta inflamatoria, o ECEP
 ETEC (enterotoxigenicas), mucosa intestinal, diarrea producida por toxinas, no cambia la mucosa, enterotoxias
termolábiles.
 EIEC (enteroinvasiva), lactosa (-), inmóvil, diarrea sanguinolienta, libera calcio (solidificación), daña al epitelio
intestinal y produce artritis y arteroesclerosis.
 EAEC (enteroag----gatina), solo se produce en humanos, gran cantidad de fimbrias, se aglutinan las células en
cultivos celulares, diarrea y fiebre, tienen hemolisina como factor de virulencia, las toxinas son termoestable
codificada por plasmidos
 ADEC , adherencia difusa, adherencia total al epitelio intestinal, niños maldesarrollados y malnutridos.
 STEC (productoras de toxina shiga) produce colitis hemorragia, única fimbria polar largo de adherencia, la toxina
se produce por un fago.
Vias de transmisión de STEC

Medio ambiente
Animales
Alimentos varios
Carne
Humano
Leche
Persona a persona
Agua
Medios de cultivo y diferenciaciones

 Agar RAMBACH: se prepara en el momento con agua esteril, color rosa opaco, inhibidor de gram (+) sal biliar y
desoxicalato de sodio, fermentador lactosa y propelenglicol, la salmonella produce acido y genera una colonia roja.
Las colonias incoloras son lactosa (-) y las azul verdosas o azul violeta son lactosa (+).
 FLUOROCULT: para determina e-coli, revelado por luz uv, resultado a las 18 hs. Con el reactivo de Kovac tiene
que dar rojo, indol (+).
 Kits: Sistemas de multipruebas bioquímicas en miniatura en el cual se encuentran minicubas donde esta el sustrato
mas el agar.
o Enterotub Roche: te da como resultado una cifra que después se puede ver en un manual la especie de
cepa que es.
o API de Biomerié
COLIFORMES
NO es un género, es un grupo de bacterias entéricas que tienen propiedades bioquímicas en común:
o Basilos Gram (-) entéricos

o Aerobios o anaerobios facultativos
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o Fermentan la lactosa con producción de acido y gas a 35-35°C

o Escherichia coli, klebsiela, enterobacter, citrobacter
o Generalmente su origen es materia fecal del hombre y de los animales de sangre caliente, pueden estar en aguas,
suelos y semillas.
o Son indicadores de contaminación con materia fecal, del buen tratamiento de aguas.
Coliformes totales = Coliformes fecales (E.Coli) + Grupo AIC (Aerobacter Intermedium Cloacae)
Si es de origen animal, los coliformes tienen rhoduccus (bacteria que no esta en los humanos)
Métodos para determinación de coliformes
Willison: utiliza dilusiones de tubos generalmente por triplicado de 3 concentraciones ta establecidas, se pueden utilizar
una serie de tubos de un N variable y luego los resultados se buscan en tablas estadísticas, es un estudio probabilístico los
resultados se expresan en NMP (numero mas probable) de bacterias coliformes cada 100 ml de muestra originaria, es en
dos etapas ,caldo McConkey, violeta que por acidez vira al amarillo y caldo Brilla o caldo verde brillante, se colocan las
campanitas de Durham.
1° paso
10 ml de muestra 1 ml de muestra 0.1 ml de muestra

10 ml de agar 5 ml de agar 5 ml de agar
Caldo McConkey doble Caldo McConkey simple Caldo McConkey simple
Se incuba 35 – 37°C
(+) es si vira al amarillo , es turbio y contiene gas
Tiempo de Tubo con 10 ml de Tubo de 1 ml de Tubo de 0.1 ml de

incubación muestra muestra muestra
24 hs 3⁄ 1⁄ 0⁄
5 3 3
48 hs 3⁄ 2⁄ 0⁄
5 3 3
𝑁𝑢𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑝𝑜𝑠𝑖𝑡𝑖𝑣𝑜𝑠
⁄𝑁𝑢𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑡𝑢𝑏𝑜𝑠 𝑞𝑢𝑒 𝑠𝑒 𝑠𝑒𝑚𝑏𝑟𝑎𝑟𝑜𝑛
En la tabla:
VS Combinacion de tubos (5-3-3)

Combinación de resultados (3-2-0) Se obtiene un X
X es directamente la cantidad o número más probable de coliformes totales en 100 ml de muestra original.
2° paso
De cada tubo positivo se pasa una anzada a tubos chicos de McConkey simple. Se realiza la tabla nuevamente pero se
incuba a 44°C (E.coli es la única resistente a esa temperatura)
Tiempo de Tubo originario de 10 Tubo originario de 1 Tubo originario de 0.1

incubación ml de muestra ml de muestra ml de muestra
24 hs 1⁄ 0⁄ 0⁄
3 2 0
21
48 hs 2⁄ 0⁄ 0⁄
3 2 0
En la tabla correspondiente se extrae otro número a
VS Combinación de tubos (3-2-0)

Combinación de resultados (2-0-0) Se obtiene un a
Se hace lo mismo con cada tubo positivo a 35-37°C en el caldo Kosser (para grupo AIC), en la tabla se obtiene b entonces:
𝑥 .𝑎
𝐸. 𝑐𝑜𝑙𝑖 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒𝑠 =
𝑎+𝑏
𝑥 .𝑏
𝐴𝐼𝐶 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒𝑠 =
𝑎+𝑏
𝐸. 𝑐𝑜𝑙𝑖 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒𝑠 + 𝐴𝐼𝐶 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒𝑠 = 𝐶𝑜𝑙𝑖𝑓𝑜𝑟𝑚𝑒𝑠 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒𝑠
El límite de confianza de este método es del 95%.
Si da todo 0 el menor valor encontrado en la tabla es 3 es decir que se informa menor a 3.
Si se siembra dilusiones se realiza la multiplicación de x por la inversa de la dilusion.
Agua potable
1. Recuento de bacterias mesofilas por milímetro (UFC). Se acepta hasta 500.

