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Ciencias Pecuarias 234 (2020) 103986

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comunicación corta

Sustitución total y parcial de harina de maíz por salvado de arroz en raciones de cordero: T
efectos nutricionales

Julian Andrés Castillo Vargasÿ , Rafael Mezzomo, Daiany Iris Gomes,

Luis Rennan Sampaio Oliveira, Vanessa Jaqueline Veloso da Mata,
Rozilda da Conceição dos Santos, Kaliandra Souza Alves
Universidad Federal Rural de la Amazonía, Campus Parauapebas, PA-275, km 13, Parauapebas, PA, CEP 68.515-000, Brasil

INFORMACIÓN DEL ARTÍCULO RESUMEN

Palabras clave: La inclusión de salvado de arroz en las dietas de corderos como concentrado energético se ha explorado en niveles bajos, ya que se creía que en
Alimento alternativo una inclusión alta, podría ser perjudicial para la ingesta de fibra y la digestibilidad. Así, el objetivo de este estudio fue evaluar los efectos nutricionales
Digestibilidad de la sustitución parcial y total de harina de maíz por salvado de arroz en dietas para corderos. Se evaluaron cuatro niveles de inclusión de salvado
Consumo
de arroz (0, 7.4, 14.9 y 22.5% de la dieta total) en sustitución de la harina de maíz y se criaron cuatro corderos castrados Santa Inés con peso
Balance de nitrógeno
corporal promedio (PC ± DE) de 35.3 ± 1.30 kg. utilizado en un experimento de diseño de cuadrado latino de 4 × 4. No hubo efecto del nivel de
inclusión de salvado de arroz sobre la ingesta de materia seca y nutrientes (P > 0,05), excepto por la ingesta de grasas y carbohidratos sin fibra,
que aumentaron y disminuyeron linealmente, respectivamente, a medida que aumentó la proporción de salvado de arroz en la dieta ( p < 0,01).
Además, la inclusión de salvado de arroz hasta en un 22,5 % del consumo de materia seca de los corderos no afectó la digestibilidad aparente de
la materia seca y los nutrientes, el balance de nitrógeno, la concentración de nitrógeno amoniacal en el fluido ruminal y el pH (P > 0,05).

Por lo tanto, el salvado de arroz podría utilizarse como alimento alternativo a la harina de maíz en dietas para corderos.

1. Introducción
La producción mundial anual de arroz ha aumentado aproximadamente un 94 % en
los últimos 20 años (FAOStat, 2019). El procesamiento industrial del arroz produce
aproximadamente del 8 al 10 % de salvado de arroz, que contiene 16,1 % de extracto
etéreo (EE; en base a materia seca), 13,7 % de proteína cruda (PC), 24 % de fibra
detergente neutra (FDN); Santos et al., 2010), y 80,3% de los nutrientes digestibles totales
(TDN; Valadares Filho et al., 2019). Por lo tanto, el salvado de arroz es un subproducto
importante del procesamiento del arroz y puede ser un alimento energético atractivo para
la nutrición de los rumiantes. La inclusión de salvado de arroz en las dietas de los corderos
puede ser beneficiosa para los productores de rumiantes debido a su menor costo en
comparación con otros alimentos (Cutrim et al., 2012). Sin embargo, considerando que la
densidad energética del salvado de arroz proviene de su contenido de lípidos, la inclusión
de este subproducto en la alimentación de corderos como sustituto del concentrado
energético solo ha sido explorada en niveles bajos o parciales (Tabeidian y Sadeghi,
2009; Santos et al. ., 2010). Esto se debe a que se cree que una mayor inclusión puede
ser perjudicial para el consumo de fibra y la digestibilidad (Santos et al., 2010). Así, la
inclusión total del salvado de arroz como concentrado energético en dietas de corderos
confinados permanece inexplorada hasta el momento. Por lo tanto, la hipótesis del
presente estudio es que la harina de maíz puede ser sustituida totalmente por salvado de
arroz sin efectos perjudiciales sobre
Parámetros nutricionales en corderos confinados. Así, el objetivo de este estudio fue
evaluar los efectos nutricionales de la sustitución parcial y total de harina de maíz por
salvado de arroz en dietas para corderos.
2. Material y métodos
2.1. animales y lugar
El experimento se desarrolló en las instalaciones del Campus Parauapebas de la
Universidad Federal Rural de la Amazonia (Universidade Federal Rural da Amazônia -
UFRA) en Parauapebas, Pará (PA), Brasil (6° 4ÿ25.53ÿS; 49°48ÿ54.57ÿ W). Los análisis
químicos se realizaron en el laboratorio de nutrición animal de la misma institución. Todos
los procedimientos utilizados en este estudio se realizaron de acuerdo con las instrucciones
de la Comisión de Ética e Bem-Estar Animal de la Universidad (Comissão de Ética e Bem-
Estar Animal – CEUA) (Número de Protocolo: 001/2012).
Cuatro Santa Inés machos de 24 meses castrados y canulados en rumen
corderos, con PC promedio (± DE) de 35,3 ± 1,30 kg fueron ubicados y adaptados a
jaulas metabólicas durante 15 días antes de iniciar el primer período experimental. Tenían
acceso ad libitum al agua.

