Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Medicina y

Homeopatía
Sección de Estudios de Posgrado e
Investigación
Especialidad en Acupuntura Humana


“Efecto de la aplicación del rayo LASER (980 nm) en el
punto Yishu (Extra) en un modelo de diabetes en ratas,
sobre los niveles de TNFα por ELISA”

Presenta:
Ada Mizraim López Terrón

Directoras:
Med. Esp. Flavia Becerril Chávez
Dra. Cynthia Ordaz Pichardo
 Definición
Es un grupo de trastornos metabólicos que

comparten el fenotipo de la hiperglucemia

DM 1
Clasificación

DM 2

Otros Tipos
Específicos de DM

Gestacional
3-8%
NOM, 2010
ADA, 2014
Epidemiología
2013 - 382 millones de personas con diabetes


(46% no se encuentra diagnosticada)
+ de 316 millones sufren tolerancia anormal a la
glucosa (Riesgo de contraer la enfermedad)

Continente Americano Tiene del 9-12% de morbilidad

En México la DM es un problema de salud pública

Cada Año: Hay 400,000 casos nuevos
2013: 8.7 Millones de personas afectadas
Sus complicaciones son la primer causa de defunción en
hombres y mujeres
ENSANUT, 2012
FID, 2013
Fisiopatología


Borgeson et al., 2012

Las citocinas pro-inflamatorias
“TNFα”


Borgeson et al., 2012

 Citocinas


Origen Diverso
Sistema Linfoide
Proteínas
No Linfoide
“Adipocitos”

Comunicación
celular

Donath et al., 2013

Clasificación Fisiopatología de la
DM

PROINFLAMATORIAS

“TNFα”

Ruta inflamatoria DESCONTROLADA
Importancia el Tejido Adiposo

Secretar productos biológicos

Moduladoras como:

Leptina, AGL, Resistina, adiponectina

“TNFα”
Antiinflamatorias
Secreción de insulina
Peso corporal
Donath et al., 2013 Papel importante RI
Cipriani et al., 2010
 Diagnóstico
Clínico

Poliuria Polifagia Polidipsia Fatiga

Visión borrosa Pérdida de peso Dolor de Neuropatía

estómago, Irritabilidad
nauseas y
ADA, 2013
vómitos
Tratamiento

OBJETIVO

El control glucémico

Disminuir las complicaciones

“Relacionadas con la evolución de

la enfermedad”
Farmacológico

“Sulfonilureas” Aumentan la secreción de
GLIBENCLAMIDA insulina

“Tiazolidinedionas” Aumentan la sensibilidad

PIOGLITAZONA de la insulina

“Biguanidas” Retrasan la absorción de

METFORMINA hidratos de carbono
Tratamientos Coadyuvantes

Homeopatía

Herbolaria

Acupuntura
 

Agujas
Moxa
Técnicas para Herbolaria
estimular
puntos de Rayo LASER
acupuntura
MTCH

Acupuntura
 Rayo LASER
Amplificación de la luz por emisión estimulada
de radiaciones
 Efectos nivel tisular
Reacción fotoquímica
sobre los tejidos Aumenta Aumenta la
oxigenación y
proliferación regeneración
celular tisular

Efectos fotofísicos y
fotoeléctricos Acorta el Drenaje de
proceso líquidos
intersticiales
Incremento síntesis inflamatorio
de ATP y ADN Hernández., 2007
 Clasificación de LASER
Estimular Puntos de Acupuntura

Según su potencia  LASER Espectro de

Luz no
Terapéutico
visible
Baja < de 2 mW
Longitud de
Emisión
5 - 200 mW Onda de
continua
Media “Terapéuticos” 980 nm

Capacidad de
absorción de Frecuencia de
> 1W
Alta “Quirúrgicos”
tejidos de
profundidad de:
3000 Hz / 50 mW
/ 30 s / 2.49 J
5-7cm
Hernández., 2007
 Marco Teórico de la
MTCH

Xiao •Consumo
Ke •Sed intensa

“Complejo de Alteración de la
Diabetes en varios
Energía Yuan de
MTCH Síndromes”
origen y Jing
esencial

Choate C., 1999.

