Rev Cubana Farm 2001;35(3):171-80

Instituto de Farmacia y Alimentos. Universidad de La Habana

DISEÑO Y VALIDACIÓN DE UN MÉTODO

ESPECTROFOTOMÉTRICO PARA EL ESTUDIO
DE ESTABILIDAD DE BENZOCAÍNA EN UN NUEVO
UNGÜENTO RECTAL

Yania Suárez Pérez, 1 Oscar García Pulpeiro2 y Fathel

Mohamed Ahmed Al-Sufi3

RESUMEN
Se desarrolló un método por espectrofotometría UV, que incluyó la extracción
previa del producto de degradación de la benzocaína presente en un nuevo
ungüento rectal, destinado al tratamiento del brote hemorroidal agudo. El
método analítico se validó para el estudio de estabilidad química de este principio
activo. Según los criterios estadísticos vigentes, el método resultó lineal, exacto,
preciso, sensible y específico para el objetivo con el cual fue diseñado.

DeCS: TECNOLOGIA FARMACEUTICA; ESTABILIDAD DE MEDICA-

MENTOS/métodos; composición DE MEDICAMENTOS; ESPECTRO-
FOTOMETRIA ULTRAVIOLETA; BENZOCAINA/farmacología; QUIMICA
FARMACEUTICA; POMADAS/uso terapéutico.

La Industria Farmacéutica se encuentra La validación de un método analítico

involucrada en garantizar la máxima calidad
posible de los productos desde la etapa de
diseño, cumpliendo con las llamadas
Buenas Prácticas de Fabricación y
Laboratorio. Para ello es necesario tener en
cuenta una serie de aspectos que incluyen
la calificación de equipos y del personal, la
documentación y la validación de las
técnicas o métodos de análisis.
incluye la evaluación de una serie de
parámetros que dependerán del estudio en
que será utilizada la técnica en cuestión.
Ellos son: linealidad, precisión, exactitud,
especificidad y sensibilidad.1
La benzocaína (p-amino benzoato
de etilo) es el éster etílico del ácido p-
-aminobenzoico (PABA). El PABA a su vez
es el principal producto de degradación de

1
Master en Tecnología y Control de Medicamentos. Instituto de Farmacia y Alimentos
(IFAL). Universidad de La Habana.
2
Master en Tecnología y Control de Medicamentos. Empresa Laboratorio “Roberto Escudero
Díaz”. Industria Médico Farmacéutica. (IMEFA).
3
Licenciado en Ciencias Farmacéuticas.