2. Coliformes totales. Se acepta menor a 3.
3. E.coli (coliforme fecales). Ausente
4. Ps aeuriginosa. Ausente
Orden: BACILLALES
Familia: STAPHYLOCOCCACEAE
Género: STAPHYLOCOCCUS
Especies:
 AUREUS
 EPIDEMIS
 SOPROPHYTICUS
Características de la familia
Son cocos Gram (+), catalasa (+), no forman esporas, son facultativos, holotolerantes (toleran grandes cantidades de sal),
se agrupan en racimos
Características del genero

Algunos liberan pigmentos
Características de las especies

1. Aerous: (manos, faringe y fosas nasales), se transmite persona a persona, a través de ropa, juguetes. El vehículo es
el agua o los alimentos. Produce intoxicaciones alimentarias por toxinas. Son resistentes a la penicilina porque
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tienen enzima β- lactamasa. Poseen capsula lo que las hace muy resistentes. Las colonias son medianas, lisas,
amarillas, β hemolíticas. El pigmento es la estafiloxantina que es insoluble en agua.
Propiedades que permiten distinguir staph de strept

 CATALASA: Staph (+); Strept (-) – La catalasa transforma el agua oxigenada en agua y oxigeno. El positivo se
manifiesta por producción de burbujas (no se utiliza en sangre por que da un falso positivo.
 REDUCCION DE NITRATOS: Staph (+), Strept (-) – En un tubo con caldo nitratos, se emulsiona el inoculo,
incuba 24-48 hs, 35°C. Se revela con ácido sulfonico y αnaftilamina, esto detecta nitritos y reacciona con el
formando una sal la cual reacciona con la naftilamina para dar color rojo. Para verificar se realiza una
contraprueba, se le agrega zinc que reduce los nitratos a nitritos, si al agregar zinc no hay color significa que es
reductor de nitratos positivo (Staph). También se puede usar una campanita de durham para ver gas.
Propiedades que permiten diferenciar S. aureus del resto de los Staphilos /S.Epidemis
Pruebas S.aureus Resto staph
Manitol Fermenta No fermenta
Coagulasa Produce No produce
Dnasa Positivo Negativo
 Agar manitol salado: manitol NaCl 6.5%, rojo fenol (ac: amarillo; alc: rojo). Medio de cultivo selectivo (por ser
halotolerante) y diferencil (diferencia por colores). El S.aureus genera colonias amarillas y medio amarillo, el S.
epidemis colonias rojas.
 Coagulasa es una enzima que coagula el plasma, se encuentra en superficie de pared celular y también la libera el
staph.
o Se prueba en el portaobjetos, plasma de conejo si se pone pegajosa es coag (+), si da (-) se pasa a tubo
para determinar coagulasa libre.
o En tubo, se utiliza 0.3 – 0.5 ml en tubo, se coloca el inoculo y se deja 4 hs a 37°C en baño termotatizado.
Se realiza la primera lectura acostando el tubo para ver el coagulo viscoso. Luego se realiza otra lectura a
las 24 hs y vemos si hay formación de coagulo.
 La Dnasa hidroliza el ADN. Se coloca en agar Dnasa (blanquesino), se siembra en forma de línea recta y hay que
revelar con HCl 1 N. El DNA puede estar polimerizado, precipita el ADN de color blanquesino. Si el DNA esta
hidrolizado el agar se vuelve transparente.
 Se puede realizar otra prueba especifia de S.aureus: Agar Boird Parker (agar base esterilizado) se le agrega yema de
huevo (tiene lecitina y el ureus tiene lecitinasa se produce colonias negras con un halo de glicolisis amarillo) y
telurito (el aureus reduce telurito a telurio dando colonias negras). El S.Epidemis puede reducir telurito pero es
lecitinasa (-) por lo que tiene colonias grisáceas.
Factores de virulencia del S.aureus

 Capsula:
 Polisacárido extracelulares que permiten adhesión entre células permitiendo el aureus dormar biopeliculas.
 Toxinas:
o α toxina estafiococcica, forma poros en las membranas celulares lo que produce lisis. Tiene ainidad r los
hefotositos,miocitos, eritrocitos y queratinocitos. Produce dermonecrosis.
o Β toxina, es una esfiomielinasa afectando axones.
o Luocidina, destruye leucocitos
o Exfliatina, es una enzima proteolítica rompe los grupos aminos degradando proteínas que mantienen
unidos los querotocitos
o Toxina del shock toxico, produe fiebre alta, hipertensión, allo multirganico.
o Enterotoxina, intoxicación, inducen a la perdida de liquido en células intestinales, es termoestable.
o Coagulasa, el saph se mete en los coagulos.
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o Β lactamasa, rompe el anillo β lactamico de la mayoría de las penicilinas. Hace que el aureus sea resistente
a la penicilina. Se utiliza acido clavulanico para detener la β lactamasa.
Orden: LACTOBACILLACEAE
Familia: STREPROCACCACEAE
Genero: STREPTOCOCCUS
Especie:
 Pyogenes
 Agalactiae
 Faecalis (enterococcus faecalis)
 Bovis
 Viridians
 Pneumoniae
Caracteristicas del genero

 Cocos gram (+)
 Catalasa (-)
 No esporulados
 Anaerobios facultativos
 Inmóviles
 No reducen nitratos
 Cocos en cadena (los pyogenes son los mas largos y los neumoniae mas cortos )
Habitat:
 Pyogenes: si bien no es flora normal en el humano , hay portadores sanos en la nasofaringe (produce faringitis)
 Agalactiae: flora normal del intestino y puede estar como flora normal del aparato genital femenino
 Pneumococo: ídem pyogenes (genera neumonías)
 Faecalis: florma normal intestinal, se lo suele buscar en alimento y aguas por ser contaminante fecal.
Clasificacion
Según la hemolisis en agar sangre (1900)
 β hemolíticos : del subgrupo pyogenes (representante)

 α hemolíticos: subgrupo viridians (representante)
 el feacalis puede ser α , β o δ por lo que no entraba en nngun grupo.
Según la clasificación de Rebecca LANCEFIELD (1933) – basada en las diferencias antigénicas.
 Grupo A: (antígeno NAG +RAM) el representante es el PYOGENES, prueba bioquimica

