UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CIUDAD JUÁREZ

ICB

Bioquímica aplicada
Docente: Ricardo Alonso Hernández Escamilla
Semestre: Ene - Jun 2022

Practica de laboratorio #3
Determinación y cuantificación de ácido úrico

Fecha de desarrollo: 10/02/22

Fecha de entrega: 17/02/22

Gaspar Zamarripa María Luisa 196216

Vital María Camila 205000
Gordillo Karina Denisse 195986
Lara Gutiérrez Alejandro 145796
Resumen:
Lo que podemos ver en esta práctica que
lleva el nombre de Determinación y
cuantificación de ácido úrico es desde lo
que viene siendo la definición de ácido
úrico que como ya bien sabemos que es un
químico que se crea cuando el cuerpo
descompone sustancias llamadas purinas.
Introducción:
1. ¿Qué es el ácido úrico?
Es un químico que se crea cuando el
cuerpo descompone sustancias llamadas
purinas. Las purinas se producen
normalmente en el cuerpo y también se
encuentran en algunos alimentos
bebidas. Los alimentos con un alto
contenido de purina incluyen el hígado, las
anchoas, la caballa, los frijoles y chícharos
secos y la cerveza. La mayor parte del
ácido úrico se disuelve en la sangre y viaja
a los riñones. Desde ahí sale a través de la
orina. Si el cuerpo produce demasiado
ácido úrico o no lo elimina en cantidades
suficientes. Los niveles altos de ácido
úrico en la sangre se denominan
hiperuricemia (Pike, 2022).
También lo que podemos ver fue el cómo
preparamos y llevamos a cabo los
reactivos, al igual a su vez pudimos ver lo
que era el cómo podíamos extraer una
muestra de sangre para así poder usarlo
con nuestros tubos. Tanto como pudimos
redactar nuestros resultados obtenidos.
2. Describe el metabolismo de los
nucleótidos puricos
Cada nucleótido consta de tres
componentes un éster fosfórico, un azúcar
de la clase de las pentosas y una base
y heterocíclica (base nitrogenada) ya sea
purina o pentosa. En los ácidos nucleicos
se encuentran dos clases principales son
las purinas y pirimidinas, las purinas más
abundantes son la guanina y adenina que
se encuentran en el ADN como en el ARN
y se hayan unidas al azúcar en el N9.
3. Catabolismo de bases purinicas
El producto final del catabolismo
completo de las purinas es el ácido úrico,
el catabolismo degrada nucleótidos de
purinas, si quitamos fosfato queda
nucleosido luego se quita la azúcar para
2
dejar sola la base nitrogenada y sigue su
proceso hasta convertirse en acida úrico.
4. ¿Qué es el mono urato de sodio y
como se forma?
Cuando la cantidad de ácido úrico
producida más la cantidad ingerida es
mayor que la que se elimina, el ácido úrico
del organismo aumenta, lo que se traduce
en niveles más altos en la sangre, hasta que
precipita en forma de cristales de
monourato de sodio, principalmente en las
articulaciones, dando lugar a los síntomas
y signos de la gota (Rodríguez 2022).
5. Valores de referencia del ácido úrico
Valores de referencia del ácido úrico
Mujeres Hombres
Normal
2,4-6,0 mg/dl 3,4-7,0 mg/dl
(Scott, 2002)
6. ¿Por qué los valores son diferentes
en hombres y mujeres?
Los cambios hormonales de la pubertad de
las niñas incluyen una subida de
estrógenos, que facilitan la excreción de
ácido úrico por el riñón, y sus niveles en
sangre durante su vida fértil son inferiores
a los de los hombres. Las mujeres en esa
edad no padecen gota, como también anotó
Hipócrates: “Las mujeres no la sufren
mientras menstrúan”. Tras la menopausia
los estrógenos bajan, el riñón reabsorbe
más ácido úrico y su nivel en sangre sube,
sin llegar a alcanzar los niveles de los
hombres. Pero a partir de este punto
pueden sufrir gota, siempre con menor
probabilidad que los hombres.
Los cambios hormonales juegan un papel
importante en esta patología, ya que
determinan los niveles de ácido úrico en
sangre.
El ácido úrico tiene dos orígenes, uno
interno originado en la degradación de los
ácidos nucleicos (componente esencial de
los genes), y tras la degradación de
precursores presentes en los alimentos.
Durante la pubertad se producen cambios
hormonales en los niños que determinan
que los túbulos renales reabsorban más
ácido úrico, siendo menor la excreción
renal y subiendo los niveles en sangre
(Pascual, 2017).
7. Características metabólicas de la
gota:
A un pH de 7.4 y a una temperatura de 37°
C, el urato monosódico -la forma iónica
del ácido úrico- predomina en el plasma y
agua extracelular, incluyendo el líquido
sinovial. A pesar de que las purinas se
sintetizan y degradan en todos los tejidos,
los uratos sólo se producen en tejidos que
3
contienen la enzima xantina oxidasa, como desarrollar una crisis de gota al depositarse
el hígado y el intestino delgado. La éstos en una articulación y producir artritis
producción de uratos varía con el aguda (dolor, enrojecimiento y aumento de
contenido de purinas en la dieta, la volumen de la articulación afectada) fiebre
velocidad de biosíntesis, su degradación y y leucocitosis. (James Hillray, 2014)
almacenamiento. En condiciones
La hiperuricemia está directamente
normales, 75% de la producción de uratos
asociada con los niveles de creatinina
se elimina por el riñón y el resto por el
sérica, índice de masa corporal, edad,
intestino. (James Hillray, 2014)
tensión arterial e ingesta de alcohol.
8. Esquematice las bases puricas y (James Hillray, 2014)
pirimidicas
Existen muchas formas para clasificar a la
hiperuricemia, por ejemplo, primaria (por
errores innatos del metabolismo) o
secundaria (a una enfermedad como
leucemia, insuficiencia renal), transitoria
(cambios agudos en el volumen
circulatorio, cirugía, fármacos) o
permanente, etc. (James Hillray, 2014)