171
la benzocaína por hidrólisis. Su perfil de pH
revela catálisis básica, aunque también puede
esperarse que presente catálisis ácida. De ahí
se deduce que para incrementar la estabilidad
de la benzocaína, se debe minimizar su
contacto con agua, bases y ácidos.2
En la bibliografía se reportan muy pocas
técnicas específicas que permiten la
determinación de la benzocaína en
presencia del PABA. Entre ellas se destacan
la espectrofotometría diferencial basada en
la capacidad del PABA de sufrir efecto
batocrómico en zona alcalina. Otro consiste
en acomplejar benzocaína con cafeína
después de aplicar hidrólisis alcalina,
mientras que la solución acuosa de PABA
se determina en la zona UV.2
Entre estos métodos se incluyen
lógicamente técnicas cromatográficas. Se
reportan 2 técnicas por cromatografía líquida
de alta resolución con adecuada sensibilidad
y selectividad que garantizan la separación
y cuantificación simultánea de benzocaína y
PABA. 2 Otras técnicas reportadas más
recientemente incluyen la cuantificación de
benzocaína en presencia de otros principios
activos.3-5
La cromatografía gaseosa se utilizó con
éxito en el estudio de estabilidad de un
ungüento de uso tópico, empleando detector
de ionización de llama.6
El ungüento rectal que contiene este
fármaco es un producto en etapa de
investigación, que requiere de los estudios
de estabilidad para poder ser registrado. Por
esta razón, nos encaminamos a desarrollar
un método útil para este fin, que pudiera
satisfacer los requisitos actuales de
validación estipulados para los métodos de
la categoría II.7
MÉTODOS
Reactivos
− Cloroformo p.a.
− Etanol 96° p.n.
− Sulfato de sodio anhidro.
172
Equipos
− Balanza analítica digital ER - 60 A.
− Balanza analítica digital Sartorios 1720.
− Espectrofotómetro UV-VIS. Pye -
-Unicam SP 6-450.
− Espectrofotómetro UV-VIS. Pharmacia
LKB.
Desarrollo de un método específico
para cuantificar benzocaína en presencia
de su producto de degradación. Teniendo
en cuenta las solubilidades relativas de la
benzocaína y de su producto de degra-
dación, se diseñó un método por espectro-
fotometría UV que incluyó la extracción
previa del PABA en fase acuosa, por
separación en sistemas de 2 fases. La
benzocaína se determinó en fase
clorofórmica y el PABA se eliminó en fase
acuosa.
Determinación de la capacidad de
eliminación de interferencias del PABA en
la fase clorofórmica con la aplicación de
lavados acuosos sucesivos. La solubilidad
relativa del PABA en agua con respecto a
la benzocaína es muy superior.
Se preparó una solución de PABA en
agua 3 mg/mL de la cual se tomaron 50 mL y
se mezclaron en un embudo separador con
igual volumen de cloroformo. Se agitó y se
separó la fase clorofórmica. De cada fase se
tomaron 100 µL y se enrasó a 10 mL con
etanol 96 °.
Se determinó la absorbancia a 295 nm
contra un ensayo de corrección.
La misma solución clorofórmica se
sometió a lavados sucesivos con 4 fracciones
de 50 mL de agua. Después de cada extracción
se colectaron 100 µL y se enrasaron en
matraces de 10 mL con etanol 96 °. Las
soluciones finales se leyeron a 295 nm. Con
estos resultados se construyó un gráfico
de absorbancia vs número de lavado para
cada fase y se observó si el procedimiento
resultó eficaz o no.
Descripción del método
− Se pesaron con exactitud 300 mg de
ungüento en un beacker de 50 mL.
− Se añadieron 20 mL de cloroformo, se
agitó para disolver la benzocaína y se
trasvasó a un embudo separador de 125 mL.
− Se lavó el beacker con 10 mL de
cloroformo y se trasvasó al embudo.
− Se extrajo el PABA de la fase clorofórmica
mediante el lavado con 4 fracciones
sucesivas de 50 mL de agua.
− Se desechó la fase acuosa y se colectaron
los extractos clorofórmicos en un
beacker de 100 mL.
− Se añadieron cantidades apropiadas de
sulfato de sodio anhidro para secar la
fase clorofórmica con ayuda de
agitación.
− Se filtró por papel rápido hacia
volumétricos de 50 mL.
− Se completó el volumen con cloroformo.
− Se extrajo una alícuota de 2 mL y se
trasvasó a un volumétrico de 50 mL.
− Se completó el volumen con cloroformo.
− Se determinó la absorbancia a 280 nm
contra ensayo de corrección.
Forma de cuantificación utilizada para
estimar el contenido de benzocaína en el
ungüento. Se utilizó la comparación con el
estándar externo. Se preparó una solución
de benzocaína en cloroformo de concentra-
ción 4,8 µg/mL, la cual se evaluó en iguales