BACITRACINA.aspecto de colonias: pequeñas casi puntiformes tienen un halo grande de β hemolisis. Factores
de virulencia : capsula en toda la cadena – hemolisinas – toxinas eritrogenicas (fiebre y erupciones) – agente causal
de la fiebre escarlatina.
 Grupo B: (antígeno RAM + glucosamina) el representante es AGALACTIAE, prueba bioquimica HIPURATO
DE SODIO. Causante de la mastitis en las vacas. Colonias medianas β hemolíticas de halo estrecho. Factores de
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virulencia: capsula – hemolisinas – enferman a bebes recién nacidos por contagio en el canal de parto y producen
otitis, conjuntivitis.
 Grupo D: (antígeno acido glicerol teicoico) tiene una distinción para NO enterococos el respresentante es BOVIS
y para Enterococos el representante es el feacalis. Prueba bioquimica en la bilis escolina. Características de
enterococos que lo diferencia de los no enterococos: halotolerante (hasta 6.5% de sal) - ph 9.6 – soporta
tratamiento térmico de 60° por 30 min – puede crecer entre 10° y 45°C. Para saber si es feacalis se siembra en
caldo hiper salado a 45°C o en azida puprura de bromocresol (fermenta glucosa, el purpura de bromocresol es
amarillo en acido y purpua en neutro, la azida es inhibidora de gram (-)) el bovis fermenta glu con producción
neutra y el feacalis con gas y acido. Factores de virulencia: plasmido R que produce β lactamasa por lo que es
resistente a la penicilina – acido lipoteicoico le da adherencia a las válvulas condriacas o a las células del epitelio
renal.
Familia: LACTOBACILLACEAE
Tribu: STREPTOBACILLACEAE
Género: Diplococos
Especie: única – pneumoniae
Sinónimos: streptococo pneumonia / neumococo
Cocos gram (+) , que se presentan en forma de diplos, de forma lanceolada y generalmente poseen una gran capsula,
cuando forman la cadena lo hacen de a dos.
Se encuentran en garganta, naso-faringe, saliva, secreciones de vías respiratorias, se aísla de sangre, esputo, liquido
encefalorraquideo, oído. Produce peritonitis, endocarditis, neumonía.
Es un patógeno exclusivamente humano también en procesos invasivos seveeros puede llegar a producir meningitis y
sepsis. Particularmente ataca a niños lactantes, ancianos y personas inmunodeprimidas, coloniza durante los primeros días
de los bebes.
Griffith descubrió la capa lisa llamada ¨S¨ que tiene capsula y la rugosa ¨R¨ que no tenía capsula. Así descubrió que la
virulencia dependía de la capsula que tenía un polisacárido cargado negativamente que se unía al cuerpo de la bacteria por
medio de enlaces covalentes, según el tipo de polisacárido capsular se descubrieron 92 serotipos, el polisacárido le confiere
propiedades inmunogenicas y los componentes no sacaroliticos le proporcionan el carácter antigénico, la capsula no es la
responsable o no interviene en fenómenos de adherencia invasión o inflamación dentro de los tejidos, pero si interviene
por que bloquea el reconocimiento por parte del hospedador impidiendo la fagocitosis. La pared celular de los
neumococos tiene una importante función en los procesos de colonización adherencia e invasión en los tejidos.
Puede ser anaerobios facultativos, el crecimiento de la pared celular se realiza intercalando o incorporando nuevos anillos
del peptidoglucano donde tiene un 90% de ácido muramico y 16% de glucosamina. Cuando sufre desacetilacion eso
contribuye a la virulencia por que se hacer resistentes a la lisozima.
Características de las colonias:

Difícil de cultivar invitro. Colonias pequeñas brillantes y trasparentes. En sangre son α hemolíticos. Después de 48 hs se
ponen mas densas. Tienen forma de peon de damas. Después de 72 hs de cultivo tienen la propiedad de producir autolisis,
generalmente necesita nutrientes específicos y 10 % de CO2. Producen infecciones y se enuentran dentro de las células
Pruebas para diferenciar neumococos:

1. Prueba de las sales biliares: cultivo bien concentrado de 48 hs de neumococo. Se le agrega 2 gotas de sal biliar al
10% (desoxicalato de Na , taurocolato de Na) al minuto se tiene que aclarar el caldo (entonces es positivo). Los
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neumococos hidrolizan sales biliares a ph alrededor de 7, en el caldo tiene que haber poco contenido de hidrato de
carbono para que no produzcan acido.
2. Optoquina: antibiótico, los únicos susceptibles son los neumococos (se ve halo de inhibición)
3. Inulina, es un hidrato de carbono, el neumococo lo fermenta con producción de ácido.
4. En vivo en ratones (para ver la virulencia): se le inyecta de 0.5 1 ml de un cultivo de 2 hs por inyección
interperitoneal a las 18 hs el ratón muere si la cepa es virulenta. Se puede aislar la cepa pura del corazón.
5. Preba de Quellung: para ver los serotipos, es una reacción de aglutinación con una mezcla de distintos serotipos
(antisueros capsulares de 9 serotipos) no se usa actualmente. Da positivo si aparecen los diplococos azules y la
capsula bien brillante.
Familia: NEISSERIACEAE
Género:
I. Neisserias (anaerobios facultativos)

II. Veillonelas (no son patógenos para el hombre) anaerobios.
Neisserias: cocos gram (-). También se presentan en diplococos pueden formar cadenas (como los neumococos). Son inmóviles y son oxidasa (+)
catalasa (+).
Especies:
 Meningitidis (meningococo – meningitis)

 Gonorrhoeae (gonococo – gonorrea)
 Catharralis
 Faringitidis
Se la encuentra en boca, intestinos, y en el tracto genito-uriario, parásitos obligados intracelulares. Solo el meningococo
tiene capsula, son muy sensibles a temperatura baja y a la desecación (se mueren en bancos de sangre), sensibles a metales
pesados.
Gonococo: segundo lugar en transmisión sexual (venérea) puede producir uretritis, vulvovaginitis, oftalmia en el recién
nacido (por contagio en el canal de parto), también son difíciles de atacar por que necesitan células. Tienen colonias
traslucidas, convexas pero con bordes globulados. Se las identifica por oxidasa (+) e indofenol oxidasa (+). La enfermedad
también se llama blenorragia.
Meningococo: habitualmente en nasofaringe, infecta los senos nasales y si sigue avanzando a través del hueso o del sistema
linfático llega a las meninges y después pasa al SNC, a su vez puede invadir a los riñones y producir septicemia
(hemorrágica) los que sobreviven quedan con alteraciones neurológicas. No son hemolíticos producen rápida autolisis.
Tipo serológico del grupo A es el responsable de las epidemias. Se aísla de líquido cefalorraquídeo. Las manifestaciones
clínicas son: rigidez en la nuca, fiebre muy elevada, fotosensibilidad, cefalea, vómitos y confusión.
Diferenciación de Nesserias
GLUCOSA MALTOSA SACAROSA
Faringitidis + + +
Catharralis - - -
Gonnorhaceae + - -
meningitidis + + -
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Orden: EUBACTERIAL
Familia: BACILLOCEAE
Género:
I. BACILLUS : Aerobios estrictos

