INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Ubicación: Santo Tomas. Unidad Profesional Lázaro Cárdenas, Prolongación de Carpio
y Plan de Ayala s/n, Col. Santo Tomas C.P. 11340 Delegación Miguel Hidalgo
Departamento de Bioquímica.
“Dr.Guillermo Carvajal Sandoval”.
“AISLAMIENTO DE DNA PLASMIDICO”.
Mondragon Flores Maria de los Angeles , Hernández Aguirre Gerson Odín.

INTRODUCCION RESULTADOS
Los plasmidos son moléculas de DNA
extracromosomal los cuales están presentes
en algunas células bacterianas, levaduras y
hongos. Los mismos poseen DNA de doble
hebra, mayormente son circulares pero
también se han encontrado plàsmidos lineales.
La replicación de los plasmidos es
independiente de la replicación del cromosoma
del huésped ya que los plasmidos poseen su
propio origen de replicación. El número de
copias de un plasmido en la célula es variable,
todo depende del origen de replicación del que
posea el mismo y su regulación. Los plàsmidos
no son esenciales para el desarrollo o
supervivencia de la célula pero le proveen una
ventaja competitiva a las células que los
poseen, dado a que los plasmidos poseen
genes que le confieren características
selectivas a su huésped tales como resistencia
a antibióticos, nuevas habilidades metabólicas
como degradación de carbohidratos, factores
de virulencia y producción de toxinas entre
otros. Los plásmidos poseen un interés
singular en Ingeniería Genética por ser uno de
los sistemas vectores más sencillos de usar.
Un vector de clonación es un sistema que
permite introducir en una célula hospedadora DISCUSION
un fragmento de DNA que se pretende clonar;
en esta célula hospedadora el vector se replica La electroforesis es una técnica usada para la
y expresa, en su caso. separación de moléculas en base a su tamaño
y carga eléctrica, las muestras se colocan en
OBJETIVO los pocillos de un gel que puede ser de
agarosa, agar-agar o acrilamida, y luego se
 Aislar DNA plasmidico bacteriano, someten a una corriente eléctrica que separará
comprobando dicho aislamiento
las moléculas, en el caso del DNA como la
mediante electroforesis en gel de
carga que presenta es negativa migrará hacia
agarosa.
el polo positivo (por eso debemos tener
cuidado al colocar los electrodos porque las
muestras se pueden salir del gel ). El
procedimiento consta de una serie de pasos;
en nuestro caso los geles usados eran de  Voet D., Voet J.G., “Biochemestry” Editorial
agarosa que permite una resolución de Jhon Wiley & Sons, Inc., 3a edicion. Pp
fragmentos de DNA de 100 pb a 20-30 kb 105-112,1285-1290(2004).
( cuanto más baja es la concentración de
 http://facultadbiologia.usal.es/documentos/
agarosa se separan fragmentos de mayor practicasempr/MemoriasPracEmpresas/
tamaño). En cuanto a los reactivos tenían la CSIC_CIC_DrGSarmiento_08_MonicaBenit
siguiente función: o.pdf

 Solución GTE (GLUCOSA-TRIS-EDTA)  https://www.uco.es/organiza/

EDTA es un agente quelante y sirve departamentos/bioquimica-biol-mol/pdfs/
para atrapar lod iones y no deja 17%20ELECTROFORESIS%20ACS
disponible para las Dnazas que %20NUCLEICOS%20GELES
requieren Mg+2. %20AGAROSA.pdf
 SDS 1% NaOH 0.2 N
Es un detergente que disuelve las
membranas y provoca que las células
se rompan ( lisis alcalina de la
membrana celular) en medio alcalino.
 Acetato de potasio 5M
Para las proteínas que están unidas al
DNA se disocien y eliminarlas.
 Isopropano
El DNA es insoluble en alcohol,
precipita.
 Regulador tris-EDTA (TE)
Tris disuelve el DNA y el EDTA evita la
actividad de las Dnazas.

CONCLUSION

 No se pudo aislar satisfactoriamente

debido a ciertos problemas que
presento el equipo, pero se esperaba
observar las pozas donde se introdujo la
muestra, en el barrido observar
 Circular Relagado
 Lineal
 Superenrollado
Esto va a separarse de acuerdo a su
carga, la mas pequeña van a migrar
mas rápido.

BIBLIOGRAFIA

 David L. Nelson, Michael M. Cox.,Lehninger

Principios de Bioquimica,Ediciones Omega,
S.A., Sexta edición, Barcelona.