Pero desde el punto de vista clínico, es útil

9. Describe 2 patologías del
clasificarla de acuerdo a la fisiopatología
metabolismo de las purinas:
subyacente, o en otras palabras, si ésta es
el resultado de un aumento en su
Hiperuricemia:
producción, disminución en su excreción o
Se define como la concentración sérica de una combinación de ambos. (James
ácido úrico por arriba de 6.8 mg/dl, que es Hillray, 2014)
el límite de su solubilidad en suero. A
Gota:
concentraciones mayores, el riesgo de
precipitación de uratos en forma de La gota es una enfermedad metabólica que
cristales de urato monosódico se se caracteriza por un incremento en las
incrementa, y con ello la posibilidad de concentraciones corporales de uratos con

4
hiperuricemia sostenida. (James Hillray, A pesar de su elevada prevalencia, con
2014) frecuencia la gota no es identificada o
tratada adecuadamente.
Afecta predominantemente a hombres en
edad adulta, mujeres posmenopáusicas y Al evaluar a un paciente con artritis aguda
adultos mayores. Desde el punto de vista mono articular de localización en el ortejo
clínico, se caracteriza por episodios de mayor (podagra), pie, tobillo o rodilla
artritis aguda o crónica secundaria al (aunque puede afectar cualquier
depósito de cristales de urato monosódico articulación), el interrogatorio es de suma
en articulaciones, tejido conectivo e importancia, ya que los antecedentes del
intersticio renal. La afección renal produce paciente nos pueden dar las primeras pistas
nefrolitiasis por ácido úrico y para establecer el diagnóstico de una crisis
eventualmente insuficiencia renal. (James aguda de gota. (James Hillray, 2014)
Hillray, 2014)
Debido a que la gota se asocia a obesidad,
Desde el punto de vista clínico tiene 3 síndrome metabólico, diabetes,
fases: hipertensión arterial sistémica,
insuficiencia cardiaca, hiperlipidemia,
1) Hiperuricemia asintomática, que
enfermedades cardiovasculares, uso de
generalmente dura alrededor de 20
diuréticos o ciclosporina y enfermedad
años y termina cuando el paciente
renal, es importante sospechar la
presenta su primera crisis de artritis
enfermedad en pacientes con estos
aguda o de nefrolitiasis.
diagnósticos durante la evaluación de un
2) Gota aguda e Inter crítica.
cuadro de artritis aguda; por otro lado, al
3) Artritis crónica gotosa.
establecer el diagnóstico de gota, es
La prevalencia de gota en la población importante buscar la coexistencia de una
general varía del 2 al 15 %, con un claro de estas enfermedades en el paciente.
incremento en las últimas décadas, (James Hillray, 2014).
probablemente secundario a cambios en
los hábitos de alimentación y a la epidemia
de obesidad. (James Hillray, 2014)