II. CLOSTRIDIUM: Anaerobios estrictos
Bacilos gram (+), esporulados
Habitat: agua, suelo, superficie de animales, vegetales, intestino del hombre.
BACILLUS
Son saprofitos pero hay algunos patógeno. En forma de bastones. Algunos son inmóviles, los móviles tienen flagelos
peritricos. Al esporular no deforman.
Especies comunes: Bacillus subtillus y cereus.
Ambos generos liberan toxinas muy patógenos. Muchos forman cadenas. Rodeados de una capsula de acido glutámico.
Las toxinas son termoresistentes, contaminan el pan (subtillus) hay especies con acción funguicida
Bacillus thuringiensis: pesticida biológico, liberan exotoxinas, forman cristales de proteínas internas que aparecen al
destruir las larvas de ciertos insectos. Se lo usa para combatir el dengue.
Bacillus Anthrasis: las esporas se usan como arma biológica (la piel se pone negra). Produce 3 patologias: Antrax cutáneo
(ataca manos y antebrazos, se forma una postula, hay necrosis), carbunco pulmonar (rápidamente produce septicemia) y
carbunco intestinal (por ingesta de la espora va a la sangre y produce septicemia y muerte) . Las esporas se encuentran en el
núcleo, partículas de polvo que están en el aire y sobre la piel de animales. Tiene 2 factores de virulencia: sustancia P
(polipeptido capsular, que le confiere propiedades antifagocitosis) y Factor B (exotoxina, actua como agente protector, es
un factor edematoso)
Clostridium ¨Proteoliticos¨
Bacilos Gram (+) anaerobios estrictos. Sus esporas son erminales o subterminales y deformal al bacilo. La flora
acompañante suele ser enterobacterias. Para separar y aislar: shock térmico (60 – 100° x 30´) o alimentando la flora
acompañante en un caldo tioglicolato con alta concentración de glucosa y bajo pH por 72 hs.
Según el sindome metabolico que produce
 Gangrena gaseosa: C. perfingeus. libera una exotoxina que es una colagenasa que ataca el colágeno del musculo y
se denomina ëxotoxina Kappa¨. La herida se pone colorada y a tener un aspecto como el papel crepe. Si se cura
queda un pozo por que es necrosante.
 Tetani: C. Tetani. Se encuentra en la tierra, entra por herida. Produce una neurotoxina, se inmovilizan los
musculos, el diafragma y se produce paro respiratorio.
 Botulismo: C. Botulinum. Ingresa por ingesta de productos vegetales sin cocción y acidos (palmitos, morrones).
Produce una neurotoxina (botulina), produce vomitos, paralisis muscular progresiva. Se usa la toxina butulinica
para tratar enfermedades de distomias (movimientos involuntarios), en el estrabismo y en estética como botox.
 Diarreas especiales: C. difficile.
BACILLUS CLOSTRIDUM
Catalasa + -
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Nitrato a nitrito Reducen No reducen

Oxidasa + -
Indol + -
Familia: CORYNEBACTERIACEAE
Género:
I. CORNYEBACTERIUM : diphteriae
II. LISTERIA
III. ERYSIPELOTHRIX
Bacilos gram (+) no esporulados. Infecta lácteos y suelo.
Cornybacterum difteriae: baston gram (+), aerobio, inmóvil, presenta bandas cromáticos. El medio selectivo es agar sangre
con telurito de potasio donde se ven colonias grises con el centro negro de telurio de potasio. Son glucosa positivo, muy
patógenos por que liberan la exotoxina diftérica. Las pruebas son in vivo en cobayos el positivo presenta pustula
eritematosa e in vitro ELEK (agar sangre con telurito)
Listeria monocytogenes
Es beta hemolítica provoca listeria o listeriosis. Aumenta los leucocitos mononucleares puede causar mononcleosis
infecciosa y meningoencefalitis. Se identifica in vivo por la prueba de Anton, es una prueba ocular que el conejo en dos
días presenta conjuntivitis y ceguera.
Eryspelothrix insidiosa
Bacilos gram (+) móviles, sin capsula, microaerobios, forman largos filamentos. Producen erispela en hombre, cerdo y
rata. Produce infección en manos con lesión eritematosa y edema, libera delta hemolisinas que atacan los globulos rojos de
los caballos. Se cultiva en caldo de globulos rojos de caballo, la colonia tiene forma de pino invertido.
Orden: CHLAMYDIALES Orden: CHLAMYDIALES Orden:

Familia: RICKETTSIACEAE Familia: CHLAMYDIA MYCOPLSMETALES
Generos: Rickettsia, Rochamalimaea, Especies: C. trachomatis, C. Familia:
Coxiella y Ehrelichia. pneumoniae y C. psittaci MUCOPLASMATACEAE
Clamidias Generos: Mycoplasma y
Ureaplasma
Especies: M. pneumoniae, M.
hominis, M. genitalum y U.
urealyticum
Cocobacilos gram (+), agunos Bacterias pequeñas con Son las bacterias mas
tienen capsula, son inmóviles, estructura de pared simil gram (- pequeñas. No poseen pared
tienen toxina hemolisina, se ) celular, lo que determina su
multiplican dentro del huesped pleomorfismo. Muy
resistentes a la penicilina
Provocan fiebre exantemáticas; Infectan al hombre: C. Producen infecciones
fiebre botonosa del medterraneo. trachomatis, C. pneumoniae y a respiratorias, urinarias y
Rickettsiosis tíficas : tifus y fiebre animales: C. psittaci. Producen genitales
de las trincheras o Q. Algunas conjuntivitis y enfermedades
especies de Ehrlichia producen venereas
alteraciones en los leucocitos
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originando un síndrome de
mononucleosis infecciosa.
Parasitos obligados intracelulares Parasitos estrictos de energia
de antropodos, acaros, garrapatas
y piojos.
Generadores de energía (ATP) No sintetizan su propio ATP
Necesitan cultivo de tejidos Se colorea con Dienes (azul
de metileno), todas las
bacterias lo reducen y lo
vuelven incoloro mientras
que las mycoplasmas
quedan azules.
Se cree que son los precursores
de las mitocondrias
Orden: SPIROCHAETALES
Familia: SPIROCAETACEAE
Géneros:
I. Espiroquetas
II. Criptispira
III. Borrelia (terminan en espátula)
IV. Leptospira (terminan en gancho)
V. Treponema (terminan en mechon)
Pueden ser saprófitos o parásitos, son procariotas de forma espiralada, de estructura tortuosa, varían en longitud, grosor,
número de vueltas y amplitud. Son muy móviles, se tiñen levemente con gram, por lo que se usa coloracion de Fontana
tribondeau (usa nitrato de plata) y ahora se utiliza la tincion con anticuerpos fluorescentes. I y II no son patógenas, el resto
sí.
Borrelia: parásitos de la sangre y muchas veces hacen simbiosis con espiroquetas, son patógenas para el hombre.
 Borrelia recurrentis: causa fiebre recurrente y es transmitida por el piojo