 Factores Patógenos

Misceláneos Proceso
Del bazo y

 Transformación
y distribución
Estomago

Generan
Yin se
Dieta calor
interno afecta

Daña la Sangre
Yang del y Los Líquidos
Riñón corporales
“Función” “Yin”
Ejercicio
Genera
Evolución
calor
Exceso de:
Trabajo, Sentado
o Sexual Alterando los órganos de los tres
Calentadores
Choate C., 1999 . FEMTCH, 1997
 Factores Patógenos

Internos 
Emociones
Altera
Shuxie

Estanca la
Provocando Lesiona
Energía de
Hígado
calor sangre

Agota Consiguiente
líquidos al “Yin”

Choate C., 1999 . FEMTCH, 1997

 Tres Jiaos
Alteración de Líquidos y sequedad

JS
 POLIDIPSIA

Alteración de transporte y transformación

JM POLIFAGIA

JI Doble deficiencia, altera el Qihua

POLIURIA

Altera Shuxie
Estancamiento Sanguíneo y calor, por
lo anterior hay ojos sin brillo y
alteraciones de la visión.
Choate C., 1999. FEMTCH, 1997
 Punto Yishu (Extra)
Punto Shu del Páncreas

Menciona por primera vez en el

libro “Mil recetas de Oro para
emergencias” Sun Simiao


Localización
Por debajo de la AE de la 8va vértebra torácica a
1.5 cun lateral de la línea posterior

Funciones
Armoniza el Estómago, transforma la flema, regula
la dinámica de la energía y alivia el dolor
Shi jin Png., 1996
 De la Cruz en el 2012 Abrajan en el 2012

Efecto hipoglucemiante de la aplicación de rayo LASER

en el punto Pishu (V 20) en un


modelo murino
Ratas
Wistar macho
LASER 650 nm LASER 980 nm
DM inducida con STZ TX c/3 er día
30 s
Bilateral
12 sesiones

Resultados
361 mg/dL – 242 mg/dL 377 mg/dL a 138 mg/dL
(119 mg/dL) (239 mg/dL)
Histopatología: Histopatología:
Bazo con Ligera inflamación Sin diferencia entre los grupos
 Sandoval, 2014
“Efecto hipoglucemiante de la aplicación de LASER
en el punto Yishu (Extra), en ratas diabéticas

inducidas con STZ”

Sesiones Resultados
TX c/3er día ESTADISTICAMENTE SIG:
30 s
Bilateral “STZ V/S STZ + LASER”
16 sesiones
LASER 980 nm 305.3 mg/dL – 87.4 mg/dL
(217.9 mg/dL)

Programe Graph Pad Prism 6. Multiple comparisons test y anova

 Estudio

Longitudinal Experimental Prospectivo

Analítico
 Población de estudio
40 Ratas Wistar macho

Con un peso promedio de 250 ± 50 g

Aproximadamente 2 meses de edad

 Diseño del Estudio
40 ratas Wistar
macho
Sanos

Sin STZ (n=10)
(n=5) por grupo Diabéticos
STZ (n=30)
1 (n=5) por grupo
Con Rayo
Sin Tx
Láser

Sin Tx Gliben Metf Pio Acupu LASER

ELISA
 ACTIVIDAD DE AGOSTO 2014 - SEPTIEMBRE DEL 2014
SEMANA LUNES MARTES MIERCOLES JUEVES VIERNES SABADO DOMINGO

1 Adaptación

Inducción 2

2  Inducción
0

4 7

3 11
4 17 19
5 26

6
32
7 *TOMA DE ELISA
MUESTRAS
40 42
8 Interpretación de Resultados
Consideraciones éticas
• NOM-062-ZOO-1999

• Especificaciones técnicas para la
producción, cuidado y uso de los animales
de laboratorio

• NOM-087-ECOL-SSA1-2002
• Protección ambiental - Salud ambiental -
Residuos peligrosos biológico-infecciosos -
Clasificación y especificaciones de manejo.
 Resultados
TNFα
600.00


500.00
Picogramos por mililitro

400.00

300.00

200.00

100.00

-
Sanos con
Sanos sin Tx Diabetico Pioglitazona Metformina Glibeclamida Acupuntura LASER
LASER
pg/ml 386.30 434.50 468.50 447.80 517.00 501.70 463.00 455.70
Encuesta Nacional de Salud y Nutrición
2012
Grupo pg/mL
Sanos sin Tx
Sanos con

386.30
434.50

[TNFα]
LASER
Diabético con 447.80
Pioglitazona
Diabético con 455.70
LASER
Diabético con 463.00
Acupuntura
Diabético sin 468.50
Tratamiento
Diabético con 501.70
Glibenclamida
Diabético con 517.00
Metformina
 “Sanos v/s Diabéticos tratados con
Fármacos”
TNFα por ELISA

* * * 
Sanos sin Tx 386.30
82.2
Pg/mL

D/ sin Tx 468.50

115.4
D/ Glibencla 501.70

130.7
D/ Metformi 517.00
Sanos sin Tx Diabetico Metformina Glibeclamida
pg/ml 386.30 468.50 517.00 501.70
Grupos

Los datos son presentados como el promedio + DE de 3 repeticiones y fueron analizados mediante
una ANOVA de una vía seguido de un pos hoc de Dunnett´s. *P<0.05 comparado con el control (sano)
 “Sanos v/s Sanos LASER”
600.00