5
10. Desarrolla 2 patologías del encefalopatía y pseudo - obstrucción
metabolismo de las pirimidinas. intestinal (Osorio, J. H. 2019).

Deficiencia de uridina monofosfato 11. Mecanismo de reacción del ácido

sintasa (aciduria orótica hereditaria) úrico por el método fosfotugstico

La uridina monofosfato es la enzima que Para la determinación del ácido úrico “el
cataliza las reacciones de la orotato procedimiento requiere únicamente de dos
fosforribosiltransferasa y la oritidina-5′- soluciones reactivas estables (carbonato de
monofosfato decarboxilasa. En caso de sodio y ácido fosfotungstico), que son
deficiencia, hay acumulación de ácido agregadas directamente a un filtrado de
orótico, que se manifiesta clínicamente por suero liberado de proteínas para el
anemia megaloblástica, nefropatía y desarrollo de color. La intensidad del color
cristaluria orótica, malformaciones es directamente proporcional a su
cardíacas, estrabismo e infecciones concentración”. (German F., 2012)
recurrentes. El diagnóstico de la
El mecanismo de reacción entre el
deficiencia de uridina monofosfato sintasa
carbonato de sodio y ácido fosfotugstico es
se realiza por análisis de DNA y/o
un método de reducción donde el producto
enzimático en diversos tejidos. (Véase
reductor es azul de tungsteno y en la
también evaluación de probables
muestra se obtiene un color azulado que
trastornos hereditarios del metabolismo).
podemos utilizar como indicador para
El tratamiento de la deficiencia de uridina
determinar la concentración de ácido úrico
monofosfato sintasa consiste en
mediante el fotoespectometro a través de
suplementos orales de uridina (Demczko,
la absorbancia obtenida de la muestra
M. 2021).
(German, F. 2012)
Deficiencia de timidina fosforilasa
12. Alimentos moderados, permitidos y
(OMIM# 603041).
prohibidos relacionados al ácido
Conocida como Síndrome de depleción del úrico y por qué.
DNA mitocondrial 1, o como
Consumo Permitido:
encefalomiopatia neurogastrointestinal
mitocondrial (MNGIE), se caracteriza por  Frutas naturales y con cáscara.

polineuropatia, oftalmoplegia, leuco  Vegetales y hortalizas.

6
 Leche descremada, yogur  Carnes procesadas como salchicha,
descremado y quesos bajos en grasa, longaniza, jamón serrano, jamón
como cottage y ricota. y mortadela.
 Café y tés.  Vísceras como hígado, riñones y
 Aceite de oliva, nueces, cacahuates, mollejas.
almendras, marañón y pistachos.  Pan, arroz, pasta y harina de trigo
Mantequilla de cacahuate, de blanca.
almendras o marañón.  Algunos pescados como anchoas,
 Papas y camote. arenque, caballa, sardinas y truchas; y
 Semillas de chía, linaza, ajonjolí y mariscos como cangrejo, camarón,
calabaza. mejillones, huevas y caviar.
 Bebidas alcohólicas, en especial la
Consumo Moderado:
cerveza.
 Guisantes, frijoles, soya, maíz,  Azúcar, dulces, helados, miel,
lentejas, arvejas y garbanzo. refrescos y jugos industrializados.
 Espárragos, coliflor y espinacas.
¿Por qué?
 Hongos/ champiñones.
 Cereales integrales, como pan integral, La dieta para el ácido úrico elevado tiene
arroz integral, salvado de trigo, avena como objetivo principal disminuir la
y pasta integral ingesta de purinas, un tipo de proteína que,