 Borrelia Duttoni: transmitida por la garrapata
 Borrelia Vincenti: enfermedad de Vincent
Leptospira: la más patógena es la leptospira icterohemorragiae que produce ictericia y hemorragia en neonato, enfermedad
de Weil
Treponema
 Treponema pallidum: sífilis (enfermedad venérea), muere a bajas temperaturas.

 Treponema pertenue: enfermedad de “pian”
 Treponema carateum: enfermedad de la “pinta”
29
Bacterias fototropicas oxigenicas: Fueron los primeros microorganismos que liberaron oxigeno y asi transformaron la
atmosfera. Ciano bacterias poseen clorofila y liberan muchos pigmentos: ficobilinas. Es un grupo heterogéneo.
Unicelulares, filamentosas, se diferencian de las demás procariotas en la composición de acidos grasos; fina pared celular
similar a las gram (-) , tienen una envoltura , membrana fotosintética llamada lamela, multilaminar. Tiene vacuolas
gasíferas, necesitan estár en contacto con la luz. Son móviles pero muy lentamente, siempre se apoyan sobre una superficie
solida, liberan exoesporas en la oscuridad, cuando hay sequedad o congelamiento. Producen neurotoxinas muy potentes.
Forman líquenes: simbiosis entre hongo y alga)
Arqueobacterias: bacteras mas adaptadas a ambientes extremos, son los organismos mas antiguos , productores de
metano y CO2. Resisten altas temperaturas se usan para producir enzimas resistentes a la temperatura.
Actinomycetales: tienen aspecto de hongos, son células filamentosas.
Actinomicetos Micobacterium Nocardias

Degradan materia organica del BAAR, con acido micolicos y BAAR. La nocardiasis produce
suelo. El grupo Streptomyces alcoholes. Son las bacterias lesiones crónicas en pulmones
es el mayor productor de mas impermeables que se e intestino y también abcesos
antibióticos. conocen de crecimiento lento: en pies de atleta
M. tuberculosis , M. leprae M.
avium-intracelular
Unidad 15: Inmunología

Respuesta inmunológica: es un mecanismo sofisticado que tienen los organismos superiores para desarrollar resistencia a
los microorganismos o virus específicos. Tienen un sistema general para neutralizar moléculas extrañas y células
microbianas.
Inmunogeno: toda macromolécula que desencadena una respuesta inmunológica. El huésped no es pasivo cuenta con dos
mecanismos de defensa:
1. Inmunología humoral
a. Específicos: incluye aquellos agentes que son solubles, no células. Basada en anticuerpos (Atc)
b. Inespecífica: incluye diversas sustancias químicas que son agentes antimicrobianos inespecíficos, ej: enzima
lisozima.
2. Inmunología celular
a. Especifica: medida por las células t-activadas. Lisis d antígenos (Atg)
b. Inespecífica: implica la actividad de fagocitos. Ej: macrófagos.
Antígeno: toda sustancia extraña que desencadena una respuesta inmunológica reaccionando con sustancias específicas.
Como resultado de un Atg el sistema inmunológico sintetiza proteínas especificas llamadas anticuerpo o inmunoglobulina
(Ig)
La respuesta inmune presenta las siguientes características:
1. ESPECIFICIDAD: entre Atc y Atg o Atg y células T. Se presenta una reacción específica a cada nuevo invasor
(distinto a la fagocitosis), inflamación y otros mecanismos no específicos ya que estos últimos se desarrollan ante
cualquier invasor. La especificidad nos sirve para la prevención, control de enfermedades específicas,
investigación.
2. MEMORIA: una vez producido un tipo específico de Atc o células T, ante na segunda invasión, el sistema
inmune es capaz de producir mas del mismo.
30
3. TOLERANCIA: se da porque las células de nuestro organismo tienen Atg en la superficie y nuestro sistema
inmune reconoce esos Atg. No todas las respuestas inmunes son benéficas. Ej: híper sensibilidad, reacción
autoinmune que se da cuando falla la tolerancia.
Hapteno: es una sustancia de bajo PM con la capacidad de combinarse con anticuerpos específicos para que el sistema
autoinmune lo reconoce esa sustancia tiene que tener PM mayor a 10000. Se une a proteínas transportadoras.
Una amplia cantidad de sustancias pueden actuar como antígenos: proteínas, lipoproteínas, polisacáridos, ac nucleicos, ac
teicoicos.
Las determinantes antigénicas son las zonas del antígeno que reaccionan con el anticuerpo, pueden ser azucares,
aminoácidos, bases, grupos aromáticos.
Cada antígeno puede tener varios determinantes antigénicos diferentes capaces de reaccionar con un anticuerpo específico.
En cambio los anticuerpos tienen un solo sitio determinante.
Los anticuerpos se encuentran en el suero de la sangre y en otros lípidos orgánicos. Al suero que contiene anticuerpos
específicos se llaman antisuero.
Inmunoglobulinas
Los nombres derivan según la secuencia de aminoácidos que forman la cadena constante:
 IgG (gamma): está en líquido extracelular, sangre y linfa. Única inmunoglobulina que atraviesa la barrera
placentaria.
 IgM (Mu): primera en sintetizarse antu un Atg. Está en sangre, linfa y superficie de los linfositos T.
 IgA (Alfa): principal Atc secretor. Ej: saliva, suero, líquido celular y sanguíneo, calostro.
 IgD (Delta): es termolábil con alto contenido en carbohidratos, está en sangre, linfa y en la superficie de los
linfocitos T.
 IgE (Epsilon): se encuentra en sangre, linfa, es la que participa en las reacciones alérgicas.
Ig PM Atc totales [sérica mg/ml] Estructura Sitios Atg