condiciones que las muestras y se
determinaron los valores de absorbancia
contra ensayo de corrección a 280 nm. El
cálculo de la concentración experimental en
tanto por ciento se realizó mediante la
expresión siguiente:
Cm =Am × Cp/Ap
donde:
Cm = concentración que se desea
estimar (%).
173
Am = absorbancia de la muestra a
280 nm.
Cp= concentración del estándar
externo (100 %).
Ap = absorbancia del estándar externo
a 280 nm.
Validación del método espectrofo-
tométrico con extracción previa para
estudios de estabilidad. El método se validó
teniendo en cuenta los parámetros exigidos
para la categoría II que agrupa a los métodos
analíticos para determinación cuantitativa
del fármaco sin interferencias de sus
productos de degradación en las formas
terminadas.
Los parámetros evaluados fueron:
− Especificidad.
− Especificidad en estabilidad.
− Linealidad del sistema.
− Linealidad del método.
− Exactitud.
− Precisión: repetibilidad y reproduci-
bilidad.
− Sensibilidad: Límite de detección y de
cuatificación.
Especificidad. La especificidad con
respecto a los excipientes se evaluó
mediante el proceso por triplicado de
placebos del producto por la técnica
propuesta. Se analizó la presencia de
respuesta positiva o no de los componentes
de la matriz en el rango de interés analítico
para la benzocaína. Además se registró el
espectro UV contra blanco de cloroformo
entre 245 y 330 nm.
Especificidad en estabilidad. Se
procesaron por triplicado placebos
cargados con 15 mg de PABA (aproxima-
damente 3 veces la cantidad de benzocaína
presente en la porción de ensayo) y se
determinó la absorbancia de la fase
clorofórmica a 280 nm, la que se comparó
con el estándar externo equivalente al
100 % de benzocaína en cloroformo.
Además se analizaron por triplicado
placebos cargados simultáneamente con
6 mL de solución madre de benzocaína en
cloroformo 1 mg/mL, es decir, la cantidad
equivalente al 100 % y con 15 mg de PABA.
Finalizado el procesamiento, se determinó
el tanto por ciento de recobro de benzocaína
(R) y se comparó nuevamente con el
estándar externo preparado al 100 % de la
dosis. Se verificó la posibilidad de
interferencia del PABA en los porcentajes
de benzocaína obtenidos.
Linealidad del sistema. Cumplimiento
de la ley de Lambert-Beer. Para evaluar el
cumplimiento de la ley de Lambert-Beer se
construyó una curva de calibración de
absorbancia vs concentración, utilizando
diferentes diluciones de benzocaína en
cloroformo correspondientes a 2,4; 3,6; 4,8;
6,0 y 7,2 µg/mL. Estas diluciones correspon-
dieron a las concentraciones de 50, 75, 100,
125 y 150 % del fármaco en relación con el
contenido nominal en el ungüento. Cada
punto se evaluó por duplicado. Los datos
se procesaron estadísticamente con la
aplicación de la regresión lineal mediante el
paquete STATISTICA. Se determinó r
(coeficiente de correlación lineal), r 2
(coeficiente de determinación), intercepto
(a) y pendiente (b) para el 95 % de confianza.
Se aplicaron los criterios de aceptación
siguientes:
− Ecuación de la recta: y = bx + a
− r ≥ 0,99
− r2 ≥ 0,98
− Prueba de proporcionalidad del método
analítico o hipótesis nula de la ordenada
en el origen a = 0. Se empleó la prueba
estadística t de Student para n–2 grados
de libertad siendo n el número total de
pares de valores; donde t experimental
< t teórica.
174
− Prueba de la hipótesis nula de la
pendiente b = 0. Se determinó a partir
de una prueba ANOVA de la
regresión, o mejor, la probalidad (p)
asociada con el valor de la pendiente,
es decir, si la p<< 0,05 el valor de “b”
difiere significativamente de cero.
Linealidad del método, exactitud y
repetibilidad. Para la evaluación de estos 3
parámetros se utilizaron los mismos datos.
Se llevó a cabo con placebos cargados con
el 50, 75, 100, 125 y 150 % de benzocaína. La
preparación de las muestras consistió en
pesar individualmente 300 mg de placebo, a
los cuales se les adicionaron alícuotas de
3; 4,5; 6; 7,5 y 9 mL respectivamente de una
solución madre de benzocaína en
cloroformo 1 mg/mL. Cada punto se procesó
por triplicado.
Se aplicaron los criterios de aceptación
siguientes:
− Linealidad del método: Se procedió de
la misma forma descrita para la
evaluación de la linealidad del sistema;
de manera que se construyó la curva de
calibración de concentración experi-
mental (%) vs concentración teórica (%)
y se aplicó el mismo procesamiento
estadístico y los mismos criterios de
