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ASIGNATURA: ANÁLISIS CLÍNICOS

UNIDAD 2: ÁNÁLISIS FÍSICO, QUÍMICO Y MICROSCÓPICO DE ORINA

Examen microscópico de orina

DOCENTE: IRINA M. VILLACRÉS GRANDA, PhD


INTRODUCCIÓN
• Examinación del sedimento urinario

• Propósito: identificar material insoluble en orina: detección de desórdenes renales, del tracto urinario y
enfermedades sistémicas

• Se puede observar: Glóbulos rojos, leucocitos, células epiteliales, cilindros, bacterias, levaduras, moco,
espermatozoides, cristales y artefactos.

• Protocolos para determinar si el análisis microscópico es necesario: Correlación con análisis físico y químico de orina.
Además, mujeres embarazadas, pacientes pediátricos, geriátricos, diabéticos, inmunocomprometidos y renales.

• CLSI recomienda examen microscópico:

- Requerido por médico


- Población específica
- Resultados anormales en examen físico y/o químico

• Desarrollo del análisis microscópico: microscopios de contraste, imagen automática computarizada, tinciones de
sedimento urinario.
PREPARACIÓN DEL SEDIMENTO
• Análisis microscópico susceptible a variaciones metodológicas: volumen, métodos y equipos, reporte
de resultados.

• Métodos automatizados=más precisos menos tiempos

• Muestra fresca: glóbulos rojos, glóbulos blancos, cilindros hialinos=se desintegran en orina alcalina.

• Refrigeración= precipitación de uratos amorfos, fosfatos y cristales=opacan a otros elementos.

• Centrifugación: 12 a 15 mL (en menor cantidad, se debe reportar o hacer la corrección). 5 minutos a


4000 g (1500-2000 rpm)

• Resuspención de sedimento: se desecha el sobrenadante hasta dejar 1,5 a 1 mL. Se realiza la


resuspención con pipeta o con pequeños toques al tubo.

• Volumen del sedimento: debe ser estandarizado. 20 µL. En porta objetos limpio. Cubrir con un
cubreobjetos.
EXAMINACIÓN DEL SEDIMENTO
• Consistente. Al menos 10 campos ópticos (10X y 40X)

• Cuando se encuentra elementos que necesitan identificación se debe subir el aumento del microscopio

• Variaciones

- Cilindros se ubican en la periferia de los cubre objetos.


- Sin tinción: índice refractivo de sedimentos similar a orina= disminuir la luz. Cerrar el diafragma y ajustar el
condensador.
REPORTE DE RESULTADOS
- Cilindros: se observan en 10X y se reportan: 1) total encontrado en los 10 campos ópticos
analizados. 2) rangos 0-2,2-5, 5-10. 3) raro, escaso, moderado, alto
- Células: se enumeran en 40X. 10 campos ópticos. Reporte: 1) Total en 10 campos. 2)
rangos: 0-2, 2-5, 5-10, 10-20, 20-50, ˃50. 3)raro, escaso, moderado, alto
- Cristales, bacterias, parásitos y otros sedimentos: 1) presencia-ausencia. 2)raro, escaso,
moderado, alto. 3) 1,2,3,4 (+)
GLÓBULOS ROJOS-ERITROCITOS
• Morfología:

• Normal: Bordes definidos, Sin núcleo, Discos


bicóncavos, 7 micras diámetro

• Orina Concentrada: células con bordes irregulares y


encogidas

• Orina diluida: células redondas, se lisan rápido, sólo


membranas (células fantasma)

• Sangrado glomerular o de origen glomerular: células


con protuberancias, fragmentadas (dismórficas)

• Visualización: 40X

• Reporte: número observado en 10 campos ópticos

• Confusión: levaduras, gotas de grasa y burbujas de


aire, gránulos en leucocitos

• Valoración con análisis químico


SIGNIFICADO CLÍNICO:
Hematuria=daños en membrana glomerular o lesión vascular en el aparato genitourinario
Número de células=severidad del daño
GLÓBULOS BLANCOS- LEUCOCITOS
Más grandes que Glóbulos rojos pero más
pequeños que células epiteliales renales
Normal: ˂5. Puede ser mayor en orina de mujeres
12 micras de diámetro
Varios tipos
Reporte: número en 10 campos ópticos a 40X
Ingresan por traumatismo glomerular o capilar,
también migración ameboide hacia tejidos o sitios
de infección o inflamación.
Incremento= piuria=presencia de inflamación o
infección del sistema genitourinario
Agrupados: pielonefritis, cistitis o uretritis
NEUTRÓFILOS
• Más predominantes.