IgG 146000 80% 13 Monomera 2
IgM 970000 6% 1.5 Pentámera 10
IgA 160/385000 13% 3.0/0.05 Mono/dimera 2/4
IgD 184000 1% 0.03 Monomera 2
IgE 188000 0.002% 0.00005 monomera 2
Estructura Ig
31
1. Cadena pesadas : Hv – Hc : 450 aa

2. Cadenas livianas: Lv – Lc : 212 aa
Inmunoglobulina (mayor concentración en sangre) tienen estructura monomerica, 4 cadenas polipetptidicas, formadas por
cadenas pesadas y livianas, todas con puentes disulfuro, las zonas variables con un grupo amino y las constantes con
grupos COOH.
Las secuencias de aa de la zona constante de las cadenas pesadas determina el tipo de inmunoglobulina: IgG-D-E son
monómeras; IgA puede ser mono o dimera (sgun donde actue); IgM pentamerica.
El sitio de unión abarca las 2 cadenas y se une con el grupo amino, hay dos sitios antigénicos (siempre el mismo antígeno).
Generalmente se puede separar la parte constante de la variable (vacunas).
Respuesta primaria y secundaria
IgM en respuesta secundaria no tiene periodo de latencia y su concentración es mayor a la respuesta primaria. IgG en la
respuesta secundaria tiene una concentración 100 veces mayor que la respuesta primaria y el tiempo de vida deciende muy
lentamente (inmunidad por meses, años)
Inmunidad celular especifica

Linfocitos: un tipo de célula blanca de la sangre proveniente de células no diferenciadas de la medula ósea. Interviene en la
respuesta inmune do tipo, los B que maduran en la medula ósea y tejido linfoide (bazo), son de corta vida y son inmóviles
y los T maduran en el timo de larga duración y móviles.
Los B tienen como único producto las inmunoglobulinas y los T muchas Ig de distintas clases y con funciones distintas.
Los que producen inmunidad mediada por células se los puede llamar linfocitos Tdh o Th. Los que presentan
hipersensibilidad retardada Tdh1 o Tdh2. También los que producen linfcinas Tdhl, en inmunidad de trasplante de
órganos Tr, ayudan a la producción de inmunoglobulinas Tb y los que actúan como linfocitos T asesinos..
Inmunidad celular inespecífica

Macrofagos: células inespecíficas fagociticas ta que no distingue entre Atg distintos y se originan en el sistema linfático,
ingieren cualquier sustancia extraña. Su principal tarea es modificar el Atg para la respuesta inmunológica específica,
cooperando con los linfocitos, por lo que actúan como un intermediario.
Existen dos tipos, los monocitos (fagocitosis que circulan libremente, abundan en sangre y linfa) y los macrófagos (se usan
para los fagocitos que están fijos en la superficie tisular , sistema linfoide y bazo)
32
Enfermedades autinmunes
Cuando la células no toleran su ropia inmunología son hereditarias, crónicas, irreversibles y progresivas.
Las especificas: atacan un tipo de tejido, generan anticuerpos específicos dentro de un tejiso.
Las no especificas: atacan varios tipos de tejidos puede ser en simultaneo o no
Hipersesibilidad
Alergias, los mediadores son químicos, se produce un gran aumento de la histamina y la serotonina. Pero cuando hay
hipersensibilidad esto es irreversible.
Inmunidad activa: el huésped recibe inyecciones con el antígeno y el cuerpo genera anticuerpos, hay memoria
inmunológica y los anticuerpos permanecen altos por un tiempo, la inmunidad se genera en semanas
Inmunidad pasiva: el huésped recibe anticuerpos sintetizados en otro organismo, no hay exposición del antígeno, no hay
memoria inmunológica derece la concentración con el tiempo pero la inmunidad es inmediaa.
Vacuna: todo antígeno o mezcla o anticuerpo utilizado para la inducción de la inmunidad
1. Toxoide: por modificación química de una endotoxina, se lo hace con formaldheido que bloquea los grupos
aminos acivos de la toxina por lo tanto inhiben su poder toxico pero conserva el poder antigénico. Ej: antitetánica,
antidifteria.
2. Con cepas muertas: se mata los microorganismos portadores de la endotoxina. Se una fenol o calor, suelen ser
gram (-). Ej: fiebre tifoidea, cólera, peste.
3. Cepas vivas atenuadas: es una cepa mutante el microorganismo patógeno, que pierde su virulencia o poder
infectivo, pero que conserva su poder antigénico. Cuando se trata de virus se dice que son ïnactivados¨. Ej:
varicela, rabia, influenza
4. Anticuerpos como antígenos: vacunas libres de antígeno, el anticuerpo se sintetiza como antígeno.
5. Recambiantes: hepatitis
6. Comestibles: ën estudio¨ problema con la concentración que se inyecta en la comida, dependiendo del medio.
Técnica para el diagnóstico inmunológico: RIA (radio inmuno ensayo) y ELISA (ensayo inmuno solvente ligado a
enzimas).
Inmunología complementaria
Complemento: es un grupo de 11 enzimas (c1, c2, c3…..c11) que se encuentran en el suero sanguíneo y qué se activan
siempre que haya una reacción antígeno anticuerpo generalmente se unen anticuerpo para evitar a las células extrañas por
ejemplo causando daño en la membrana celular o lisis por lo tanto hacen susceptible a esta célula extraña para que pueda
ser fagocitada, a este proceso se le llama opsonización, por ejemplo destruye la cápsula en diplococos y también lisa
microorganismos gram negativos y puede producir muerte de microorganismos sin lisis. También está relacionada con
reacciones alérgicas sobre todo en producción de anafilotoxinas causando la liberación de los dos mediadores químicos de
los procesos alérgicos:
 Histamina que produce aumento de la permeabilidad capilar celular por lo que ingresa líquido provocando
inflamación
 Serotonina qué emplea en tratamiento por depresión y aumenta vascularización
Cuando la reacción alérgica es muy seria y se generan altas concentraciones de IgE se le llama hipersensibilidad (daño
celular Irreversible) y si esto persiste se produce el shock anafiláctico (se cierra la glotis y se inflaman los órganos internos)
33
LABORATORIO
TP N°9: Características de las colonias
Caracteres culturales de colonias en superficie:
1. Forma: puntiforme, circular, irregular, rizoide, filamentosa.