 Aves, como pollo y pavo, cuando es consumida en exceso, aumenta

pescados y huevos la producción de ácido úrico, y está

 Carne roja, como res o cerdo. presente principalmente en las carnes de

 Jugos de fruta naturales. res y de cerdo, así como en las vísceras

como hígado y molleja; además de
Consumo prohibido:
también estar contenida en ciertos
 Salsas industrializadas como pescados, como atún o sardina, y mariscos,
mayonesa, kétchup, mostaza, entre como camarón y mejillones (Zanin, T.
otras; caldos de carne y extractos de 2021).
carne.

7
Metodología

Preparar una serie de tubos de acuerdo a la Prepare otra serie de tubos de acuerdo a la

siguiente tabla: siguiente tabla:

REACTIVO T. T. T. REACTIVO T. T. T.
PROBLE PATRÓ BLAN
PROBL PATR BLAN
MA N CO
EMA ÓN CO
SOBRENADA 0.5 ml -------- --------
SUERO 0.3 ml ----- -----
NTE T.
SOL. PATRÓN ----- 0.3 ml ----- PROBLEMA
AGUA ----- ----- 0.3 ml SOL. -------- 0.5 ml --------
DESTILADA PREPARADA
AC. 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml T. PATRON

FOOSFOTUN SOL. -------- -------- 0.5 ml

PEPARADA T.
GSTICO
BLANCO.
Tabla 1 Primera serie de tubos para la
CARBONATO 2.5ml 2.5ml 2.5ml
determinación de ácido úrico sérico. DE SOLDIO
AL 3.5%
Mezclar bien cada tubo y centrifugar el
Tabla 2 Segunda serie de tubos para la
tubo problema a 2,500 RPM durante 10
determinación de ácido úrico sérico.
min. Y recuperar el sobrenadante. El tubo
blanco no es necesario que se centrifugue, Mezclar bien cada tubo y dejar reposar

atendiendo a las propiedades específicas durante 20 minutos.

de la reacción. Leer la absorbancia del problema y del

patrón ajustando a cero el
espectrofotómetro con el tubo blanca a una
longitud de onda de 640 nm.

Fórmula para calcular resultados:

(ABS. Problema/ABS. Patrón) X

([t.patrón])= [Ácido úrico]

8
Resultados

En la imagen 1.1 se muestra el equipo que se utilizo para realizar la técnica de flebotomía a
nuestra compañera de equipo María Luisa Gaspar.

Imagen 1.1

Después de obtener la muestra de sangre se procedió a centrifugarla a 2500 rpm por 10 min.
En la imagen 1.2 se puede observar la separación en concentrado de glóbulos rojos al fondo,
concentrado de plaquetas al medio y en la superficie el plasma.

Imagen 1.2

En la siguiente imagen 1.3 podemos observar la primera

serie de tubos de acuerdo con la tabla 3 de la metodología
de la presente práctica. Los 3 tubos se identificaron con sus
respectivos nombres, tubo problema, tubo patrón y tubo
blanco. Después se colocó la cantidad adecuada de reactivo
para cada tubo. Imagen 1.3

9
Una vez centrifugados nuestros tubos se procedió a realizar la segunda serie de tubos de la
tabla 4 de la metodología de la presente práctica. Esto lo podemos observarlo en la siguiente
imagen 1.4 donde colocamos el sobrenadante de nuestros primeros tubos a los tubos de la
segunda serie.

Imagen 1.4

Una vez transcurrido 20 minutos se pudo observar que él tubo problema y el patrón
cambiaron a una coloración azulada. A continuación se procedió a tomar la absorbancia de
cada tuvo en el espectrofotómetro, calibrándolo con nuestro tubo blanco (imagen 1.5). En la
imagen 1.6 podemos observar la absorbancia del tubo patrón y en la imagen 1.7 la
absorbancia del tubo problema.