aceptación.
− Exactitud: Se construyó la curva de
recuperación que incluyó los valores
obtenidos para 3 niveles de
concentración: bajo (75 %), medio
(100 %) y alto (125 %). Estos datos se
procesaron por regresión lineal de igual
modo que para la linealidad, por lo que
deben cumplirse los mismos criterios de
aceptación. Además se calculó para
cada punto el tanto por ciento de recobro
 (R), el recobrado medio (R) y el
coeficiente de variabilidad total (CV).
(R) = Y/X
donde:
Y = absorbancia de la muestra.
X= absorbancia del estándar externo.
R = 96-104 %
CV ≤ 3,0 %
− Repetibilidad: Se analizaron las réplicas
de los 3 niveles de concentración
utilizados para evaluar la exactitud. Se
calculó para cada punto el CV. Estas
determinaciones se realizaron por el
mismo analista en las mismas
condiciones de trabajo. CV ≤ 2,0 %.
Reproducibilidad. Se cargaron placebos
del producto con alícuotas de 6 mL de una
solución madre de benzocaína en cloroformo
1 mg/mL. Participaron 2 analistas en 2 días
diferentes, quienes analizaron 3 réplicas
cada uno para un total de 12 ensayos. Los
resultados se evaluaron estadísticamente
mediante un análisis de varianza.
El criterio de aceptación fue: CV≤ 3,0 %.
Sensibilidad: Límite de detección y de
cuatificación. Para la evaluación de este
parámetro se estimaron el límite de cuantifi-
cación (Lc) y el límite de detección (Ld) a
partir de la curva de regresión aplicando
los pasos siguientes:
1. Se determinó la pendiente de la curva
de calibración de la linealidad del
sistema: concentración (µg/mL vs
absorbancia) y se obtuvo el valor de “b”.
2. Se construyó otra curva de calibración
analizando 3 puntos con 3 réplicas cada
uno de concentraciones menores de
analito (0,8, 1,2 y 1,6 µg/mL) y se
determinó la ecuación de esta nueva
recta de calibración aplicando regresión
lineal con el paquete STATISTICA. Se
extrapoló la respuesta a concentración
cero y se obtuvo un estimado de la
respuesta blanco “Ybl”.
175
3. Se determinó la desviación estándar (S)
correspondiente a cada concentración
evaluada en el paso anterior. Se
construyó otra curva de calibración de
concentración (µg/mL) vs desviación
estándar (Sx). Al igual que en el paso
anterior, se extrapoló S a concentración
cero y se obtuvo el estimado “Sbl”
correspondiente a la S del blanco.
Se calculó Lc y Ld mediante las
ecuaciones siguientes:
Ld = (Ybl + 3Sbl)/b x (1 / √ n)
Lc = (Ybl + 10Sbl) / b x (1 /√ n)
donde:
Ld: límite de detección.
Lc: límite de cuantificación.
b: pendiente de la recta de regresión
lineal.
Ybl: estimado del blanco.
Ysl: estimado de la desviación estándar
del blanco.
n: número de medidas individuales.
Se comprobaron de forma experimental
los resultados obtenidos teóricamente para
ambos límites, preparando por triplicado las
soluciones correspondientes de benzocaína
en cloroformo en cada caso.
RESULTADOS
Se determinó que la longitud de
onda de máxima absorción de la
benzocaína 4,8 µg/mL en cloroformo
fue a 280 nm, por lo que se fijó este valor
para llevar a cabo la determinación.
Además se verificó que los valores de
absorbancia permanecieron estables
durante 8 h.
En la figura 1 se muestra la capacidad
del método para eliminar las posibles
interferencias debidas al PABA de la fase
clorofórmica, en la cual se lleva a cabo la
cuantificación del fármaco.
 Concentración
de PABA
(mg/mL)
2,5
2 principal producto de hidrólisis en la fase
1,5
1 benzocaína en los placebos cargados
0,5
0 medio de 99,39 % ± 0,87. De este forma
1 2 3 4 5
Número de lavado
Fase acuosa Fase clorofórmica
FIG. 1. Capacidad de eliminación de interferencias del PABA
en la fase clorofórmica con la aplicación de lavados acuosos
sucesivos.
En dicha figura se evidenció una rápida
transferencia del PABA a la fase acuosa a
partir del segundo lavado. El producto de
degradación estuvo totalmente ausente
después de la cuarta extracción, por lo que
de este modo se justifica la selección de
este número de lavado en la descripción
del método. Si se tiene en cuenta que la
cantidad de PABA que se añadió equivale
aproximadamente al 250 % con respecto a
la degradación total de la benzocaína en
concentraciones ideales, podemos brindar
adecuada seguridad en relación con la
eficacia de este paso.
El primer parámetro analizado en la
validación del método fue la especificidad.
La figura 2 muestra que el método es
específico frente a las sustancias auxiliares
y el otro fármaco incluido en la formulación,