2. Elevación: plana, elevada, convexa, pulvinada, umbilicada o prominente.
3. Borde: entero, ondulado, lobulado, dentado, filamentoso.
4. Superficie: lisa, brillante, mate, rugosa, erizada, seca, pulvurulenta, plumosa, vidrio esmeril.
5. Consistencia: mantecosa, mucosa, viscosa, granulienta, aspera, liquida.
6. Opacidad: transparene, traslucida, opaca, semiopaca.
7. Cromogenesis: si libera pigmento, de que color y si es soluble en el medio.
8. Olor: presente o ausente y la identificación.
9. Tamaño
10. Facilidad para emulsionarse.
11. Crecimiento
TP N° 10: Contaminación ambiental

1. Flora fúngica: exponer al aire placas conteniendo agar Sabouraud Dextrosa (SDA).
2. Flora bacteriana: exponer al aire placas conteniendo agar para recuento en placa (PCA).
Lectura: recuento de unidades formadoras de colonias (UFC) cada 30 min de exposición.
TP N° 11: Métodos de siembra - Anaerobios

1. Siembra en tubo: en caldo necesita tapón de parafina, vaselina o vas-par (50% de cada uno), en agar recto no se
necesita tapón por que el agar evita la difusión de oxígeno. El medio de cultivo base es el caldo tioglicolato
(reductor es el tioglicolato de sodio que continuamente elimina el oxígeno, la resazurina como indicador redox la
cual es rosa en presencia de oxígeno y en ausencia incolora).
2. Siembra en placa: en profundidad o bien por estría pero se incuba en ambiente anaeróbico (jarra anaeróbica o
anaerocult)
 Recuento de anaerobios totales: en agar Clostriel o agar para anaerobios en jarra.
 Recuento de Clostridium Sulfito Reuctores: medio agar sulfito hierro cubierto de parafina (colonias negras)
 Investigación cualitativa de anaerobios totales: Caldo carne cocida o caldo hígado en fondo de tubo con tapón de
vas-par, si se desplaza el tapón indicara presencia de anaerobios.
TP N° 12: Control higiénico y sanitario de superficies

1. Hisopado de superficies: hisopos estériles humedecidos en caldo triptona soja (TSB) se siembra en distintos
medios (Levine, EMB, Manitol; salado; VRBL, TSA, TSB, SDA, etc)
2. Lavado de manos
3. Secado de manos
Lectura: recuento de UFC /30 min
34
TP N° 15: Enzimas bacterianas

1. CATALASA: Emulsionar colonia con una gota de agua oxigenada , positiva si se observa la aparición de burbujas
de gas (Estafilococo sp y Bacillus sp)
2. GELATINASA: Incubar e 48 hs a una semana a 37°C en caldo gelatina al 15% y pH 7. Si al enfriar los tubos se
comprueba que la gelatina perdió su poder de solidificación, es positiva. (Bacillus sp, Clostridium sp)
3. DNasa: se prueba la actividad de la desoxirribonucleasa. En agar DNasa, se revela con HCL 1 N o azul de
toluidina al 0.1% . Es positivo si con HCL se observa una ona clara y brillante alrededor del cultivo y con aul de
toluidina se observa zona rosada y brillante lrededor del cultivo (Estafilococo aureus)
4. COAGULASA: en portaobjetos cepa mas plasma humano positivo si a los 10 minutos se forma coagulo, se
comprueba en tubo, se le agrega la cepa a 0.5 ml de plasma fresco se incuba en baño de agua a 37°C hasta 4 hs, si
no hay formación de coagulo se realiza una nueva lectura a las 2 hs. (Estafilococos patógenos)
5. OXIDASA: en suspensión con el germen se le agrega disco de oxalato de tetrametil p-fenilendiamina , positivo
vira a color rosa violáceo (Pseudomona sp)
6. FENILDESAMINASA: desaminacion de la fenilalanina a acido fenil pirúvico el cual se detecta agregando
tricloruro férrico al 10 % dando un quelato verde si es positivo, debe realizare en medio alcalino (Proteus sp,
Providencia sp)
7. LIPASA: se siembra en agar graso con 100 ml% de manteca o en agar con agregado de una emulsion de yema de
huevo, incubar 48 hs a 37°C rn jarra anaeróbica, cubrir con una solución saturada de sulfato de cobre si los
globulos de grasa se han vulto azul grisáceos es positivo (Clostridium sp)
8. CASEINASA: en agar 2 ml leche, la turbidez se debe a la caseína en suspensión. La presencia de una zona clara
alrededor de cada colonia indica hidrolisis de la enzima (Clostridium)
9. AMILASA: en agar con 2% de almidos, cubrir con lugol, la presencia de una zona azul alrededor de cada colonia
indica reacción negativa (almidon con lugos = azul) (Bacillus sp)
TP N° 17: Pseudomonas
1. EMB (Eosina, azul de metileno)
2. Agar sangre (tipo de hemolisis)
3. Agar Pseudo F (inhibe piocianina) Agar Pseudo P (inhibe la fluorosceina)
4. Bajo tubo UV se verifica la producción de fluorosceina.
5. Agar cetrimide (selectivo par Ps. Aeruginosa)
6. Medio OF: identifica bacilos gram (-) (si producen acido el indicador torna amarillo), se ve la producción de gas y
la movilidad del germen.
7. Oxidasa (pseudomanas +, enterobacterias -)
8. Agar GSP glutamato-starch-penicilina –rojo fenol. Medio selectivo (por la penicilina) se utiliza para diferenciar las
pseudomonas de las aeromonas. (positivo son colonias amarillas con halo amarillo: aeromonas degradan el
almidon y el glutamato con producción de acido virando el indicador de rojo al amarillo y negativo colonias
violetas rojizas con halo rojizo son pseudomonas.
35
Ps aeruginosa Ps pseudomallei Ps maltophillia

