PRACTICA EXTRACCION ADN POR CROMATOGRAFIA

LUNES 14 DE NOVIEMBRE 2022

PARTICIPANTES: MONTAÑA, ANGELA, LAURA, ELENA Y MARTA

1. En un tubo eppendorf, añadir 200 microlitros de sangre y 20 microlitros de proteína k.

2. Agitar suavemente
3. Añadir 200 microlitros de buffer BL.
4. Incubar a 56º durante 10 minutos
5. Centrifugar brevemente
6. Con una micropipeta de 1000 microlitros añadir Todo el contenido del tubo Eppendorf
a un tubo de 2 ml con la columna de Spin.
7. Centrifugar a 13000 revoluciones por minuto durante un minuto.
8. Descartar el filtrado, y colocar la columna de spin en un tubo nuevo de 2 ml.
9. PRIMER LAVADO: añadir 700 microlitros del buffer WA.
10. Centrifugar un minuto a 13000 revoluciones por minuto.
11. Descartar el filtrado, reutilizaremos el tubo recolector de 2 ml.
12. SEGUNDO LAVADO: añadir 700 microlitros de tampón WB.
13. Centrifugar un minuto a 13000 revoluciones por minuto
14. Descartar el filtrado y transferir la columna de Espín a un nuevo tubo recolector de 2
ml.
15. Centrifugar un minuto para secar la membrana
16. Colocar la columna de spin en un tubo nuevo recolector de 1,5 ml
17. Añadir 65 microlitros de tampón CE.
18. Incubar un minuto a temperatura ambiente
19. Centrifugar un minuto a 13000 revoluciones por minuto
20. Desechar la columna y en un tubo nuevo Eppendorf recolectar que el ácido nucleico
purificado.
21. Etiquetarlo y Guardar en el congelador

VINCULO: PRATICA GRUPO 4 LUNES 14. EXTRACCION ADN POR CROMATOGRAFIA.docx