UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA

PATAGONIA SAN JUAN BOSCO

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES
DEPARTAMENTO DE FARMACIA
CATEDRA DE FARMACOGNOSIA

Problemas 3. Cromatografía.

1- Con el objetivo de analizar la presencia de flavonoides en un extracto

hidroalcohólico de flores de Tilia cordata (Tiliaceae), se realizó una cromatografía
planar bidimensional ascendente sobre soporte activo. Se obtuvo el siguiente
cromatograma:

2°) AcOH 15 %

1°) BAW (BuOH - AcOH - H2O, 3:1:1)

a) Elabore una conclusión sobre los resultados obtenidos. Justifique su

respuesta indicando resolución obtenida, polaridad de las sustancias
separadas, nº de sustancias que contenía el extracto, ventajas del sistema
cromatográfico empleado.
b) ¿Cómo mejoraría la resolución de dicho cromatograma?.

2- Para el análisis de una muestra de un medicamento fitoterápico en cápsulas que

contiene un extracto purificado de semillas de Aesculus hippocastanum
(Hippocastanaceae), se utilizó el siguiente sistema cromatográfico:
FE: sílicagel GF254
FM: CHCl3 – Me OH - H2O (65: 50 : 10); T° , H y P ambiente.
Sustancia patrón: escina.
Cromatograma obtenido:

Escina Muestra
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 a) Establezca una conclusión justificando su respuesta.
b) ¿Podría asegurar que la muestra contiene dos componentes? Si considera que no,
proponga otro sistema para verificar la composición.
c) Si en lugar de utilizar la FE señalada, usara celulosa microcristalina, ¿qué
resultados esperaría obtener y por qué?.

3- La pasiflora, Passiflora coerulea (Passifloraceae), presenta entre los flavonoides de

su composición química: vitexina (flavona), kaempferol (flavonol), glicósido de
kaempferol y quercetina. Dibuje los cromatogramas esperados como resultado de la
aplicación de los sistemas cromatográficos planares ascendentes sobre papel
Whatman N°1 con las siguientes FM y justifique lo dibujado:
a) BAW (3:1:1)
b) FORESTAL (HCl – HAcO - H2O, 3:30:10)
c) BN (Butanol - NH4OH 2 M, 1:1)

4- Para cuantificar los flavonoides presentes en el Ginkgo biloba (Ginkgoaceae), se

realizó una CLAE en fase reversa de un extracto metanólico hidrolizado en medio
ácido, utilizando como fase móvil metanol-agua con un gradiente de elución. El
sistema cromatográfico utilizado fue el siguiente:
- F.E.: columna Microsorb-MV100 C18 (250 mm x 4,6 mm x 5 μm)
- F.M.: (metanol-agua con 0,3 % v/v de ácido fosfórico)
- Flujo de la Fase móvil: 1 ml/min
- Gradiente inicial: 30 % Metanol – 70 % agua con 0,3% v/v de ácido fosfórico
- Gradiente final: 60 % Metanol- 40 % agua con 0,3% v/v de ácido fosfórico
- Volumen de inyección: 20 μl
- Detector: UV modelo ProStar
- Longitud de onda de trabajo: 370 nm
- Temperatura: 25 °C
- Tiempo de corrida: 40 min

a) Analice el cromatograma y explique por qué la quercetina tiene un tiempo de

retención menor y la isoramnetina el mayor. Dibuje las estructuras químicas que
permiten justificar su explicación.

b) ¿Qué ventajas otorga el utilizar un gradiente de elución?

c) ¿Por qué se hidroliza el extracto antes de efectuar la cromatografía?

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 5- Dado el siguiente Sistema cromatográfico:
F.M.: Forestal (HCl cc-HAcO- H2O, 3:30:10)
F.E. papel Whatman Nº 1. T°, P, H, ambiente.
Cromatofolio con dimensiones: 7 x 16 cm
Muestra: extracto etanólico de las hojas de Gingko biloba (Gingkoaeae) (M)
Patrón: apigenina (P)
Frente de solvente: 10 cm

1 (M) 2 (P)

Nº 1: Rf 0,84 Nº 4: Rf 0,83

Nº 2: Rf 0,57

Nº 3: Rf 0,43

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 a) Realice una búsqueda en bibliografía respecto de los componentes que debería
contener la muestra.

b) De acuerdo a las estructuras químicas de dichos componentes, justifique los Rf

obtenidos usando este sistema cromatográfico.

6- Una muestra contiene las sustancias X e Y. Se desea determinar cuantitativamente

X, utilizando el método del estándar interno. Se probaron los compuestos 1, 2 y 3
como posibles estándares internos, obteniéndose el siguiente cromatograma:
a) ¿Cuál elegiría como estándar?
b) ¿Cómo procedería para la cuantificación de X?

7- Dado el siguiente sistema cromatográfico:

FE: papel Whatman Nº 1.
FM: 1º D: n-butanol-ácido acético-agua (3:1:1), 2º D: ácido acético al 15 %.
Muestra: extracto seco retomado con etanol y sembrado en forma puntual.
Patrón: rutina.
Revelado: luz UV sin y con vapores de NH3.
Temperatura ambiente, P y H normal.

a- Clasifique el tipo de cromatografía.

b- Indique a qué compuestos corresponden las manchas obtenidas, si la muestra
presentaba:
- flavonas metiladas
- flavonas/flavonoles
- glicósidos de flavonas
- glicósidos de flavonoles

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