- Contienen gránulos y núcleo


multilobulado
- Se lisan rápido en orina
alcalina y pierden el detalle
del núcleo
- En orina hipotónica:
absorben agua y se hinchan
y se observan brillantes por
movimiento de los gránulos
(Células escarchadas)
EOSINÓFILOS
• Presencia: No es normal: Más del 1% es significativo

• Nefritis asociada al consumo de medicamentos o drogas

• Infecciones de vías urinarias

• Rechazo en trasplante renal


CÉLULAS MONONUCLEARES
• Células esféricas
• Citoplasma granular
• Linfocitos, monocitos, macrófagos e histiocitos
• Presentes en pequeño número
• Linfocitos: muy pequeños, números altos en rechazo de trasplante
de riñón
• Monocitos, histiocitos y macrófagos: células más grandes. Pueden
tener vacuolas o inclusiones.
CÉLULAS EPITELIALES
• Normal: Derivadas de las paredes del tracto genitourinario
• Problema: en altas cantidades o formas anormales
• 3 tipos: Escamosas, de transición (Urotelial), renales tubulares.
CÉLULAS EPITELIALES ESCAMOSAS
• Las más grandes en el sedimento
urinario. Mayor cantidad en mujeres.

• Citoplasma abundante e irregular con


un núcleo grande (tamaño de GR

• Reporte: raro, escaso, moderado o alto.


También rangos 0-1, +.

• Observación: 10X

• Se originan en las capas epiteliales de la


vagina y uretra (hombre y mujer)

• Variación: clue cell (Células clave).


Indicativo de infección bacteriana,
especialmente con Gardnerella
vaginalis. Célula escamosa cubierta con
los cocobacilos. Apariencia granulosa e
irregular.
Examples of the usefulness of the A-S dye solution
in the diagnosis of BV. (A and B) Fresh observation
of a normal squamous epithelial cell (A) and clue
cells (B) in a nonstained sample. (C to E) Normal
squamous epithelial cells (with normal morphology)
and examples of clue cells in samples from patients
with BV using the A-S dye solution. (F) Bacterial
morphotypes attached to the surface of epithelial
cells, including curved bacilli (red arrow) and a
coccobacillus (black arrow). (G) Leukocytes
(polymorphonuclear). (H) Presumptive koilocyte
(associated with HPV infection) with karyomegaly
and perinuclear halo (yellow arrow). (I) Group of
squamous epithelial cells with inflammation-related
changes such as karyomegaly (green arrow) and
perinuclear halo (yellow arrow)
during Candida infection (blue arrow) (1000X
amplification).
Células epiteliales de transición (uroteliales)
• Más pequeñas que las células escamosas

• Varias formas: esférica, poliedra y caudada

• Capacidad de absorber grandes cantidades de agua

• Característica compartida entre todas las formas: núcleo central

• Reporte: raro, escaso, moderado o alto. También rangos 0-1, +.

• Observación: 10X

• Se originan en las capas epiteliales de la pelvis renal, cálices,


uréteres y vejiga y la porción superior de la uretra masculina.

• Incremento de número: en pares o aglomeradas: cateterización.

• Células con morfología anormal: vacuolas o núcleo irregular.


Infección viral o daño de tejido.
Células renales tubulares
• Varían en tamaño y forma dependiendo del origen en
los túbulos renales
• Contienen un núcleo grande y redondo
• Generalmente presentes por destrucción de tejido
(necrosis): necrosis de los túbulos renales con posible
afectación de la función renal y desórdenes
glomerulares
- Células columnares: túbulo proximal: las más
grandes. Forma rectangular. Citoplasma granular.
Similares a los cilindros (se revisa el núcleo para
descartar cilindro). Células del túbulo distal: Más
pequeñas que las del proximal, redondas u ovales.
Se pueden confundir con GB o las células epiteliales
de transición esféricas.
• Diferencia: Núcleo redondo y excéntrico
• Células del Ducto colector: cuboidales no redondas.
Núcleo excéntrico.
CILINDROS
• Exclusivos de los riñones: Se forman en el lumen de los túbulos distal y colector.

• Presencia en orina: Cilindruria

• Se examinan en el sedimento a 10X, con luz baja, sobre todo en las periferias de la placa.

• Se identifican a 40X y se reportan como número en 10 campos a 10X.