TNFα por ELISA


500.00

400.00
Pg/mL

300.00

Sanos sin Tx 386.30

200.00
69.4

100.00 D/LASER 455.70

-
Sanos sin Tx Sanos con LASER
pg/ml 386.30 434.50

Grupos
 “Sanos LASER v/s Diabéticos LASER”
600.00

TNFα por ELISA

500.00

455.70
434.50
400.00
Pg/mL

300.00 S/LASER 434.50

21.2
200.00
D/LASER 455.70

100.00

-
Sanos con
LASER
LASER Grupos
pg/ml 434.50 455.70
 “Sanos LASER v/s Diabéticos Tx Pio y
MTCH”
600.00

500.00
TNFα por ELISA

400.00
S/LASER 434.50
Pg/mL

300.00
13.3
D/Piogli 447.80
200.00
21.2
D/LASER 455.70
100.00
28.5

- D/Acupu 463.00
Sanos con Pioglitazon
Acupuntura LASER
LASER a Grupos
pg/ml 434.50 447.80 463.00 455.70
 Discusión
Para buen control de la DM hay que regular la RI

•(Donath et al., 2013 y Cipriani et al., 2010)

El Incremento de la RI esta regulado por citocinas proinflamatorias “TNFα”

La RI coordinada es necearía para activar el sistema inmunológico y limitar
el daño causado por patógenos “Es necesaria para la defensa del huésped”

•(Borgeson et al., 2012)

Hay asociación de “Inflamación de bajo grado al controlar la [TNFα]”

•(Mirza et al., 2012)

Grupo pg/mL “Asegura la
homeostasis”
Sanos sin Tx
Sanos con
386.30
434.50
 “Limita efectos
LASER secundarios”
Diabético con 447.80

CONTROLADA
Pioglitazona • (Borgeson et al., 2012)
Inflamatoria
Respuesta
Diabético con 455.70
LASER
Diabético con 463.00 El aumento de [TNFα]
Acupuntura Se asocia con la evolución de
Diabético sin 468.50 daños agudos y a largo plazo
DESCONTROLADA

Tratamiento
Como disfunción y fallo en
Inflamatoria
Respuesta

Diabético con 501.70 órganos entre ellos “Riñón”

Glibenclamida
Diabético con 517.00 • (Lampropoulou Th et al., 2014)
(Niewczas M. et al., 2009)
Metformina
 Aumento de peso, Fracturas, Mayor riesgo (IC)
Cáncer de vejiga
Lewis et al., 2011, riesgo del 40% de desarrollar CA de
Pioglitazona

“E f e c t o s - A d v e r s o s”
vejiga usa más de 24 meses.

La FDA no ha llegado a la suspensión.

Europa esta prohibido su uso
• Sinha B. et al., 2013

LASER *Deterioro de la función visual

(Irreversible). “Técnica - EPP”
*Descarga Eléctrica
• Rupérez Calvo., 1999

*Infecciones
Acupuntura *Traumatismo tisular
*Dermatitis
• Ernst E. et al., 1999
 Conclusiones
*Uso de LASER en el punto Yishu contribuye a
que el proceso inflamatorio sea coordinado


*Hay un impacto + en el Sistema inmune
*“Corroborado por los niveles de TNFα”

*Sobre los niveles de TNFα se encontraron

resultados estadísticamente significativos en el
grupo Sanos sin TX y Los D/ sin Tx, D/
Glibenclamida y D/ Metformina

Los grupos que tuvieron un mejor control de la

RI fueron:
Diabético con Pioglitazona, Diabético
con LASER Diabético con Acupuntura
“Contemplar los efectos a largo plazo del Tx”
Es un buen tratamiento
Coadyuvante

Reto de Salud
Tiene un impacto en la parte económica.

Al reducir el consumo de fármacos

Podría apoyar a la economía Familiar


Resistencia Insulina


Borgeson et al., 2012

 Diagnóstico

HbA1C > 6.5%
• Glucosa plasmática en ayuno > 126 mg/dL

• Glucosa plasmática a las 2 h > 200 mg/dL

(11.1 mmol/L) durante PTOG

• Crisis hiperglucémica - Glucemia > 200

mg/dL

ADA, 2013
 Tratamiento
Medidas generales

Higiénico/Dietéticas

Ejercicio

Psicológico

IMSS; 2012
Inducción de DM


Estructuras de (a) glucosa
(b) N-acetil glucosamina
(c) estreptozotocina y (d) metilnitrosourea