ÿ Autor de correspondencia.
Dirección de correo electrónico: jcfcav@gmail.com (JAC Vargas).

https://doi.org/10.1016/j.livsci.2020.103986 Recibido
el 23 de octubre de 2019; Recibido en forma revisada el 13 de febrero de 2020; Aceptado el 1 de marzo de 2020
Disponible en línea el 2 de marzo de 2020
1871-1413/ © 2020 Elsevier BV Todos los derechos reservados.
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Cuadro período, cada cuatro horas, siendo: antes de la alimentación (0 h) y a las 4, 8, 12, 16 y
1 Proporción de ingredientes y composición química de las dietas experimentales. 20 h después de la alimentación. Se filtraron alícuotas de 50 mL de fluido ruminal
utilizando un empaque de triple capa de gasa. El pH se midió con un medidor de pH
Artículo Niveles de inclusión de salvado de arroz en la dieta
digital (Digmed Modelo DM21; Digicrom, São Paulo, Brasil). Después de la lectura de pH,
0% 7,4% 14,9% 22,5% se agregó 1 mL de solución de H2SO4 al 50 % (vol:vol) a cada muestra para el análisis
de nitrógeno amoniacal (NH3eN) . Las muestras se almacenaron a -20 °C hasta su
Composición de ingredientes (g/kg)
análisis.
Hierba elefante (Pennisetum 600.0 600.0 600.0 601.0
purpureum Schum.)
Harina de 225.0 151.0 77.0 – 2.4. Evaluaciones
maíz Salvado – 74.0 149.0 225.0
de arroz Harina de 160.0 160.0 160.0 160.0
Se analizaron muestras de alimentos, heces y orts para MS (método 934.01; AOAC
soja Urea 5.0 5.0 4.0 4.0
10.0 10.0 10.0 10.0 1990), cenizas (método 942.05; AOAC 1990), CP (método 920.87; AOAC 1990) y EE
Premezcla mineral1
Composición química (g/kg)2,3 (método 920.85; AOAC 1990). Se determinó la fibra detergente neutra (NDFap) y se
MD 443.4 445.8 448.0 449.7 corrigió por ceniza residual (Mertens, 2002) y por compuestos nitrogenados residuales
ACERCA DE 905.9 899.1 892.1 885.0
(Licitra et al., 1996).
milímetro 94.1 100.9 107.9 115.0
PC 156.1 159.6 160.6 164.2
EE.UU. 25.6 33.3 41.2 49.1 El nivel de carbohidratos sin fibra corregido para cenizas y proteínas
NDFap 459.2 468.4 478.0 487.9 (NFCap) se calculó utilizando la ecuación propuesta por Hall (2000):
NFCap 265.1 237.8 212.3 183.8
NFCap = 100
1
Contenía 13,2 % Na, 8,2 % Ca, 6,0 % P, 1,17 % S, 2600,0 mg/kg de Zn, 1200,0
ÿ

[(%CP CPde
% urea %urea) % %
ÿ

NDFap EE % + + ++
mg/kg de Mn, 700 mg/kg de Fe, 350 mg/kg de Cu, 180 mg/kg de Mo, 50 mg/kg de I, ceniza ]

30 mg/kg de Co, 15 mg/kg de Se y 11,7 mg/kg de Cr.