ya que no se obtuvo respuesta en el rango
de interés analítico para la benzocaína.
Los mismos resultados con respecto a
176
los valores de absorbancia se obtuvieron
al cargar placebos del producto con
cantidades apreciables de PABA, por lo que
tampoco existieron interferencias desde el
punto de vista cualitativo, debidas al
clorofórmica. Desde el punto de vista
cuantitativo, los resultados también fueron
satisfactorios pues la cuantificación de la
simultáneamente con el principio activo y
el PABA, dieron valores de recobrados
adecuados entre 99 y 101 %, para un valor
quedó demostrada no solo la especificidad
para control de calidad, sino también la
especificidad del método para estudios de
estabilidad.
Se verificó la linealidad del sistema, es
decir, el cumplimiento de la ley de Lambert-
-Beer en el rango entre 2,4 y 7,2 µg/mL. Para
este mismo rango, pero trabajando en lugar
de patrones con placebos cargados, se
comprobó la linealidad del método. Para
ambos parámetros se alcanzaron elevados
coeficientes de correlación lineal y
determinación. Para el intercepto el valor
de t de Student experimental fue menor que
el teórico para el 95 % de confianza y para
los grados de libertad utilizados en cada
caso, por lo que el intercepto no difiere
significativamente de cero. Por otra parte,
se mostraron pendientes próximas a la
unidad, con t de Student muy altas y valores
de probabilidad (p) inferiores al 0,05
establecido como límite, por lo que podemos
concluir que el valor observado es
prácticamente igual al predicho. El
cumplimiento de todos los criterios
estadísticos de la regresión avaló la
linealidad del sistema y del método.
Con los resultados de los 3 puntos
centrales de la linealidad del método se
 Absorbancia
0,06
0,05
0,04
0,03
0,02
0,01
FIG. 2. Resultados del ensayo 0
de especificidad. Espectro UV 250
del placebo procesado por el -0,01
método propuesto.
evaluó la exactitud y la repetibilidad. Para la
exactitud el procesamiento estadístico de
la curva de recuperación cumplió con las
exigencias establecidas al igual que en la
linealidad. Este resultado nos condujo a
considerar que los errores sistemáticos del
método no fueron significativos, por lo que
puede considerarse exacto. Aunque para el
recobrado medio ( R) ningún valor excedió
los límites de 97-103 % propuestos por la
mayoría de los autores, consideramos la
ampliación de estos en ± 1 % (96-104 %) tal
como se recomienda para las preparaciones
semisólidas. A su vez el coeficiente de
variación total fue muy inferior al 3,0 %
estipulado como límite.
La repetibilidad a los 3 niveles dio
valores de coeficiente de variación bajos,
los cuales cumplen satisfactoriamente con
el 2,0 % propuesto como límite (tabla 1).
Los resultados de la reproducibilidad
se muestran en la tabla 2. Como se observa
el coeficiente de variación total es menor
que el 3,0 %. Además se comprobó por el
programa ANOVA-2 que no existen
diferencias significativas desde el punto de
vista estadístico entre los resultados
obtenidos para días (F = 0,402) y analistas
(F = 0,345), pues en ambos casos la F
calculada resultó inferior a la tabulada. De
este modo, pudimos concluir que el método
260 270 280 290 300 310 320 330
Longitud de onda
fue repetible y reproducible, es decir, fue
suficientemente preciso, por lo que no
repercutieron apreciablemente los errores
aleatorios en la determinación.
Por último se determinó la sensibilidad.
La tabla 3 resume los resultados obtenidos
para el límite de detección y cuantificación,
así como los resultados experimentales
alcanzados en la comprobación de los
límites.
Como hemos demostrado, el método
cumplió con los parámetros mínimos
necesarios para ser aplicado en el segui-
miento de la estabilidad química de la
benzocaína en este producto. Además de
ser lineal, exacto, preciso y específico frente
a las sustancias auxiliares, fue suficien-
temente sensible y permitió diferenciar la
respuesta de la benzocaína y de su
producto de degradación.
DISCUSIÓN
La benzocaína es prácticamente
insoluble en agua y muy soluble en
cloroformo, al igual que los excipientes
utilizados en la formulación, ya que se
utilizó una base oleaginosa. El PABA es
soluble en agua, por lo que consideramos
oportuno realizar su extracción en medio
177
TABLA 1. Resultados de la evaluación de los parámetros linealidad del sistema, linealidad del método, exactitud y repetibilidad