• Tienen la forma de los túbulos: cilíndrica con bordes redondeados

• Formados por precipitación de las mucoproteínas tubulares de Tamm–Horsfall


CILINDROS HIALINOS
• Son los más frecuentes

• Formados en su mayoría por proteína Tamm-Horsfall

• Normal: 0-2

• Patológico: Glomerulonefritis, pielonefritis, enfermedad renal crónica.

• Apariencia: sin color, índice de refracción similar al de la orina= bajar la luz


• Presencia ocasional de células adheridas a la pared
CILINDROS DE GLÓBULOS ROJOS
• Indican sangrado en el tracto genitourinario, específicamente en las nefronas
(glomérulos)
• Color rojo-anaranjado. Pueden estar fragmentados o tener formas irregulares.
• Confirmar con la presencia de GR
• Hemoglobinuria masiva: cilindros obscuros de color café.
CILINDROS DE GLÓBULOS BLANCOS

• Presencia significa infección o inflamación en nefronas


• Pielonefritis/UTI
• Inflamación no bacteriana: nefritis intersticial y glomerulonefritis
• Se visualizan en 10X acompañados de GB libres
• Composición: Neutrófilos=granular con núcleos multilobados
• Se debe revisar que exista una matriz en el cilindro.
CILINDROS EPITELIALES
• Contienen células renales tubulares=destrucción tubular avanzada
• Células visibles, pequeñas, redondas y ovaladas.
CILINDROS GRASOS
• Se observan en conjunto con los cuerpos de grasa ovales y gotas libres de
grasa=lipiduria
• Asociados a síndrome nefrótico y necrosis tubular tóxica, diabetes mellitus
• Se observa gotas de grasa en la matriz del cilindro
CILINDROS MIXTOS
• Los que más se encuentran: GR y GB (glomerulonefritis), GB y
células epiteliales renales o GB y bacterias en pielonefritis.
• Son más difíciles de identificar. Deben estar presentes con los
cilindros homogéneos de cada tipo de célula.
CILINDROS GRANULARES
• No-patológico: lisosomas excretados por las células epiteliales renales durante el
metabolismo. Generalmente en periodos de ejercicio extremo aumentan estos cilindros.

• Patológico: gránulos=desintegración de células tubulares o proteínas filtradas por el


glomérulo
CRISTALES
• Raramente de significancia clínica.
• Formas geométricas o como material amorfo
• Identificación= enfermedades del hígado, metabólicas o daños renales causados por
la cristalización de compuestos en los túbulos.
• Se reportan como raro, pocos, moderado o alto
• Formación de los cristales
- Precipitación de los solutos en la orina (sales inorgánicas, compuestos orgánicos y
medicación
- Puede ser = cambios en la temperatura, concentraciones altas del soluto y el pH.
En Orina Ácida
• Uratos: uratos amorfos, ácido úrico, uratos ácidos y uratos de sodio

• Color de amarillo a rojo-Café= únicos con color

- Uratos amorfos: similares a gránulos y cilindros granulosos. Se observan con un


pigmento rosado debido a la acumulación de Uroeritrina. Se encuentran a pH
ácido 5.5
- Ácido úrico: variedad de formas. Color amarillo-café, incoloros. Orina
pH 7-8
- Uratos ácidos y uratos de sodio: raros, orina pH 7-8. Uratos ácidos forma de
gránulos largos con espículas. Uratos de sodio en forma de aguja (líquido
sinovial)
• Oxalato de calcio: orina ácida más pero también en neutra y alcalina. Más
común dihidrato(incoloro, octaedro o dos pirámides unidas por su base). En
monohidrato son menos comunes (ovalados).
- Acumulaciones de estos cristales = formación de cálculos renales, ingesta alta
de alimentos como tomate, espárragos y ácido ascórbico.
En Orina Alcalina
• Cristales de fosfatos: fosfatos amorfos, fosfatos triples y fosfatos de calcio

- Fosfatos amorfos: granulares. Se diferencias de los uratos amorfos por el color y el pH.
- Fosfatos triples (fosfatos de amonio y magnesio): forma de prisma. No tienen
significancia clínica, pero se observan en orina alcalina con bacterias
metabolizadoras de urea.
- Fosfato de calcio: no frecuentes. Incoloros, planos y rectangulares o en prisma o en agujas. No clínico pero el
fosfato de calcio es constituyente de los cálculos renales.
• Cristales de carbonato de calcio: pequeños, incoloros forma de campana o esférica.
Pueden aparecer en acumulaciones.
• Cristales de Biurato de amonio: color amarillo-café. Esferas cubiertas de
espículas. Siempre en orina alcalina y se relacionan con la presencia de bacterias
metabolizadoras de urea.
Cristales considerados de importancia clínica
• En orina ácida o neutra