2 El TDN se estimó de acuerdo con la siguiente ecuación:
MS = materia seca; MO = materia orgánica; MM = Materia Mineral; PC = proteína
cruda; EE = extracto etéreo; NDFap = fibra detergente neutra corregida por ceniza y TDN (%) =+DCP
+ ++ DNDFap DNFCap DEE ) ,
(2.25
proteína, y NFCap = carbohidrato no fibroso corregido por ceniza y proteína.
donde DCP = proteína cruda digerible aparente, DNDFap = fibra detergente neutra
3
Valores expresados en Base DM. digerible aparente corregida por cenizas y proteínas, DNFCap = carbohidratos sin fibra
digeribles aparentes corregidos por cenizas y proteínas, y DEE = extracto etéreo digerible
2.2. Tratamientos y dietas experimentales aparente (grasa). La digestibilidad aparente (DA) de cada nutriente se calculó a partir de
la siguiente ecuación:
Los tratamientos fueron cuatro niveles de inclusión de salvado de arroz (0, 7.4, 14.9
y 22.5% de la dieta total) en sustitución de la harina de maíz en la dieta de los corderos.
Las dietas experimentales se formularon para ser isoproteicas y consistieron en un 60 %
DA (IO)/I
=ÿ
,
de pasto elefante recién cortado (Pennisetum purpureum Schum.) y un 40 % de mezcla donde I = ingesta de nutrientes y O = eliminación de nutrientes por heces
concentrada en base a MS (Tabla 1). Las dietas se proporcionaron como una ración mixta El contenido de N en muestras de orina, heces y alimentos se determinó de acuerdo
total, ad libitum una vez al día, a las 08:00 h, y se calcularon para alcanzar el 10 % de con AOAC (1990; método 920.87) y la concentración de NH3eN del líquido ruminal se
orts. determinó de acuerdo con el protocolo de Chaney y Marbach (1962) .

2.3. manejo experimental

Cada período experimental duró 20 días, con 14 días para la adaptación y 6 días
para el período de recolección, cuando se recolectaron muestras de alimento y se
almacenaron en un congelador (ÿ20 °C) para obtener muestras agrupadas por cada
período. Los corderos se pesaron al comienzo de cada período experimental. Todos los
días, antes de la alimentación de los animales, se recogieron, pesaron y almacenaron
trozos de cada animal para determinar la composición química. Al final de cada período,
se mezclaron los alimentos y las muestras ort para hacer muestras compuestas. El
consumo estuvo determinado por la diferencia entre el peso del alimento ofrecido y sus
pesos, registrados desde el día 15 al 19 de cada período experimental.
Tanto las heces como la orina se recolectaron entre los días 15 y 19. Las heces se
recolectaron para calcular la digestibilidad aparente total de la materia seca (MS) y los
constituyentes de la dieta y la orina se recolectaron para calcular el balance de N.
Al final de cada día, se recogieron, pesaron y homogeneizaron las heces. Se tomó
una submuestra, se pesó, se secó en una estufa de aire forzado a 55 °C durante 72 h, se
molió (tamaño de tamiz de 1 mm) y se almacenó en un congelador (-20 °C) hasta su
análisis. La orina se recolectó en recipientes con 50 mL de una solución de H2SO4 al
20% (vol:vol) y se midió el volumen total. Todas las muestras de orina fueron congeladas
y mantenidas a -20ºC hasta su análisis.
El balance de N se calculó como la diferencia entre la ingesta de N
de cada uno de los cinco días de recolección (es decir, cuando se midió el consumo de
alimento) menos la cantidad de N excretado. La excreción de N se determinó a partir del
contenido de N en heces y orina durante los días de recolección.
El líquido ruminal se recolectó el día 20 de cada experimento.
2.5. Diseño experimental y análisis estadístico
Los datos se analizaron como un diseño de cuadrado latino 4 × 4, con cuatro
tratamientos, cuatro animales y cuatro períodos. Las diferencias entre tratamientos se
determinaron mediante un análisis de varianza (ANOVA) y un análisis de regresión
(modelo lineal y cuadrático), aplicando el procedimiento mixto (PROC MIXED) de SAS
(SAS Institute Inc., Cary, NC, EE. UU.).
El animal y el período se consideraron como efectos aleatorios.
Se realizó un análisis de medidas repetidas en el tiempo sobre el pH ruminal y
NH3eN mediante el procedimiento mixto y los parámetros se estimaron por máxima
verosimilitud restringida (REML). Se evaluaron los efectos del tiempo y el nivel de inclusión
de salvado de arroz, así como todas las posibles interacciones. Cuando el efecto del
tiempo fue significativo, se encontró el mejor modelo para la función característica del
tiempo, utilizando polinomios ortogonales en contraste con modelos lineales y cuadráticos.
El nivel de significación adoptado fue de P < 0,05.
3. Resultados y discusión
3.1. Ingesta de materia seca y nutrientes
No hubo efecto de la inclusión de salvado de arroz de 0 a 22,5% (sobre la base de
MS) sobre el consumo de materia seca (P > 0,05; Cuadro 2). Usando la ecuación
reportada por Cabral et al. (2008) para predecir el CMS en corderos en condiciones
brasileñas, se obtuvo una estimación de 1074 g/d para un cordero de 35,26 kg de peso
corporal, que estuvo cerca de los valores observados entre los tratamientos