Linealidad del sistema Linealidad del método Exactitud Repetibilidad

Absorbancia Conc. Experimental (%) Recobrado (%) Coeficiente de
Conc. Real (%) a 280 nm Y ± DE Y ± DE variación (%)

50 0,27 ± 0,00 49,53 ± 0,462 - -

75 0,42 ± 0,63 74,93 ± 0,414 100,23 ± 1,086 1,080
100 0,56 ± 0,00 99,99 ± 1,815 99,99 ± 1,815 1,815
125 0,71 ± 0,00 122,51 ± 0,525 97,70 ± 0,854 0,875
150 0,86 ± 0,00 149,90 ± 1,153 - -
Resultados Y = 1,22 x-0,023 Y = 0,9892 x+ 0,249 Y = 9,948 x+ 0,45 -
R2 = 0,9999 R2 = 0,9990 R = 0,9979
2

R = 0,9999 R = 0,9980 R = 0,9959

Texp (0,13) <tteo texp (0,19)<tteo texp(1,96)<tteo
P= 0,000 p = 0,000 p= 0,000
R = 99,31 %
CV = 1,67 %
Criterios Y =bx+a Y = bx+a Y =bx+a CV ≤2,0 %
R 2 ≥ 0,99 R2 ≥ 0,99 R2 ≥ 0,99
r ≥ 0,98 r ≥ 0,98 r ≥ 0,98
a ≅ 0: a ≅ 0: a ≅ 0:
texp<tteo texp<tteo texp<tteo
b≅ 1 b≅ 1 b≅ 1
p<<0,05 p<<0,05 p<<0,05
R = 96-104 %
CV ≤ 3,0 %

TABLA 2. Resultados de la reproducibilidad del método todos los componentes de la matriz.