Imagen 1.5 Imagen 1.6 Imagen 1.7

Con las absorbancias obtenidas del espectrofotómetro se elaboro la siguiente tabla 5 y se

procedió hacer los cálculos para obtener la concentración de ácido úrico.

10
 Muestra Absorbancia (As)
Tubo problema 0.116 As
Tubo patrón 0.122 As
Tubo blanco 0
Calculo:

Después de sustituir los datos en la formula nos dio un resultado de concentración de ácido
úrico de 4.7 mg/dl.

Conclusión

Gracias a todo lo anterior, podemos reductor es el azul de tungsteno el cual lo

interpretar que en esta práctica utilizamos utilizamos como un indicador de presencia
el método de Caraway 1955 para la de ácido úrico y posteriormente mediante
determinación del acido úrico “el el espectrofotómetro podemos medir su
procedimiento requiere únicamente de dos absorbancia y así con la formula
soluciones reactivas estables (carbonato de determinar la cifra de ácido úrico.
sodio y acido fosfotungstico), que son
El intervalo de referencia para las cifras
agregadas directamente a un filtrado de
normales de ácido úrico nos menciona que
suero liberado de proteínas para el
para “mujeres fue de 2.4 mg/dl a 7.16
desarrollo de color. La intensidad del color
mg/dl” (Gabriela O., 2012). Demostrando
es directamente proporcional a su
así que nuestra paciente a la cual
concentración”. (German F., 2012)
calculamos su concentración de ácido
El carbonato de sodio siendo un ion úrico obteniendo una cifra de 4.7 mg/dl
reacciona con el ácido fosfotungstico por lo tanto se encuentra dentro de los
mediante una acción reductora, el ácido parámetros normales. Aunque nuestra
fosfotungstico se oxida porque cede paciente aparentemente no presenta
electrones al carbonato de sodio valores altos o bajos de ácido úrico como
produciendo una reducción. El producto para determinar alguna patología, no

11
debemos pasar desapercibidos las Caso clínico
recomendaciones nutricionales que nos
ayudaran a prevenir la elevación de los
parámetros de ácido úrico.

Algunas de las principales

recomendaciones nutricionales son
disminuir el consumo de carne rojas, el
consumo de alcohol y en caso de presentar
obesidad, disminuir la ingesta calórica
para producir perdida de peso. Fomentar el
uso de verduras como hongos, coliflor y
espinacas. Preferir alimentos ricos en
Errores innatos del metabolismo de las
antioxidantes, como granda, frambuesas y
purinas y otras enfermedades
fresas. Asegurar un consumo abundante de
relacionadas
líquidos, en particular agua y disminuir o
evitar las bebidas carbonatadas endulzadas Los errores innatos en el metabolismo de

con fructosa o azúcar. Para Valenzuela “la las purinas son trastornos hereditarios

ingesta excesiva de fructosa en la complejos de gran impacto clínico, que

alimentación actual, requiere mayor ATP presentan síntomas variables de acuerdo

para su metabolización hepática, elevando con el tipo de enfermedad. Pueden

las concentraciones intracelulares de presentarse problemas renales de origen

AMP, derivando en una mayor producción desconocido, retardo mental con

final de ácido úrico” (2016, p. 4). En manifestaciones neurológicas, retardo del

definitiva una mala alimentación puede crecimiento, infecciones recurrentes,

llevarnos a un exceso de ácido úrico el cual automutilación, inmunodeficiencias,

es reconocido como un factor de riesgo anemia hemolítica inexplicable, artritis

para diversas enfermedades metabólicas. gotosa, historia familiar, consanguinidad y

reacciones adversas a fármacos que son
análogos de las purinas.

Las investigaciones de estas enfermedades

comienzan generalmente con la

12
cuantificación del ácido úrico en suero y
en orina, por ser el producto final del
metabolismo de las purinas en humanos.
La dieta y el consumo de medicamentos,
entre otras condiciones patológicas,
fisiológicas y clínicas, también pueden
modificar los niveles de este compuesto
(Contreras Roura, J. 2012).
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13