OLOR A frutas (uva) A tierra amoniacal No posee
PIGMENTOS Azul verdoso, No posee Castaño
fluorescente
CETRIMIDE + - -
OF oxidativo oxidativo No oxidativo
OXIDASA + + (desaparición -
rápida)
AGAR SANGRE Grandes, grises a Circulares, color Redondas, lisas ,
verdosas, aspecto crema a castaño, brillantes, no
vidrio esmeril, rugosa convexas, opacas, pigmentadas, borde
o mucoide, de borde arrugadas, borde entero, verdoso no
irregular , hemolitica irregular, ligeramente hemolitica
hemoliticas
TP N° 18: Marcha comparativa Salmonella - Escherichia coli

Lactosa (+)
Medios Escherichia coli Salmonella

Levine Pardo o negro con brillo Incoloras
metalico
Brolacin o Cled Amarilla Incolora- azulada
Mac Conkey Rojo ladrillo, halo turbio Incolora trasparente
(precipita la bilis)
Selectivo y diferencial para Salmonella
Medios Esherichia coli Salmonella

Verde brillante Verde amarilla Rojas rosadas
Rambach Azul Rojo
Salmonella- Shigella (SS) Rojas rosadas Incoloras centro negro
Sulfito de Bismuto (SB) Verdes Ambar centro negro
IMVIC ++ -- -+ -+/-
TP N° 19: Enterobacterias
LACTOSA (+) LACTOSA (-)
E coli Salmonella
Klebsiela Shigella
Citrobacter Proteus
Enterobacter
Serratia
Medios
1. CLED (Cistina – Lactosa – Azul de Bromotimol)

2. Levine: Colonias fermentadoras con brillo metalico Ecoli y Citrobacter, Colonias mucosas Klebsiella, colonias no
fermentadoras Proteus y Salmonella
3. BPLS (Verde Brillante, rojo fenol, lactosa, sacarosa)
4. Mac Conkey
5. VRBL (cristal violea, rojo neutro, bilis lactosa)
36
6. SIM ( SH2 – Movilidad – indol) : el indol en las bacterias deriva del acido aminado triptófano, se revela con el rvo
de Kovac
7. Agar sulfito de bismuto: (verde brillante, sulfito de bismuto sales de hierro para identificar mo que generan sh2)
TP N° 21: Estafilococos
St. aureus St. epidermidis St. saprofictus
Nitrato + + +
Catalasa + + +
Coagulasa + - -
Manitol + - -
DNasa + - -
Baird Parker + - -
Hemolisis + - -
1. Nitrato (staf reducen)

2. Catalasa (+)
3. Coagulasa
4. Manitol: solo las cepas patógenas fermentan este azucar
5. DNasa
6. Baird Parker: utiliza la capacidad del aureus para reducir telurito a telurio y detectar la lecitinasa a partir de lecitina
de huevo.
TP N° 22: Estreptococo
Especie pyogenes agalactiae faecalis bovis viridians Pneumoniae
grupo A B D D - -
Hemolisis Β con halo Β con halo βαδ βαδ α α
grande estrecho
Bacitracina + - - - - -
Hipurato - + - - - -
de Na
Bilis - - + + - -
Caldo - - + - - -
hipersalado
azida - - + - - -
optoquina - - - - - +
37

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Microbiología FINAL 2016

Unidad 2: CELULA BACTERIANA

Hay dos tipos de organismos

La bacteria es un organismo procariota unicelular.

Componentes accesorios de la pared celular Gram (-)

 Colorante: cristal violeta

GRAM (+) GRAM (-)

Tiempo de generación (G): es el tiempo necesario para que la población se duplique.

Tinción: colorante básico ya que el medio (zona nuclear) es acido.

PROPIEDADES ESTRUCTURALES DE LAS BACTERIAS

o Tetrados o tetracoccos (dos diplococos unidos)

División de los bacilos (no agrupaciones)

o Ramificada (bacilo de koch)

Unidad 3: METABOLISMO BACTERIANO

Componen dos tipos de fenómenos

o Catabolismo: degradación o desasimilación del sustrato. Son exoergonicas.

Metabolismo aeróbico y anaeróbico

Necesidades metabólicas de las bacterias:

Unidad 4: CULTIVOS Y CRECIMIENTO

Criterio de muerte: es la pérdida irreversible de la capacidad de dividirse o reproducirse.

Log (N° cel) / T

Métodos para medición de crecimientos bacterianos

Unidad 5: AGENTES MICROBIANOS

Método de acción de antimicrobianos

Mecanismos de reversión de los agentes antimicrobianos:

Agentes quimioterapéuticos y antibióticos

Clasificación según blanco:

 Análogos a factores de crecimiento: sulfas

Los antibióticos semisinteticos o sintéticos son por modificaion de los naturales.

Unidad 6: GENETICA MICROBIANA

Genotipo: conjunto de cromosomas de cada bacteria, todo un patrimonio sea o no manifiesto

Fenotipo: conjunto de expresiones visibles.

 Huesped animal: celula eucariota virus animal

Según el tejido que atacan:

 Nurotropicos: células nerviosas (rabia, encefalitis, poleo)

Cianofagos: el mas estudiado es el ADN-2 bicatenario.

Ebola: virus hemorrágico. El contagio es directo. Existe vacuna.

HPV: es un virus oncogénico, sintomático o asintomático.

Clasificación según reproducción

Clasificación según tabicación

Micosis: enfermedades producidas por hongos.

En tópico los más usados son: nistatina, clotrimazol, miconazol, tolnaftato.

Los hongos saprofitos con frecuencia suelen ser:

Aparte de los géneros se los clasifica según tipo serológico y ATCC.

Características de los cultivos

La secuencia determina la diferencia entre organismos. Los estudios demuestran que:

El método más utilizado es la hibridación del ADN y homologación de acidos nucleicos.

Unidad 10: Familias

Características de las colonias

Identificación o marcha de enterobacterias

 Oxidasa (tiene que dar negativa, si es positiva es pseudomona)

Produce infecciones urinarias, diarrea, gastroenteritis, meningitis, septicemia.

Vias de transmisión de STEC

Medios de cultivo y diferenciaciones

o Basilos Gram (-) entéricos

o Fermentan la lactosa con producción de acido y gas a 35-35°C

Métodos para determinación de coliformes

10 ml de muestra 1 ml de muestra 0.1 ml de muestra

Tiempo de Tubo con 10 ml de Tubo de 1 ml de Tubo de 0.1 ml de

VS Combinacion de tubos (5-3-3)

Tiempo de Tubo originario de 10 Tubo originario de 1 Tubo originario de 0.1

En la tabla correspondiente se extrae otro número a

VS Combinación de tubos (3-2-0)