Días Analista 1 Analista 2
La demostración de la linealidad del
sistema permite establecer en el rango
1 97,58 96,77 estudiado una proporcionalidad directa
96,77 96,54
96,77 97,00
entre la concentración de analito y la
2 97,20 96,77 respuesta medida, que es la absorbancia en
97,00 97,40 este caso. Si bien este resultado es muy
96,77 96,80
Resultado: CV = 0,358 % Criterio: CV ≤ 3,0 % importante, no debemos limitarnos a estimar
la linealidad solo para el sistema, ya que las
características de la matriz en estudio y el
acuoso a partir de la fase apolar, con el trabajo experimental realizado con el desarrollo
objetivo de lograr adecuada especificidad del método, puede provocar algunas
del método frente al producto de modificaciones en los resultados con
degradación. Además se evaluó la respecto al procedimiento mucho más
especificidad frente a la matriz, su objetivo simplificado que se lleva a cabo con los
fue demostrar la ausencia de interferencias de patrones.
los restantes componentes de la formulación. Con respecto a la exactitud no se
La cuantificación de benzocaína por confrontaron dificultades con el
espectrofotometría UV directa, es decir, sin cumplimiento de los criterios. Sin embargo,
extracción previa del PABA, carece de valor la disminución de los valores de R con el
para el seguimiento de la estabilidad química aumento de la concentración pudiera
del fármaco y solo puede ser recomendada parecer contradictoria. Estos resultados
para el control de calidad en el producto pueden ser perfectamente explicados si
recién elaborado. El método utilizado partimos de la base de que en los 30 mL de
garantiza seguridad y selectividad frente a cloroformo añadidos al inicio se disuelve la

178
TABLA 3. Resultados del ensayo para la determinación de la sensibilidad

Concetración µg/mL Absorbancia a 280 nm (X ± DE)

0,8 0,0786 ± 0,061

1,2 0,1200 ± 0,056
1,6 0,1700 ± 0,010
Pendiente de la recta 0,12229
Intercepto Yhl 0,00000
Intercepto Sbl 0,01200
Límite de detección 0,203 µg
Límite de cuantificación 0,677 µg

Comprobación experimental de los límites absorbancia a 280 nm

Límite de detección 0,020

0,019
0,020
límite de cuantificación 0,070
0,069
0,070

totalidad de la benzocaína, y a partir de esa concentrada, se observa menor valor de R.

concentración se realizan las 4 extracciones
con agua. Las pequeñas pérdidas de
volumen que ocurren en esta etapa,
repercuten marcadamente en la concentra-
ción final. Aunque las pérdidas sean
mínimas, si la muestra estaba más
La precisión y la sensibilidad de la
técnica fueron satisfactorias, por lo que el
método es válido para el objetivo con el
cual fue diseñado. Mediante la técnica
propuesta se puede cuantificar pequeñas
cantidades de fármaco, en el orden de los
microgramos con elevada especificidad.

SUMMARY
A method including the previous extraction of the degradation product of
benzocaine pesent in a new rectal ointment to treat acute haemorrhoid was
developed by ultraviolet spectrophotometry. The analytical method was
validated for the study of the chemical stability of this active principle. According
to the standing statistical criteria, the method proved to be lineal, exact,
accurate, sensitive and specific for the objective it was designed.

Subject headings: TECHNOLOGY, PHARMACEUTICAL; DRUG STABILITY/

/methods; DRUG COMPOUNDING; SPECTROPHOTOMETRY, ULTRAVIOLET;
BENZOCAINE/pharmacology; CHEMISTRY, PHARMACEUTICAL;
OINTMENTS/therapeutic use.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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Recibido: 23 de febrero del 2001. Aprobado: 30 de mayo del 2001.

M. Sc. Yania Suárez Pérez. Palatino No. 53 entre Salvador y Meireles, municipio Cerro, Ciudad de La
Habana, Cuba.

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