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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
PROGRAMA ACADÉMICO DE MICROBIOLOGÍA Y
PARASITOLOGÍA

GENÉTICA - PRÁCTICA

II UNIDAD

ESTUDIANTES:

● Pacherres Yarlaque, Andy Adrian

● Páz Chavez, Joel Miro
● Romero Torres, Sebastian Fabrizzio

DOCENTE:

Dr. Miguel Angel Jaime Chamochumbi

CICLO III - SECCIÓN “B”

TRUJILLO – PERÚ

2023
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1. INTRODUCCIÓN:

Normalmente todo individuo tiene un número, tamaño y forma de par de

cromosomas propios de su especie. En los homo Sapiens (humanos) el número
característico de cromosomas es 44 xy (hombres) o 44 xx, siendo 22 pares de
autosomas y 1 par de alosomas.

Ahora bien, no siempre y necesariamente va a nacer un ejemplar totalmente sano y es

que pueden ocurrir aberraciones cromosómicas o también llamadas mutaciones, estás
se diferencian porque alteran la estructura cromosómica y son totalmente aleatorias y
casi imposible de determinar una causa exacta.

Para ello existe un método llamado prueba de cariotipo, este es una prueba genética
que se encarga de examinar el número, tamaño y forma de los cromosomas en
nuestras células del cuerpo, en otras palabras la prueba de cariotipo determina si
contamos con un total de 46 cromosomas y busca cambios en las estructuras de los
cromosomas.

Para realizar la prueba de cariotipo solo se emplean en general 3 métodos, siendo

estos: Prueba de sangre, hisopado bucal y prueba de médula ósea, estos métodos se
usarán de acuerdo a la edad y condición de salud de la persona.

Para identificar cada cromosoma se realizan técnicas de bandeo, llamadas técnicas de

diferenciación cromosómica. El análisis estructural con la técnica de bandeo G es el
más usado.

El bandeo G es un procedimiento mediante el cual los cromosomas son expuestos a la

acción enzimática controlada (los preparados se tratan con tripsina), y al ser
posteriormente teñidos, los cromosomas presentan un patrón de bandas oscuras y
claras característicos que permite su identificación.

Un ideograma, de aplicación internacional, es la representación esquemática del

tamaño, forma y patrón de bandas de todo el complemento cromosómico.
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2. MATERIALES Y MÉTODOS:

● Materiales:

- Tubo vacutainer
- Heparina
- Microcentrífuga
- Tubos de microcentrífuga
- Medio de cultivo RPMI
- Pipeta Pasteur
- Solución de KCL 0.075 M
- Termostato
- Solución fijadora de Carnoy's
- Solución de Carnoy
- Solución de Orceína acética
- Lamina porta objetos
- Laminilla cubreobjetos
- Papel toalla
- Compás
- Regla

● Métodos:

- Colectar 3 ml de Sangre periférica, utilizando un tubo vacutainer con

Heparina.
- Agregar 1 ml de Sangre a 5 ml de medio de cultivo RPMI con todos los
suplementos, en un tubo de microcentrífuga, incubar durante un periodo de 72
horas a 37 °C.
- Una hora antes de las 72 horas, agregar una solución de colchicina (150 ul) al
medio de cultivo, incubar a 37 grados durante una hora.
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- Centrifugar a 1500 rpm y posteriormente con ayuda de una pipeta Pasteur