2
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Cuadro 2

Efectos de la inclusión de salvado de arroz en sustitución de harina de maíz en la dieta de corderos sobre el consumo de materia seca y nutrientes.

Artículo 1 Niveles de inclusión de salvado de arroz en la dieta CUAL valor p2

0% 7,4% 14,9% 22,5% L q

Ingesta (g/d)3
MD 902.0 949.1 877.2 952.5 50.51 0.727 0.777
ACERCA DE 819.9 856.4 785.1 844.2 45.62 0.990 0.801
PC 152.1 164.3 150.8 164.4 8.953 0.566 0.931
EE.UU. 24.24 33.77 38.04 48.39 2.082 <0.001 0.881
NDFap 395.2 422.9 403.8 452.8 23.46 0.167 0.658
NFCap 248.3 235.5 192.5 178.6 13.39 0.001 0.999
TDN 571.1 602.8 549.4 587.2 39.45 0.980 0.932
Ingesta (% peso corporal)
2,55 marcos alemanes 2.79 2.54 2.73 0.22 0.754 0.921
NDFap 1.12 1.25 1.16 1.30 0.10 0.302 0.965

1
MS = materia seca; MO = materia orgánica; PC = proteína cruda; EE = extracto etéreo; NDFap = fibra detergente neutra corregida por ceniza y proteína; NFCap = carbohidratos no fibrosos corregidos por
cenizas y proteínas y TDN = nutrientes digeribles totales.
2
Efectos lineal (L) y cuadrático (Q) para los niveles de reemplazo.
3
Valores expresados en Base DM.

Cuadro 3 3.2. Materia seca y digestibilidad de nutrientes

Efectos de la inclusión de salvado de arroz en sustitución de harina de maíz en la dieta de corderos

sobre la digestibilidad aparente de materia seca y nutrientes. No hubo efecto de la inclusión de salvado de arroz en sustitución del maíz.

Niveles de inclusión de salvado de arroz en la dieta SEM valor p2

harina en la dieta del cordero, sobre la digestibilidad de MS, MO, PB, EE, NDFap, NFCap
Artículo
(g/ kg)1 y TDN (P > 0.05; Tabla 3). El consumo de EE para el 22,5% de inclusión de salvado de
0% 7,4% 14,9% 22,5% L q arroz fue de 51,0 g/kg de consumo total de MS. Este nivel fue más bajo que el considerado
crítico para las dietas de las ovejas (70 g/kg EE; Palmquist y Jenkins, 1980; Sullivan et al.,
MD 646 645 626 613 24,2 0,295 0,813
2004), lo que explica por qué los niveles de EE en la dieta utilizados en este experimento
ACERCA DE 676 677 661 648 21,6 0,309 0,784
PC 726 753 708 716 19,1 0,377 0,627 no fueron suficientes para causar algún cambio en la dieta . la digestibilidad de la MS y los
EE.UU. 721 754 781 814 45,6 0,157 0,985 33,7 nutrientes. Por lo tanto, el resultado sugiere que un aumento en el contenido de EE de la
NDFap 503 503 506 514 0,812 0,920 dieta cuando el salvado de raza reemplaza la harina de maíz no influye en la dinámica de
NFCap 891 889 879 832 37,5 0,285 0,571
la materia seca o la degradación de nutrientes a través del tracto digestivo de los corderos.
TDN 632 636 624 617 24,1 0,612 0,836

1
MS = materia seca; MO = materia orgánica; PC = proteína cruda; EE = extracto etéreo; NDFap =
fibra detergente neutra corregida por ceniza y proteína; NFCap = carbohidratos no fibrosos corregidos 3.3. Balance de nitrógeno
por cenizas y proteínas, y TDN = nutrientes digeribles totales.