Takada et al., 2006

Eleazu Ch. et al., 2013
 Antecedentes TNFα
Autor /Año Modelo Variables
ELISA
Resultados
Mirza et al., 367 pacientes IL 1B, IL6, IL 8, Elevación de TNFα, IL6, IL8, y


2012 Reciente Dx TNFα, PCR, PCR
En USA leptina, resistina y Disminución de Leptina
Dx DM2 adiponectina

Hay asociación de
“Inflamación de bajo grado y el control de la glucosa”

Xu Jie et al., 482 pacientes TNFα, Aumento de TNFα en el suero

2014. China embarazadas leptina, y de los pacientes DMG
adiponectina
en comparación con
embarazos normales
DMG

Concentraciones significativamente
disminuidas de adiponectina en
pacientes con DMG en comparación
con los Embarazos normales.
 Antecedentes TNFα ELISA,

complicaciones

Autor /Año Modelo Variables Resultados
Lampropoulou Th 80 pacientes Midió TNFα en
et al., 2014. Grecia orina Más [TNFα] = >
gravedad de la
DM2 Grado de microalbuminuria
microalbuminuria
Niewczas M. et al., 667 pacientes Midió citocinas
2009 proinflamatorias Más
En USA “TNFα” en suero [ proinflamatorias
(TNFα)] = >
Función renal sin disminución de la
proteinuria función renal sin
DM1
proteinuria
 ELISA
• Ensayo por Inmunoabsorción
Ligado a Enzimas


Suero, Plasma…
 Ventajas de la ELISA
Muy sensible  Gran número de
muestras
ESPECIFICA: procesadas
99.9% simultáneamente

Resultados Picogramos (pg)

rápidos por mililitro
The RayBio® Rat TNF-alpha ELISA
 Reactivos y muestras en T°
Ambiente

Emplea una placa

de 96 pocillos

Cubierto con AC
específico de TNFα
Agrega AG
(La muestra de suero de
la rata)
Deja incubar durante toda la

Desecha - lavado (4)

noche 4°c con agitación suave

Reacción AG-AC Desecha - Lava Se agrega biotina Aplica:

4 veces Incubar por una hora “Estreptavidina”
Evidenciar
Incuba por 45 min

Inmediatamente
Leer
Agregar un amortiguador TMB Cambio de color Azul-
Desecha – Lavar (4) Reaccione la Estreptavidina Amarillo
Incubar por 30 minutos The RayBio® Rat TNF-alpha ELISA


“Estadística”
 • Aumentan la • Secretagogos
secreción de insulina • Interacción con un canal de K sensible a ATP
“Sulfonilureas” de la célula β, produciendo una despolarización
• GLIBENCLAMIDA de membrana


• Secretar la insulina de acuerdo a el estimulo
en glucosa en sangre
Farmacológico

• Aumentan la
• Disminución de la RI a nivel muscular y tejido graso
sensibilidad de la
• Activando los receptores activadores por la
insulina proliferación de peroxisomas tipo ˠ
“Tiazolidinediona” • *Encuentra en la superficie de los macrófagos
• PIOGLITAZONA • Regula en forma negativa la expresión de las
citocinas proinflamatorias

• Retrasan la • Disminuyen la RI a nivel hepático

absorción de • Disminuye la gluconeogénesis hepática
hidratos de carbono • Potencializa la acción periférica de insulina
“Biguanidas” • Reduce la absorción intestinal de glucosa
• METFORMINA • Favorece la expresión de los Macrófagos 2 (anti)
 “Sanos LASER v/s Diabéticos tratados
con MTCH”
600.00
TNFα por ELISA

500.00

400.00

Pg/mL

300.00
S/LASER 434.50
21.2
200.00
D/LASER 455.70
100.00
28.5
D/Acupun 463.00
-
Sanos con
Acupuntura LASER
LASER
pg/ml 434.50 463.00 455.70
 “Sanos/LASER v/s Diabéticos, Db TX
con fármacos”
TNFα por ELISA


600.00

500.00 S/LASER 434.50

13.3
400.00 D/Pioglitazo 447.80
34
D/Sin Tx 468.50
Pg/mL

300.00

67.2
D/Glibencla 501.70
200.00
82.5
D/Metformin 517.00
100.00

-
Sanos con Pioglitaz Metformi Glibecla
Diabetico
LASER ona na mida
Encuesta Nacional de Salud y Nutrición
pg/ml 434.50 468.50 447.80 517.00 2012501.70
Grupos
 TNF A

 El TNF a promueve, 2;32
 Ayuda a ala dregadacion del sustrato de receptor de
insulina, 3;30.
 El TNFa, activa a IKK, Cinaza del inhibidor de
nfkapa b, esta libre y expresa varios genes, y estos la
disfunción celular.

Encuesta Nacional de Salud y Nutrición

2012