eliminar el sobrenadante.
- Con una pipeta Pasteur agregar 10ml de una solución de KC1 0.075 M e
incubar en un termostato a 37°C durante 30 minutos.
- Cumplidos los 30 minutos agregar 1ml de Carnoy y con ayuda de la pipeta
pasteur homogenizar, posteriormente centrifugar a 1500 rpm. durante 10
minutos.
- Utilizando un gotero eliminar el sobrenadante y agregar 10 ml de fijador
Carnoy's (helado).
- Homogeneizar lentamente con pipeta Pasteur y centrifugar a 1500 rpm.
- Eliminar el sobrenadante y agregar 1 ml de fijador Carnoy's (helado),
homogenizar y gotear la suspensión celular sobre una lámina portaobjetos,
desde una altura de 40 cm-60cm.
- Dejar secar al ambiente, agregar una gota de Orceína acética sobre la muestra,
colocar una laminilla cubreobjetos, dejar colorear 1-2 minutos, con ayuda de
un paño de papel toalla presionar sobre una superficie sólida y uniforma,
finalmente observar al microscopio.
- Identificar las placas metafásica con aumento de 1000X, y contar los
cromosomas en por lo menos 5 placas metafasicas por alumno, para
determinar el número cromosómico de la especie.
- Fotografiar las mejores placas metafásicas con un aumento total de 1000X.
- Imprimir la mejor placa metafásica para la posterior elaboración del cariotipo.
- Recortar los cromosomas por los bordes y ordenarlos a simple vista de mayor
a menor tamaño, enumerarlos en la parte posterior.
- Realizar mediciones de cada cromosoma con ayuda de un compás y regla.
- Reordenar los cromosomas en parejas (homólogos), teniendo en cuenta el
tamaño y tipo de cromosoma (mayor a menor, metacéntrico, submetacéntrico,
acrocéntrico, telocéntrico).
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3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN:

Luego de haber puesto la orceína (es la más específica como tinción para el ADN) a la
muestra pasamos a llevarlo al microscopio de 10 a 400x y observamos cromosomas
que la mayoría son submetacéntricos (de 37.5 a 25.0 i).

Cromosoma observados a un aumento de 10 a 400x:

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Los números de cromosomas varían de acuerdo a cada especie al igual que su forma y
tamaño, en este caso debido a la técnica empleada se logran especificar y reconocer
ciertos grupos de cromosomas dispersos por la lámina portaobjetos, dicha imagen fue
visualizada en un aumento de 10 × 400

Segundo sector de cromosomas observadas en la misma preparación de ADN con

Orceína:
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Placa metafásica de distintos tipos de cromosomas

Cariotipo de la placa metafásica anterior

N° P q
P P' (promedio q q' (promedio) C I Tipo
Cromosom
a
) Cromosoma

1 0.5 0.5 0.5 0.9 0.9 0.9 1.4 35.71 Submetacéntrico

2 1 1.1 1.05 1.2 1.2 1.2 2.2 46.66 Metacéntrico

3 1.1 1.1 1.1 1.1 1.1 1.1 2.2 50 Metacéntrico

4 1 1 1 2.6 2.6 2.6 3.6 27.77 Submetacéntrico

5 0.9 0.9 0.9 2.1 2.1 2.1 3 30 Submetacéntrico

6 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.8 40 Metacéntrico

7 1.3 1.3 1.3 2.2 2.1 2.15 3.4 37.6 Metacéntrico

8 1.1 0.9 1 2.1 2.2 2.15 3.1 31.7 Submetacéntrico

9 0.3 0.3 0.3 1 1 1 1.3 23.7 Acrocéntrico

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10 0.6 0.6 0.6 0.9 1 0.95 1.5 38.7 Metacéntrico

11 1.1 1.1 1.1 2.6 2.5 2.55 3.6 30.1 Submetacéntrico

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12 1.4 1.3 1.35 2.1 2.1 2.1 3.4 39.1 Metacéntrico

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13 0.1 0.1 0.1 0.4 0.4 0.4 0.5 20 Acrocéntrico

14 0.4 0.4 0.4 0.9 1.0 0.95 1.3 29.6 Submetacéntrico

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Total

Fórmula para la obtención del Índice Centromérico:

Cuadro para la determinación de tipo de Cromosoma:

Índice centromérico (i) Tipo de Cromosoma

50.0 - 37.5 Metacéntrico

37.5 - 25.0 Submetacéntrico

25.0 - 12.5 Acrocéntrico

12.5 - 1.0 Telocéntrico

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4. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

Citogenética convencional y molecular. (s. f.). CEDIE.

https://cedie.conicet.gov.ar/citogenetica/#:~:text=El%20bandeo%20G%20es%20un,ca
racter%C3%ADsticos%20que%20permite%20su%20identificaci%C3%B3n.

Prueba de cariotipo. (s. f.).

https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/prueba-de-cariotipo/#:~:text=
La%20prueba%20de%20cariotipo%20es,Los%20cromosomas%20contienen%20sus
%20genes.

5. ANEXOS:

Observación de muestras de cromosomas de los grupos restantes de la Mesa 1:

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