2
El consumo de N, el N fecal, el N urinario, el balance de N y el balance de N: relación
Efectos lineal (L) y cuadrático (Q) para los niveles de reemplazo.
de consumo de N no se vieron afectados por el nivel de inclusión de salvado de arroz en
sustitución de la harina de maíz en la dieta del cordero (P > 0,01; Tabla 4). Estos resultados
(877,2 a 952,5 g/día).
fueron similares a los informados por Criscioni y Fernández (2016), quienes también
No hubo efecto de la inclusión de salvado de arroz en la dieta de los corderos desde 0
encontraron que el salvado de arroz en sustitución del grano de avena no influyó en el
al 22,5 % en la ingesta de nutrientes (P > 0,05; expresado en MS; Tabla 2), excepto para
balance de nitrógeno de las cabras murciano-granadina. La falta de influencia de la
la ingesta de EE y NFCap, que aumentaron y disminuyeron linealmente respectivamente,
sustitución de la harina de maíz por salvado de arroz en el balance de nitrógeno puede ser
a medida que aumentó la inclusión de salvado de arroz en la dieta (P < 0,01; Tabla 2) .
una indicación de que se conserva la homeostasis del nitrógeno en los corderos. Esto es
Santos et al. (2010) reportaron una disminución en el consumo de materia seca y PB, así
benéfico para la producción animal, considerando que la excreción excesiva de nitrógeno
como un aumento en el consumo de EE cuando se reemplazó la harina de maíz por
es costosa energéticamente para el animal, afectando su rendimiento y producción (Van
salvado de arroz hasta un 21% en la dieta, mientras que la materia orgánica (MO), NFCap,
Soest, 1994).
NDFap y TDN las ingestas no se vieron afectadas. Sin embargo, estos autores
reemplazaron hasta el 60% de la harina de maíz, mientras que nosotros reemplazamos el
3.4. Concentración y pH de NH3eN ruminal
100% de la harina de maíz (es decir, el 22,5% en la inclusión de salvado de arroz en la
dieta). Por lo tanto, los resultados sugieren que el salvado de arroz se puede incluir en las
No hubo efecto de la interacción entre el tratamiento y el tiempo en relación con el
dietas de los corderos hasta un 22,5 % de la CMS en sustitución de la harina de maíz sin efectos perjudiciales.
punto de alimentación (P = 0,437; Cuadro 5) o el tratamiento (P = 0,797; Cuadro 5) sobre
efectos sobre la ingesta de materia seca, fibra, energía y proteínas de los corderos.
la concentración de NH3eN ruminal . Sin embargo, hubo un

Tabla 4

Efectos de la inclusión de salvado de arroz en sustitución de harina de maíz en la dieta de corderos sobre el balance de nitrógeno.

Artículo Niveles de inclusión de salvado de arroz en la dieta CUAL Valor p1

0% 7,4% 14,9% 22,5% L q

Ingesta de N (g/d) 24.33 26.29 24.13 26.31 1.432 0.566 0.931

N fecal (g/d) 6.587 6.445 7.046 7.492 0.489 0.155 0.569
N urinario (g/d) 14,10 16,36 12.71 14.71 1.168 0,738 0,931
Saldo de N (g/d) 3,648 3,477 4.371 4.103 1.188 0,679 0,963
Equilibrio de N: proporción de ingesta de N (%) 14.43 12.67 18.58 15.76 4.593 0.641 0.903

1
Efectos lineal (L) y cuadrático (Q) para los niveles de reemplazo.

3
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Cuadro 5

Efectos de la inclusión de salvado de arroz en sustitución de harina de maíz en la dieta de corderos sobre la concentración y el pH del NH3eN en el fluido ruminal.