• Identidad confirmar con análisis químico y por la información del paciente

• Cristales de cistina: desorden metabólico heredado (no pueden reabsorber la cistina en los túbulos renales-
cistinuria). Tendencia a formar cálculos renales a edad temprana. Cristales incoloros, hexagonales, planos.
• Cristales de colesterol: sólo en muestras refrigeradas. Planas rectangulares con
una hendidura en uno o más bordes. Asociados con lipiduria (síndrome
nefrótico). Deben estar acompañados de otros elementos lipídicos.
• Cristales asociados con enfermedades del hígado
• Cristales de Tirosina: incoloros a amarillos en forma de agujas en
aglomeraciones o en forma de roseta
• Cristales de Leucina: enfermedades metabólicas hereditarias
(Metabolismo de aminoácidos). Esferas amarillas-cafés con círculos
concéntricos y estriaciones radiales
• Cristales de Bilirrubina: Desordenes hepáticos. Agujas agrupadas o
gránulos de color amarillo
• Cristales de sulfonamida: en orina fresca= daño tubular. Generalmente por el uso
de medicación con sulfonamidas. Varias formas. Se debe acompañar con la
historia clínica del paciente.
• Cristales de ampicilina: altas dosis de ampicilina sin buena hidratación.
Aparecen como agujas incoloras.
CUERPOS GRASOS
• Son células epiteliales reticulares que absorbieron lípidos presentes en el filtrado glomerular.

• Se observan en conjunto con gotas de grasa libres.

• Se necesita tinción del sedimento

• Contienen triglicéridos y grasas neutras

• Generalmente en pacientes con daño glomerular, necrosis tubular, diabetes y trauma


BACTERIAS
• No es normal presencia de bacterias=orina líquido estéril=contaminación externa por toma
de muestra

• En orina conservada a temperatura ambiente: nitritos positivos, pH sobre 8, células clave

• Cocos o bacilos

• Reporte: poco, moderado, alto o +

• Significancia: acompañado de GB Alto. bacterias+leucocitos= cultivo

• NO se puede identificar la especie de bacteria por microscopía

• Bacterias comunes productoras de UTIs: Familia Enterobacteriaceae (bacilos Gram-) y Cocos


Gram+ Staphylococcus y Enterococcus
Levaduras
• Estructuras ovales y pequeñas. Pueden presentarse con micelio
• Reporte : raro, poco , moderado, alto o +
• Generalmente Familia Candida
• Infección acompañada de GB. Nitritos negativo
Parásitos
• Más común: Trichomonas vaginalis. Trofozoito. Transmisión sexual.
• Schistosoma haematobium: huevos.
• Contaminación fecal de muestra: Enterobius vermicularis
Espermatozoides
• Fáciles de identificar por su estructura característica La orina es tóxica para los
espermatozoides por lo que rara vez se puede ver su motilidad

• Patológico: infertilidad masculina o eyaculación retrógrada (esperma es expulsado a la vejiga


en vez de a la uretra).

• Proteína positiva: Altos niveles de semen en orina


Moco
• Material proteico: producido por glándulas y células epiteliales del aparato genitourinario
bajo y las células renales tubulares.

• Filamentos mucosos: largos, delgados

• Se cuenta los filamentos mucosos. Reporte: raro, poco, moderado o alto. Pueden
confundirse con cilindros hialinos.
ARTEFACTOS
• Son contaminaciones de varios tipos, especialmente por fallas en la colección de la muestra.

• Más comunes: Almidón, gotas de grasa, burbujas de aire, granos de polen, fibras y materia fecal.

• No es necesario su reporte.

• Gránulos de almidón
• Gotas de grasa
• Polen
• Fibras
• Otros Artefactos
• Cabello
• Fragmentos de vidrio
• Burbujas de aire
• Partículas de talco
BIBLIOGRAFÍA
• King Strasinger, S. & Schaub Di Lorenzo, M. 2008. Urinalysis
and body fluids. F.A. David company Philadelphia.

• Mundt, L. & Shanahan, K. 2011. Graff’s Text book Urinalysis


and body fluids. Second edition. Lippincott Williams & Wilkins.

• Brunzel, N. Fundamental of Urine and Body Fluids analysis.


2018. Fourth edition. ElSevier.

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