Artículo 1 Niveles de inclusión de salvado de arroz en la dieta CUAL valor p2

0% 7,4% 14,9% 22,5% T tiempo L Q-tiempo T x tiempo

Tiempo (h) NH3eN ruminal , mg/dL 1.470 0.797 0.936 0.003 0.437

0 8.530 13.91 11.52 13.28

4 11.69 9.70 12.63 16.96
8 20.96 20.42 17.86 19.07
12 16.48 19.88 12.89 14.78
dieciséis 17.00 12.19 18.25 20.43
20 17.75 13.27 11.78 13.51
Promedio 15.40 14.89 14.15 16.34
CUAL T tiempo L Q-tiempo T x tiempo
Tiempo (h) pH ruminal 5,92 0.090 0.587 0.037 0.022 0.629
0 6.16 6.38 6.33
4 6.36 6.49 6.51 6.58
8 6.83 6.79 6.87 6.75
12 6.50 6.56 6.66 6.35
dieciséis 6.69 6.63 6.75 6.52
20 5.95 6.15 6.40 6.55
Promedio 6.37 6.46 6.59 6.51

1
0, 4, 8, 12, 16 y 20 correspondientes a los tiempos de recolección después de la alimentación en horas; Promedio = promedio de cada tratamiento. NH3eN = nitrógeno amoniacal ruminal.
2
T = efecto del tratamiento; L-tiempo = efecto lineal en el tiempo; Q-tiempo = efecto cuadrático en el tiempo; T x tiempo = interacción entre tratamiento y tiempo de recolección.

efecto cuadrático del tiempo relativo al punto de alimentación sobre la concentración
ruminal de NH3eN (P = 0,003; Tabla 5). Según Criscioni y Fernández (2016), un aumento
de la concentración de NH3eN en el líquido ruminal puede indicar una inhibición parcial de
la síntesis microbiana como resultado del aumento de lípidos en la dieta, cuando se utiliza
salvado de arroz para cabras lecheras.
Por lo tanto, una diferencia no significativa en la concentración de NH3eN entre las dietas
sugiere que la harina de maíz se puede sustituir totalmente por salvado de arroz sin inhibir
la síntesis de proteínas microbianas.
Finalmente, ni la interacción entre el tratamiento y el tiempo relativo al punto de
alimentación (P = 0.629; Cuadro 5) ni el tratamiento (P = 0.587; Cuadro 5) fue significativa
para el pH ruminal, mientras que el tiempo relativo al punto de alimentación tuvo un efecto
cuadrático (P = 0.022; Tabla 5). Ørskov y Fraser (1975) sugieren que para mantener una
fermentación ruminal normal, los valores promedio de pH ruminal deben ser superiores a
6,2. Por lo tanto, los valores de pH ruminal promedio indican que los altos niveles de
inclusión de salvado de arroz no son perjudiciales para la fermentación del rumen.
4. Conclusión
El salvado de arroz es un buen alimento alternativo energético y puede usarse en
dietas para corderos, reemplazando totalmente la harina de maíz en la dieta, sin efectos
perjudiciales sobre el consumo de alimento, la digestibilidad, el balance de nitrógeno, la
concentración de nitrógeno amoniacal ruminal y el pH ruminal.
Declaración de contribución de autoría CRediT
Julián Andrés Castillo Vargas: Conceptualización, Redacción - borrador original,
Redacción - revisión y edición. Rafael Mezzomo: Conceptualización, Curación de datos,
Redacción - revisión y edición. Daiany Iris Gomes: Conceptualización, Financiamiento
adquisición. Luis Rennan Sampaio Oliveira: Conceptualización, Adquisición de
Financiamiento. Vanessa Jaqueline Veloso da Mata: Metodología. Rozilda da Conceição
dos Santos: Metodología. Kaliandra Souza Alves: Conceptualización, Adquisición de fondos.
Declaración de interés en competencia
Los autores declaran que no tienen intereses financieros en competencia ni relaciones
personales conocidas que pudieran haber influido en el trabajo que se presenta en este
documento.
Reconocimiento
Los autores agradecen a la Universidade Federal Rural da Amazônia, Campus de
Parauapebas, al Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
ya la Fundação Amazônia de Amparo a Estudos e Pesquisas (FAPESPA) por el
financiamiento de este estudio.
Materiales complementarios
El material complementario asociado con este artículo se puede encontrar en
la versión en línea, en doi:10.1016/j.livsci.2020.103986.
Referencias
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Chaney, AL, Marbach, EP, 1962. Reactivos modificados para la determinación de urea y amoníaco.
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